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3、普通肉汤:

轻度混浊,无菌环、无菌膜

侵害巨噬细胞,为胞内菌。

犊牛和羔羊表现为败血症和肝坏死。

成年牛、羊表现为神经症状,“转圈病”。

孕畜流产。

毒力因子为内化素和ActA、最重要的是李氏杆菌溶血素o(LLO)

1、涂片、染色、镜检

2、分离、培养、纯化

3、生化

4、小动物试验:

小白鼠

具O抗原和H抗原。

13个血清型(血清学诊断意义不大)

耐碱不耐酸。

抗干燥能力强,在干粪中能存活2年以上。

对氨苄青霉素敏感。

丹毒杆菌(Erysipelothrix)

G+,无荚膜、无芽胞,无鞭毛。

生长不良。

光滑、透明、露珠样小菌落,α溶血。

轻度混浊,无菌环、无菌膜。

可寄生于哺乳动物、禽和鱼类。

引起3-12月猪的丹毒,羔羊关节炎,鸡下痢、鸭败血症和类丹毒。

有些菌株毒力因子有透明质酸酶、神经氨酸酶

3、生化:

鸽子

对青霉素敏感。

13个血清型。

血清学诊断意义不大。

1、疫苗:

我国应用猪丹毒GC42或C4T(10)弱毒菌苗。

2、抗血清

3、抗菌素

菌名

溶血型

4℃生长

运动性

接触酶

七叶苷水解

VP及甲基红试验

新生霉素

明胶穿刺

感染试验

鸽豚鼠

李氏杆菌

β

+

敏感

沿穿刺线生长

—+

丹毒杆菌

α

-

抵抗

试管刷状

+—

丹毒杆菌与李氏杆菌的生化特点

革兰氏阳性芽胞杆菌

芽胞杆菌属(Bacillus)

炭疽芽胞杆菌(B.anthracis)

蜡状芽胞杆菌(B.cereus)

G+链大杆菌(组织中为短链,纯培养为长链),无鞭毛,不运动。

有椭圆形芽胞位于中央和荚膜。

为最大的细菌。

需氧或厌氧。

A普通琼脂:

强毒长成粗糙型菌落。

B血清或血液培养基、5%CO2可形成粘液型菌落。

C肉汤:

上清透明,有白色絮状沉淀。

D明胶:

成倒立的雪松状,时间稍长呈漏斗状。

E含青霉素的肉汤中:

0.5U/mL呈“串珠反应”,1.0U/mL生长受到抑制。

引起绵羊和牛的败血症。

人感染后发生肠炭疽、肺炭疽和皮肤炭疽。

毒力主要与荚膜和毒素有关。

(1)细菌学检查:

涂片、染色、镜检。

分离培养生化鉴定

动物试验

(2)血清学:

用已知抗体检测未知抗原

A、Ascolis氏沉淀反应(强阳性)

B、串珠荧光试验

有荚膜抗原、菌体抗原、保护性抗原及芽胞抗原四种成分。

60℃30-60min,常用消毒剂、常用浓度可杀死繁殖体,但芽胞的抵抗力很强。

免疫防治:

菌苗、血清和抗菌素

梭菌属(Clostridium)

产气荚膜梭菌(魏氏梭菌)(Cl.perfringens)

菌体直杆状,两端钝圆,单在或成双。

无鞭毛。

芽胞位于菌体中央,使菌体膨胀成梭状。

多数有荚膜。

厌氧生长,A、D、E型最适温度为45℃,B和C型37℃-45℃,世代时间是8min。

可生长。

B绵羊血琼脂平板:

菌落边缘整齐、灰色至灰黄色、表面光滑半透明、园屋顶状。

有时呈叶状或丝状边缘。

溶血,双溶血环,内环由θ毒素引起的完全溶血,外环由α毒素引起的不完全溶血

A型引起人气性坏疽和食物中毒。

B型引起羔羊痢疾和其他动物的肠毒血症。

C型引起羊猝疽。

D、E型引起动物的肠毒血症。

A、人中毒:

作细菌的分离鉴定。

B、动物的发病主要由细菌在肠道内产生的肠毒素引起,因此要进行毒素的中和试验。

根据致死性毒素,可分为A、B、C、D、E五个型。

在含糖的厌氧肉肝汤中因产酸于几周可死亡,而无糖则可生存几个月

生化特性:

发酵牛乳培养基,“暴烈发酵”

三联菌苗或五联菌苗

肉毒梭菌(Cl.botulinum)

菌体直杆状,两端钝园,单在或成双。

周鞭毛。

芽胞位于菌体近端,使菌体膨胀成球拍状。

专性厌氧生长。

产毒素的温度为25-30℃。

菌落为园形扇状、裂叶状或根状边缘。

扁平或隆起,透明或半透明,灰色至灰白色。

A、B、E、F引起人食物中毒。

A、B引起马、牛、水貂中毒。

C引起禽、马、牛等中毒。

毒素检查:

材料+10%胰酶37℃60min,腹腔接种小鼠,若有毒素,24H内发病,小鼠主要表现为坚毛、四肢瘫痪、呼吸困难、呼吸呈风箱式,腰部凹陷,宛如蜂腰,最终死于呼吸麻痹。

根据毒素的不同,可分为A、B、C、D、E、F、G7个型。

芽胞抵抗力极强,肉毒毒素对碱敏感

气肿疽梭菌(Cl.chauvoei)

菌体直杆状,两端钝圆,单在或成双,在豚鼠腹腔渗出液中呈短链。

芽胞位于菌体中央,使菌体膨胀成梭状或汤匙状。

生长温度为37℃,pH为7.2-7.4。

A、普通琼脂:

B、葡萄糖血琼脂:

菌落圆形,中央隆起纽扣状。

肌肉丰满部位发生气性水肿,肌肉常呈暗红棕色到黑色,故又称黑腿病。

6个月-2岁的牛最易感

细菌的分离鉴定

共同的O抗原

芽胞抵抗力强

破伤风梭菌(Cl.tetani)

G+杆菌、两端钝圆、细长、正直或略弯曲。

单在或成双。

有鞭毛能运动。

有芽胞,偏端而成球拍状。

严格厌氧。

37℃,pH7.0-7.5。

(1)普通琼脂上:

生长旺盛。

(2)血清或血液培养基:

在皮肤黏膜伤口侵入机体后在其中繁殖,产生强烈毒素,引发破伤风

一般无需作微生物学诊断。

动物试验(小鼠)

10个血清型,我国为V型

芽胞的抵抗力很强

(1)菌苗:

(2)血清:

分支杆菌属及相似菌属

分支杆菌(Mycobactreium)

细长、直或微弯的杆菌,单在,少数成丛。

G+,抗酸性染色。

不产生鞭毛、芽胞或荚膜。

细胞壁含有10%左右的糖脂,抗3%盐酸酒精脱色,故称为抗酸菌。

专性需氧,生长温度为37-37.5℃,最适pH6.4-7.0。

2、罗杰二氏培养基(内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐等):

长成粗糙、隆起、不透明、边缘不整齐,颗粒、结节状、乳白色或米黄色的菌落。

结核杆菌14-15小时分裂一次。

3、肉汤:

形成菌膜。

被巨噬细胞吞噬后不被消化降解,细菌在胞内繁殖,形成病灶,产生干酪样坏死。

1、涂片、染色、镜检:

2、分离、培养、纯化:

病料用6%H2SO4或4%NaOH处理15min,每份病料接种4-6支管,培养8周。

3、变态反应:

用PPD

4、血清学:

ELISA

5、PCR:

抗干燥能力强;

湿热抵抗力弱,62-63℃或煮沸可将其杀死。

对紫外线敏感,直射日2H内可杀死该菌,对75%的酒精敏感。

敏感药物有链霉素、异烟肼等,但易产生耐药性。

分为结核分支杆菌、牛分支杆菌和禽分支杆菌。

变异:

易产生耐药性变异和毒力的变异。

免疫与变态反应:

机体主要产生细胞免疫。

还产生迟发性变态反应。

免疫与治疗:

