Tris-HCl及其他几种缓冲液配方Word格式.doc

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例如，在生物化学实验中常用的TAE和TBE缓冲液（用于核酸的溶解）都需要用到Tris。

由于它含有氨基因此可以与醛发生缩合反应

Tris为弱碱，在室温（25℃下，它的pKa为8.1；

根据缓冲理论，Tris缓冲液的有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间。

Tris碱的水溶液pH在10.5左右，一般加入盐酸以调节pH值至所需值，即可获得该pH值的缓冲液。

但同时应注意温度对于Tris的pKa的影响。

由于Tris缓冲液为弱碱性溶液，DNA在这样的溶液中会被去质子化，从而提高其溶解性。

人们常常在Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。

如果将调节pH值的酸溶液换成乙酸，则获得“TAE缓冲液”（Tris/Acetate/EDTA），而换成硼酸则获得“TBE缓冲液”（Tris/Borate/EDTA）。

这两种缓冲液通常用于核酸电泳实验中。

用途：

有机合成中间体。

在电泳缓冲液中同甘氨酸构成缓冲体系，稳定电泳过程中的PH值。

在凝胶中也起到稳定PH的作用，只不过是Tris-HCl缓冲体系。

Tris缓冲液不仅被广泛用作核酸和蛋白质的溶剂，还有许多重要用途。

Tris被用于不同pH条件下的蛋白质晶体生长。

Tris缓冲液的低离子强度特点可用于线虫（C.elegans核纤层蛋白lamin）的中间纤维的形成。

Tris也是蛋白质电泳缓冲液的主要成分之一。

此外，Tris还是制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物的中间物。

Tris也被用作滴定标准物。

1MTris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）

组份浓度 

1MTris-HCl

配制量 

1L

配制方法：

1.称量121.1gTris置于lL烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.按下表加入浓HCl量调节所需要的pH值。

pH值 

浓HCl

7.4 

约70ml

7.6 

约60ml

8.0 

约42ml

4.将溶液定容至1L。

5.高温高压灭菌后，室温保存。

注意：

应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。

1.5MTris-HCl（pH8.8） 

1.5MTris-HCl

1L

配制方法 

1.称量181.7gTris置于1L烧杯中。

3.用浓HCl调节pH值至8.8。

TE即Tris-EDTAbuffer（10mMTris，1mMEDTA，pH7.4pH7.6pH8.0）。

常用分子生物学试剂，用于DNA的溶解等。

配制10×

TEBuffer（pH7.4,7.6，8.0） 

组份浓度：

100mMTris-HCl，10mMEDTA

配制量：

1.量取下列溶液，置于lL烧杯中。

1MTris-HClBuffer（pH7.4，7.6，8.0） 

100ml

500mMEDTA（pH8.0） 

20ml

2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。

3.将溶液定容至1L后，高温高压灭菌。

4.室温保存。