血液学及血液学检验教案docxWord格式.docx
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包括血细胞形态学新领域：
血细胞生理学血细胞生物学
血液生化学血液分子生物学
血液免疫学
遗传、流变学
临床血液学（clinicalhematology）以疾病为研究对彖，是基础理论与临床实践紧密结合的综合性临床学科。
重点研究原发血液病：
白血病再障血友病继发血液病：
肝、肾等疾病引起血液学异常。
新动态：
利用分子标志物对白血病进行免疫学分型和血栓前状态诊断。
血液学及血液学检验（hematologyandhematologicexamanations）以血液学理论为基础，以血液病为研究对象，以检验方法为手段，创建了理论、检验疾病相互结合，紧密联系的新体系。
故三个学科均属于血液学范畴，只是侧重点、分工、研究对象有所不同。
第二节血液学发展史
屮国古代早在《黄帝内经》中即有关于血液记载，但系统科学研究开始于显微镜问世之后。
镜下可观察到红细胞、白细胞、及血小板三种有形成分，无形成分则指血浆。
一、血细胞的认识
血细胞包括红细胞与门细胞。
血细胞形态学是血液学研究一个重要组成部分。
染色技术不断改进，血细胞形态观察更加清晰。
19世纪小期开始了解骨髓,血细胞产生于骨髓，成熟后进入外周血。
特殊显微镜：
暗视野显微镜、位相显微镜、偏光显微镜、干涉显微镜、电子显微镜。
（-）血细胞数量检测
手工：
血细胞计数、血红蛋口定量、血细胞分类。
机器:
1953年，美国库尔特发明第一台血细胞自动计数仪。
现已有各种半、全自动分析仪相继问世，广泛应用于临床。
（2）红细胞认识
1871—1876年开始认识红细胞，了解到红细胞具冇携氧能力，后知红细胞可使二氧化碳转化为碳酸根离子，与酸碱平衡有密切关系。
红细胞ABO血型发现后，输血才安全开展。
20世纪40年代血库建立起来。
（3）白细胞的认识
1、粒细胞
1892—1930年，已知屮性粒细胞具冇趋化、吞噬和杀菌作用。
1986年后知杀菌依赖于细胞内的过氧化物酶。
嗜酸、嗜碱细胞也有了一定的了解。
2、单核细胞
1910年后其吞噬功能才有报道。
当吋称之为清道夫（细菌、寄生虫、较大真菌），依赖于内部溶酶体。
单核巨噬细胞系统（单核细胞短暂存在于血液中，后进入各种组织转变为组织细胞，吞噬物质后称为吞噬细胞。
3、淋巴细胞与浆细胞
以前认为淋巴细胞为淋巴系最末一代细胞，而现在认为受抗原刺激后增殖分裂。
淋巴细胞虽形态相似，但功能却显著不同。
T—LC杀伤、辅助、抑制诱导
B-LC受抗原刺激形成浆细胞，分泌免疫球蛋白。
二、血栓与止血的认识
1842年发现血小板1882年发现止血作用，后知血小板具粘附聚集功能。
60年代“瀑布学说”凝血机制，现对PC、PS、AT—III等也进行了深入研究。
分子标志物的检测成为诊断血栓前状态的重要依据。
第二章血液学与临床关系
第一节血液学与疾病关系
（―）非血液系统疾病合并血液病
（二）血液病合并非血液系统疾病
（三）血液制品临床应用
第二节血液学与检验的关系
血液学检验是临床检验一个分支，利用各种实验室技术，对血系及非血系疾病诊治研究。
检验医师应除掌握血液方面各项实验外，还应具有一定血液病临床知识，对疾病能初步诊断。
第二篇血细胞形态学检验
第三章造血基础理论
第一节造血器官
造血器官：
能够生成并支持血细胞分化、发育、成熟的组织器官称为造血器官（hematopoiticorgan）o如骨髓、肝、脾及淋巴结等。
造血：
造血器官生成各种血细胞的过程称为造血。
正常人在发育不同时期造血器官不断转移。
造血分为胚胎期造血和岀生后造血。
一、胚胎期造血
（一）中胚叶造血期（人胚2周末一9周）
又称卵黄囊造血期。
造血细胞产生于屮胚层卵黄囊壁上的血岛，有的可移行到体蒂和胎盘等处.