结核病的免疫是带菌免疫。

人可用卡介苗。

但在动物,为防止对检疫的干扰,一般不作免疫。

副结核分枝杆菌(M.paraenberculosis)

短杆状,无芽胞、无鞭毛、无荚膜。

病料中成丛排列。

革兰氏阳性、抗酸性阳性。

需氧,最适温度37.5℃,最适Ph6.8-7.2。

生长缓慢,初代分离及困难,需在培养基中添加分支杆菌抽提物,一般需6-8周,或6个月

引起细胞免疫和体液免疫,细胞免疫随病情进展而降低,体液免疫随病情发展而提高。

感染牛呈间歇性腹泻,回肠和空肠呈明显增生性肠炎,黏膜呈脑回状

显微镜检查

分离培养

变态反应

抗体检测

对热较敏感

放线菌属

牛放线菌(Actinomycesbovis)

从培养基中来的细菌呈杆状或棒状,可形成Y、V或T型排列的无隔菌丝。

来自病料的细菌,呈菊花状,革兰氏染色中央为阳性、周围呈阴性。

初代分离需厌氧。

培养基中加入甘油、血清或葡萄糖,生长更旺盛。

在血琼中的菌落半透明、乳白色、不溶血、粗糙。

主要感染牛、猪、马、羊。

以颌骨缓慢肿大为多见

取硫磺样颗粒加5%KOH,压碎,固定,革兰染色,镜检

对干燥、低温、高热抵抗力很弱

肠杆菌科

埃希氏菌属(Escherichia)

大肠埃希氏菌(Ecoli)即大肠杆菌

革兰氏阴性无芽胞杆菌。

大部分有周鞭毛和菌毛。

直杆状,两端稍圆。

单在或成双排列。

为最小的细菌

本菌为兼性厌氧菌。

最适生长温度为37℃,最适pH为7.2-普通培养基:

中生长良好。

隆起、光滑,整齐,灰白色。

2、肉汤:

浑浊,粘性沉淀,管壁有菌环。

3、麦康盖培养基:

红色菌落。

4、伊红美兰鉴别培养基:

黑色带金属光泽的菌落。

5、血平板:

β溶血(致病菌株)。

1、产肠毒素大肠杆菌(ETEC):

毒力因子主要是粘附素和肠毒素。

引起动物腹泻。

2、肠产毒性大肠杆菌(EnterotoxigenicE.coli,ETEC):

引起婴幼儿和旅游者腹泻,出现轻度水泻,也可呈严重的霍乱样症状。

致病因素是LT或ST,或两者同时致病。

有些菌株具有定居因子,常见者为O6:

K15:

H16、O25:

K7:

H42。

3、产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC):

主要毒力因子是粘附性菌毛和类志贺毒素,引起猪水肿和人的出血性肠炎。

4、肠致病性大肠杆菌:

是婴儿腹泻的主要病原菌,有高度传染性,严重者可致死;

成人少见

5、败血性大肠杆菌:

6、尿道致病性大肠杆菌

涂片、染色、镜检

分离培养、纯化

生化试验、血清学

1、O抗原

2、K抗原

3、H抗原

抗原结构式:

O:

K:

H

大肠杆菌能分解多种碳水化合物产酸产气。

大多数菌株可发酵乳糖。

防治:

1、抗粘附素全价或亚单位苗

2、类毒素苗或LT-B亚单位苗

3、基因工程苗

4、抗血清

5、抗菌药

沙门氏菌属(Salmonella)

革兰氏阴性,无芽胞,周鞭毛。

呈直杆状。

兼性厌氧,

与E.coli相似

只有鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒在普通培养基上生长较差。

大部分不利用乳糖。

培养基中加入硫代硫酸钠、胱氨酸、血清等可提高其生长效率。

主要引起败血症、胃肠炎、局部炎症。

人中毒。

多毒力因子

鉴别培养基增菌培养基

三糖铁和尿素培养基

生化鉴定A-F群多价O血清

沙门氏菌具有O、H、K和菌毛四种抗原。

沙门氏菌的抗原式:

O:

H1:

H2

绝大多数发酵葡萄糖产酸产气,在三糖铁琼脂上常产生H2S.

