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5.精氨酸的pI值为10.76,将其溶于pH7的缓冲液中,并置于电场中,则精氨酸应向电场的_______方向移动。

6.组成蛋白质的20种氨基酸中,含有咪唑环的氨基酸是________,含硫的氨基酸有_________和___________。

7.蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是_____________和______________。

8.α-螺旋结构是由同一肽链的_______和________间的___键维持的,螺距为______,每圈螺旋含_______个氨基酸残基,每个氨基酸残基沿轴上升高度为_________。

天然蛋白质分子中的α-螺旋大都属于___手螺旋。

9.一个α-螺旋片段含有180个氨基酸残基,该片段中有_____圈螺旋?

该α-螺旋片段的轴长为_____.

10.球状蛋白质中有_____侧链的氨基酸残基常位于分子表面而与水结合,而有_______侧链的氨基酸位于分子的内部。

11.氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成______色化合物,而________与茚三酮反应生成黄色化合物。

12.维持蛋白质的一级结构的化学键有_______和_______;

维持二级结构靠________键;

维持三级结构和四级结构靠_________键,其中包括________、________、________和_________.

13.用电泳方法分离蛋白质的原理,是在一定的pH条件下,不同蛋白质的________、_________和___________不同,因而在电场中移动的_______和_______不同,从而使蛋白质得到分离。

14.氨基酸处于等电状态时,主要是以________形式存在,此时它的溶解度最小。

15.今有甲、乙、丙三种蛋白质,它们的等电点分别为8.0、4.5和10.0,当在pH8.0缓冲液中,它们在电场中电泳的情况为:

甲_______,乙_______,丙________。

16.当氨基酸溶液的pH=pI时,氨基酸以_____离子形式存在,当pH>

pI时,氨基酸以_______离子形式存在。

17.谷氨酸的pK1(α-COOH)=2.19,pK2(α-NH+3)=9.67,pKR(R基)=4.25,谷氨酸的等电点为__________。

18.天然蛋白质中的α-螺旋结构,其主链上所有的羰基氧与亚氨基氢都参与了链内_____键的形成,因此构象相当稳定。

19.将分子量分别为a(90000)、b(45000)、c(110000)的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析,它们被洗脱下来的先后顺序是_____________。

20.血红蛋白的辅基是________,当其中的1个亚基与氧结合后,其余亚基与氧的亲合力______,这种现象称________,当CO2或H+浓度增高时,血红蛋白与氧的亲合力_______,这种现象称_________。

(三)选择题

1.在生理pH条件下,下列哪种氨基酸带正电荷?

A.丙氨酸B.酪氨酸C.赖氨酸D.蛋氨酸

2.下列氨基酸中哪一种是非必需氨基酸?

A.亮氨酸B.酪氨酸C.赖氨酸D.蛋氨酸

3.蛋白质的组成成分中,在280nm处有最大吸收值的最主要成分是:

A.酪氨酸的酚环B.半胱氨酸的硫原子

C.肽键D.苯丙氨酸

4.下列4种氨基酸中哪个有碱性侧链?

A.脯氨酸B.苯丙氨酸C.异亮氨酸D.赖氨酸

5.蛋白质的一级结构是指:

A.蛋白质氨基酸的种类和数目B.蛋白质中氨基酸的排列顺序

C.蛋白质分子中多肽链的折叠和盘绕D.包括A,B和C

6.下列哪一项不是蛋白质α-螺旋结构的特点?

A.天然蛋白质多为右手螺旋

B.肽链平面充分伸展

C.每隔3.6个氨基酸螺旋上升一圈。

D.每个氨基酸残基上升高度为0.15nm.

7.下列哪一项不是蛋白质的性质之一?

A.处于等电状态时溶解度最小B.加入少量中性盐溶解度增加

C.变性蛋白质的溶解度增加D.有紫外吸收特性

8.下列氨基酸中哪一种不具有旋光性?

A.LeuB.AlaC.GlyD.Ser

9.下列关于蛋白质结构的叙述,哪一项是错误的?

A.氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位

B.电荷的氨基酸侧链常在分子的外侧,面向水相

C.白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一

D.白质的空间结构主要靠次级键维持

10.于β-折叠片的叙述,下列哪项是错误的?

