微生物实验考试Word文档格式.docx
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10.显微直接计
利用血球计数板或细菌计数板在显微镜下测计出每小格的微生物细胞数量后,再换算出单位体积中微生物细胞总数的测数方法。
11.巴氏消毒
巴氏消毒是法国微生物学家巴斯德发明的一种消毒方法。
是在62-63℃的条件下,保温半小时杀死微生物的营养体（主要是病原菌）的方法。
12.间歇灭菌
利用100℃的温度杀死微生物的营养体.每次1小时连续三天,中间的空隙时间让未杀死的芽胞萌发成营养体,在下一次100℃的温度下被杀死。
如此反复两次可将培养基的微生物（包括芽胞）全部杀死。
该方法适用于没有高压灭菌器的地方进行灭菌处理。
1
13.消毒:
只杀死微生物的营养体（主要是病原菌）,而不能杀死微生物的芽胞的除菌方法。
14.灭菌:
利用物理或化学方法杀死所有微生物包括细菌的芽胞的除菌方法称为灭菌。
15.过滤除菌:
利用一定孔径的滤膜阻止微生物的通过而除去溶液中或者空气中微生物的除菌方法。
16.湿热灭菌:
利用热的蒸汽杀死微生物的灭菌方法。
湿热灭菌又分常压蒸汽灭菌和加压蒸汽灭菌
17.干热灭菌:
利用干热空气杀死微生物的方法。
其灭菌工艺条件通常为160-170℃/2h。
18.选择培养基:
根据使用的目的,控制培养基的组成成分,使之有利于某种微生物的生长而限制其它微生物的生长,从而能从自然界混杂的群体中分离出某一种单一的微生物。
如无氮培养基用来分离土壤中的自生固氮菌。
19.加富培养基:
在基本培养基中加入血清,动植物组织液或者其它生长因子而配制出来的营养特别丰富的
培养基。
20.鉴别培养基:
根据微生物的代谢特点,通过指示剂的显色反应,用以鉴别不同微生物的培养
21.数值孔径:
数值孔径是判断物镜和聚光镜性能的重要指标,通常用N.A表示:
N.A=n.sin
（n为介质折光率,α为镜口角）。
22.分辨力:
分辨力是指显微镜能够分辨出的物体两点间最小距离的能力。
它与波长及物镜的数值孔径有关。
23.超净工作台:
利用过滤除菌的原理而设计出来的一种无菌操作工作台,鼓风机鼓出的空气通过孔径很小的薄膜将空气中的微生物过滤后变成无菌空气吹向操作台,可防止周围有菌空气流入,能保证操作台始终保持无菌状态,便于无菌操作。
24.纯培养技术:
纯培养技术是培养某个单一微生物的方法。
包括培养基的制作与灭菌。
单一微生物的分离与纯化,和无菌操作接种技术。
25.焦深；
焦深是指清晰的目的象的上面和下面所看见的物象之间的距离。
它与放大倍数成反比,即放大倍数越大,焦深越小。
26.暗视野显微术:
利用暗视野聚光器能阻止光线直接照射标本,而使光线斜射在标本上。
在显微镜中见到黑暗视野中明亮物象的镜检技术。
27.荧光显微术:
紫外光作光源的显微镜检技术。
28.负相差:
在黑暗视野中看到明亮物体的相差镜检技术。
29.正相差:
在明亮视野中看到黑暗物体的相差镜检技术。
实验技术
选择题
01.革兰氏染色的关键操作步骤是:
A.结晶紫染色。
B.碘液固定。
C.酒精脱色。
D.复染。
答:
（C）
02.放线菌印片染色的关键操作是:
A.印片时不能移动。
B.染色。
C.染色后不能吸干。
D.A-C。
（A）。
03.高氏培养基用来培养:
A.细菌。
B.真菌。
C.放线菌。
（C）。
04.肉汤培养基用来培养:
A.酵母菌。
B.霉菌。
C.细菌。
05.无氮培养基用来培养:
A.自生固氮菌。
B.硅酸盐细菌。
C.根瘤菌。
D.A,B均可培养。
E.A,B,C均可培养。
（D）。
06.在使用显微镜油镜时,为了提高分辨力,通常在镜头和盖玻片之间滴加:
A.二甲苯。
B.水。
C.香柏油。
07.常用的消毒酒精浓度为:
A.75%。
B.50%。
C.90%。
08.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是:
A.20ml/M3。
B.6ml/M3。
C.1ml/M3。
（B）。
09．高压蒸汽灭菌的工艺条件是:
A.121℃/30min。
.
