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葡萄球菌抗原(SPA)

c抗原,表面抗原(含M,T,R,S四种蛋白质抗原,M致病)

抵抗力

较一般无芽孢菌强,耐青霉素(产生-内酰胺酶),万古霉素和奈夫西林

不耐热,对消毒剂敏感,对抗生素和磺胺药物敏感,首选青霉素,极少有耐药株发现

较弱,对一般消毒剂敏感,有荚膜株抗干燥力较强。

对青霉素、红霉素、林可霉素敏感

致病物质

凝固酶coagulase(使纤维蛋白原变为纤维蛋白沉积于菌体表面,抗吞噬)

葡萄球菌溶血素staphylolysin(5种,型毒性最强,损伤细胞膜,攻击红细胞、白细胞和血小板,可制成类毒素)

杀白细胞素leukocidin(攻击中性粒细胞和巨嗜细胞),肠毒素enterotoxin(六种血清型:

ABCDEG,使小肠上皮细胞内水分和钠离子流失,引起急性胃肠炎)

表皮溶解毒素epidermolytictoxin(裂解表皮组织的棘状颗粒层,使表皮和真皮脱离,引起葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征(SSSS))

毒性休克综合症毒素1

toxicshocksyndrome

toxin(有致热性,并能提高对内毒素敏感性,引起发热、中毒性休克及脱屑性皮炎-毒性休克综合征(TSS))

脂磷壁酸(lipoteichoicacid,LTA)(LTA与细胞表面受体结合,增强细菌对宿主细胞的粘附性)

M蛋白Mprotein(抗吞噬,诱导变态反应——引起急性肾小球肾炎)

侵袭性酶invasiveenzyme(包括透明质酸酶——分解细胞间质的透明质酸利于细菌扩散,链激酶——也称溶纤维蛋白酶溶解血块阻止血浆凝固利于细菌扩散,链道酶——降解粘稠的DNA利于细菌的扩散)

链球菌溶血素hemolysins(链球菌溶血素OstreptolysinO——SLO:

对氧敏感,还原态可溶解红细胞,抗原性强;

链球菌溶血素SstreptolysinS——SLS:

对氧稳定,产生β溶血环,无抗原性)

致热外毒素pyrogenicexotoxin(也称为红疹毒素或猩红热毒素,化学本质为pr,有ABC三个血清型,作用是改变血脑屏障的通透性,直接作用于下丘脑引起发热、皮肤红疹)

夹膜(最主要,无荚膜的变异株无毒力)

溶血素

紫癫形成因子

疾病

化脓性炎症

食物中毒

烫伤样皮肤综合症

毒性休克综合症

葡萄球菌性肠炎(假膜性肠炎,与食物中毒不同,是长期使用广谱抗生素使菌群失调所致)

1.化脓性感染:

丹毒,脓疱疮,淋巴腺炎,蜂窝织炎,化脓性扁桃体炎,咽炎,中耳炎等

2.中毒性疾病:

猩红热,链球菌毒性休克综合征

3.变态反应性疾病:

风湿热,急性肾小球肾炎

备注:

甲型溶血性链球菌可致:

1.龋齿

2.亚急性细菌性心内膜炎

主要引起大叶性肺炎(呼吸道常见此菌,当呼吸道功能异常、酒精药物中毒、肺充血、心功能衰竭、体质虚弱时引起疾病)

其次是支气管炎

侵入其他部位:

中耳炎

脑膜炎

血症

全身感染时有败血症和脓毒血症

败血症

免疫

正常人体有一定天然免疫力,感染后获得一定免疫力但难以防止再次感染

感染后可以获得对同型链球菌的特异性免疫力,但是无交叉免疫,可反复感染

感染后建立起特异性免疫,再次感染少见

生化反应

发酵多种糖,产酸不产气,分解甘露醇(与非致病性葡萄球菌区别)

菊糖-,胆汁-

菊糖+,胆汁+

微生物学检测法

直接涂片镜检:

不能区别致病菌与非致病菌

致病性葡萄球菌特点:

