第1章组织学绪论Word文档下载推荐.docx

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5．冰冻切片

A.是将组织块冷冻后用普通切片机进行切片的技术

B.最常用于骨组织

C.主要应用于血液

D.能较好地保存酶的活性

E.能较好地保存微细结构

6．用于光镜观察的石蜡切片厚度一般是

A.1～2μm

B.5～10μm

C.50～80μm

D.5～10nm

E.50～80nm

7．在还原剂存在时被硝酸银染成黑色的结构具有

A.嗜银性

B.亲银性

C.嗜酸性

D.嗜碱性

E.中性

8．普通光镜所能分辨的两点之间的最小距离是

A.mm

B.μm

C.nm

D.μm

E.nm

9．光镜观察时，低倍镜下结构清楚，但高倍镜下看不见或看不清楚，其原因常是

A.虹彩未打开

B.对光不好

C.载玻片太厚

D.盖玻片太厚

E.切片放反，盖玻片朝下

10．观察活细胞的形态和生长时应该用

A.荧光显微镜

B.普通光学显微镜

C.暗视野显微镜

D.倒置相差显微镜

E.电子显微镜

11．荧光显微镜技术中常使用的光源为

A.紫外线

B.红外线

C.荧光

D.激光

E.电子束

12．透射电镜的最大分辨率约为

13．透射电镜术中常用的染色剂是

A.苏木精和伊红

B.甲基绿和派若宁

C.柠檬酸铅和醋酸铀

D.溴乙啶和吖啶橙

E.锇酸和油红O

14．对于透射电镜术来说哪一点是错误的

A.取材要新鲜

B.组织块不需要固定

C.需制备超薄切片

D.用重金属染色

E.在荧光屏上观察

15．扫描电镜术主要用于观察

A.组织和细胞内部的微细结构

B.器官和细胞表面的立体微细结构

C.细胞断裂面的微细结构

D.各种细胞器的微细结构

E.细胞膜内蛋白质颗粒的分布

16．PAS反应显示的是组织和细胞内的

A.蛋白质

B.脂类

C.多糖

D.核糖核酸

E.脱氧核糖核酸

17．显示组织和细胞内特殊的多肽或蛋白质时应选用

A.H-E染色法

B.PAS反应

C.孚尔根（Feulgen）反应

D.免疫组织化学术

E.原位杂交术

18．应用放射自显影研究细胞DNA合成及增殖时，注入体内的物质常是3H标记的

A.胸腺嘧啶核苷

B.亮氨酸

C.胆固醇

D.抗体

E.抗原

19．在体外长期保存活细胞时应选用

A.冷冻干燥

B.福尔马林固定

C.干冰内保存

D.甘油内保存

E.液氮内保存

20．细胞株是

A.原代培养的细胞

B.传代培养的细胞

C.长期培养的细胞

D.贴壁培养的细胞

E.用某种单细胞或细胞克隆培养成的纯细胞群体

（二）B型题

A.嗜酸性

B.嗜碱性

C.异染性

D.嗜银性

E.亲银性

21．组织结构与碱性染料亲和力强

22．组织结构被伊红染成红色

23．组织结构与银离子结合且直接使其还原成银颗粒而被染成黑色

24．组织结构被甲苯胺蓝染成紫红色

B.冰冻切片

C.涂片

D.铺片

E.磨片

25．检测酶活性常用

26．观察骨和牙等硬组织常用

27．检查液体材料如血液、胸水等常用

A.组织化学术

B.原位杂交术

C.流式细胞术

D.细胞培养术

E.扫描电镜术

28．检测细胞内的DNA或mRNA

29．研究各种理化因子对活细胞的影响

30．对细胞的生物化学和生物物理特性进行快速定量测定

（三）X型题

31．与苏木精亲和力强的结构或化学成分有

A.细胞核

B.细胞质

C.细胞膜

D.DNA

E.RNA

32．PAS反应中使用的试剂是

A.稀盐酸

B.过碘酸

C.甲醛

D.乙二醛

E.希夫（Schiff）试剂

33．细胞质嗜碱性常是因为其中含有丰富的

A.粗面内质网

B.滑面内质网

C.游离核糖体

D.溶酶体

E.高尔基复合体

34．酶组织化学的特点是

A.属于酶催化其特异性底物的反应