B.115℃/30min。
C.130℃/30min。
10．巴氏消毒的工艺条件是:
A.62-63℃/30min。
B.71-72℃/15min。
C.A.B.均可。
11．半固体培养基的主要用途是:
A.检查细菌的运动性。
B.检查细菌的好氧性。
C.A.B.两项。
12．半固体培养基的琼脂加入量通常是:
A.1%。
B.0.5%。
C.0.1%。
13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是:
A.排冷气彻底。
B.保温时间适当。
C.灭菌完后排气不能太快。
14．目镜头上的"
K"
字母表示:
A.广视野目镜。
B.惠更斯目镜。
C.补偿目镜。
15.目镜头上的"
P"
A.平场目镜。
B.广视野目镜。
C.平场补偿目镜。
16.物镜头上的"
PL"
A.正低相差物镜。
B.正高相差物镜。
C.负高相差物镜。
17.物镜头上的"
UVL"
字母表示。
A.无荧光物镜。
B.照相物镜。
C.相差物镜。
18．镜头上标有"
对C"
字母的镜头是:
A.相差调整望远镜。
B.摄影目镜。
C.相差目镜。
19．"
PA"
表示:
A.马铃薯培养基。
B.高氏培养基。
C.肉汤培养基。
20.无菌室空气灭菌常用方法是:
A.甲醛熏蒸。
B.紫外灯照射。
C.喷石炭酸。
D.A.B.并用。
21.干热灭菌的关键操作是:
A.灭菌物不能有水。
B.保温过程中不能开箱门。
C.降温不能太快。
22．
霉菌水浸制片的关键操作是:
A.菌丝要分散。
B.菌丝首先要用50%的乙醇浸润。
C.盖盖玻片不能有气泡。
（A）
23.用来染芽胞的染料通常是:
A.孔雀绿。
B.结晶紫。
C.复红。
D.番红。
24．复红法染鞭毛的关键操作是:
A.玻片干净。
B.染料新鲜。
C.菌体活化适当。
D.A.B.C。
25.镀银法染鞭毛的关键操作是:
B.染料无沉淀。
C.加热适当。
D.菌体活化适当。
E.A-D。
26．进行简单染色使用的染色液通常是:
A.复红。
B.蕃红。
C.结晶紫。
D.孔雀绿。
E.A-D均可。
27.物镜头上的"
APO"
字母代表:
A.消色差物镜。
B.复消色差物镜。
C.半消色差物镜。
28．物镜头上的"
Ach"
A.平场物镜。
B.超平场物镜。
C.消色差物镜。
29．物镜头上的“NH”字母表示:
A.正相差物镜。
B.负相差物镜。
30．物镜头上的“0.17”表示:
A.要求的盖玻片厚度。
B.要求的载玻片厚度。
C.镜头浸油的深度。
31．镜头上标有“NK"
A.照相目镜。
B.荧光目镜。
32．目镜头上的“PK”字母表示:
B.补偿目镜。
33．物镜头上的"
Splan"
A.超平场物镜。
B.平场物镜。
34．物镜头上的"
SplanApo"
A.超平场复消色差物镜。
B.超平场半消色差物镜。
C.超平场物镜。
35.物镜头上的"
Planapo"
C.平场复消色差物镜。
36．物镜头上的"
Plan"
B.消色差物镜。
37．目镜头上的"
W"
A.广视野高眼点补偿目镜。
B.高眼点目镜。
C.广视野目镜。
38．目镜头上的"
SWK"
A.超广视野目镜。
B.高眼点补偿目镜。
39.目镜头上的"
WHK"
B.广视野高眼点目镜。
40.物镜头上的"
错.L"
B.半消色差物镜。
C.复消色差物镜。
判断题
01.无菌吸管上端塞入棉花是为了过滤口中的有菌空气。
（对）。
02.无菌吸管上端塞入棉花的目的是为了防止菌液吸入口中。
（错）。
03.稀释平板测数时,放线菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。
04．稀释平板测数时,细菌计数的标准是选择每皿中菌落数在30-300个之间的稀释度进行计数。
05.稀释平板测数时,细菌,放线菌,真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在30-300个的稀释度进行计数。