1.产金黄色色素

2.血平皿上出现透明溶血环

3.凝固酶阳性

4.发酵甘露醇

食物中毒:

检测肠毒素

药敏试验

抗链球菌溶血素O试验(antistreptolysinOtest,ASOtest)

目的:

用于活动性风湿热的辅助诊断

 

1.菊糖发酵试验

2.胆汁溶菌试验

3.奥普托欣试验:

新鲜的标本悬液与等量不同稀释的肺炎链球菌分型诊断血清混合,与同型免疫血清相遇荚膜显著增大

防治原则

注意个人卫生,做好消毒隔离,防止医源性感染

采用抗-内酰胺酶的青霉素类药物静脉给药

患者,隐性感染者和恢复期带菌者是主要传染源

隔离消毒!

极少产生耐药性

青霉素G为治疗链球菌感染的首选药

预防:

23价肺炎链球菌荚膜多糖菌苗

治疗:

青霉素G为首选治疗药物

奈瑟菌总结

脑膜炎奈氏球菌

淋球奈瑟菌

Neisseriameningitidis

Neisseriagonorrhoeae

简称淋球菌gonococcus

单个菌体肾形

圆形或卵圆形

成双,两个凹面相对

成双,菌体相接触面略凹陷,形似一对咖啡豆

染色

G-

无鞭毛,不形成芽孢,有菌毛,新分离株有荚膜

无鞭毛,有菌毛,分离初期有荚膜

巧克力色血液琼脂平板

初次分离培养需要提供5%-20%CO2

初次分离培养需要提供5%-20%CO2

温度

35-36

露滴状

光滑型菌落

半透明

1.荚膜多糖抗原

2外膜蛋白

3.脂多糖抗原

菌体表面抗原有:

1.菌毛,2.脂多糖蛋白,3.外膜蛋白

极弱,干燥,阳光,湿热及一般消毒剂很快将细菌杀死

极弱,不耐干燥和寒冷。

一般消毒剂敏感。

对青霉素,磺胺药物,金霉素均敏感,但易产生耐药性

制病物质

1.荚膜:

抗吞噬,依抗原性不同可分为13个血清型

2.菌毛pili:

黏附(咽部粘膜上皮细胞表面)

3.内毒素:

自溶性释放,作用于毛细血管或小血管,引起血栓、出血。

作用于肾上腺可以引起肾上腺出血。

大量内毒素可引起弥漫性血管内出血(disseminatedintravascularcoagulation,DIC),导致休克,预后不良

1.荚膜:

抗吞噬

2.菌毛pili:

粘附(人泌尿生殖道上皮细胞、精子、红细胞和白细胞等)。

实验证明只有有菌毛的淋病奈瑟菌才有毒力。

3.外膜蛋白outermembraneprotein:

两种:

PIandPII粘附

4.(脂多糖)内毒素:

自溶释放,引起炎症反应

5.IgA1酶:

破坏粘膜表面IgA1

流行性脑脊髓炎:

人类是脑膜炎奈瑟菌唯一的易感宿主。

易感人群:

6m-2y年龄的婴幼儿

血清A群为主要致病菌,B群感染常致带菌状态!

1.泌尿生殖系统化脓性炎症(淋病):

人类是淋病奈瑟菌的唯一天然宿主。

淋病是重要的性传播疾病(sexuallytransmitteddisease,STD)

无症状携带者:

女性>

男性

发病:

男性>

女性

2.新生儿淋病奈瑟菌性结膜炎,俗称脓漏眼

菌血症

机体对脑膜炎奈瑟菌感染的免疫力主要依赖体液免疫。

免疫性强

普遍易感,感染后产生特异性抗体IgM,IgG和分泌性IgA抗体,但此菌抗原易变异故反复感染现象普遍

分解糖类(包括葡萄糖,麦芽糖等)产酸不产气。

氧化酶试验阳性。

脑膜炎奈瑟菌可以产生自溶酶,人工培养若不及时移种,数日后菌体自溶

只分解葡萄糖产酸不产气,不分解其他糖类。

产生氧化酶,过氧化酶。

故氧化酶、过氧化酶试验阳性

微生物学检查法

1.标本采集

菌血症期病人采集血液

有出血点或瘀斑者,可取瘀斑渗出液

有脑膜刺激症状者,抽取脑脊液

2.直接涂片检查

脑脊液或瘀斑渗出液,若发现G-双球菌,肾形成对,可初报

3.分离培养与鉴定

巧克力色血琼脂平板,初次分离提供5-10%CO2

1.直接涂片镜检

急性淋病:

中性粒细胞内大量G-,咖啡豆形双球菌——有诊断意义

慢性淋病:

镜检较困难

2.分离培养鉴定

即采集即培养,标本保温保湿,巧克力色血琼脂培养基培养

3.抗原检测:

直接荧光抗体染色法

4.核酸检测:

PCR

流行率

致死率

两岁以上儿童注射A群荚膜多糖菌苗、应隔离患者、流行期间儿童可口服磺胺药物等预防,治疗首选青霉素G。

青霉素的剂量要大,对青霉素过敏者可以选用氯霉素或红霉素

1.无疫苗

2.开展防治性病的知识教育,取缔娼妓

3.洁身自爱,不发生不正当的性关系

4.根据药敏试验选用敏感抗生素(青霉素)

5.新生儿:

抗生素(红霉素或四环素眼药膏)或1%硝酸银滴眼液

肠道杆菌总结

大肠埃希菌

沙门菌属

志贺菌属

Escherichiacoli

Sallmonell

Shigella

中等大小杆菌

较大肠埃希菌稍大的杆菌

短小杆菌

有周鞭毛(故能运动),有普通菌毛,性菌毛,有些有微荚膜(多糖包膜)和致病性菌毛

有周鞭毛,有菌毛。

无荚膜,无芽孢。

有菌毛,无芽孢,无鞭毛,无荚膜

普通琼脂培养基上培养繁殖较快形成S型菌落,肠道内较慢

普通琼脂培养基上可生长,形成S型菌落

营养要求不高

兼性厌氧

S型菌落,有些有β溶血环

S型菌落

粗糙菌落

H-O,S-R,V-W,位相变异

S-R,型抗原消失变异,形体变异,溶原性变异,耐药性变异

O抗原

171种,位于细胞壁最外层的脂多糖,化学组成是重复的多糖单位。

为细菌的内毒素。

主要引起IgM抗体

58种,是分组依据;

存在于细菌细胞壁脂多糖中多糖部分。

耐热!

引起人类疾病的在A~E组

群特异性抗原(A、B、C和D群);

型特异性抗原(42血清型和亚型)

H抗原

56种,位于鞭毛上,加热或者用酒精处理可以使H抗原变性或丧失。

主要引起IgG抗体

存在于鞭毛蛋白上,不耐热!

有两相(phase),I相和II相。

第I相特异性高又称特异相,以a,b,c……表示;

第II相非特异相,以1,2,3……表示。

一个菌株同时有两相抗原的称双相菌,反之单相菌。

每一组沙门菌根据H抗原的不同组中进一步分为不同菌型

K抗原

100种以上。

位于O抗原的外层,化学组成是多糖。

与细菌的侵袭力有关。

Vi抗原,存在于菌体表面,可以阻止O抗原与相应抗体的凝集反应

有,但在分类上无意义

肠产毒型大肠埃希菌ETEC

肠侵袭型大肠埃希菌

EIEC

肠致病型大肠埃希菌

EPEC

肠出血性大肠埃希菌

EHEC

肠凝聚型大肠埃希菌

EAggEC

2500多种血清型(1400余种对人有致病性)

最重要的是SalmonellaentericasubspeciesentericaserovarTyphi(肠道沙门菌肠道亚种伤寒血清型)