A.β-折叠片的肽链处于曲折的伸展状态

B.的结构是借助于链内氢键稳定的

C.有的β-折叠片结构都是通过几段肽链平行排列而形成的

D.氨基酸之间的轴距为0.35nm

11.维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是:

A.盐键B.疏水键C.氢键D.二硫键

12.维持蛋白质三级结构稳定的因素是:

A.肽键B.二硫键C.离子键D.次级键

13.凝胶过滤法分离蛋白质时,从层析柱上先被洗脱下来的是:

A.分子量大的B.分子量小的

C.电荷多的D.带电荷少的

14.下列哪项与蛋白质的变性无关?

A.肽键断裂B.氢键被破坏

C.离子键被破坏D.疏水键被破坏

15.蛋白质空间构象的特征主要取决于下列哪一项?

A.多肽链中氨基酸的排列顺序B.次级键

C.链内及链间的二硫键D.温度及pH

16.下列哪个性质是氨基酸和蛋白质所共有的?

A.胶体性质B.两性性质

C.沉淀反应D.变性性质

17.氨基酸在等电点时具有的特点是:

A.不带正电荷B.不带负电荷

C.在电场中不泳动D.溶解度最大

18.Arg的pK1ˊ=2.17,pK2ˊ=9.04,pK3ˊ=12.48其pIˊ等于:

A.5.613B.7.332C.7.903D.10.76

19.血红蛋白质的氧合曲线是:

A.双曲线B.抛物线C.S形曲线D.直线

20.有一蛋白质水解产物在pH6用阳离子交换柱层析时,第一个被洗脱下来的氨基酸是

A.Val(pI为5.96)B.Lys(pI为9.74)

C.Asp(pI为2.77)D.Arg(pI为10.76)

21.SDS凝胶电泳分离蛋白质是根据各种蛋白质

A.pI的差异B.分子大小的差异C.分子极性的差异D.溶解度的差异

22.血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于

A.O2分压降低B.CO2分压降低C.CO2分压增高D.N2分压增高

(四)是非判断题

()1.氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色化合物。

()2.因为羧基碳和亚氨基氮之间的部分双键性质,所以肽键不能自由旋转。

()3.所有的蛋白质都有酶活性。

()4.α-碳和羧基碳之间的键不能自由旋转。

()5.多数氨基酸有D-和L-两种不同构型,而构型的改变涉及共价键的破裂。

()6.所有氨基酸都具有旋光性。

()7.构成蛋白质的20种氨基酸都是必需氨基酸。

()8.蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序在很大程度上决定了它的构象。

()9.一氨基一羧基氨基酸的pI为中性,因为-COOH和-NH2的解离度相同。

()10.蛋白质的变性是蛋白质立体结构的破坏,因此涉及肽键的断裂。

()11.蛋白质是生物大分子,但并不都具有四级结构。

()12.血红蛋白和肌红蛋白都是氧的载体,前者是一个典型的变构蛋白,在与氧结合过程中呈现变构效应,而后者却不是。

()13.蛋白质二级结构的稳定性是靠链内氢键维持的,肽链上每个肽键都参与氢键的形成。

()14.并非所有构成蛋白质的20种氨基酸的α-碳原子上都有一个自由羧基和一个自由氨基。

()15.蛋白质是两性电解质,它的酸碱性质主要取决于肽链上可解离的R基团。

()16.在具有四级结构的蛋白质分子中,每个具有三级结构的多肽链是一个亚基。

()17.蛋白质的空间结构就是它的三级结构。

()18.维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。

()19.具有四级结构的蛋白质,它的每个亚基单独存在时仍能保存蛋白质原有的生物活性。

(五)问答题

1.什么是蛋白质的一级结构?

为什么说蛋白质的一级结构决定其空间结构?

2.什么是蛋白质的空间结构?

蛋白质的空间结构与其生物功能有何关系?

3.蛋白质的α-螺旋结构有何特点?

4.蛋白质的β-折叠结构有何特点?

5.举例说明蛋白质的结构与其功能之间的关系。

6.什么是蛋白质的变性作用和复性作用?

蛋白质变性后哪些性质会发生改变?

7.简述蛋白质变性作用的机制。

8.蛋白质有哪些重要功能?

9.根据蛋白质一级氨基酸序列可以预测蛋白质的空间结构。

假设有下列氨基酸序列(如图):

151015

Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gly-

202527

Pro-Asp-Gly-Met-Glu-Cys-Ala-Phe-His-Arg

(1)预测在该序列的哪一部位可能会出弯或β-转角。

(2)何处可能形成链内二硫键?

(3)假设该序列只是大的球蛋白的一部分,下面氨基酸残基中哪些可能分布在蛋白的外表面,哪些分布在内部?

天冬氨酸;

异亮氨酸;

缬氨酸;

赖氨酸;

丙氨酸

10.在下面指出的pH条件下,下列蛋白质在电场中向哪个方向移动?

A表示向阳极,B表示向阴极,C表示不移动。

人血清蛋白:

pH5.5,pH3.5;

血红蛋白:

pH7.07,pH9.0;

胸腺组蛋白:

pH5.0,pH8.0,pH11.5;

已知:

人血清蛋白的pI=4.64血红蛋白的pI=7.07胸腺组蛋白的pI=10.8。

11.凝胶过滤和SDS-PAGE均是利用凝胶,按照分子大小分离蛋白质的,为什么凝胶过滤时,蛋白质分子越小,洗脱速度越慢,而在SDS-PAGE中,蛋白质分子越小,迁移速度越快?

12.已知牛血清白蛋白含色氨酸0.58%(按质量计),色氨酸相对分子质量为204。

(1)计算牛血清白蛋白的最低相对分子质量

(2)用凝胶过滤测得牛血清白蛋白相对分子质量大约为7万,问牛血清白蛋白分子中含几个色氨酸残基?

Chapter3酶

1.米氏常数(Km值)

2.底物专一性(substratespecificity)

3.辅基(prostheticgroup)

4.酶原(zymogen)

5.酶的比活力(enzymaticcompareenergy)

6.活性中心(activecenter)

7.激活剂(activator)

8.抑制剂(inhibitorinhibiton)

9.别构酶(allostericenzyme)

10.同工酶(isozyme)

11.酶(enzyme)

12.诱导契合学说(inducedfittheory)

13.核酶

(二)英文缩写符号

1.NAD+(nicotinamideadeninedinucleotide)

2.NADP+(nicotinamideadeninedinucleotidephosphate)

3.FAD(flavinadeninedinucleotide)

4.FMN(flavinmononucleotide)

5.CoA(coenzymeA)

(三)填空题

1.酶是产生的,具有催化活性的。

2.酶具有、、和等催化特点。

3.影响酶促反应速度的因素有、、、、和。

4.与酶催化的高效率有关的因素有、、、

、等。

5.别构酶的特点是:

(1),

(2),它不符合一般的,当以V对[S]作图时,它表现出型曲线,而非曲线。

它是酶。

6.全酶由和组成,在催化反应时,二者所起的作用不同,其中决定酶的专一性和高效率,起传递电子、原子或化学基团的作用。

7.辅助因子包括、和等。

其中与酶蛋白结合紧密,需要除去,与酶蛋白结合疏松,可以用除去。

8.根据国际系统分类法,所有的酶按所催化的化学反应的性质可分为六类、、、、和。

9.根据国际酶学委员会的规定,每一种酶都有一个唯一的编号。

醇脱氢酶的编号是EC1.1.1.1,EC代表,第1个数字分别代表。

10.根据酶的特异性程度不同,酶的特异性可以分为、、和。

11.酶的活性中心包括和两个功能部位,其中直接与底物结合,决定酶的专一性,是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。

12.酶活力是指,一般用表示。

13.通常讨论酶促反应的反应速度时,指的是反应的速度,即时测得的反应速度。

14.解释别构酶作用机理的假说有模型和模型两种。

15.温度对酶活力影响有以下两方面:

一方面,另一方面。

16.脲酶只作用于尿素,而不作用于其他任何底物,因此它具有特异性;

