新冠核酸检测技术PCR实验室质量体系文件第一部份管理类SOPWord文件下载.docx
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S0P_18-15
实验室化学试剂的管理及配置标准操作程序
30-32
S0P_18-16
标本的采集、验收和保存的标准操作程序
33-35
S0P_18-17
标本与扩增板次唯一标识编号程序
36-36
S0P_18-18
实验室室内质量控制标准操作程序
37-38
S0P_18-19
实验室室间质量评价标准操作程序
39-39
S0P_18-20
新型冠状病毒核酸检测结果分析与报告管理及可疑、阳性结果讨论审签制度
40-48
S0P_18-21
新型冠状病毒核酸检测疑似阳性结果、可疑结果处置应急预案
49-53
第二部分仪器类SOP
S0P_18-22
移液器使用、维护与校准标准操作程序
54-55
S0P_18-23
移动紫外线消毒车使用、维护与校准操作程序
56-56
S0P_18-24
传递窗操作程序
57-57
S0P_18-25
生物安全柜使用、维护与校准操作程序
58-60
S0P_18-26
CleancubeMini过氧化氢空间消毒器使用、维护与校准操作程序
61-64
S0P_18-27
台式高速冷冻离心机使用、维护与校准操作程序
65-66
S0P_18-28
高压蒸汽灭菌器使用、维护与校准标准操作程序
67-68
S0P_18-29
超净工作台使用、维护与校准标准操作程序
69-69
S0P_18-30
旋涡振荡器使用与维护标准操作程序
70-70
S0P_18-31
冰箱使用、维护与校准操作程序
71-72
S0P_18-32
天隆GeneRotex96全自动核酸提取仪使用、维护与校准程序
73-74
S0P_18-33
MA-6000基因扩增检测仪使用、维护、校准程序
75-81
S0P_18-34
优思达UC0102核酸扩增检测分析仪使用、维护、校准程序
82-84
第三部分项目类SOP
S0P_18-35
临床标本的处理（核酸纯化）程序
85-86
S0P_18-36
新型冠状病毒2019-nCoV基因（达安红盒）扩增检测操作规程
87-92
S0P_18-37
新型冠状病毒2019-nCoV基因（金豪）扩增检测操作规程
93-97
S0P_18-38
新型冠状病毒2019-nCoV基因（之江）扩增检测操作规程
98-103
S0P_18-39
优思达新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测操作程序
104-106
S0P_18-40
新型冠状病毒2019-nCoV基因（中元）扩增检测操作规程
107-111
文件审批者；
发布日期：
年月曰
操作者从事本项工作前，必须认真学习并掌握本手册的内容，严格按照操作规程操作！
学习者：
休订书册与增补程序内容与日期:
学习者:
S0P_18-l临床基因诊断实验室设置及管理
1目的：
实现核酸扩增荧光检测实验室有专人负责，依照实验室管理规范实施全面质量管理，保证实验质量。
2适用范围：
本制度适用于本实验室及相关人员，并明确了实验室各项规章。
3负责人：
李四四
4规章
4. 1实验室分区设置
a） 核酸扩增荧光检测实验室设置为试剂准备区、标本制备区及扩增区。
每个区都设置一个缓冲区，用于更换工作服、鞋套及维持空气流向，实验室布局见附图01。
进入各个工作区域工作时，必须严格遵守单一方向顺序，即从第一区试剂准备区一第二区的标本制备区一第三区的扩增区。
各区门前有醒目标志，一区通过排风装置保持正压，二区、三区通过抽风装置保持负压。
b） 各室的实验物品（含移液器、试管架、吸头盒、记录本、笔等），不得混用，须贴上
不同标签予以区别。
c）各区配有不同颜色工作服，一区为蓝色，二区为白色，三为粉红色。