噬菌体型

痢疾志贺菌S.dysenteriae(A)10个血清型,唯一不能发酵甘露醇的志贺菌

福氏志贺菌S.flexneri(B)13个血清型

鲍氏志贺菌S.boydii(C)18个血清型

宋内志贺菌S.sonnei(D)抗原单一只有一个血清型

较其他肠道杆菌强

对于理化因素抵抗力较差,对于一般消毒剂敏感。

水、粪便中存活时间较长

比其他肠道杆菌弱,对酸敏感。

故粪便标本要立即送检,以免其他菌产酸使本菌死亡。

蔬菜瓜果上课存活较长

见附录2

侵袭力(粘附、侵袭、胞内繁殖、进入血流;

Vi抗原抗吞噬)

内毒素(沙门菌死亡后释放的内毒素可以使得宿主体温升高,白细胞数下降,中毒休克)

肠毒素(鼠伤寒沙门菌可产生,与ETEC产生的肠毒素性质类似)

侵袭力(菌毛菌毛粘附、侵袭、胞内繁殖、胞间扩散、病灶形成)

外毒素(志贺毒素,A群的I和II型产生Shigatoxin(ST;

又叫Verotoxin,VT),与EHEC的毒素类似,具有肠毒素活性、细胞毒活性、神经毒活性)

内毒素:

肠功能紊乱,引起腹痛,里急后重等症状

伤寒沙门菌(S.Typhi)和甲型、乙型和丙型伤寒沙门菌(S.paratyphiA,B,C)引起的感染:

1、肠热症(Typhoidfever,entericfever)

伤寒、副伤寒

2、无症状带菌者(asymptomaticcarrier):

症状消失后1年或更长时间内仍可从粪便中排菌(TyphoidMary)

鼠伤寒、猪霍乱或肠炎沙门菌引起的感染:

1.胃肠炎(foodpoisoning):

摄入>

108个细菌致食物中毒

2.败血症(septicemia):

多见于儿童和免疫力低下成年人,败血症状严重,但肠道症状常常缺少

志贺菌引起细菌性痢疾,A群感染者病情较重,D群轻微感染,B群则易转变为慢性

急性细菌性痢疾(典型,非典型,中毒型)

慢性细菌性痢疾(急性发作型,迁延型,隐匿型)

细菌性痢疾是国家乙类传染病!

感染剂量1000个

典型的粪口传播途径!

典型症状:

发热、痛腹、里急后重、腹泻(水泻→脓血→粘液便),没有呕恶现象

肠热症反复引起菌血症

局限于肠粘膜层

牢固细胞免疫

发酵葡萄糖,发酵乳糖产酸产气(乳糖发酵试验是鉴别肠道非致病菌和肠道致病菌的重要生化实验)

IMViC试验++--

IMViC试验见附录1

发酵葡萄糖,麦芽糖,甘露糖;

不发酵乳糖或蔗糖

克氏双糖管中,斜面不发酵和底层产酸产气(伤寒沙门菌产酸不产气)

IMViC试验:

--++或--+-

发酵葡萄糖,不发酵乳糖(宋内志贺菌迟缓发酵)

++--或

-+--

备注

肥达试验(据抗原抗体中和试验)见附录3

人类细菌性痢疾的病原菌,

俗称痢疾杆菌(dysenterybacterium)

1.分离培养:

选择性培养基(SSagarplate)

2.生化反应:

双糖实验、IMViC实验

3.毒力试验:

细胞培养、动物实验、检测毒力基因或毒素等

4.分型:

血清学实验

1.伤寒病人按病程不同取不同标本

第一周血

第二周粪便、尿

病程全程骨髓液

2.食物中毒者取排泄物、呕吐物、可疑食物

3.败血症患者取血液

4.胆道带菌者取十二指肠引流液

1.采集标本:

粪便的脓血及粘液部分;

中毒性痢疾患者可取肛拭

2.分离培养与鉴定

Sereny试验

4.快速诊断:

PCR、协同凝集试验、荧光菌球法

畜牧业中,用菌毛菌苗预防新生仔猪腹泻

根据药敏试验结果进行抗菌治疗

监测表明庆大霉素、丁胺卡那霉素或痢特灵效果较好,耐药性普遍

1.“三管一灭”(管理粪便、水源和饮食卫生,消灭苍蝇)

2.预防接种:

皮下接种伤寒Vi荚膜多糖疫苗

3.彻底治疗病人及带菌者

4.抗生素治疗:

环丙氟哌酸!

氯霉素可,但对骨髓有毒性作用,且目前抗药菌株多见

1.除早发现、早隔离和早治疗外,查出带菌者很重要

2.切断传染途径:

加强粪便和水源管理,加强食品卫生监督

3.口服菌苗预防:

有链霉素依赖(Sd)株及口服重组活菌苗

4.选用敏感药物治疗:

如磺胺药、氯霉素、氨苄青霉素、痢特灵

传染源

1.污染的食物:

半生不熟的肉制品(特别是牛肉)、未经高温消毒的果汁和牛奶

2.污染的水:

饮用水和公共游泳池

分布最广泛的病原菌:

可在各种动物中发现

可在各种环境中发现

病人和带菌者,无动物宿主

附录:

1.IMViC试验:

吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐试验。

凡IMViC试验示++——的判断为正常的典型的大肠埃希菌,表明被检物有粪便污染,有传播肠道传染病的危险!

大肠埃希菌在克氏双糖管中,斜面和底层均产酸产气,硫化氢阴性,动力阳性。

可同沙门菌、志贺菌等区别。

2.引起腹泻的大肠埃希菌

菌株

易感

人群

感染

部位

所致疾病

腹泻类型

ETEC

<

5岁

旅游者

小肠

不耐热肠毒素(LT)

耐热肠毒素(ST)

定居因子(菌毛粘附素K88、K99等)

婴幼儿腹泻

旅游者腹泻

水泻(轻度霍乱样腹泻)

较大儿童、成人

大肠

侵袭力(粘附、细胞内吞、胞内繁殖、胞间扩散)

较大儿童腹泻

成人腹泻

痢疾样腹泻;

水样便,继以少量脓血便

婴儿

定居因子(bundleformingpili和intimin)

细胞信号传导

婴儿腹泻

水泻;

常为自限性,也可变成慢性

Vero毒素(VT;

Shiga-liketoxin,SLT)

定居因子(intimin)

出血性结肠炎

溶血性尿毒综合征(HUS)

水泻血性腹泻

EAggEC

毒素(肠集聚耐热毒素、溶血素样毒素)

定居因子(集聚性粘附菌毛I)

婴儿持续性腹泻

持续性水泻

3.卫生细菌学检查

卫生细菌学中常以大肠菌群数(总大肠菌群)作为饮水、食品等粪便污染的指标之一!

(1).总大肠菌群:

一群需氧及兼性厌氧的,在37℃生长时能使乳糖发酵并在24h内产酸产气的G-无芽胞杆菌(埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属)。

(2).我国生活饮用水卫生标准(GB5749-85):

总大肠菌群:

≤3个/L;

每100mL水样中不得检出

细菌总数:

≤100个/ml

4.肥达试验结果分析

(1).正常效价

伤寒沙门菌O抗体<

1:

80,H抗体<

1:

160;

副伤寒沙门菌H抗体<

80

(2).动态观察

2份血清,第二次效价增长4倍以上有意义

(3).O、H抗体的诊断意义

O-Ab-IgM(出现早,持续短,难重现);

H-Ab-IgG(出现晚,持续长,易重现)

O高H高很可能是肠热症

O不高H不高很可能不是肠热症

O不高H高预防接种或者非特异性回忆反应

O高H不高感染早期或与其他伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染

(4).其他

5.E.coliO157:

H7

EHEC的重要血清型

牛是主要的储存宿主

产生Vero毒素(VT),亦称志贺样毒素(Shiga-liketoxin,SLT)