1、血岛：
卵黄囊壁上的胚外中胚层是一些未分化的、具有自我更新能力的细胞，这些细胞聚集成团称为血岛。
血岛是一个实心的细胞团，细胞增殖、分化出现间隙，周围细胞形成血管内皮细胞。
2、人体内的唯一的血管内造血。
3、产生巨幼型幼稚红细胞：
不能脱核
冇三种Hb：
HbPortland
HbgowerI
HbgowerII和少量HbF
第六周后，逐渐被肝造血代替。
（二）肝脏造血期（人胚6周一7个月）
1、肝造血：
由卵黄囊血岛造血干细胞迁移至肝脏所致。
造血以红细胞为主，4个月后可形成粒细胞。
4个月造血最旺盛。
2、脾造血：
（人胚3个月一出生后）
接受肝造血细胞
最初产生RBC—粒细胞…5个月LC、Mo—出生后LC、Mo
3、胸腺造血：
6周・7周产生LC,后诱导分化T-LCo
4、淋巴结造血：
开始产生RBC,4个月后产生LC和浆细胞。
（三）骨髓造血期（人胚5个月一出生后）
骨髓腔五个月时形成，提供造血环境。
从此骨髓造血功能逐渐增加，肝脾造血功能逐渐减弱。
二、出生后造血器官
包括骨髓造血和淋巴器官造血。
正常情况下，出生后造血主要是骨髓，其次是淋巴器官。
骨髓是出生后正常情况下唯一产生粒、红、血小板的场所，也产生淋巴细胞和单核细胞。
骨髓腔内充满骨髓，分红、黄骨髓。
红骨髓有活跃的造血功能，黄骨髓则无。
人类出生后至四岁，全身骨髓均为红骨髓。
以后随年龄增长，红骨髓向心性减少，被脂肪细胞取代，称为黄骨髓。
成年后，红骨髓仅限于扁骨、短骨、长骨近心端。
1、红骨髓的构造
由结蒂组织、血管、神经及实质细胞组成。
血管系统血窦内有成熟血细胞造血索各阶段造血细胞按一定部位分布
2、造血细胞分布（岛状分布）
1红细胞造血岛
概念：
骨髓内各阶段幼稚红细胞成群存在，其屮心为1—2个巨噬细胞，此结构称红细胞造血岛
特点：
a岛中央1—2个巨噬细胞，周围同心圆排列不同发育阶段幼红细胞，内层较外层幼稚。
b中心巨噬细胞的胞浆发出许多膜状突起，绕在幼稚红细胞表面起看护作用，称“mirse”细胞，它可供应幼稚红细胞营养、铁及储存铁，吞噬红细胞的裸核、滤血。
c位于血窦附近，成熟后进入血窦。
2粒细胞造血岛
中心有一个巨噬细胞，远离血窦，位于造血索中央，分化到晚幼粒后，移向
血窦进入血流O
3巨核细胞
贴血窦壁，胞浆伸入窦内，血小板成熟后直接入血。
4单核细胞
散在于造血细胞Z间，小动脉附近。
5淋巴细胞
以淋巴小结形式散在分布于造血索中。
1、胸腺：
产生T—LC,出生后功能终止，青春期后萎缩。
2、淋巴结：
出生后负责淋巴细胞的第二次増殖，是造淋巴细胞的器官。
3、脾结构：
被膜、实质部分
实质红髓脾窦脾索
白髓脾动脉周围淋巴鞘
月卑小结边缘区红白髓过渡区域
功能：
出生后脾脏只产生淋巴细胞，也是其接触抗原后再增殖场所，同时可对血液起储存滤过作用。
教案用纸
（一）No：
2
授课形式理论授课时数2小时授课口期2008、9、3
中心课题造血干细胞、祖细胞
教学目的掌握造血干细胞概念及特点，祖细胞
熟悉髄外造血、造血祖细胞、更新的造血理论。
了解骨髄间质细胞，研究造血干细胞、祖细胞意义。
造血干细胞
更新的造血理论
组织教学清点人数-起立■上课
1分
血液学及血液学检验
2008年X月25FI
复习旧课造血器官
9分
导入新课三、髄外造血
第二节造血干细胞、祖细胞
一、造血干细胞
（-）概念及特点
（二）更新的造血理论
二、造血祖细胞
三、骨髓间质细胞
四、研究造血干细胞、祖细胞意义
总结新课造血干细胞、祖细胞
造血干细胞、祖细胞、骨髓间质细胞2分
造血T细胞的特点是什么？
更新的造血理论是什么？
三、髓外造血
1、概念：
岀生后两个月后，在某些应激状态下，骨髓以外组织或器官重新参与
粒、红、巨三系细胞的产生过程。
2、特点：
6多发于婴幼儿，身体发育快，骨髓腔发育慢，代偿能力小。
2成人在恶性贫血、口血病时可能出现某一部位造血灶。
3血片上易见幼红、幼粒细胞。
胚胎干细胞（embryonicstemcell,ESC）是指从早期胚胎的内细胞团中分离出来的具有高度分化潜能的细胞系，它具有高度分化潜能，可以无限增殖并分化成为全身多种细胞类型，从而可以进一步形成机体的任何组织和器官，因此也称全能干细胞。
胚胎干细胞…•组织干细胞
血液组织干细胞••造血干细胞
非造血干细胞间逅干细胞
I血管干细胞
一、造血十■细胞（hematopoieticstemcell,HSC）
（一）概念：
造血组织中的一类具冇高度自我更新能力，又冇向各系祖细胞分化的潜能，在造血组织屮含量极少，形态上难以辨认的类似于小淋巴细胞样的一群异质性细胞群。
其无形态特点，只能通过细胞培养知其存在，外部形态和淋巴细胞相似。
特征：
1、多数细胞处于Go期或静止期。
间期细胞有三种去向：
分化
进入分裂期进入静止期BP：
Go期
2、大多数表达CD34和Thy・1（CD34+Thy-1+）
.CD34是造血干、祖细胞分选的标志。
Thy-1（CD90）比CD34出现更早，介导负增殖信号。
3、低表达或不表达CD38和HLA-DRo
4、缺乏系特异性系列抗原表面标志。
（-）造血理论的更新
1、内容①各种血细胞均起源丁造血多能干细胞
2胚胎期各造血器官的造血功能，是由于卵黄囊血岛产生的造血干细胞,通过血流依次传递种植而来的。
2、实验：
脾集落形成1961年
a小鼠x线全身照射——骨髓造血功能衰竭而死亡
b小鼠x线照射（小部分骨髓未照射）——生存——形成脾结节——骨髓中存在血细胞祖先
c小鼠x线全身照射，再将另一鼠骨髓或血液——生存——说明造血干细胞存在
以上实验说明骨髓及血液中存在血细胞祖先。
在特殊情况下，此种细胞可形成脾结节，称为脾集落形成单位。
二、造血祖细胞（hematopoieticprogenitorcellHPC）
指一类曲造血干细胞分化而來，但部分失去自我更新能力的过渡性、增殖性细胞群。
有单向和多向分化能力
分为：
红、粒、单、巨核系祖细胞，其对血细胞数量起主要的放大作用。
三、骨髓间质干细胞
i间质干细胞（mesenchymalstemcell,MSC）是骨髓基质细胞的祖细胞,
进一步形成的骨髓基质细胞是造血微环境的重要组成成分，其在造血调控屮起十分重要的作用。
MSC具冇干细胞的共性，即具有多向分化潜能和自我更新能力，可在不同环境中分化成不同的种类的细胞，如成骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞和血管内皮细胞等。
现有研究表明：
骨髓间质干细胞可在一定条件下向心肌细胞转化，且移植于梗死心肌后与宿主细胞之间形成缝隙连接，成为有功能的心肌细胞，从而修复心肌组织。
目询临床治疗应用的骨髓单个核细胞，是包含骨髓间质干细胞在内的一组混合细胞群。
