甘肃省中青年科技基金申请书.docx
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甘肃省中青年科技基金申请书
科学组编号
甘肃省中青年科技基金申请书
申请者：
赵秀梅
项目名称：
外源NO对盐分胁迫下小麦幼苗生长的影响
所在单位：
甘肃省农科院生物技术中心
联系电话：
7692030
E-Mail：
推荐者：
欧阳维敏
专业技术职务：
研究员
工作单位：
甘肃省农科院果树所
推荐者：
贾克礼
专业技术职务：
研究员
工作单位：
甘肃省农科院果树所
申请日期：
2005年4月
填表说明
一、填写申请书前，请先查阅《甘肃省中青年科技研究基金管
理暂行办法》。
申请书各项内容，要实事求是，逐项认真填写。
表达要明确、严谨，字迹要清晰易辨。
外来语要同时用原文和中文表达。
第一次出现的缩写词，须注出全称。
二、申请书为A4开本，复印时用A4复印纸，于左侧装订成册。
一式七份，由所在单位签署意见后，送报甘肃省科学技术厅发展计划处，地址：
兰州市庆阳路128号，邮政编码：
730030。
封面上“科学组编号”申请者不必填写。
一、简表
研
究
项
目
名称
外源NO对盐分胁迫下小麦幼苗生长的影响
项目
类别
A．项目大纲B．自选C．其他
项目性质
A．基础研究C．应用研究B．应用基础
B
所属
学科
名称
代码
所属
科学组
A．自然科学组B．工程与技术科学组C．农业科学组
D．材料科学组E．医学环境科学组C
申请
金额
4.50
万元
起止
年月
自2005年1月至2007年12月
申
请
者
姓名
赵秀梅
性别
A．男
B．女
出生
年月
1963年1月
民族
名称
汉
代码
01
B
专业
职务
名称
副研
学位
A．博士B．硕士
C．学士
专业或
特长
植物组织培养及逆境生理
代码
062
B
工作
单位
名 称
甘肃省农科院生技中心
所在地
甘肃（自治州、省辖市）
兰州市（县）
性 质
A．高等院校
B．科研单位
C．其他
B
详细
地址
兰州安宁刘家堡甘肃省农科院新村1号
邮政代码
隶属
关系
名 称
甘肃省科委
730070
项
目
组
总人数
高级
中级
初级
辅助人员
博士后
在读博
士生
在读硕士生
合作单位数
7
3
2
2
3
1
关键词
项目内容
1．关键词数量不多于三个；2．关键词之间用逗号隔开
NO，盐分胁迫，小麦幼苗
项目组主要成员（含申请者）
姓 名
年 龄
专业技
术职务
每年参加
研究月数
姓 名
年龄
专业技
术职务
每年参加研究月数
赵秀梅
42
副研
12
欧巧明
28
研实
12
陈玉梁
32
助研
12
王红梅
33
助研
12
倪建福
52
副研
12
张艳萍
27
研实
张正英
41
副研
12
研究内
容和意
义摘要
通过研究外源NO供体硝普钠（SNP）对盐分胁迫下小麦幼苗生长的影响及小麦叶片生理生化指标（包括叶绿素、MDA、质膜相对透性、脯氨酸含量、CAT活性、SOD活性、H2O2含量、O。
-2产生速率）的变化，初步探讨作为一种活性氮的NO对盐胁迫下小麦叶片细胞膜脂过氧化的保护作用，旨在了解NO在盐分胁迫下的作用机理，为培育新的具有抗逆性的作物品种提供参考。
简 表 填 写 要 求
一、简表内容将输入电子计算机，必须逐项认真填写，采用国家公布的标准简化汉字。
二、凡选择性栏目，将相应提示符A、B等之一填入该栏的右下角。
三、部分栏目填写要求：
项目名称——应确切反映研究内容，最多不超过25个汉字（包括标点符号）。
基础研究——指以认识自然现象、探索自然规律为目的，不直接考虑应用目标的研究活动。
应用基础研究——指有广泛的应用前景，但以获取新知识、新原理、新方法为目的应用理论研究，包括科学数据的收集、整理和评价、验证工作。
所属学科——按《国家自然科学基金申请项目分类目录》填写申请项目所属的最低层次学科。
申请金额——以万元为单位，用阿拉伯数字表示，注意小数点。
申请者姓名——如多于四个汉字，填前四个字。
专业或特长——指长期从事研究的专业，最多不得超过8个汉字。
工作单位名称——按单位公章填写全称，全称中有数字，一律写中文数字，例如“航空工业部第五一O研究所”。
隶属关系——指申请者所在单位隶属于哪个部门或地市。
合作单位数——指研究项目组成员所在单位数，包括主持单位，以阿拉伯数字表示。
项目组主要成员——指每年参加研究工作四个月以上、在项目组内起主要作用的人员，包括申请者，最多录10名。
二、中青年科学基金申请者学习、
进修与科研工作简历
学历（大专以上）
年月
单位
毕业论文题目
导师
成绩
1982-1986
兰州大学
水分胁迫期间小麦叶片中溶质的积累及对渗透调节的贡献
秦鑫
良
进 修
年 月
单 位
进 修 内 容 与 成 绩
2000-2001
西北农林科技大学
在职研究生学习。
2004年6月取得同等学历在职硕士研究生学位。
毕业论文题目“利用组培苗进行葡萄耐盐性鉴定及筛选技术研究”
科 研 工 作
年 月
单 位
研究项目名称及承担的主要研究工作
1986-1991
1992-2001
2002-
农科院果树所
农科院果树所
农科院生技中心
以第三完成人参加了省两西项目“草莓引种试种试验”，主要从事草莓不同品种的物候期、生物学特性等的观察记载工作，随后参加了省星火办项目“草莓栽培技术推广”，主要完成了兰州地区草莓花芽分化技术研究工作。
作为主要完成人先后参加了“果树脱毒苗培育及示范应用”、“优良苹果砧木-倒挂珍珠的脱毒及快繁研究”、“梨树病毒及梨树无病毒苗培育”、“草莓优良品种的无病毒苗培育及示范推广”等。
在项目实施期间，本人主要完成实验室工作，进行外植体建立，最佳继代培养基和生根培养基的筛选。
先后进行的树种有苹果、梨、草莓、李子、扁桃等，品种近百个，同时针对组培时出现的问题如叶片枯黄、脱落，芽簇生或不生根等，及时进行营养元素和激素的调配，较好地解决了这些问题，为果树脱毒快繁奠定了良好的基础。
随后有参加了“花卉、葡萄、草莓组培快繁及试验示范”、“兰州百合脱毒种球培育及试验示范”项目，先后开展了唐菖蒲、百合、火鹤、芦荟、新几内亚凤仙、丽格海棠等花卉的组织培养，外植体类型有花瓣、花丝、鳞瓣、叶片、茎段等。
2000-2001年在西北农林科技大学进修学习期间，进行过葡萄胚培养工作，获得了爱莫无核×山葡萄的胚培苗。
参加“利用胚培养技术创造无核葡萄新种质”项目，主要承担葡萄胚培养工作。
三、中青年科学基金申请者研究工成绩
（包括已完成的主要科研成果及发表的论著目录，发表处及获奖情况）
赵秀梅，1986年7月毕业于兰州大学生物系，同年分配到甘肃省农科院果树所工作。
1992年被聘为助理研究员，1999年10月被聘为副研究员。
2000年到西北农林科技大学进修学习，2004年6月取得同等学历硕士研究生学位。
一、取得的科技成果
1、1986-1990年
以第二完成人参加项目“草莓引种试种试验”，该项目1988年获省农业技术改进三等奖。
以第六完成人参加项目“草莓栽培技术推广”，该项目1990年获省科技星火三等奖。
2、1991-1999年
以第四完成人参加“果树脱毒苗培育及示范应用”课题，该项目1998年获省农业技术推广三等奖。
同期又参加了“优良苹果砧木-倒挂珍珠的脱毒及快繁研究”、“优质耐贮苹果新品系-145”项目，它们于1995年底鉴定验收，分别达到国内同类研究先进水平和领先水平。
随后主持“梨树病毒及梨树无病毒苗培育”课题，于1996年结题。
作为第一完成人参加了“草莓优良品种的无病毒苗培育及示范推广”项目，该项目2002年获甘肃省科技进步三等奖。
3、2000年-
主要参加了“花卉、葡萄、草莓组培快繁及试验示范”、“兰州百合脱毒种球培育及试验示范”和“利用胚培养技术创造无核葡萄新种质”等项目。
除承担项目的部分研究工作外，主要开展了李、杏杂种胚培养，桃、油桃杂种胚培养研究，获得了近十个不同组合的杂种胚培养试管苗，基本摸清了杂种胚培养的生长和培养条件。