弧菌总结

霍乱弧菌

Vibriocholerae

性状

菌体短小,弯曲成弧型或逗点状,运动活泼(单鞭毛),呈穿梭样或流星样,人工培养后呈杆状而不宜与肠道杆菌相区分

一端有单鞭毛,有菌毛,无芽孢。

有些菌株如霍乱弧菌O139有荚膜

营养要求低,在普通培养基上生长,初次分离霍乱弧菌常用碱性蛋白胨水增菌。

可在无盐环境中生长而其他致病性弧菌则不能

兼性厌氧,氧气充足更好

生长繁殖的温度范围广(18-37度),故可在自然界生存

PH

PH7.4-9.6能迅速生长,特别是在PH8.8-9.0碱性蛋白胨水或碱性琼脂培养基上生长良好。

酸能迅速杀死此菌,因此培养基内不能有发酵产酸的糖类

突起、光滑、圆型的菌落

O抗原:

根据O抗原的不同,霍乱弧菌可以分为206个血清群;

O1群霍乱弧菌菌体抗原由3种抗原因子A、B、C组成,据此又分为三个血清型,小川型、稻叶型和彦岛型;

每个血清型还可分为两个生物型:

古典生物型(classicalbiotype)和ElTor生物型(ElTorbiotype)

H抗原:

无特异性,所有霍乱弧菌拥有相同的H抗原

ElTor和其他非O1群霍乱弧菌在外环境中的生存力较古典型强。

淡水、咸水中可生存,与浮游生物和藻类等结合,夏季可大量繁殖,对热、干燥、日光、化学消毒剂和酸均很敏感,耐低温和碱性环境

鞭毛:

细菌进入小肠后,依靠活泼的鞭毛运动穿过粘膜表面粘液层而接近肠壁上皮细胞;

通过菌毛粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上,并在其上繁殖。

菌毛:

细菌定居于小肠的必须因子,只有黏附定居后方可致病。

霍乱肠毒素:

1、CT=1个A亚基+5个B亚基;

2、蛋白酶裂解A亚基成A1和A2两个多肽;

3、B亚基结合真核细胞表面GM1神经节苷脂受体;

4、CT-GM1复合物被内吞到细胞内;

5、A1具有ADP-核糖转移酶活性,可活化腺苷酸环化酶,使ATP以不正常的高效率转化为cAMP,导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进,大量水和电解质在肠腔堆积,引起剧烈腹泻。

霍乱肠毒素是目前已知的致泻毒素中最为强烈的毒素,是肠毒素的典型代表!

霍乱:

米泔水样粪便

霍乱是烈性肠道传染病,我国法定管理甲类传染病,国际检疫传染病之一

1、人类是惟一易感者;

2、传播途径:

通过污染的水源或食物经口摄入

3、传染源:

病人及无症状感染者

4、典型症状:

无痛性腹泻,先泄后吐,不伴里急后重,米泔水样便,脱水明显,腓肠肌痉挛

5、所致疾病严重程度:

Classicalbiotype>

ElTorbiotype

GroupO139>

groupO1

不侵入肠上皮细胞,而是毒素作用

1、感染后可获得牢固的免疫力,再感染少见

2、保护性抗体:

病人发病数月后,血液和肠道中常出现保护性的抗肠毒素抗体以及抗菌抗体,抗肠毒素抗体主要针对霍乱毒素B亚单位,抗菌抗体主要针对O抗原,抗H抗体无保护作用

3、短期带菌可见,慢性带菌者少见,病菌主要存在于胆囊中

感染O1群获得的免疫对O139群无交叉保护作用

过氧化酶反应阳性,氧化酶阳性,能发酵很多常见的单糖、双糖和醇糖,如葡萄糖、蔗糖和甘露醇,产酸不产气;

不分解阿拉伯糖;

能还原硝酸盐,吲哚反应阳性

霍乱红反应阳性

标本:

米泔水样粪便、肛拭或呕吐物

镜检:

悬滴法检查有无“鱼群”样穿梭运动的弧菌

革兰染色观察细菌形态

培养:

标本接种于碱性蛋白胨水增菌

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