06．稀释平板测数时,真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。
07.稀释平板测数时,细菌、放线菌、真菌的计数标准是选择每皿中菌落数在10-100个的稀释度进行计数。
08.用混菌法测微生物活菌数时,每个平皿中的菌液加入量是1ml。
09.用涂抹法测微生物活菌数时,每个平皿中的菌液加入量是0.1ml。
10．用油镜镜检时应将聚光器升至最高。
11．使用高倍镜时,可将聚光器升至最高。
12.为了满足微生物对微量元素的需要,配制培养基所用的水最好使用自来水。
13.稀释测数用的无菌水通常是由自来水灭菌而成。
14.观察根霉,青霉只需用低倍镜观察即可。
15.实验室通常使用血球计数板测微生物的总菌数。
16．浸油的油镜头可用软的卫生纸擦净。
17.为了节省时间,可直接在染色涂片上滴加香柏油后,直接用油镜观察。
18.使用油镜的正确操作步骤是:
1.低倍镜观察。
2.高倍镜观察。
3.转出高倍镜头,滴加香柏油后用油镜观察。
19.在擦拭显微镜镜头时,应向一个方向擦拭。
20.显微镜镜头的放大倍数越大,它的数值孔径值越大,其镜口角也越大。
21.稀释平板测数通常是采用十倍稀释法。
22.稀释平板测数通常采用的是二倍稀释法。
23.做稀释平板测数时,只需一支吸管从头稀释到尾即可。
24.做稀释平板测数时,每做一个稀释度都必须更换一支无菌吸管。
25.稀释平板测数时,无论是用混菌法,还是用涂抹法,每个平皿中的菌液加入量都是1ml。
26.稀释平板测数时,无论是用混菌法,还是用涂抹法,每个平皿中的菌液加入量都是0.1ml。
27.实验室做固体培养基时,常加1.8%的琼脂作凝固剂,做半固体培养基时,琼脂加入量通常是0.5%。
28.实验室做固体培养基,常加2%的琼脂作凝固剂,做半固体培养基时,琼脂加入量通常是1%。
29.E.coli经革兰氏染色后,菌体呈红色,它是革兰氏正反应细菌。
30.在光学显微镜下,根霉的孢子囊是透明的。
31.使用手提灭菌锅灭菌后,为了尽快排除锅内蒸汽,可直接打开排气阀排气。
32.苏云金杆菌的芽胞在菌体的中央。
33.所有真菌菌落的表面干燥,呈绒毛状。
34.所有放线菌菌落表面干燥,呈粉粒状。
35.所有细菌菌落的表面都是光滑湿润状。
（芽胞菌菌落表面粗糙。
）。
36．镜台测微尺每小格的实际长度是10微米。
37.目镜测微尺每小格的实际长度是10μm。
38.镜台测微尺每小格的实际长度是10nm（纳米）。
39.血球计数板两边的平台比计数区高0.1cm。
40.血球计数板两边的平台比计数区高0.1mm。
41.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的2/3。
42.棉花塞塞入试管的长度应为棉塞全长的2/3。
43.摆斜面的长度应不超过试管长度的2/3。
44.摆斜面的长度应不超过试管长度的1/2。
45.血球计数板计数区的面积是1mm2。
46.用血球计数板计数时,任数5个大方格（80个小格）的菌数即可。
47.在使用细菌计数板计数时,为了防止计数偏大,计数区四周压线的菌只能数两边。
48.目镜测微尺每格的实际长度是未知的,需用长度已知的镜台测微尺校正。
49.测微生物的细胞大小时,需要校正的是镜台测微尺每格的实际长度。
50.测微生物细胞大小时,需要校正的是目镜测微尺每格的实际长度。
51.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000mm3。
52.血球计数板计数区共有400个小格,每小格的面积是1/400cm2。
53.用分装器将培养基分装试管时,应谨防培养基沾染试管口。
54.琼脂的熔化温度是90℃以上,凝固温度是45℃以下。
55.琼脂的熔化温度是95℃以上,凝固温度是45℃以下。