同时开展了葡萄（包括中国野生葡萄、砧木品种、酿酒葡萄品种等近20个品种或株系）的组织培养，获得的试管苗进行了耐盐筛选，通过调查在盐分胁迫下试管苗的生长量指标和测定的部分生理生化指标，将供试的葡萄品种或株系的耐盐性进行了分类。
4、从1990年以来共发表16篇论文
在《西北植物学报》上发表了“水分胁迫下小麦叶片渗透调节与抗旱性的关系”；《甘肃农业大学学报》上分别发表了“倒挂珍珠砧木病毒检测技术”和“李子的组织培养”。
在“果树学报”上分别发表了“李、杏远缘杂交及杂种胚培养技术研究”和“葡萄组培苗耐盐性研究”。
在《甘肃农业科技》上发表论文11篇。
四、中青年科学基金研究项目说明
请按下列提纲逐条认真填写（如写不下时，请附另页）
1．研究项目的科研依据和意义（包括国内外研究概况及发展趋势，立论根据及学术思
想，科学意义和应前景等）；
2．研究项目的主要研究内容，创新性及特色；
3．研究方案的设计（包括研究方法、技术线路、进度安排、预期目标及成果等）；
4．已具备的研究工作条件，包括已有的研究工作基础，可使用的实验条件及主要合作
者的情况（姓名、年龄、职称、单位、研究工作简历及在项目组的分工）等。
一、项目研究的科学依据和意义
小麦是我国的重要粮食作物，盐害是导致小麦产量降低的重要原因之一，因此提高植物的耐盐性是植物逆境研究的重要课题。
一般认为，盐害引起的渗透胁迫可以使植物叶片活性氧累积，导致膜脂过氧化，最终使叶片功能丧失。
一氧化氮（NO）是一种广泛分布于生物体的生物活性分子，它具有多种生理功能。
已有研究表明，NO参与了植物中的多种生理功能，如呼吸作用、种子萌发、根和叶的生长发育、衰老、胁迫响应等。
但NO在这些生理过程中的作用机理基本上还是一片空白。
目前认为NO对细胞中活性氧自由基水平的调节可能是NO参与胁迫应答的作用机制之一。
作为一种活性氮，NO对活性氧水平的调节作用具有双重性，一定生理条件下，低浓度NO可作为抗氧化剂对O。
-2等ROS具有清除作用，而较高浓度的NO则引发自由基链式反应，从而导致细胞损伤。
最近的研究表明，NO在植物体内广泛分布，主要通过一氧化氮合酶（NOS）和硝酸还原酶（NR）合成。
Beligni和Lamattina（1999）认为NO具有双重生理效应，其中高浓度NO具有生理毒性，而低浓度则有保护作用，并与细胞的微环境和NO的实际浓度有关。
例如，低浓度NO可以促进植物的生长发育，能减少叶绿素的损失、离子崩漏、黑斑病（Beligni和Lamattina2001），也可以缓解盐胁迫诱导的小麦叶片膜脂过氧化，提高耐盐性（阮海华等2001）。
2001年，Garcia-Mata和Lamattina首次发现外源NO预处理可以提高干旱胁迫条件下植物叶片的保水性、减低离子渗漏，诱导气孔关闭，从而提高耐旱性。
马铃薯叶片中，NO可以减少由于干旱和紫外线引起的氧化性损害（Leshem，1996），因此合适浓度的NO是植物中的抗逆境分子。
近年来，作为一种简单的双原子小分子的一氧化氮（NO）以其独特的生理生化作用和功能引起人们的普遍关注。
目前在植物学领域中，NO的研究令人振奋，富有挑战性。
但与动物体中NO功能的研究还有很大的差距，借鉴在动物中的研究方法揭示NO在植物中的功能及作用机制是一条行之有效的途径。
本研究通过外源NO对盐分胁迫条件下的小麦幼苗生长的影响及对小麦叶片膜脂过氧化的缓解效应进行初步探讨，旨在了解NO在盐分胁迫下的作用机理，为培育新的具有抗逆性的作物品种提供参考。
二、项目研究的主要内容、创新性及特色
选用3-4个小麦品种，进行不同浓度的盐分处理，通过外施NO供体硝普钠（SNP），研究小麦幼苗在盐分逆境下生长情况。
研究的主要内容如下：
1、外源NO对小麦盐分逆境下幼苗生长的影响
2、外源NO对小麦盐分逆境下叶片氧化损伤的保护作用
土壤盐渍化已成为限制农业发展的一个重要因素，在我国的西北地区，盐渍化问题更为突出，逆境胁迫的研究也日益受到人们的重视。
NO作为生物体中活性很强的极性分子，由于其具有毒害和保护生物细胞的双重性，并与植物的抗病和对各种胁迫的应答有关，因此NO在植物体中的功能及作用机制的研究正受到普遍关注，研究盐分胁迫下NO对小麦幼苗生长的影响十分必要。