进入实验室，必须更换本室有颜色标识的工作服，穿上鞋套。
4. 2标本接收工作制度
a） 采血、接收标本、接待来访由专人负责。
b） 收齐标本登记后，由内走廊入口将标本送入标本制备区。
c） 每天的标本登记记录，应书写工整详细，使用本室专用的、带有本室标识的记录本、纸和笔。
d） 将本区所有废弃物装入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，将垃圾带出实验室交医院集中处理。
e） 每天要打开紫外灯消毒60分钟，记录紫外灯使用情况。
4. 3试剂准备区工作制度
a） 该工作区进行以下操作：
储存试剂的制备、试剂分装和主反应混合液配制。
b） 实验人员进入本区工作室时，须穿本室专用工作服。
实验过程中须戴手套，手套根据需要经常更换。
c） 每天实验开始前，用75%乙醇清洁实验台面，并打开紫外灯消毒60分钟。
d） 记录温、湿度计读数于实验室温度、湿度记录表上。
e） 记录冰箱的温度计读数于冰箱温度记录表上。
f） 取出当天实验需配制和使用的试剂，其余试剂要立即收好，放回冰箱内。
g） 每周一清点库存试剂，看有无过期或将近到期的试剂，或作报废处理或排列优先使用，避免浪费，然后记录试剂的详细保存情况。
h） 试剂准备工作完成后，将使用过的离心管、吸头须置于盛有5000mg/L次氯酸钠的废液缸中，还原实验台面。
i） 严禁其它工作室的用品带入本工作室。
j） 每次实验记录，书写工整详细，应使用本室专用的、带有本室标识（标“I区”）的记录本、纸和笔。
k） 实验结束后要及时整理、清洁工作台面，做好实验室清洁卫生。
l） 实验完毕打开紫外灯消毒60分钟，记录紫外灯使用情况。
m） 将准备好的试剂放入传递窗中。
n） 实验开始后，当天不得返回本室。
4.4标本制备区工作制度
临床标本保存、核酸（RNA,DNA）提取、cDNA合成以及模板加样。
b） 实验人员进入本工作室须穿本室专用工作服。
实验中戴手套，手套根据需要经常更换。
配置当天使用的含氯消毒剂，浓度最少包括2000mg/L.5000mg/L含氯消毒剂（按照《月亮县中医院检验科新冠病毒防控常用消毒剂使用说明及配置方法》科学合理使用）o
d）从传递窗中取出试剂放入冰箱冷冻室试剂存放专区暂存。
e） 记录温湿度计读数于实验室温度、湿度记录表上。
f） 记录冰箱的温度于冰箱温度记录表上。
g） 记录水浴箱的温度于水浴箱温度记录表上。
h） 样品的接受、登记、保存和核酸提取按标准操作程序及试剂盒要求进行。
i） 使用本室专用的，经灭菌处理的加样器和带滤心的吸头。
j） 使用过的离心管、吸头须置于5000mg/L次氯酸钠溶液中浸泡，消毒后方可丢弃。
k） 开放性样品操作必须在生物安全柜中进行。
加样后低速3000rpm离心数秒后，将其放入传递窗。
l） 做好实验记录，使用本室专用的带有本室标识（标“II区”）的记录本、纸和笔。
m） 患者样品应按有生物传染危险品对待，遗弃之前必须进行高压灭活。
n） 严禁基因扩增区的物品带入本室。
o） 实验结束后，关闭所有仪器，记录仪器使用时间和运行状态，及时清洁实验室和实验台面，并打开紫外灯消毒60分钟，记录紫外灯使用情况。
4.5扩增区及产物分析区工作制度
a） 在该工作区进行以下操作：
PCR反应混合液上机、扩增、扩增过程荧光检测（使用定量基因扩增仪）。
b） 非本室工作人员未经允许不得进入。
c） 实验人员进入该室须穿本室专用工作服。
实验中须戴手套，手套根据需要经常更换。
d） 每天实验开始前，用70%乙醇清洁实验台面，并打开紫外灯消毒60分钟。
f） 使用本室专用的经灭菌处理的加样器和带滤心的吸头。
g） 使用过的离心管，吸头须置于5000mg/L次氯酸钠溶液中浸泡，消毒后方可丢弃。
h） 将从传递窗接收来的离心后加好样的反应管上机扩增。
i） 扩增分析完后，打印报告。
使用本室专用的记录本和笔（标"
III区”）做好实验记录。
j） PCR扩增室物品不得带到以前各区。
k） 实验结束后，及时清洁实验室和实验台面；
及时擦净分析仪器；
登记仪器使用记录；
并打开紫外灯消毒60分钟；
记录紫外灯使用情况。
5.引用的图表
5. 1YCXZYY/JYK-JL-SOP_18-1-01附表1：
实验室仪器设备一览表
5.2YCXZYY/JYK-JL-S0P_18-l-02附表2：
拟（已）开展的临床基因扩增检测项目
5. 3YCXZYY/JYK-JL-SOP_18-1-03附表3：
实验室温、湿度记录表
表1 PCR室主要设备一览表
序
号
仪器编号
仪器设备名称
型号规格
数量
生产厂家
购买日期
备
注
1
JYK-SB-
PCR1001
PCR荧光定量分析仪
MA-6000
苏州雅睿
2020.06
2
PCR1002
半自动核酸提取仪
GeneRotex96
西安天隆
2020.06
3
PCR1003
生物安全柜
1500-TEB2
上海力申
4
PCR1004
洁净工作台
SW-CJ-IFD
苏净安泰
2017.06
5
PCR1005
立式高压灭菌器
LMQ.C
山东新华
6
PCR1006
低温台式高速离心机
5424R
艾本德
7
PCR1007
八联管离心机
mini-6K
湖南湘仪
8
PCR1008
漩涡混合仪
XW-80A
上海沪西
9
PCR1009
干式恒温器
K30
杭州奥盛
10
PCR1010
冰箱
HYCD-290
青岛海尔
11
PCR1011
12
PCR1012
DW-86L388J
13
PCR1013
紫外消毒车
普通型
丹阳翔东
14
PCR1014
电热鼓风干燥箱
XMA-600
绍兴苏珀
2020.08
15
PCR1015
2020.10
16
PCR1016
2020.10
17
PCR1017
过氧化氢空间消毒器
mini
瑞士库钳
18
PCR1018
高速离心机
5425
19
PCR1019
不间断电源
GASTLE3K（6G）
山特电子
20
PCR1020
21
PCR1021
核酸扩增检测分析仪
UC0102
优思达
2020.12
附表2 拟（己）开展临床基因扩增检验项目一览表
项目
方法
备注
新型冠状病毒（2019-nCoV）RNA
PCR荧光实时扩增
苏州雅睿MA-6000
恒温扩增-实时荧光法
优思达UC0102
图1基因扩增实验宣平面图
月亮县中医院临床基因扩增实验室
S0P_18-2实验室人员的配置及培训程序
1目的
保证实验室有足够数量的合格的具备开展该类实验的能力的实验人员。
2适用范围
本程序适用于实验室人员配置、管理、培训及考核。
3负责人
4程序
4. 1人员要求：
4. 1.1本实验室工人作员应为医学检验专业或相关专业毕业。
4.1.2实验室工作人员应参加卫生部或省临检中心举办的PCR技术培训，并取得合格证。
4.1.3对于新进入本室的人员，如尚未取得PCR技术培训合格证，应在实验室有培训合格证的技术人员的指导下进行实验工作，实验报告由有资格人员出具，并应在最短的时间内取得上岗培训合格证。
4.1.4参加新冠核酸检测的人员必须身体健康，经过经过相关生物安全培训并考核合格，经过
三级个人防护穿脱培训并考核合格，经过其它医院或科室认为应当掌握的生物安全与质量管理相关培训并考核合格。
4. 2人员配置：
4.2.1实验室应根据工作需要配备足够的工作人员，目前实验室有副主任技师1人、主管技师3人、技师2人，技士4人，获得培训合格证者11人。
4. 2.2各级技术人员履行相应的工作职责。
4. 3人员培训及考核：
4.3.1实验室负责人（或委托人）参加每年福建省PCR室间质评总结会。
4.3.2对于未取得PCR技术培训合格证的实验员，应在取得培训合格证的实验员的指导下进行实验工作，实验报告由取得培训合格证的实验员出具。
并应在最短的时间内取得上岗培训合格证。
4.3.3争取每年让1-2名实验室工作人员参加PCR技术的省级或国家级继续教育项目，参加相关学术交流会议。
4.3.4科室定期组织实验室内部实验人员学习，并针对实验中的具体问题、疑难问题进行讨论，丰富实验人员的工作经验和知识。
4.4人员管理
4.4.1实验室建立所有工作人员的技术档案，包括：
学历、任职资格、发表论文、研究成果、培训等相关材料复印件。
4. 4.2技术档案分文本档案和电子档案，文本档案每年更新1次，电子档案随时更新。
5. 引用的图表
5. 1YCXZYY/JYK-JL-SOP_18-2-01附表4：
实验室主要负责人简历
5.2 YCXZYY/JYK-JL-SOP_18-2-02附表5：
实验室工作人员一览表
5.3 YCXZYY/JYK-JL-SOP_18-2-03附表6：
人员培训计划及培训记录表
S0P_18-3手套使用及左右手分开的原则
1. 目的：
手套的使用是实验室工作人员在实验操作过程中作为一种基本的防护措施，而为了防止污染，实验过程中注意左右手分开
2. 适用范围：
用于临床核酸扩增荧光检测实验室的操作人员的实验操作全过程。
3. 操作人：
PCR实验室全体操作者
4. 原则要求：
4. 1实验过程中要戴一次性手套，手套要保持完整、不破损。
4. 2接触样本前应该戴上手套，将化验单和试管依次对应编好号后，应弃去手套。
4. 3手套一旦有污染，应立即更换。
4. 4在实验过程中应注意左右手分开原则：
左手用于接触标本，右手用于使用移液器、接触和操作仪器。
4. 5接触仪器均用右手，严禁用接融过样品的左手触摸任何器材或工作室的门把手等。
4. 6使用离心机时，用左手将离心管全部配平，按顺序置于离心机中相应位置，右手操作离心机。
离心完毕后也是用左手取出离心管。
4. 7该程序的变动程序：
本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报
经下述人员批准签字：
检验科主任、室技术负责人。
S0P_18-4实验室台面摆放顺序程序
使操作过程达到最优，保证检测工作正常、顺利进行
基因扩增实验室中用来处理样品的实验台及其上的实验用具（包括移液器架、标本架、吸头盒、离心管盒等物品
4. 摆放规则
4. 1实验室中用来处样品的实验台上各种物品的摆放必须遵照一定的规则。
实验物品需摆放整齐，实验前和做实验时要有区别，要区分相对清洁区和相对污染区。
4. 2移液器架上从左到右放200〜lOOOul（100〜lOOOul）、40〜200ul（或20〜200ul）、5〜40ul（或5〜50ul）、0.5〜10ul的移液器；
移液器架左边摆主离心管架和弃液缸，是相对污染区；
枪架右边摆放常用的实验试剂（如蒸馅水、生理盐水、NaOH等）和枪头盒，是相对清洁区。
4. 3做实验时，枪头摆在枪架前；
弃液缸移至右手易打掉枪头的位置（注意与常用的实验试剂隔开一定的距离，实验后其摆放位置用75%酒精擦拭；
标本在正前方和左手边区域管理。
4. 4该程序的变动程序：
S0P_18-5实验室内务管理制度
保证实验室日常内务管理及清洁工作顺利进行。
实验室相关人员及医院清洁工人。
4制度
4.1要有强烈的时间观念，按时上下班，不迟到、早退。
4. 2实验人员须保持仪表整洁，语言有礼貌、举止讲文明。
4. 3实验室技术人员必须严格按照PCR实验操作程序进行，包括实验室清洁、台面消毒，离心管、吸头的无菌灭活准备，仪器使用和废弃物处理等。
4.4进入实验室的工作人员必须遵守实验室的单一流向的规定，禁止逆向走动。
4. 5非本室工作人员未经允许不得进入实验室。
4. 6实验室内不得吸烟、饮食及进行化妆。
4. 7实验人员必须熟悉仪器性能方允许操作，严格遵守操作规程。
4.8所有仪器设备须有专人负责，有使用维护记录，保持仪器卫生整洁。
4.9仪器使用前必须检查是否完好，一旦发现问题，需及时向科室负责人反映，不得擅自拆装。
非仪器操作人严禁使用。
4.10每天了解仪器运转情况及试剂使用情况，负责仪器的整洁，安全，检查电源，水龙头。
4.11实验室地面必须平整、干净，通道要利于通行，没有无用的物品阻碍。
4.12合理规划实验室内物品，做到摆放整齐、有序，无用的或使用效率低的物品放置到储存处，常用的物品要容易寻找到。
4.13抽屉、柜子、文件类物品要作好标记，以方便识别。
4.14实验结束后清洁实验台面和地面，用移动紫外灯消毒实验台面，扩增区紫外灯每天开启60分钟，定时开启通风系统。
4.15每天下班前要关门、关窗、检查空调和仪器的电源是否关闭，处理好废弃物。
S0P_18-6实验室清洁制度
保证实验室环境的整洁，防止污染。
实验室工作环境、实验台面、离心机、生物安全柜等
4. 1实验室地面必须平整、干净，通道要利于通行，没有无用的物品阻碍。
4. 2合理规划实验室内物品，做到摆放整齐、有序，无用的或使用效率低的物品放置到储存处,常用的物品要容易寻找到。
4. 3抽屉、柜子、文件类物品要作好标记，以方便识别。
4.4实验结束后用2000mg/L含氯消毒剂对台面进行清洁，并用移动紫外灯进行消毒。
4.5每天对使用过的移液器用75%酒精进行擦拭。
每周1次对移液器咀进行75%酒精浸泡15分钟左右，若使用过程中发生污染应随时浸泡处理。
4.6实验过程中如发生标本或试剂外溅，应立即用5000mg/L含氯消毒剂滴上，滤纸盖上半小时，然后用酒精擦洗，并用移动紫外灯消毒。
4.7每天实验前通过内走廊上的开关，开启各区的通风系统，各区实验结束后打开该区移动紫外灯消毒实验台面，紫外灯每天开启最少60分钟。
4.8待紫外灯消毒时间足够后，依次关闭各区紫外灯并记录。
4.9依次清洁四个区的实验台面和地面，各区清洁消毒工具均专用，不可混用，注意按照单一方向流程的原则来进行清洁。
4.10处理好各区废弃物，交医院集中处理。
4. 11每周将工作服洗涤消毒，不同实验区的工作服隔开洗涤。
5. 1YCXZYY/JYK-JL-SOP_18-6-01附表7：
实验室清洁消毒记录表
5. 2YCXZYY/JYK-JL-SOP_18-6-02附表8：
垃圾移交记录表
SOP_18-7实验耗材的购买、质检和储存程序
保证耗材的使用质量，合理的配用及存放。
核酸扩增荧光检测实验室常用耗材：
离心管；
PCR管（八联管）；
滤芯吸头；
PCR用采血管、采样管、采样拭子和一次性吸管等；
无核酸水、PBS等缓冲液。
4购买和储存程序
4. 1购买前订出计划并定出品名、质量规格报相关部门订货及购买。
4. 2购买后，验收合格即领取。
4. 3常用的消耗品定点、定量地摆在实验台抽屉里，并标明品名及数量。
特殊的消耗品放在指定的地方。
4.4每周用量要有记录，并及时补充及领取所用去的数量。
4.5订购消耗品前，应准确查询数量。
4. 6玻璃用品应放在指定位置，存放要小心，以免损坏。
5质检程序
5.1辅料质检的基本原则
5. 11外包装检查:
外包装应完整无损无污，标识清楚，检查品名、品牌，货号，规格、生产日
期，有效期、保存条件等信息。
5. 12.内包装检查：
内包装物品应与外包装标识一致，检查是否有破损，泄漏，内容物是否齐全，是否有相应的使用说明书等。
5. 13.性能质检:
检测试剂耗材是否与其性能一致，比如吸头的准确性和气密性等
5. 14.污染物质检:
检试剂耗材是否被常规检测项目的待检物污染，这种污染可能是物品生产环节，也可能是运输或实验室的保存过程中被污染。
5.
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