甘油激酶可以催化甘油磷酸化,仅生成甘油-1-磷酸一种底物,因此它具有特异性。

17.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法),得到的直线在横轴的截距为,纵轴上的截距为。

18.判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的和。

19.维生素是维持生物体正常生长所必需的一类_________有机物质。

主要作用是作为_________的组分参与体内代谢。

20.根据维生素的____________性质,可将维生素分为两类,即____________和____________。

21.酶促反应速度(v)达到最大速度(Vm)的80%时,底物浓度[S]是Km的___________倍;

而v达到Vm90%时,[S]则是Km的__________倍。

22.不同酶的Km________,同一种酶有不同底物时,Km值________,其中Km值最小的底物是__________。

23.__________抑制剂不改变酶反应的Vm。

24.__________抑制剂不改变酶反应的Km值。

25.乳酸脱氢酶(LDH)是_______聚体,它由________和_________亚基组成,有________种同工酶,

其中LDH1含量最丰富的是__________组织。

26.动物消化道内最初由细胞分泌的无活性的酶前体称为________。

在一定条件下,无活性的酶前体转变成有活性的酶过程称为________。

27.米切尔和曼顿根据中间产物理论,提出了底物浓度与反应速度的关系式,称为________,该方程为________。

28.米氏常数可用________来表示,它的涵义是酶促反应速度达到________一半时的________。

29.维生素K又称为________;

维生素E称为________。

(四)选择题

1.酶的活性中心是指:

A.酶分子上含有必需基团的肽段B.酶分子与底物结合的部位

C.酶分子与辅酶结合的部位D.酶分子发挥催化作用的关键性结构区

2.酶催化作用对能量的影响在于:

A.增加产物能量水平B.降低活化能

C.降低反应物能量水平D.降低反应的自由能

3.竞争性抑制剂作用特点是:

A.与酶的底物竞争激活剂B.与酶的底物竞争酶的活性中心

C.与酶的底物竞争酶的辅基D.与酶的底物竞争酶的必需基团;

4.竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列那种因素无关:

A.作用时间B.抑制剂浓度C.底物浓度

D.酶与抑制剂的亲和力的大小E.酶与底物的亲和力的大小

5.哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度:

A.不可逆抑制作用B.竞争性可逆抑制作用C.非竞争性可逆抑制作用

D.反竞争性可逆抑制作用

6.酶的竞争性可逆抑制剂可以使:

A.Vmax减小,Km减小B.Vmax增加,Km增加

C.Vmax不变,Km增加D.Vmax不变,Km减小

7.下列常见抑制剂中,除哪个外都是不可逆抑制剂:

A有机磷化合物B有机汞化合物C有机砷化合物

D磺胺类药物

8.酶的活化和去活化循环中,酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上:

A.天冬氨酸B.脯氨酸C.赖氨酸D.丝氨酸

9.在生理条件下,下列哪种基团既可以作为H+的受体,也可以作为H+的供体:

A.His的咪唑基B.Lys的ε氨基C.Arg的胍基D.Cys的巯基

10.对于下列哪种抑制作用,抑制程度为50%时,[I]=Ki:

A.不可逆抑制作用B.竞争性可逆抑制作用

C.非竞争性可逆抑制作用D.反竞争性可逆抑制作用

11.下列辅酶中的哪个不是来自于维生素:

A.CoAB.CoQC.FMND.FH2

12.下列叙述中哪一种是正确的:

A.所有的辅酶都包含维生素组分

B.所有的维生素都可以作为辅酶或辅基的组分

C.所有的B族维生素都可以作为辅酶或辅基的组分

D.只有B族维生素可以作为辅酶或辅基的组分

13.如果有一酶促反应其[S]=1/2Km,则v值应等于多少Vmax?

A.0.25B.0.33C.0.50D.0.67

14.有机磷杀虫剂对胆碱酯酶的抑制作用属于:

A.可逆性抑制作用B.竞争性抑制作用C.非竞争性抑制作用D.不可逆性抑制作用

15.关于pH对酶活性的影响,以下哪项不对?

A.影响必需基团解离状态B.也能影响底物的解离状态

C.酶在一定的pH范围内发挥最高活性D.破坏酶蛋白的一级结构

16.Km值的概念是:

A.与酶对底物的亲和力无关B.是达到Vm所必须的底物浓度

C.同一种酶的各种同工酶的Km值相同D.是达到1/2Vm的底物浓度

17.关于酶的竞争性抑制作用的说法哪些是正确的?

A.抑制剂结构一般与底物结构相似B.Vm不变

C.增加底物浓度可减弱抑制剂的影响D.使Km值增大

18.关于酶的非竞争性抑制作用的说法哪些是正确的?

A.增加底物浓度能减少抑制剂的影响B.Vm降低

C.抑制剂结构与底物无相似之处D.Km值不变

19.酶与一般催化剂的不同点,在于酶具有:

A.酶可改变反应平衡常数B.极高催化效率C.对反应环境的高度不稳定D.高度专一性

20.辅酶A的生理功能是

A.递氢体B.转移酰基C.转移酮基D.递电子体

(五)是非判断题

()1.酶促反应的初速度与底物浓度无关。

()2.当底物处于饱和水平时,酶促反应的速度与酶浓度成正比。

()3.某些酶的Km由于代谢产物存在而发生改变,而这些代谢产物在结构上与底物无关。

()4.某些调节酶的V-[S]的S形曲线表明,酶与少量底物的结合增加了酶对后续底物分子的亲和力。

()5.测定酶活力时,底物浓度不必大于酶浓度。

()6.测定酶活力时,一般测定产物生成量比测定底物消耗量更为准确。

()7.在非竞争性抑制剂存在下,加入足量的底物,酶促的反应能够达到正常Vmax。

()8.酶反应的最适pH值只取决于酶蛋白本身的结构。

()9.脂溶性维生素都不能作为辅酶参与代谢。

()10.酶可以促成化学反应向正反应方向转移。

()11.对于可逆反应而言,酶既可以改变正反应速度,也可以改变逆反应速度。

()12.酶只能改变化学反应的活化能而不能改变化学反应的平衡常数。

()13.酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。

()14.从鼠脑分离的己糖激酶可以作用于葡萄糖(Km=6×

10-6mol/L)或果糖(Km=2×

10-3mol/L),则己糖激酶对果糖的亲和力更高。

()15.Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶浓度无关

()16.Km是酶的特征常数,在任何条件下,Km是常数。

()17.Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶的底物无关。

()18.一种酶有几种底物就有几种Km值。

()19.当[S]>

>

Km时,V趋向于Vmax,此时只有通过增加[E]来增加V。

()20.酶的最适pH值是一个常数,每一种酶只有一个确定的最适pH值。

()21.酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作用时间短,则最适温度低。

()22.金属离子作为酶的激活剂,有的可以相互取代,有的可以相互拮抗。

()23.增加不可逆抑制剂的浓度,可以实现酶活性的完全抑制。

()24.竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。

()25.由1g粗酶制剂经纯化后得到10mg电泳纯的酶制剂,那么酶的比活较原来提高了100倍。

(六)问答题及计算题

1.怎样证明酶是蛋白质?

2.简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性?

3.试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性?

(1)脲酶(只催化尿素NH2CONH2的水解,但不能作用于NH2CONHCH3);

(2)β-D-葡萄糖苷酶(只作用于β-D-葡萄糖形成的各种糖甘,但不能作用于其他的糖苷,例如果糖苷);

(3)酯酶(作用于R1COOR2的水解反应);

(4)L-氨基酸氧化酶(只作用于L-氨基酸,而不能作用于D-氨基酸);

(5)反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸(延胡索酸),而不能作用于顺丁烯二酸(马来酸)];

(6)甘油激酶(催化甘油磷酸化,生成甘油-1-磷酸)。

4.称取10mg蛋白酶配成10mL溶液,取2mL溶液测得含蛋白氮0.2mg,另取0.1mL溶液测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产生1500μg酪氨酸,假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1μg酪氨酸的酶量,请计算:

(1)酶溶液的蛋白浓度;

(2)酶溶液的酶活力及比活。

5.

(1)为什么某些肠道寄生虫如蛔虫

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