56.玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌,而不能用干热灭菌。
57.细菌计数板每小格的体积是1/20000mm3。
58.血球计数板计数区每小格的体积是1/4000cm3。
59.无菌室用甲醛熏蒸消毒后可喷氨水以减少甲醛的刺激。
实验技术
填空题
01.霉菌水浸片的制片程序是加一滴水于载玻片中央,用解剖针挑取菌丝少许,将菌丝用50%的酒精浸润,将菌丝用蒸馏水水洗,将菌丝放入载玻片水滴中并小心分散,盖上盖玻片。
02.放线菌印片染色的操作程序是印片,干燥,固定,复红染色2-3分钟,水洗,晾干。
03.固体培养基常用洋菜（琼脂）作凝固剂,普通固体培养基的用量一般为1.5-2.0%_,半固体培养基的用量一般为0.5%__。
04.简单染色的操作程序是涂片,干燥,固定,复红染色1-2分钟,水洗,晾干。
05.使用手提式灭菌锅进行灭菌的操作程序是__锅内加水,灭菌物体装锅,对称上紧密封螺帽将锅密封上,加热升温,排尽锅内冷空气,升温至灭菌工艺条件（一般为98kpa）,在工艺条件下保压计时（一般为30分钟）,到时间后切断热源,降温,出锅。
06．实验室配制固体培养基的操作程序是照配方称取药品,将药品溶解在一定量的水中后加热煮沸,将琼脂按量称取后用水浸湿,将浸湿的琼脂加入煮沸的营养液中,待琼脂全部融化后调节pH值,补充损失的水分,分装培养基入不同的容器中。
07.有荚膜的细菌用负染色法染色后,荚膜为无色,菌体为_红色.
08.细菌经革兰氏染色后,革兰氏正反应菌呈__紫色,革兰氏负反应菌呈__红色。
09.细菌经简单染色后呈__所染染料的颜色_。
10.显微镜的光学系统由_反光镜,聚光镜,物镜,_和目镜组成。
11．显微镜的机械部分包括_镜座,镜臂,载物台,转换器,镜筒,推动器,粗动螺旋,微动螺旋聚光镜升降螺旋。
等九部分组成。
12.高氏培养基通常用来培养_放线菌,其pH值为_7.5-8.0__。
13.PA培养基通常用来培养真菌__菌,其pH值为5-6_。
14.牛肉膏、蛋白胨培养基通常用来培养_细菌,其pH值为_、7.0-7.2__。
15.无氮培养基通常用来培养自生固氮菌。
其氮源来自_空气中的N2_。
16.干热灭菌的工艺条件是160-170℃/2h_。
17.使用显微镜低倍镜观察时,聚光器应该降低,使用显微镜高倍镜观察时,聚光器应该适当升高。
18.革兰氏染色的关键操作是酒精脱色_。
19.显微镜的倍数越大,焦深越小,调焦应该越小心_。
20.按培养基的形态,可将培养基分为液体_,固体_,半固体__三种类型。
21.配制常规培养基时通常用_自来_水。
22.热灭菌通常用来灭菌玻璃器材,培养基的灭菌通常用_高压蒸汽灭菌。
23.细菌稀释测数通常采用10倍__稀释法,稀释用试管无菌水为9__毫升。
24.配制培养基时常用_1molNaOH、和1molHCL调节pH值。
25.按培养基的特殊用途,可将培养基分成__选择培养基,加富培养基,鉴别培养基等。
26.选择培养基可用来分离培养我们所需的特殊微生物类群,例如我们要从土壤中分离纤维分解菌,可以利用_纤维素_作唯一碳源来筛选纤维分_解菌___；
要分离产蛋白酶的微生物,可以利用酪蛋白,作唯一氮源分离_蛋白分解菌_。
27．革兰氏染色的操作程序是涂片,干燥,固定,结晶紫染色1分钟,水洗,碘液媒染1分钟,水洗,95%的乙醇脱色25秒,水洗,蕃红复染3-5分钟,水洗,晾干__。
28.培养基是人工配制的适合不同微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质。
按营养物质的不同来源可分为_天然培养基,合成培养基,半合成培养基__三大类。
29.高倍镜头的数值孔径通常为_0.65,,放大倍数为_40x__。
30.油镜头的数值孔径通常为_1.25,放大倍数为_100x或90x__。
31.低倍镜头的数值孔径通常是0.25__,放大倍数为_10x或8x__。
