南京工业大学微生物实验考试试题.doc

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微生物学实验试题库及标准答案

制药1103

南京工业大学微生物实验课试题库及标准答案

5

选择题：

01.革兰氏染色的关键操作步骤是:

A.结晶紫染色。

B.碘液固定。

C.酒精脱色。

D.复染。

答:

（C）

02.放线菌印片染色的关键操作是:

A.印片时不能移动。

B.染色。

C.染色后不能吸干。

D.A-C。

答:

（A）。

03.高氏培养基用来培养:

A.细菌。

B.真菌。

C.放线菌。

答:

（C）。

04.肉汤培养基用来培养:

A.酵母菌。

B.霉菌。

C.细菌。

答:

（C）。

05.无氮培养基用来培养:

A.自生固氮菌。

B.硅酸盐细菌。

C.根瘤菌。

D.A,B均可培养。

E.A,B,C均可培养。

答:

（D）。

06.在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力,通常在镜头和盖玻片之间滴加:

A.二甲苯。

B.水。

C.香柏油。

答:

（C）。

07.常用的消毒酒精浓度为:

A.75%。

B.50%。

C.90%。

答:

（A）。

08.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是:

A.20ml/M3。

B.6ml/M3。

C.1ml/M3。

答:

（B）。

09．高压蒸汽灭菌的工艺条件是:

A.121℃/30min。

.

B.115℃/30min。

C.130℃/30min。

答:

（A）。

10．巴氏消毒的工艺条件是:

A.62-63℃/30min。

B.71-72℃/15min。

C.A.B.均可。

答:

（C）。

11．半固体培养基的主要用途是:

A.检查细菌的运动性。

B.检查细菌的好氧性。

C.A.B.两项。

答:

（C）。

12．半固体培养基的琼脂加入量通常是:

A.1%。

B.0.5%。

C.0.1%。

答:

（B）。

13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是:

A.排冷气彻底。

B.保温时间适当。

C.灭菌完后排气不能太快。

D.A-C。

答:

（A）。

14．目镜头上的"K"字母表示:

A.广视野目镜。

B.惠更斯目镜。

C.补偿目镜。

答:

（C）。

15.目镜头上的"P"字母表示:

A.平场目镜。

B.广视野目镜。

C.平场补偿目镜。

答:

（A）。

16.物镜头上的"PL"字母表示:

A.正低相差物镜。

B.正高相差物镜。

C.负高相差物镜。

答:

（A）。

17.物镜头上的"UVL"字母表示。

A.无荧光物镜。

B.照相物镜。

C.相差物镜。

答:

（C）。

18．镜头上标有"对C"字母的镜头是:

A.相差调整望远镜。

B.摄影目镜。

C.相差目镜。

答:

（A）。

19．"PA"表示:

A.马铃薯培养基。

B.高氏培养基。

C.肉汤培养基。

答:

（A）。

20.无菌室空气灭菌常用方法是:

A.甲醛熏蒸。

B.紫外灯照射。

C.喷石炭酸。

D.A.B.并用。

答:

（D）。

21.干热灭菌的关键操作是:

A.灭菌物不能有水。

B.保温过程中不能开箱门。

C.降温不能太快。

答:

（A）。

22．

霉菌水浸制片的关键操作是:

A.菌丝要分散。

B.菌丝首先要用50%的乙醇浸润。

C.盖盖玻片不能有气泡。

D.A-C。

答:

（A）

23.用来染芽胞的染料通常是:

A.孔雀绿。

B.结晶紫。

C.复红。

D.番红。

答:

（A）。

24．复红法染鞭毛的关键操作是:

A.玻片干净。

B.染料新鲜。

C.菌体活化适当。

D.A.B.C。

答:

（B）。

25.镀银法染鞭毛的关键操作是:

A.玻片干净。

B.染料无沉淀。

C.加热适当。

D.菌体活化适当。

E.A-D。

答:

（A）。

26．进行简单染色使用的染色液通常是:

A.复红。

B.蕃红。

C.结晶紫。

D.孔雀绿。

E.A-D均可。

答:

（A）。

27.物镜头上的"APO"字母代表:

A.消色差物镜。

B.复消色差物镜。

C.半消色差物镜。

答:

（B）。

28．物镜头上的"Ach"字母表示:

A.平场物镜。

B.超平场物镜。

C.消色差物镜。

答:

（A）。

29．物镜头上的“NH”字母表示:

A.正相差物镜。

B.负相差物镜。

C.负高相差物镜。

答:

（C）。

30．物镜头上的“0.17”表示:

A.要求的盖玻片厚度。

B.要求的载玻片厚度。

C.镜头浸油的深度。

答:

（A）。

31．镜头上标有“NK"字母的镜头是:

A.照相目镜。

B.荧光目镜。

C.相差目镜。

答:

（A）。

32．目镜头上的“PK”字母表示:

A.平场目镜。

B.补偿目镜。

C.平场补偿目镜。

答:

（C）。

33．物镜头上的"Splan"字母表示:

A.超平场物镜。

B.平场物镜。

C.消色差物镜。

答:

（A）。

34．物镜头上的"SplanApo"表示:

A.超平场复消色差物镜。

B.超平场半消色差物镜。

C.超平场物镜。

答:

（A）。

35.物镜头上的"Planapo"表示:

A.超平场物镜。

B.平场物镜。

C.平场复消色差物镜。

答:

（C）。

36．物镜头上的"Plan"字母表示:

A.平场物镜。

B.消色差物镜。

C.超平场物镜。

答:

（A）。

37．目镜头上的"W"字母表示:

A.广视野高眼点补偿目镜。

B.高眼点目镜。

C.广视野目镜。

答:

（C）。

38．目镜头上的"SWK"字母表示:

A.超广视野目镜。

B.高眼点补偿目镜。

C.平场补偿目镜。

答:

（A）。

39.目镜头上的"WHK"字母表示:

A.超广视野目镜。

B.广视野高眼点目镜。

C.平场补偿目镜。

答:

（B）。

40.物镜头上的"错.L"字母表示:

A.消色差物镜。

B.半消色差物镜。

C.复消色差物镜。

答:

（B）。

填空题

01.霉菌水浸片的制片程序是加一滴水于载玻片中央,用解剖针挑取菌丝少许,将菌丝用50%的酒精浸润,将菌丝用蒸馏水水洗,将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散,盖上盖玻片。

02.放线菌印片染色的操作程序是印片,干燥,固定,复红染色2-3分钟,水洗,晾干。

03.固体培养基常用洋菜（琼脂）作凝固剂,普通固体培养基的用量一般为1.5-2.0%_,半固体培养基的用量一般为0.5%__。

04.简单染色的操作程序是涂片,干燥,固定,复红染色1-2分钟,水洗,晾干。

05.使用手提式灭菌锅进行灭菌的操作程序是__锅内加水,灭菌物体装锅,对称上紧密封螺帽将锅密封上,加热升温,排尽锅内冷空气,升温至灭菌工艺条件（一般为98kpa）,在工艺条件下保压计时（一般为30分钟）,到时间后切断热源,降温,出锅。

06．实验室配制固体培养基的操作程序是照配方称取药品,将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸,将琼脂按量称取后用水浸湿,将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中,待琼脂全部融化后调节pH值,补充损失的水分,分装培养基入不同的容器中。

07.有荚膜的细菌用负染色法染色后,荚膜为无色,菌体为_红色.