三、研究方案的设计（包括研究路线、技术路线、进度安排、预期目标及成果等）
研究方法和技术路线及实施方案：
1、外源NO对小麦盐分逆境下幼苗生长的影响
小麦种子经漂洗后，常规消毒→蒸馏水洗干净后，分别用0、0.2、0.4、0.6mmol/L的SNP（分别编号为处理T0、T1、T2、T3）浸种48h，30℃下催芽后选取芽长为0.5cm左右的种子备用。
采用NaCl琼脂法进行。
NaCl浓度依次为0、75、100、125、150mmol/L的0.6%琼脂溶液，分别装于100ml玻璃烧杯中，每个处理至少重复3次，琼脂凝固后，将选出备用的小麦种子插入上述各种琼脂中，每个烧杯中放置15粒种子，放在装有水的周转箱中，在30℃自然光照条件下培养5天后，测量株高、发根数和根长；同时取上述小麦幼苗的地上部和地下部，称鲜重后，放入70℃的烘箱中烘至恒重，称重，计算地上部、地下部和单株的干重，并以耐盐比率作为耐盐性指标。
2、外源NO对小麦逆境下叶片氧化损伤的保护作用
小麦种子常规消毒→蒸馏水洗干净→浸种催芽→种子露白后，选露白一致的种子用Hoagland营养液在恒温25℃的温室盆钵中进行水培，材料长至三叶一心时挑选长势一致的幼苗分组进行实验。
处理如下：
T0：
Hoagland营养液；T1：
Hoagland营养液+150mmol/LNaCl；T2：
Hoagland营养液+150mmol/LNaCl+SNP0.1mmol/L；T3：
Hoagland营养液+SNP0.1mmol/L；T4：
Hoagland营养液+300mmol/LNaCl；T5：
Hoagland营养液+300mmol/LNaCl+SNP1mmol/L；T6：
Hoagland营养液+SNP1mmol/L。
每组重复3次，每天更换一次处理液。
在处理后的第0、2、4、6、8天取第1和第2叶的混合样品用于各项生理生化指标的测定。
测定指标包括叶绿素、MDA、质膜相对透性、脯氨酸含量、CAT活性、SOD活性、H2O2含量、O。
-2产生速率等。
进度安排：
2005年：
引进NO供体SNP；对不同小麦品种进行初步的耐盐筛选，从中找出抗盐性强、抗盐性中等和盐敏感的3个品种进行下一步的试验；开展部分实验内容。
2006年：
全面开展实验设计的各项内容；
2007年：
进一步完善上述实验，处理数据，整理档案，总结验收。
通过该项目的实施，研究NO对小麦幼苗生长发育的影响，初步探讨NO对盐分胁迫下小麦叶片氧化损伤的缓解作用及对幼苗生长的影响。
项目完成后，撰写相关研究论文2-3篇。
四、实现本项目预期目标已具备的条件
省农科院粮食作物研究所从1958年建院以来，一直进行小麦的育种、栽培等工作，曾成功育成了国内第一个具有实际栽培意义的花培春小麦新品种花培764和优质面包小麦79668F3-2，均获省科技进步二等奖。
上世纪70年代初开始农业生物技术应用研究，“利用生物技术选育耐盐抗锈小麦新品系的研究”获得了省科技进步三等奖。
于2000年筹建了农业生物技术中心，投资100万元购置PCR仪等大型仪器可供农业生物技术应用研究和新品种育种使用。
参加本课题研究人员具有高级职称的3人，中级职称2人，其中硕士2人，在读硕士2人，高中级人员长期从事小麦育种、栽培及分子生物学等相关研究的工作经验及基础，积累了开展果树组织培养工作的研究经验，锻炼了一支从事组织培养和无病毒苗木培育工作的队伍，已具备开展多种粮食作物、果树、花卉等组织培养和无病毒苗木培育的技术贮备和技术人员。
能保证该项目的顺利进行。
申请人的学历、技术职称、以往的科研业绩、研究成果，获奖情况及论文发表等
赵秀梅，女，硕士，副研究员。
一、1998年以来完成的主要科技成果、获奖情况如下：
1、作为主要完成人，完成的“果树脱毒苗繁育研究及应用示范”项目，1998年6月获甘肃省农业技术推广三等奖。
2、作为第二主持人，完成的“草莓优良品种的脱毒苗培育及示范推广”项目，2002年10月获甘肃省科技进步三等奖。