1、疫苗

2、净化

3、药物

耶尔森菌属

鼠疫耶尔森菌(Yersiniapestis)

革兰氏阴性,菌体呈球杆状。

固体培养基培养,菌体为卵圆形或短杆状,散在或群集。

肉汤中培养,细菌排成短链状。

兼性厌氧菌。

最适生长温度为28-30℃,最适pH为7.2-7.4。

1、普通琼脂培养基:

生长贫瘠。

菌落呈半透明、奶油状,光滑湿润。

2、肉汤培养基:

液体清亮,液面有菌膜。

4-5天后形成长丝状下垂生长物。

鼠疫是由鼠疫杆菌所致的烈性传染病,病死率30%~100%

人感染后,死者皮下严重充血、出血,大量血红蛋白转为含铁血红素,致使皮肤变黑紫色,故又称为“黑死病”。

毒力与FI等毒力因子相关

1、病料的采取

2、分离培养

3、鉴定

抗原性:

18种O抗原。

还有V抗原、FI、W和MT抗原。

弧菌科(Vibrionaceae)

弧菌属

副溶血弧菌

(V.parahaemolyticus)

弧状、杆状或丝状。

端鞭毛。

革兰氏阴性。

1、血琼脂:

在绵羊血平板上生长旺盛,但不溶血。

2、TCBS琼脂:

菌落绿色。

本菌存在于海产品中,人类食用污染本菌的鱼、贝类等引致食物中毒。

主要由溶血素和磷酸脂酶A2引起。

中毒者主要表现为水样腹泻、呕吐及发热

病人粪便或可疑食品接种嗜盐菌选择培养基或SS平板,取可疑菌作生化试验和神奈川试验。

(本菌致病株绝大多数能裂解人、兔等的红细胞,用溶血反应区分致病株和非致病株,称为神奈川实验)

巴氏杆菌科

巴氏杆菌(P.multocida)

G-球杆菌,来自组织的细菌以美蓝染色为两级浓染。

无鞭毛、无芽胞。

新分离的强毒株有荚膜,菌落为黏液型,较大。

2、血清或血液培养基:

淡灰白色、闪光的水滴样小菌落。

不溶血。

3、在麦康凯培养基:

不生长。

4、肉汤培养基:

表面形成菌环,液体清朗,管底有粘稠的沉淀。

主要引起败血症。

急性型呈出血性败血症迅速死亡,慢性型呈萎缩性鼻炎(猪、羊)、关节炎、局部化脓性炎症

小鼠极易感染,鸽子对杀禽亚种易感性强

1、取材:

心、肝、脾、肺、肾、血液。

2、涂片、镜检:

3、分离培养:

4、生化试验:

5、动物试验

依荚膜抗原可分成6个血清型。

依菌体抗原可分为16个型。

我国家禽为5:

A(菌体:

荚膜),8:

A;

猪为5:

A,6:

B;

兔为7:

A,5:

A。

抵抗力不强,在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡

2、血清

3、抗菌药

里氏杆菌属

鸭疫里(巴)氏杆菌(Riemerella)

G-短杆菌,呈杆状或椭圆形,个别呈长丝状,多为单个,少数成双或短链,两级浓染。

可形成荚膜,无芽胞、无鞭毛。

初次培养需5-10%CO2。

2、巧克力或胰蛋白胨大豆琼脂(TSA):

光滑型奶油状小菌落。

3、在麦康盖培养基:

4、血清或胰蛋白胨的肉汤:

轻微混浊,管底有少量沉淀。

主要感染2-3周的雏鸭。

引起急性或慢性败血症和浆膜炎。

vap1基因的编码产物是可能的毒力因子,为CAMP协同溶血素

取发病鸭的脑和心,接种巧克力培养基。

3、生化鉴定

4、血清学鉴定

5、动物试验:

豚鼠

共有21个血清型,我国主要为I型。

与巴氏杆菌一样,对外界抵抗力不强,4℃保存易死亡。

免疫:

灭活菌苗和弱毒苗

放线杆菌属

(Actinobacillus)

猪胸膜肺炎放线杆菌

(A.pleuropneumoniae)

G-小球杆菌,具有多形性,新鲜组织涂片两极浓染。

有荚膜和鞭毛,具运动性

兼性厌氧。

初次培养需5-10%CO2,最适生长温度为37℃。

2、巧克力:

3、绵羊鲜血琼脂:

β溶血,金色葡萄球菌可增强其溶血。

4、麦康盖琼脂:

不生长(与巴氏同)。

主要引起猪的典型胸膜肺炎。

小于6月龄的猪最易感。

猪是本菌高度专一性的宿主。

毒力因子复杂。

肺、胸水、鼻及气管渗出物。

2、涂片、染色、镜检

3、分离、培养、纯化

4、生化鉴定。

5、血清学鉴定。

6、动物试验。

14个型,1型的毒力最强,102个细菌可使猪发病,105可致猪死亡。

我国为2、3、5、7、8型。

抵抗力与巴氏相同

产生脲酶、分解蔗糖。

灭活菌苗免疫母猪。

净化。

青霉素

嗜血杆菌(Haemophilus)

G-短杆状,杆状或长丝状、球状。

无鞭毛、无芽胞,两极浓染。

新分离治病菌株有荚膜

最适温度37℃,pH7.6-7.8。

初次分离需5-10%CO2,同时需提供X因子和V因子。

在巧克力琼脂上,菌落为圆形、隆起、表面光滑、边缘整齐、灰白色半透明小菌落。

可致人和动物的多种疾病。

毒力因子是荚膜、菌毛、内毒素。

1、流感嗜血杆菌:

人的呼吸道感染。

2、副猪嗜血杆菌:

引起猪的格氏病,主要表现为心肌炎、腹膜炎、胸膜炎、脑膜炎及关节炎。

与猪流感联合引起流感。

3、副禽嗜血杆菌:

鸡鼻炎、打喷嚏、面部水肿、产蛋下降。

脑、血液、分泌物。

2、染色、涂片、镜检:

两极浓染

巧克力琼脂或鲜血琼脂,5-10%CO2。

血琼脂平板上生长贫瘠。

4、V因子需要实验:

卫星现象

5、卟啉试验(X因子需要实验)

外界抵抗力不强,在干燥环境中易死亡,常用消毒剂都容易杀灭本菌。

革兰氏阴性需氧杆菌

布氏杆菌(Brucella)

短杆或球状、G-、多单在,鉴别染色法染成红色。

不形成芽胞和荚膜。

专性需氧,但初次分离5%-10%CO2。

最适温度37℃,pH6.6-7.4

1、普通培养基,生长不良。

2、肝汤琼脂:

圆形、光滑、湿润、初无色、后带灰白或灰菌

3、液体培养基:

初浑浊久粘稠沉淀。

引致多种动物和人的布氏杆菌病,毒素为内毒素。

可经气溶胶传播,是潜在的生物武器。

流产布氏杆菌一旦潜入血流,则出现菌血症,在妊娠中期造成坏死性胎盘炎,致使孕畜流产。

1、细菌学检查(显微镜检查、分离培养、动物试验)

2、血清学检查

变态反应

属内抗原A\M\R和属外抗原

对外界环境的抵抗力较强,对湿热的抵抗力不强

支气管败血波氏菌(B.bronchiseptica)

细小球杆状,无芽胞,周鞭毛。

革兰氏阴性G-、两极浓染。

I相菌,周生菌毛,无鞭毛,毒力强。

III相菌,无荚膜和菌毛,有周鞭毛,毒力弱

1、普通琼脂:

生长良好。

2、波-让氏琼脂:

I相菌落----呈珍珠状或半圆状、乳白色,光滑致蜜,β溶血。

多次传代后变异成II相或III相----灰白色,扁平、光滑、质地稀软、不溶血。

3、蛋白胨琼脂:

灰白、透明、光滑、边缘整齐微隆。

4、麦康凯琼脂:

菌落微红色,周围有小红圈。

引起呼吸道的不显性感染及急、慢性炎症,统称为波氏菌病,最有代表性的是猪萎缩性鼻炎、犬传染性支气管炎、兔传染性鼻炎。

毒力因子包括黏附素及毒素两大类。

1、细菌学检查

2、动物试验

3、血清学检查

具有O、K、H抗原,抵抗力不强,常用消毒剂均对其有效。

军团菌(Legionella)

杆状或长丝状,菌端钝圆,有的略弯曲,常见纺锤体菌状。

无芽胞和荚膜,端生鞭毛,大多数有运动力。

需氧,2.5%CO2。

在C活性炭酵母浸液琼(CYE)中:

需培养3-5天,菌落为雕花玻璃状。

在缓冲活性炭酵母浸液琼脂(BCYE)中,针尖大小的菌落,园形、灰色。

人和多种动物均可感染。

人表现为急性呼吸道传染病。

嗜肺军团菌只感染人并致病。

肺、胸腔液等。

2、分离培养:

CYE和BCYE

3、鉴定:

对细菌作免疫荧光染色

依O抗原的不同可分为多个血清型。

抵抗力较大肠杆菌强。

革兰氏阴性厌氧和微需氧无芽胞杆菌

弯曲菌属(Campglobacter)

空肠弯曲菌(C.jejuni)

螺旋状弯曲杆菌,呈弧状或豆点状,G-。

有端鞭毛。

接触空气后成球状

微需氧。

5%O2、10%CO2、85%N2的混合气体。

42-43℃。

光滑型(圆形、隆起、半透明细小菌落)和粗糙型(边缘不整齐、蔓延生长的菌落)二种菌落

引起牛、猪、犬的腹泻,绵羊流产、禽传染性肝炎。

人的急性胃肠炎和食物中毒

目前可采用PCR方法直接检测粪样中的细菌。

细菌学检查,采集病料或排泄物,直接涂片染色镜检,分离培养用改良Camp-BAP琼脂或Skirrow琼脂培养

含有耐热的O抗原和不耐热的H、K抗原

对氧敏感,在外界环境中很易死亡,对干燥抵抗力弱,对酸和热敏感,对常用消毒剂敏感

分型:

利用萘啶酮酸敏感试验、马尿酸钠水解试验和快速H2S产生试验,将该菌分为生物I型和II型,前者H2S阴性、后者阳性。

胎儿弯曲菌(C.fetus)

螺旋状弯曲杆菌,两端尖细。

老龄培养物可长成疏松弯曲螺旋的丝状体,尤其是琼脂平板上的可呈球形或类球形

37℃,pH7。

血清或血液培养基。

初次在琼脂培养基中分离,菌落为光滑型、雕花玻璃型、粗糙型或粘液型。

胎儿亚种引起绵羊和牛的散发性流产,也可感染人引起流产、早产、肠炎、败血症等或脑膜炎,经口传染。

分离培养:

用特殊培养基在特殊条件下培养。

生化鉴定。

血清学检查,主要用于牛的诊断,用试管凝集试验,血清凝集价达1:

100者可判阳性。

抵抗力不强,易为干燥、直射阳光及弱消毒剂等杀死,对氧敏感,对多种抗生素敏感

螺旋体(Spirochaeta)

概述

G-,呈螺旋状或波浪状圆柱形,具有多个完整的螺旋。

结构:

中心为原生质细胞质2-100根轴丝外鞘(细胞壁和粘液层)

运动方式:

①旋转式②伸缩螺旋间距离活动③蛇行式

多数厌氧,有的需血液、腹水或其它特殊成份

染色方法:

革兰氏染色:

大部分不着色。

姬姆萨染色:

红色或蓝色。

镀银染色:

黑褐色。

印度墨汁或刚果红:

透明无色。

暗视野:

分裂方式:

二等分裂。

疏螺旋体属(Borrelia)

伯氏疏螺旋体(B.burgadorferi)

菌体长20-30μM,直径0.2μM,有2-40个大而宽疏的螺旋,鞭毛缠绕菌体。

致病性的疏螺旋体都能

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