亚胺培南浓度测定.docx

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亚胺培南浓度测定

1、色谱条件

色谱柱:

NovaPakC18反相（4μm,150×3.9mm）

流动相：

[12.4g硼酸溶于1000ml水中加入1MNaOH]pH7.2.

流速:

1ml/min

进样量:

10μl.

稳定剂:

[3-吗啉基丙磺酸（MOPS）：

乙二醇：

水（1：

1：

2）]-40℃>15天

内标：

不需内标

药代动力学参数：

泰能

参考文献：

L.Garcia-Capdevila,C.Lo´pez-Calull,C.Arroyo,et.al.Determinationofimipeneminplasmabyhigh-performanceliquidchromatographyforpharmacokineticstudiesinpatientsJournalofChromatographyB,692（1997）127–132

Fig.1.（a）空白人血浆色谱图（b）标准人血浆与50μg/ml亚胺培南混合（peak1=imipenem）色谱图.（c）滴注结束患者血浆色谱图（peak1=imipenem）

标准曲线：

0.1到100μg/ml.Thelimitsofdetectionandquantitationwere0.03and0.08mg/ml.

2、色谱条件（动物试验）

色谱柱:

WatersAtlantisHILICsilicacolumn（50mm×2.1mm,3μ）

流动相：

80%乙腈加入15M甲酸铵（pH3）

流速:

0.4mL/min

柱温:

室温

进样量:

10μl.

内标：

（只有分子结构式）

稳定剂：

[1M2-（N-吗啉代）-乙磺酸（MES）pH6.0与50%乙二醇1：

1（v/v）混合，1MMES是将10.88gMES酸（分子量（MW）：

195.2）和9.62gMES钠盐（MW:

217.2）溶于100mlMilli-Q水而成]-70℃

储存亚胺培南最有效的是兼性离子溶液如血浆样品用2-（N—吗啉代）乙磺酸，（MES）pH6.0；3-吗啉基丙磺酸（MOPS）pH7.2；或者4-（2-hydroxyethyl）piperazineethanesulfonicacid（HEPES）pH7.0

质谱条件

离子检测方式:

离子极性:

阳离子（positive）

离子化方式:

气动辅助电喷雾离子化（ESI）

检测对象（亚胺培南、内标）:

传输区电压:

4.5kv

干燥气流速:

60L/min

雾化室压力:

干燥气温度:

550℃

亚胺培南在生物基质（经酶催化）和水溶液中易水解，尤其实在酸性或碱性环境下。

蛋白质沉淀可以最小化稳定性问题。

参考文献：

YangXu,WeiXie,CynthiaM.Miller-Steinet.al.Hydrophilicinteractionchromatography/tandemmassspectrometryforthesimultaneousdeterminationofthreepolarnon-structurallyrelatedcompounds,imipenem,cilastatinandaninvestigationalb-lactamaseinhibitor,MK-4698,inbiologicalmatrices.RapidCommun.MassSpectrom,2009,23:

2195–220

3.琼脂法

稳定剂：

血样：

2-（N—吗啉代）乙磺酸，（MES）pH6.0；尿样：

3-（N—吗啉代）丙磺酸（MOPS），PH6.8

1000mg）

标准曲线：

logy=0.079×–1.23

参考文献：

AndreaNovelli,1ChiaraAdembri,2PaolaLiviet.al.PharmacokineticEvaluationofMeropenemandImipeneminCriticallyIllPatientswithSepsis.ClinPharmacokinet2005;44（5）:

539-549

4.色谱条件（药品鉴定）

色谱柱：

采用HypersilODS250mm4.6mm（5μm）

流动相：

A相（0.01mol/L磷酸二氢钾溶液）（用10％氢氧化钾调节pH至7．3），流动相B为甲醇，

流速:

每分钟1.5ml

柱温:

室温

进样量:

20μl

水：

mili—Q超纯水

标准曲线:

：

亚胺培南自身对照溶液在供试品溶液0.2％-1.2％浓度范围内呈线性,线性范围为2-12μg/L

参考文献：

赵玉新，王广慧，列丹等.HPLC法测定亚胺培南的有关物质.中国当代医药,2010,17（13）:

50-51

5、色谱条件

色谱柱:

DiamondC18（4．6ram×250mm，5μm）；

分析纯：

磷酸铵、磷酸二氢钾、盐酸、30％过氧化氢、氢氧化钠

色谱纯：

乙腈

流动相：

乙腈0.1mol／L磷酸铵（精密称取磷酸钠20．31mg，加1000ml水使溶解并稀释至刻度，用磷酸调至pH6．8）（30：

70）；

流速:

．8ml／min

柱温:

50℃

进样量:

20μl

参考文献：

王艳军.高效液相色谱法测定亚胺培南一西司他丁钠的含量．中国美容医,2010,19

（2）:

254

6、色谱条件

色谱柱:

C1810μm,3.9x300mm

流动相：

2%乙腈和98%磷酸盐三乙胺缓冲液（含0.2%叠氮化钠）

流速:

1.0ml／min

进样量:

20μl

稳定剂：

0.2ml2-（N—吗啉代）乙磺酸和等量乙二醇,聚四氟乙烯封闭，-70℃

药代动力学参数：

500mgevery6hours

标准曲线:

Thestandardcurveforplasmawaslinearbetween0.3-50μg/ml.