二、1998年以来发表的相关论文如下：
1、高爱丽，赵秀梅，秦鑫。
水分胁迫下小麦叶片渗透调节与抗旱性的关系。
西北植物学报1991.1
2、赵秀梅，张剑侠，王跃进。
葡萄组培苗耐盐性研究。
果树学报，2005年第3期
五、中青年科学基金经费预算
申请资助总金额
（万元）
其 中
2005年
2006年
2007年
4.50
1.50
1.00
2.00
其他经费来源
及金额（万元）
预算支出科目（第1.科研业务
费2.实验材料费3.仪器设备费
4.实验改装费的顺序填列）
金额
（万元）
计算根据及理由
填表说明：
1.科研业务费：
包括动力设备和燃料试验所需的动力、燃料费，实验
用动、植物购置和种植养殖费，计算、测试、分析费（使用本单位设备
应不收或只收消耗费），业务资料费，报告、论文印刷费，科研调研费。
不包括国际合作、交流费用。
2．实验材料费：
指科研用消耗性材料、试剂、药品等购置费，标本、
样品采集加工和运杂、包装费。
3．仪器设备费：
指资助项目专用仪器设备的购置费和运杂、包装、安
装费，自制仪器设备的材料，配件和外协加工费。
大型仪器设备应充分
利用本单位、本地区现有条件。
交通运输设备、声像录放设备、复制打
印设备等一般不得列入，如特殊需要应说明理由，经批准后方可购买。
单台、件在一千元以上的仪器设备须逐项填写名称、规格、型号、单
价、数量。
4.实验室改装费：
指根据资助项目研究工作需要，改善实验室条件所
进行的简单装修。
不得将土建、房屋维修、实验室扩建等费用列入。
5.青年科学基金不支付管理费用，资助项目批准前已发生的支出不得列
入。
六、推荐意见
（推荐意见要说明项目的意义和取得预期成果的可能性，申请者和和项目组成员的学术水平
及研究能力，现有工作条件等）
甘肃省农科院生技中心提出的“外源NO对盐分胁迫下小麦幼苗生长的影响”项目，通过研究外源NO供体硝普钠（SNP）对盐分胁迫下小麦幼苗生长的影响及小麦叶片生理生化指标的变化，初步探讨作为一种活性氮的NO对盐胁迫下小麦叶片细胞膜脂过氧化的保护作用，旨在了解NO在盐分胁迫下的作用机理，为培育新的具有抗逆性的作物品种提供参考。
该项目研究方案设计合理，技术路线先进，方法可行。
项目主持人有长期从事植物生理生化技术研究的实践经验，生物技术中心，仪器设备齐全，能够开展项目所要求的指标的测定，参加人员长期从事小麦育种、栽培及抗逆性研究，具备了开展此项工作的工作经验和基础。
建议立项资助。
推荐人（签章）职务专业单位
项目负责人长期从事果树生理生化及果树组织培养等方面的工作，曾开展过水分胁迫期间小麦叶片中溶质的积累及对渗透调节的贡献的研究和葡萄组培苗耐盐性研究工作，积累了开展作物逆境研究的工作经验，参加人员有长期从事小麦育种、栽培及逆境生理等相关研究的工作经验及基础，能保证该项目的顺利进行。
该项目方案设计合理，技术路线可行。
研究对于盐分胁迫下NO对小麦生长的影响及对小麦叶片细胞膜脂过氧化的保护作用的结果，对于了解NO在盐分胁迫下的作用机理，为培育新的具有抗逆性的作物品种具有一定的指导意义。
项目主持人所在单位生物技术中心，仪器设备齐全，各项生理生化指标的正确测定。
建议立项资助。
推荐人（签章）职务专业单位
七、合作单位意见
（对合作研究内容、参加人员素质与水平及保证研究工作条件等签署具体意见）
单位（公章） 年 月 日
单位（公章） 年 月 日
单位（公章） 年 月 日
八、所在单位意见
申请者所在单位学术委员会审查意见（对本项目的意义、研究方案、申请者和项目组
主要成员的素质与水平等签署具体意见）。
主任委员（签章） 年 月 日
申请者所在单位领导审查意见（签署是否同意学术委员会意见，经费预算是否合理，有无其他经费来源，能否保证研究计划实施所需的人力、物力、工作时间等基本条件的
具体意见）
主任委员（签章） 年 月 日
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