B.直接或间接生成不溶性的有色终产物

C.可反映酶在细胞内的定位

D.反应产物越多，表示酶的含量越多

E.既可用于光镜研究，也可用于电镜研究

35．透射电镜术中通常使用的固定剂有

A.甲醛

B.多聚甲醛

C.戊二醛

D.酒精

E.锇酸

36．能够显示DNA的方法或试剂有

A.PAS反应

B.孚尔根（Feulgen）反应

C.吖啶橙

D.甲基绿

E.派若宁

37．免疫组织化学术中可用于标记抗体的物质有

A.荧光物质（如异硫氰酸荧光素FITC）

B.酶（如辣根过氧化物酶HRP）

C.金属（如胶体金）

D.放射性核素（如3H和35S）

E.硝酸银

38．应用原位杂交术可显示

A.基因在染色体上的定位

B.细胞内特定的mRNA

C.蛋白质的含量

D.蛋白质的降解速率

E.基因的转录活性

39．进行体外细胞培养时应注意

A.严防微生物污染

B.培养液的pH和渗透压

C.培养液含适宜的营养

D.温度

E.O2和CO2的浓度

40．可用于形态学定量分析的仪器有

A.透射电子显微镜

B.激光共聚焦扫描显微镜

C.显微分光光度计

D.图像分析仪

E.流式细胞仪

二、名词解释

1．组织

2．H-E染色法

3．组织化学术

4．PAS反应

5．原位杂交术

6．细胞培养术

三、问答题

1．在进行H-E染色之前，一般还需对所取材的新鲜组织做哪些处理

2．组织结构和细胞对不同染料的结合特性有哪几种

3．与光镜术比较，透射电镜技术的主要特点有哪些

4．说明免疫组织化学技术检测组织和细胞内蛋白质抗原的基本原理和关键技术。

5．常用的形态学定量分析方法有哪几种简述其原理。

附：

参考答案

1.C2.B3.A4.E5.D6.B7.A8.B9.E10.D

11.A12.C13.C14.B15.B16.C17.D18.A19.E20.E

21.B22.A23.E24.C25.B26.E27.C28.B29.D30.C

31.ADE32.BE33.AC34.ABCE35.BCE36.BCD

37.ABC38.ABE39.ABCDE40.BCDE

1．组织是形态和功能相同或相似的细胞组成的细胞群体，细胞间可有或多或少的细胞间质（或称细胞外基质）。

根据形态结构和功能，人体的组织可分为上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织4种基本类型。

由这些组织按一定的方式有机组合形成器官。

2．H-E染色法是组织学中最常用的染色方法。

染色时使用苏木精和伊红；

苏木精是碱性染料，将细胞核染成蓝紫色；

伊红是酸性染料，将细胞质和细胞外基质中的胶原纤维染成淡红色。

3．组织化学术是应用化学反应、物理反应或免疫学反应等原理，在组织、细胞原位检测组织或细胞内化学成分，并对其进行定位、定量及相关功能研究的实验技术。

凡是组织、细胞内的糖类、脂类、蛋白质、酶类和核酸等都可与相应试剂反应，最后形成有色反应终产物或电子致密物，应用光镜或电镜进行观察。

广义的组织化学术还包括免疫组织化学术、原位杂交术等。

4．PAS反应即过碘酸-Schiff反应，是显示多糖的一种组织化学反应。

其基本原理是过碘酸将糖分子中的乙二醇基氧化为乙二醛基，后者再与Schiff试剂中的亚硫酸品红反应，形成紫红色不溶性反应产物，沉积于多糖存在的部位。

根据反应产物的多少或颜色的深浅（或光密度）可对多糖进行半定量。

5．原位杂交术是一种在组织、细胞原位进行核酸分子杂交的技术，用来研究某种基因在染色体上的定位，或编码某种蛋白质的DNA或mRNA在细胞内的表达。

其原理是两条单核苷酸链通过碱基互补原则紧密结合，形成稳定的杂交体。

根据这一原理，应用一条碱基序列已知的、并经特定标记（地高辛，生物素，放射性核素等）的核苷酸链作为探针，与细胞内待检DNA片段或mRNA进行杂交，然后显示标记物，从而分析待检核酸的分布和含量。