MSC大约占骨髓有核细胞的0.001%〜0.01%,在无造血细胞和分化刺激存在
的情况下贴壁生长。
MSC屮大约冇20%的G0期细胞，表明其强大的增殖能力。
作为干细胞中的一种MSC具有自我更新能力和多向分化能力，可形成多种组织细胞。
MSC在体外经20次〜25次传代后，其表型和分化潜能不会发生明显的改变。
MSC是骨髓造血微环境的重要成分，对造血起十分重要的作用。
由于它具有向骨、软骨、脂肪、肌肉及肌腱等组织分化的潜能，因而利用它进行组织工程学研究有如下优势：
（1）取材方便且对机体无害。
间质干细胞可取自自体骨髓，简单的骨髓穿刺即可获得。
（2）曲于间质干细胞取自自体，出它诱导而來的组织在进行移植吋不存在组织配型及免疫排斥问题。
（3）由间质干细胞分化的组织类型广泛，理论上能分化为所有的间质组织类型：
将它分化为骨、软骨或肌肉、肌腱，在治疗创伤性疾病中具有应用价值。
将它分化为心肌组织，则有可能构建人工心脏。
四、研究干细胞、祖细胞意义
1、干细胞移植
2、研究某些血液病的发病机制：
再障
3、白血病的疗效预后等
4、约敏实验
3
血液学及血液学检验2008年8月25口
授课形式理论授课时数2小时授课日期2008、9、5
中心课题血细胞的发育成熟、造血调控
教学目的掌握血细胞的发育规律、造血微环境概念及组成；
熟悉造血调控；
了解细胞凋亡。
复习【口课造血T细胞、祖细胞
导入菊f课第三节血细胞的发育成熟
授课要点血细胞的增殖、成熟、发育规律
第四节造血微环境
一、骨髓微血管系统
二、基质细胞及其分泌的因了第五节造血调控
一、微环境调控
二、基因调控
三、体液调控
第六节细胞凋亡
25分
丿总结新课造血干细胞、祖细胞
布置作业（指出重点）名词：
造血微环境、细胞凋亡2分
血细胞的发育规律是什么？
正向和负向调节造血的因子有哪些？
」匕华大学医学检验学院任课老师：
笫三节血细胞的发育与成熟
一、血细胞的增殖
增殖方式：
有丝分裂
无丝分裂
血细胞与其他细胞一样，是通过分裂方式增殖的，但只有一定的幼稚细胞才有分裂能力。
发育到一定阶段后失去増殖能力。
大多数血细胞増殖方式是有丝分裂。
分裂相出现常见于早幼及小幼阶段细胞，晚幼阶段失去此能力。
正常情况下，骨髓中分裂相占有核细胞1%,增高见于异常现象，外周血屮不见分裂相。
二、血细胞的成熟
1、命名六大系统三个阶段
系系系系胞系系核巴核细红粒单淋巨浆
多能干细胞——各系祖细胞
2增殖特点
（1）红系原中经4一5次分裂，最终一个原红可形成32—64个成熟
红细胞
（2）巨核系原巨——幼巨——产板巨——裸核
3血细胞发育成熟一般规律
血细胞发育是一•个连续过程，人为划分，二级Z间划分下一阶段。
疾病时会出现
核浆发育不平衡。
如：
老核幼浆IDA,老浆幼核MA
规律：
胞体
原f幼一成熟
大f小
核浆比大一小
胞浆
量少f多
染色兰一红
深蓝一浅蓝
颗粒无一冇红无
非特异f特异
大一小
圆一凹陷一分叶圆、椭圆不变人->
小->
无细致一粗糙疏松f致密淡紫一深紫
胞核
核大小
核形粒系淋、浆红系核染色质
色
不明显f明显
显著可见一模糊一不见
核膜
核仁
第四节造血微环境（hematopoiticmicroenvironment,HIM）
指由骨髓基质细胞（stromalcell）和细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）构成。
包括微血管系统、末梢神经、基质及基质细胞所分泌的细胞因子，是造血干细胞赖以生存的场所。
1、骨髓血管特点
动脉血进入髓腔后——分支一一毛细血管——注入膨人的静脉窦——沟通成网——汇成集合窦一一注入中心静脉
静脉窦与集合窦统称血窦，窦内是成熟细胞，窦间为造血索，具有造血功能。
2、血管与造血
1血窦壁为连续性细胞构成，血细胞通过时形成临时通道。
2窦壁细胞起支架作用和调节造血量的作用。
3骨髓微血管调节进出微血管各种成分（营养、能量、酸碱度）
二、基质细胞及其分泌的因子
造血微环境的主要成分是基质细胞，能粘附造血干细胞，并直接支持其增殖分化,又町分泌细胞因子，是造血细胞生长所依赖的。
1、基质细胞是由成纤维细胞、
内皮细胞脂肪细胞
巨噬细胞等多种细胞构成，是造血微环境的主要成分。
能粘附造血干细胞并支持和调控其增殖和分化。
有分泌细胞因子的作用。
2、细胞外基质
包括胶原
层粘连蛋口
纤维结合蛋白
这些蛋口多糖、氨基葡聚糖与粘附造血干细胞有关。
3、基质细胞分泌的细胞因子
GM—CSF（粒•单集落刺激因子）
SCF（stemcellfactor干细胞因子）
Ils（白细胞介索）
LIF（Leukemiainhibitoryfactor口血病抑制因了）
TGF-P（化生长因子）
这些细胞因子不仅直接作用于干细胞、祖细胞，
也作用于基质细胞本身，改变增殖分泌状态、诱导其他因子生成。
第五节造血的调控
血细胞不断衰老死亡，耍求骨髓不断生成血细胞，以保持其数目恒定。
血细胞的生成主要靠造血祖细胞増殖、分化。
当造血严重障碍，单靠祖细胞增殖不能满足需要时，多能干细胞才增殖分化。
这就需要机体有严密调节系统。
在多种因素调控屮，微环境调控山冇重要地位。
造血微环境屮基质细胞特异、非特异地粘附多能干细胞，多能干细胞受刺激后进入细胞周期，作出增殖反应，同时还应有单向分化因子作用，方可完成单向分化。
骨髓基质细胞产生造血因子,又具有细胞因子受体，可聚集外部的因子于局部，形成不同高浓度因子分布区
二、造血的基因调控
造血调控是一个多基因调控过程，主要通过细胞内外的一些信号传递（包括信号传导、基因表达、蛋白合成等多个环节）启动或关闭一系列相关基因，正、负调控基因表达产物参与对造血的止向、负向调控。
机制：
1、诱导或抑制细胞因子及其受体的表达
2、参与造血细胞凋亡的调节等方式参与调控。
原癌基因（proto-oncogen）如ras、c-myc>
c-kit>
c-abl>
bcl-2
这些原癌基因在化学、物理、生物、等因素的作用卞，发生点突变、染色体重排、基因扩增等途径引起结构或调控的异常从而有致癌性。
抑癌基因：
P53、WT1、PRB、NF1介导细胞负增长、诱导细胞凋亡。
三、造血的体液调控
参与造血调控的细胞因子可分为二类：
30多种
促进造血细胞增殖、分化的因子称为造血生长因子
CSF（集落刺激因子）
Ils
EPO
TPOFL
抑制造血的因子包括TGF-P
TNF-a
INF-YPGI2
（一）造血的正向调控造血细胞生长因子分为二类：
1）主要作用丁•早期造血干细胞的（earli-acting-factor）
1、干细胞因子（SCF）：
是癌基因c・kit产物的配基,又称钢因子（steelfactor）
产生细胞：
基质细胞12q22
成纤维细胞
癌细胞
作用：
1）与IL・2或IL・3协同刺激干细胞生长
2）与IL・3协同刺激祖细胞生长
3）与EPO协同刺激BFU-E形成
4）与IL・7协同刺激前B细胞生长
5）与G-CSF协同刺激CFU-G形成
6）与GM・CSF、IL・6协同刺激巨核集落形成等
2、FL19ql3基质细胞合成
只作用于早期干、祖细胞增殖、分化，对定向、成熟的几乎不起作用。
FL可动员干、祖细胞由骨髓进入外周血及脾，可有效升高外周血CD34细胞含量。
3、多系集落刺激因了或IL・3：
5q23-31T细胞或肥大细胞
生物效应是在细胞发育的早期作用丁•造血细胞，刺激生长和分化，在体内捉高中性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞和网织红细胞水平。
2）主要作用于晚期造血干细胞的
1、促红细胞生成素（EPOerythropoietin）
主要由肾脏产生，属一种糖蛋白，现人工可制成。
多能干细胞受EPO的刺激，产生红系祖细胞及以后的细胞。
干细胞培养后，加入EPO可获得两种集落，即红细胞爆发集落形成单位BFU-E和红细胞集落形成单位CFU-Eo前者较后者集落大，可爆散成后者。
二者区别：
前者史接近丁•造血干细胞，红细胞集落形成单位介于前者与原红之间,属红系祖细胞。
综上可知，EPO对红系各阶段细胞都有作用，促使幼红细胞成熟，利于脱核，及早进入血液。
2、集落刺激因了（CSFcolonystimulatingfactor）
@G—CSF促进CFU—G形成中性粒细胞集落
2M—CSF促进CFU—M形成单一巨集落
3GM-CSF是一个多集落刺激因子，但以形成粒细胞一单核巨噬细胞集落为主。
3、巨核细胞集落刺激因子（Meg—CSF）
能促使形成巨核细胞集落，也可在TPO协助下促使巨核细胞生成血小板。
造血细胞生长因子共性：
①均为糖蛋口
2具有高效生物活性
3经刺激分泌
4口J由多种细胞产生
4、口细胞介素（interleukin）
白细胞介素也参与调节，屈于淋巴因子
主要对TB淋巴细胞成熟、活化进行调节，
并在造血中起协同作用。
5、白血病抑制因了22ql2
抑制白血.病细胞HL60、U937集落形成
促进胚胎干细胞增殖
6）其他：
血小板衍生生长因子
胰岛索类生长因子等
（2）造血的负向调控
造血生长因了刺激细胞增殖和分化的作用可以被另外一些细胞因了所抑制，这些因子称为造血的负向调控因子。
1、转化生长因子B（TGF・B）大多数止常细胞和肿瘤细胞分泌
阻止细胞进入S期，维持干、祖细胞的非增殖状态
对干细胞直接抑制
对祖细胞增殖高度选择性抑制
抑制多种细胞因子产生的正向调节信号
2、肿瘤坏死因子u（TNF-a）单核、巨噬细胞产生
与其他因了协同抑制造血
3、肿瘤坏死因子a、B（TNF・a、B）T■细胞、NK细胞产生。
作用同上
4、干扰素（a、B、）：
抗病毒，抑制细胞生长、分化
5、趋化因子
6、其他：
PGI2等
四、神经、体液因子的调控
神经和体液的调节作用也是较有意义的，在应激状态下，这种调节是一个造血捷径。
三种体液因子：
B—肾上腺素能兴奋剂
胆碱能受体兴奋剂
雄激素
第六节细胞凋亡
细胞凋亡（apoptosis）是
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