32.穿刺接种使用的接种工具为__接种针,斜面接种使用的接种工具为接种环__。
33.进行稀释测数使用的主要器材有__酒精灯,1ml无菌吸管,9ml试管装无菌水,9cm的无菌平板
34.用孔雀绿和复红作细菌芽胞染色时,可使菌体呈红色,使芽胞呈_绿色。
35.用日光灯作光源时,通常用_平面反光镜,用自然光作光源时,通常用凹面__反光镜
36.无菌室杀菌通常采用紫外灯照射,和喷洒化学药剂（如酚）相结合的方法。
37.半固体培养基通常用来检查_细菌的运动性。
38.摆试管斜面的基本操作方法是将摆斜面用特制木条放在桌面上,将装有固体培养基的试管趁热放在特制木条上摆成斜面,斜面长度不得超过试管长度的1/2,将试管棉塞部分用灭菌报纸盖上,以防空气中微生物落到棉塞上引起污染。
39不能加热灭菌的液体培养基应采用滤法除菌,通常用的器皿有蔡氏细菌过滤滤和膜滤_。
40.蓝细菌的培养可用膜滤_培养基。
41.分离酵母菌时为了抑制细菌的生长,通常用_膜培养基。
42.从土壤中分离真菌时,通常在培养基中加入_孟加拉红和_链霉素显_抑制细菌的生长。
43.测微生物的大小使用的主要工具是微镜,镜台测微尺和_目镜测微尺。
44.测微生物的数量使用的主要工具是_显微镜和血球计数板_。
45.进行细菌的显微计数时使用的主要工具是显微镜和细菌计数板_。
46.普通光学显微镜测酵母菌的大小的操作程序是将镜台测微尺置载物台上,调焦找到台尺,在低倍镜下校正目镜测微尺每格的长,在高倍镜下校正目镜测微尺每格的长,去掉台尺换上待测样本片,在高倍镜下测出十个酵母菌宽和长的格数,将校正值乘入,算出十个酵母菌的平均宽和平均长,以平均宽x*_平均长Y（μm）表示酵母菌的大小。
47.显微计数的操作程序是_将待测菌进行适当的稀释,将计数板置于载物台上,在低倍镜下找到计数区,将菌液加到计数区上,调焦看到菌体,按五点取样法计数五个大方格的菌数,计算每小格的含菌数,计算出单位体积（如每ml）中的含菌数。
48.荚膜染色法的操作程序是_涂片,风干,加复红染色3-5分钟,水洗,晾干,加墨素涂抹,风干。
49.芽胞染色的操作程序是片,干燥,固定,
孔雀绿加热染色15分钟,水洗,复红染色2-3分钟,
水洗,
晾干。
50.芽胞染色的关键操作是孔雀绿加热染色_。
51.放线菌印片染色的关键操作是_印片时不能移动__。
52.用负染色法染荚膜的关键操作是_涂抹墨素要薄。
53.摇床振荡培养通常用来培养_好气微生物,享格特的厌氧操作方法通常用来培养专性厌氧菌
54.革兰氏染色反应与细菌细胞壁的_结构_和__组成_有关。
在革兰氏染色过程中,当用95%酒精处理后,就放在显微镜下观察,革兰氏阳性菌呈_紫_色,而革兰氏阴性菌呈_无色。
55.血球计数板与细菌计数板的主要差别是前者计数区的深度是后者的五倍
56.制霉菌水浸片时加棉兰染色液可使菌体呈_浅兰色。
57.Anabaenaazo对ica的异型胞通常是_间生在光学显微镜下它是_透明的,细胞两端有极节_。
它能控制氧气的进入,保持异型胞内_低氧分压,以利于固定分子氮_。
58.配制培养基时,应注意各种营养物质的配比,特别是C:
N比（碳氮比）。
一般而言,当C:
N≥5:
1时,有利于_菌体生长；
当C:
N∠5:
1时,有利于__积累代谢产物。
59.由于各种微生物对某种化合物如抗生素、染料的敏感性不同,可以利用这一特征来从土壤中分离出不同类群的微生物。
如在培养基中加入青霉素（链霉素）,会杀死或抑制细菌和放线菌的生长而分离出真菌__；
在培养基中加入__结晶紫__,有利于分离到革兰氏阴性菌。
60．细菌在革兰氏染色过程中,最后用蕃红复染的原因是G-细菌经结晶紫染色、碘液媒染、酒精脱色后菌体紫色脱去,故需用蕃红复染,这样在光镜下才能见到红色的菌体。
61.高倍镜下能看到的物象在油镜下看不到往往是由于_片置反和_菌体着色太浅引起。
62.微
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