6．细胞培养术是指利用一定的方法分离和纯化组织中某种细胞，制成单细胞悬液，在适当条件下进行体外培养生长的技术。

细胞培养必须在无菌环境下进行，培养液要有适当的营养物质、生长因子、pH、渗透压、O2和CO2浓度、温度等。

细胞培养术不仅可直接研究细胞的行为，如生长、分化、代谢、形态和功能变化，还可研究各种理化因子（如激素、生长因子、药物、毒物、辐射等）对细胞的影响，同时也是现代分子生物学和重组DNA技术的关键环节。

1．①要对取材的新鲜组织进行固定，即使用一定的固定剂使蛋白质凝固，以防止组织自溶，保存组织的原有结构。

②要将组织块包埋在有一定硬度的物质内，以便将软的组织块切成薄片。

组织学中常用石蜡包埋。

但在石蜡包埋前，需用酒精等使组织块脱水，再用二甲苯置换组织块中的酒精（透明）。

③用切片机将组织蜡块切成适当厚薄的组织切片，使光线可以透过。

最后进行H-E染色，使不同的组织、细胞结构具有不同的颜色，便于光镜观察。

2．组织结构对不同染料的结合特性有：

①与碱性染料亲和力强、易被染色的称嗜碱性。

②与酸性染料亲和力强、易被染色的称嗜酸性。

③与酸性和碱性染料的亲和力都不强的称中性。

④某些结构成分如肥大细胞的胞质颗粒，当用蓝色染料甲苯胺蓝染色时呈紫红色，称为异染性。

⑤当用硝酸银染色时，有些组织结构可直接使银离子还原为银颗粒而呈黑色，称为亲银性；

而有些组织结构需加入银盐和还原剂才能显色，称为嗜银性。

3．与光镜术比较，透射电镜术的特点有：

①以电子发射器发射的电子束代替光线。

②以磁场代替玻璃透镜。

③组织取材需快，组织块需新鲜，常用双醛（多聚甲醛和戊二醛）固定，并经锇酸后固定。

④由于电子束穿透力弱，组织块需切成超薄切片（50～80nm）。

⑤用重金属盐（柠檬酸铅和醋酸铀）代替普通化学染料进行电子染色。

⑥在荧光屏或照片上观察结果，以电子密度的高低分辨各种结构。

4．⑴免疫组织化学的基本原理是应用带有可见标记的特异性抗原-抗体反应，检测组织、细胞中的抗原物质。

⑵其关键技术是：

①抗体的制备：

分离纯化人或动物的某种蛋白质，作为抗原注入另一种动物体内，使该动物产生相应的多克隆抗体；

或制备单克隆抗体；

②抗体的标记：

常用的标记物有荧光染料如异硫氰酸荧光素（FITC）、酶类如辣根过氧化物酶（HRP）、重金属如胶体金等；

④组织或细胞制备：

需保存尽量多的组织抗原及其抗原性。

5．常用的形态学定量分析方法有：

①显微分光光度测量术，以各种物质分子对光的选择性吸收为基础，在显微镜下对样品中的化学物质进行定量分析。

②形态计量术，运用数学和统计学原理，对组织和细胞进行二维和三维的形态学测量；

其中三维立体结构的研究又称体视学；

目前多应用图像分析仪进行形态计量研究，方便、快速、准确。

③流式细胞术，其原理是分离被检细胞，制成悬液，并进行荧光染色或标记，然后使单细胞液流快速通过流式细胞仪的激光照射分析区，被检细胞产生不同的荧光信号并转变为电脉冲，分别输入计算机内贮存，同时显示于示波器屏幕上，即可获得该细胞群体中不同类型细胞的有关数据。