08.细菌经革兰氏染色后,革兰氏正反应菌呈__紫色,革兰氏负反应菌呈__红色。

09.细菌经简单染色后呈__所染染料的颜色_。

10.显微镜的光学系统由_反光镜,聚光镜,物镜,_和目镜组成。

11．显微镜的机械部分包括_镜座,镜臂,载物台,转换器,镜筒,推动器,粗动螺旋,微动螺旋聚光镜升降螺旋。

等九部分组成。

12.高氏培养基通常用来培养_放线菌,其pH值为_7.5-8.0__。

13.PA培养基通常用来培养真菌__菌,其pH值为5-6_。

14.牛肉膏、蛋白胨培养基通常用来培养_细菌,其pH值为_、7.0-7.2__。

15.无氮培养基通常用来培养自生固氮菌。

其氮源来自_空气中的N2_。

16.干热灭菌的工艺条件是160-170℃/2h_。

17.使用显微镜低倍镜观察时,聚光器应该降低,使用显微镜高倍镜观察时,聚光器应该适当升高。

18.革兰氏染色的关键操作是酒精脱色_。

19.显微镜的倍数越大,焦深越小,调焦应该越小心_。

20.按培养基的形态,可将培养基分为液体_,固体_,半固体__三种类型。

21.配制常规培养基时通常用_自来_水。

22.热灭菌通常用来灭菌玻璃器材,培养基的灭菌通常用_高压蒸汽灭菌。

23.细菌稀释测数通常采用10倍__稀释法,稀释用试管无菌水为9__毫升。

24.配制培养基时常用_1molNaOH、和1molHCL调节pH值。

25.按培养基的特殊用途,可将培养基分成__选择培养基,加富培养基,鉴别培养基等。

26.选择培养基可用来分离培养我们所需的特殊微生物类群,例如我们要从土壤中分离纤维分解菌,可以利用_纤维素_作唯一碳源来筛选纤维分_解菌___；要分离产蛋白酶的微生物,可以利用酪蛋白,作唯一氮源分离_蛋白分解菌_。

27．革兰氏染色的操作程序是涂片,干燥,固定,结晶紫染色1分钟,水洗,碘液媒染1分钟,水洗,95%的乙醇脱色25秒,水洗,蕃红复染3-5分钟,水洗,晾干__。

28.培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。

按营养物质的不同来源可分为_天然培养基,合成培养基,半合成培养基__三大类。

29.高倍镜头的数值孔径通常为_0.65,,放大倍数为_40x__。

30.油镜头的数值孔径通常为_1.25,放大倍数为_100x或90x__。

31.低倍镜头的数值孔径通常是0.25__,放大倍数为_10x或8x__。

32.穿刺接种使用的接种工具为__接种针,斜面接种使用的接种工具为接种环__。

33.进行稀释测数使用的主要器材有__酒精灯,1ml无菌吸管,9ml试管装无菌水,9cm的无菌平板

34.用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时,可使菌体呈红色,使芽胞呈_绿色。

35.用日光灯作光源时,通常用_平面反光镜,用自然光作光源时,通常用凹面__反光镜

36.无菌室杀菌通常采用紫外灯照射,和喷洒化学药剂（如酚）相结合的方法。

37.半固体培养基通常用来检查_细菌的运动性。

38.摆试管斜面的基本操作方法是将摆斜面用特制木条放在桌面上,将装有固体培养基的试管趁热放在特制木条上摆成斜面,斜面长度不得超过试管长度的1/2,将试管棉塞部分用灭菌报纸盖上,以防空气中微生物落到棉塞上引起污染。

39不能加热灭菌的液体培养基应采用滤法除菌,通常用的器皿有蔡氏细菌过滤滤和膜滤_。

40.蓝细菌的培养可用膜滤_培养基。

41.分离酵母菌时为了抑制细菌的生长,通常用_膜培养基。

42.从土壤中分离真菌时,通常在培养基中加入_孟加拉红和_链霉素显_抑制细菌的生长。

43.测微生物的大小使用的主要工具是微镜,镜台测微尺和_目镜测微尺。

44.测微生物的数量使用的主要工具是_显微镜和血球计数板_。

45.进行细菌的显微计数时使用的主要工具是显微镜和细菌计数板_。

46.普通光学显微镜测酵母菌的大小的操作程序是将镜台测微尺置载物台上,调焦找到台尺,在低倍镜下校正目镜测微尺每格的长,在高倍镜下校正目镜测微尺每格的长,去掉台尺换上待测样本片,在高倍镜下测出十个酵母菌宽和长的格数,将校正值乘入,算出十个酵母菌的平均宽和平均长,以平均宽x*平均长Y（μm）表示酵母菌的大小。

47.显微计数的操作程序是_将待测菌进行适当的稀释,将计数板置于载物台上,在低倍镜下找到计数区,将菌液加到计数区上,调焦看到菌体,按五点取样法计数五个大方格的菌数,计算每小格的含菌数,计算出单位体积（如每ml）中的含菌数。

48.荚膜染色法的操作程序是_涂片,风干,加复红染色3-5分钟,水洗,晾干,加墨素涂抹,风干。

49.芽胞染色的操作程序是片,干燥,固定,

孔雀绿加热染色15分钟,水洗,复红染色2-3分钟,

水洗,

晾干。

50.芽胞染色的关键操作是孔雀绿加热染色_。

51.放线菌印片染色的关键操作是_印片时不能移动__。

52.用负染色法染荚膜的关键操作是_涂抹墨素要薄。

53.摇床振荡培养通常用来培养_好气微生物,享格特的厌氧操作方法通常用来培养专性厌氧菌

54.革兰氏染色反应与细菌细胞壁的_结构_和__组成_有关。

在革兰氏染色过程中,当用95%酒精处理后,就放在显微镜下观察,革兰氏阳性菌呈_紫_色,而革兰氏阴性菌呈_无色。

55.血球计数板与细菌计数板的主要差别是前者计数区的深度是后者的五倍

56.制霉菌水浸片时加棉兰染色液可使菌体呈_浅兰色。

57.Anabaenaazo对ica的异型胞通常是_间生在光学显微镜下它是_透明的,细胞两端有极节_。

它能控制氧气的进入,保持异型胞内_低氧分压,以利于固定分子氮_。

58.配制培养基时,应注意各种营养物质的配比,特别是C:

N比（碳氮比）。

一般而言,当C:

N³5:

1时,有利于_菌体生长；当C:

NÐ5:

1时,有利于__积累代谢产物。

59.由于各种微生物对某种化合物如抗生素、染料的敏感性不同,可以利用这一特征来从土壤中分离出不同类群的微生物。

如在培养基中加入青霉素（链霉素）,会杀死或抑制细菌和放线菌的生长而分离出真菌__；在培养基中加入__结晶紫__,有利于分离到革兰氏阴性菌。

60．细菌在革兰氏染色过程中,最后用蕃红复染的原因是G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后菌体紫色脱去,故需用蕃红复染,这样在光镜下才能见到红色的菌体。

61.高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于_片置反和_菌体着色太浅引起。

62.微生物在培养基中生长时,由于其_新陈代谢而使培养基_pH值发生改变；所以在配制培养基时,为维持该条件的相对恒定,常在培养基中加入缓冲物质如_碳酸盐（CaCO3）_或_磷酸盐

63.一般而言,微生物在含糖基质上生长,会产_酸_,而使_pH下降_；微生物分解蛋白质或氨基酸会产_碱_,而使_pH上升.

64.在微生物培养过程中使用的培养皿首先是被_Petri采用的,因此又称培养皿为_Petri_dish。

Hesse在其妻子的启发下,将固体培养基使用的凝固剂由明胶改为_琼脂

65.显微镜的微动螺旋每转一圈升降距离为_0.1毫米

66.两个典型的革兰氏正反应细菌和革兰氏负反应细菌经革兰氏染色后都呈阴性反应往往是由于_酒精脱色时间过长和__菌体培养时间太长引起。

67.检查乳品和饮料是否含有_大肠杆菌（E.Coli）_等肠道细菌,可采用_伊红--美兰_培养基,在这种培养基平板上_大肠杆菌（E.Coli）__会形成具有_金属___光泽的紫黑色小菌落。

68.细菌鞭毛经镀银法染色后呈_褐_色。

69.细菌鞭毛经李夫森法染色后呈_红色。

70.由于升汞（HgCL2）有腐蚀作用,所以不能用于金属器皿消毒,特别是_铝制品。

1．革兰氏染色反应的成败关键是什么?

为什么革兰氏染色有十分重要的理论与实践意义?

因通过革兰氏染色,可把几乎所有的细菌都分成G+和G-菌两大类细菌,在细胞结构、成分、形态、生理、生化、遗传、免疫、生态和药物敏感性等方面都呈现出明显的差异。

因此,任何细菌只要通过革兰氏染色,即可提供不少重要的生物学特性方面的信息。

革兰氏染色反应的成败关键是:

1）.菌龄:

12-24小时的纯培养物。

2）.革兰氏染色操作技术其中严格控制酒精脱色时间和菌液涂布时应均匀而薄是关键。

3）.培养基的组成。

2．如何从土壤中分离得到一个微生物的纯培养体?

首先要根据分离对象选择适宜的培养基。

若要分离真菌应选用马丁-孟加拉红选择培养基；若要分离细菌应选用牛肉膏蛋白胨培养基；若要分离放线菌应选用高氏培养基。

土样采回来后,用常规的十倍稀释分离法进行稀释分离,若分离细菌,一般稀至10-8,若分离放线菌,一般稀至10-6；若分离真菌,一般稀至10-4。

取最后三个稀释度倒平板获得单个菌落。

将平板上出现的单菌落转接斜面培养,同时镜检菌体的纯度,若不纯,应将培养的单菌落斜面再次进行稀释分离。

倒平板获得单菌落,转接斜面培养,同时镜检菌体的纯度。

反复几次直到得到菌体单一的单菌落方可认为是某一微生物的纯培养体。