参考文献：

DavidS.McKindley,Pharm.D.,BradleyA.et.al.Boucher,PharmacokineticsofAztreonamandImipeneminCriticallyIllPatientswithPneumonia.Pharmacotherapy,1996,16（5）:

924-931

7、色谱条件

色谱柱:

μBondasphereC185μm（3.9×150mm）;

流动相：

10mM磷酸缓冲液（pH6.5）和乙腈（197:

3,vol/vol）

流速:

1ml/min

柱温：

40°C

进样量:

20μl

稳定剂：

1M3-吗啉基丙磺酸buffer（pH7.0）

标准曲线:

Thecalibrationcurvewaslinearfrom0.05to100μg/ml,andthelowerlimitofquantificationwas0.05μg/ml.

参考文献：

KazuroIkawa,NorifumiMorikawa,KenichiSakamotoet.al.PharmacokineticsandPharmacodynamicAssessmentofImipenemintheIntraperitonealFluidofAbdominalSurgeryPatients.Chemotherapy,2008,54:

131–139

8、色谱条件（动物试验）

色谱柱:

反相4μm,39X150mm

流动相：

0.2M硼酸盐缓冲剂（pH,7.2）

流速:

1.5mL/min

稳定剂：

[0.5M3-吗啉基丙磺酸:

水：

乙二醇=2：

1：

1]-80℃，>90天

参考文献：

CorrieW.Barker,WeijiangZhang,SusanSanchez,et.al.PharmacokineticsofimipenemindogsAJVR,2003,6（64）:

694-699

9、色谱条件（体外试验）

色谱柱:

CAPCELLPAKC18typeMG5μm（4.6mmi.d.×150mm）

流动相：

0.04M3-（N—吗啉代）丙磺酸钠（MOPSNa）：

1.0g己磺酸钠（每公升加上0.005gdisodiumdihydrogenethylendiaminetetraacetatedihydrate）加入0.1MNaOH调整pH至7.0

流速:

2.2mL/min

柱温：

50°C

进样量:

10μL

参考文献：

MiyakoYoshida,YukoTakasu,KaoriShimizu,et.al.PredictionoftheStabilityofImipeneminIntravenousMixtures.Chem.Pharm.Bull.,2013,61

（1）:

1–7

10、色谱条件

色谱柱:

SupelcosilTMLC-18：

25cm×4.6mm×5μm,

流动相：

0.075M醋酸:

乙腈（92:

8,v/v）,pH5.0.

流速:

0.8ml/min

柱温：

37℃

进样量:

5μL

稳定剂：

3-[N-吗啉代]丙磺酸（MOPS）−80◦C

内标：

头孢呋辛

标准曲线:

1gevery6h.烧伤患者

theintercept0.0196（SEM:

0.0007）andslope0.0841（SEM:

0.0029）forimipenem（r2:

0.999）,bothover0.4–100μg/mlconcentrationrange.TheLOQwas0.4μg/mlforvancomycinandimipenem.TheLODwas0.2μg/mlforvancomycinandimipenem.

参考文献：

K.J.VeraL´opez,D.FariaBertoluci,K.M.Vicente,et.al.Simultaneousdeterminationofcefepime,vancomycinandimipeneminhumanplasmaofburnpatientsbyhigh-performanceliquidchromatography.JournalofChromatographyB,2007,860:

241–245

11、色谱条件（VAP患者）

流动相：

0.2M硼酸pH7.2,

流速:

1mL/min

柱温：

进样量:

10μL

稳定剂：

0.5MMOPS/water/ethyleneglycol,2:

1:

1,v/v/v−80◦C

Figure1.Meanplasmaimipenemconcentration–timedataforninepatientswithVAPfollowingadministrationof:

0.5g,0.5hinfusion（三角形）;0.5g,2hinfusion（菱形）;and1g,2hinfusion（方形）.

参考文献:

SutepJaruratanasirikulandTeeratadSudsai.Comparisonofthepharmacodynamicsofimipeneminpatientswithventilator-associatedpneumoniafollowingadministrationby2or0.5hinfusion.JournalofAntimicrobialChemotherapy2009,63:

560–563

7、色谱条件

色谱柱:

Grom-SIL80Amino-3CP,5μm,40×4.6mm;

流动相：

0.01M醋酸铵和乙腈（1:

1[vol:

vol]）

流速:

柱温：

进样量:

稳定剂：

1M吗啉基丙磺酸（pH7.0）_70°C.

内标：

标准曲线:

Theresponsefromcalibrationstandardswaslinearfrom0.100to100.0mg/liter,andthecoefficientofcorrelationforallmeasuredsequenceswasatleast0.997.

质谱条件

离子检测方式:

离子极性:

阳离子（positive）

离子化方式:

气动辅助电喷雾离子化（ESI）

检测对象（亚胺培南、内标）:

imipenem,m/z：

300m/z98,internalstandard,m/z3513m/z265

传输区电压:

干燥气流速:

雾化室压力:

干燥气温度: