生物分离技术习题库Word下载.docx
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调节体系pH值,使两性电解质的溶解度下降,析出的操作称为等电点沉淀。
20.膜分离:
利用膜的选择性(孔径大小),以膜的两侧存在的能量差作为推动力,由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。
21.化学渗透破壁法:
某些化学试剂,如有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素、金属螯合剂等,可以改变细胞壁或细胞膜的通透性,从而使胞内物质有选择地渗透出来。
22.超临界流体:
超临界流体是状态超过气液共存时的最高压力和最高温度下物质特有的点——临界点后的流体。
23.临界胶团浓度:
将表面活性剂在非极性有机溶剂相中能形成反胶团的最小浓度称为临界胶团浓度,它与表面活性剂种类有关。
24.反渗透:
在只有溶剂能通过的渗透膜的两侧,形成大于渗透压的压力差,就可以使溶剂发生倒流,使溶液达到浓缩的效果,这种操作成为反渗透。
29.膜的浓差极化:
是指但溶剂透过膜,而溶质留在膜上,因而使膜面浓度增大,并高于主体中浓度。
30.超滤:
凡是能截留相对分子量在500以上的高分子膜分离过程称为超滤,它主要是用于从溶剂或小分子溶质中将大分子筛分出来。
(纳滤:
以压力差为推动力,从溶液中分离300~1000小分子量的膜分离过程,孔径分布在平均2nm)
31.生物分离技术:
是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物(发酵液、培养液)及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。
32.离心分离技术:
是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异,在离心场中使不同密度的固体颗粒加速沉降的分离过程。
35.盐析:
是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异,向溶液中加入一定量的中性盐,使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。
36.有机聚合物沉析:
利用生物分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分离技术称为有机聚合物沉析。
39.功能基团:
离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团,又称功能基团
40.平衡离子:
离子交换树脂中与功能基团以离子键联结的可移动的平衡离子,亦称活性离子。
42.转型:
即按照使用要求人为地赋予树脂平衡离子的过程。
43.洗脱:
利用适当的溶剂,将树脂吸附的物质释放出来,重新转入溶液的过程。
44.树脂的再生:
就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程,树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。
51.凝胶过滤:
层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相,根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。
52.离子交换层析:
是以离子交换剂为固定相,根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。
53.高效液相色谱:
是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相,借助高压泵来输送流动相,并配有实时在线检测器,实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。
54.亲和层析:
是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。
是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。
57.过滤介质:
是指能使固一液混合料液得以分离的某一介面,通常指滤布或膜过滤中所用的膜。
58.等电点:
是两性物质在其质点的净电荷为零时介质的pH值,溶质净电荷为零,分子间排斥电位降低,吸引力增大,能相互聚集起来,沉淀析出,此时溶质的溶解度最低。
59.有机酸沉析:
含氮有机酸(如苦味酸和鞣酸等)能够与有机分子的碱性功能团形成复合物而沉淀析出。
60.选择变性沉析:
是利用蛋白质、酶与核酸等生物大分子对某些物理或化学因素敏感性不同,而有选择地使之变性沉析,以达到目的物与杂蛋白分离的技术,称为选择变性沉析。
二、选择
1.HPLC是哪种色谱的简称(C)。
C.高效液相色谱
2.针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是(C)。
C.亲和层析
3.盐析法沉淀蛋白质的原理是(B)B.中和电荷,破坏水膜
4.从组织中提取酶时,最理想的结果是(C)C.比活力最高
6.下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的?
(B)B..对底物有高度特异亲合性
7.用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是(C)C.凝胶过滤色谱
45.适合小量细胞破碎的方法是(B)B.超声破碎法
8.盐析法沉淀蛋白质的原理是(B)B.中和电荷,破坏水膜
9.蛋白质分子量的测定可采用(C)方法。
C.凝胶层析
11.氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的(A)性质。
A.溶解度和等电点、
12.离子交换剂不适用于提取(.蛋白质)物质。
13.人血清清蛋白的等电点为4.64,在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)A:
正极移动
14.蛋白质具有两性性质主要原因是(B)B:
蛋白质分子有多个羧基和氨基
15.使蛋白质盐析可加入试剂(D)D:
硫酸铵
16.凝胶色谱分离的依据是(B)。
B、各物质分子大小不同
18.下列哪一项是强酸性阳离子交换树脂的活性交换基团(A)A磺酸基团(-SO3H)
23.在蛋白质初步提取的过程中,不能使用的方法(C)。
C、有机溶剂萃取
25.离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂,通过(A)将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。
A、静电作用
27.丝状(团状)真菌适合采用(A)破碎。
A、珠磨法
28.用来提取产物的溶剂称(C)。
C、萃取剂
29.阴离子交换剂(C)。
C、可交换的为阴离子
31.凝胶色谱分离的依据是(B)。
B、各物质分子大小不同
32.洗脱体积是(C)。
C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积
34.吸附色谱分离的依据是(A)。
A、固定相对各物质的吸附力不同
37.下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法(A)。
A.亲和层析
38.纯化酶时,酶纯度的主要指标是:
(D)D.酶的比活力
39.盐析法纯化酶类是根据(B)进行纯化。
B.调节酶溶解度的方法
44.工业上常用的过滤介质不包括(D)D.真空介质
45.下列物质属于絮凝剂的有(A)。
A、明矾
49.下列哪项不是蛋白质的浓度测定的方法(D)。
D.核磁共振
50.供生产生物药物的生物资源不包括(D)D.矿物质
51.发酵液的预处理方法不包括(C)C.离心
52.其他条件均相同时,优先选用那种固液分离手段(B过滤)
53.那种细胞破碎方法适用工业生产(A)A.高压匀浆
54.高压匀浆法破碎细胞,不适用于(D)D.青霉
55.关于萃取下列说法正确的是(C)C.两性电解质在等电点时进行提取
57.在葡聚糖与聚乙二醇形成的双水相体系中,目标蛋白质存在于(A)A.上相
59.超临界流体萃取中,如何降低溶质的溶解度达到分离的目的(C)C.升温
61.盐析操作中,硫酸铵在什么样的情况下不能使用(B)B碱性条件
62.有机溶剂沉淀法中可使用的有机溶剂为(D)D.丙酮
63.有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质(B)B介电常数小
65.若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH会(A)A.升高
66.若两性物质结合了较多阴离子,则等电点pH会(B)B降低
68.那一种膜孔径最小(C)C.反渗透
69.超滤技术常被用作(C)C.小分子物质的纯化
70.微孔膜过滤不能用来(D)D.分离离子与小分子
74.酚型离子交换树脂则应在(B)的溶液中才能进行反应BpH>9
75.羧酸型离子交换树脂必须在(C)的溶液中才有交换能力C.pH>7
76.离子交换树脂适用(B)进行溶胀B乙醇
77.下列关于离子交换层析洗脱说法错误的是(D)D.若被交换的物质用酸、碱洗不下来,应使用更强的酸、碱
78.阳树脂在软化中易受Fe3+污染,可通过(C)清除铁化合物。
C.加抑制剂的高浓度盐酸
81.分子筛层析指的是(C)C.凝胶过滤
82.常用的紫外线波长有两种(B)B254nm和365nm
88.通过改变pH值从而使与离子交换剂结合的各个组分被洗脱下来,可使用(A)
A.阳离子交换剂一般是pH值从低到高洗脱
94.气相色谱的载气不能用(C)C.氧气
98.珠磨机破碎细胞,适用于(D)D.青霉
99.为加快过滤效果通常使用(C)C.惰性助滤剂
100.不能用于固液分离的手段为(C)C.超滤
101.最常用的干燥方法有(D)D、以上都是
104.物理萃取即溶质根据(B)的原理进行分离的B.相似相溶
105.纳米过滤的滤膜孔径(D)D<
1nm
107.人血清清蛋白的等电点为4.64,在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电,清蛋白质分子向(A)A:
108.单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中,加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀,属于(D)沉析原理。
D有机酸沉析
115.下列哪项不属于发酵液的预处理:
(D)D.层析
124.能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是(C)C.离子交换
125.从四环素发酵液中去除铁离子,可用(B)B加黄血盐
126.当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度(C)C、先增大,后减小
130.下列细胞破碎的方法中,哪个方法属于非机械破碎法(A)A.化学法
131.下列哪一项不是常用的滤布材料(C)C.滤纸
132.超滤膜截留的颗粒直径为(B)B0.001~0.02µ
m
136.洗脱体积是(C)。
137.分子筛层析纯化酶是根据(C)进行纯化。
C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法
138.用于蛋白质分离过程中的脱盐和更换缓冲液的色谱是(C)C.凝胶过滤色谱
140.微滤膜所截留的颗粒直径为(A)A0.02~10µ
m
141.下列哪一项不是阳离子交换树脂(D)D羟型
142.适合于亲脂性物质的分离的吸附剂是(B)。
B.氧化铝
144.关于分配柱层析的基本操作错误(D)。
D分配柱层析适用于分离极性比较小、在有机溶剂中溶解度大的成分,或极性很相似的成分。
147.超临界流体萃取法适用于提取(B)B、极性小的成分
148.分离纯化早期,由于提取液中成分复杂,目的物浓度稀,因而易采用分离量大分辨率低的方法
149.蛋白质类物质的分离纯化往往是多步骤的,其前期处理手段多采用下列哪类的方法。
(B)B.负载量大
151.将四环素粗品溶于pH2的水中,用氨水调pH4.5—4.6,28-30℃保温,即有四环素沉淀结晶析出。
此沉淀方法称为(B)B、等电点法
152.针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是(C)。
C.亲和层析
154.反渗透膜的孔径小于(C)C<
2nm
157.活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强(A)A、水
160.在超滤过程中,主要的推动力是(C)C、压力
162.在选用凝胶层析柱时,为了提高分辨率,宜选用的层析柱是(A)A、粗且长的163.如果用大肠杆菌作为宿主细胞,蛋白表达部位为周质,下面哪种细胞破碎的方
法最佳(C)C.渗透压休克法
164.盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点是(B)B.变性作用小
165.在萃取液用量相同的条件下,下列哪种萃取方式的理论收率最高三级逆流萃取
三、判断题
1.助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。
(×
)
2.通过加入某些反应剂是发酵液进行预处理的方法之一。
(√)
3.珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。
)
4.高级醇能被细胞壁中的类脂吸收,使胞壁膜溶胀,导致细胞破碎。
5.极性溶剂与非极性溶剂互溶。
)
10.流动相为气体则称为气相色谱。
13.在生物制剂制备中,常用的缓冲系统有磷酸盐缓冲液;
碳酸盐缓冲液;
盐酸盐缓冲液;
醋酸盐缓冲液等。
14.要增加目的物的溶解度,往往要在目的物等电点附近进行提取。
15.应用有机溶剂提取生化成分时,一般在较高温度下进行。
16.常压干燥浓缩的缺点是设备投资及操作维护费用高,生产能力不太大。
17.生物物质中最常用的干燥方法是减压干燥。
18.冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质。
19.溶剂的极性从小到大为丙醇>乙醇>水>乙酸。
(√)
20.蛋白质变性,一级、二级、三级结构都被破坏。
21.蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。
25.离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物。
26.蛋白质变性后溶解度降低,主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。
28.当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质的等电点为7.0。
(√)
31.板框压滤机可过滤所有菌体。
32.高压匀浆法可破碎高度分枝的微生物。
33.超声波破碎法的有效能量利用率极低,操作过程产生大量的热,因此操作需在冰水或有外部冷却的容器中进行。
35.有机溶剂被细胞壁吸收后,会使细胞壁膨胀或溶解,导致破裂,把细胞内产物释放到水相中去。
36.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带正电。
37.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹥pI蛋白质带负电。
38.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹤pI蛋白质带负电。
39.蛋白质为两性电解质,改变pH可改变其荷电性质,pH﹤pI蛋白质带正电。
。
40.离心是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异而实现分离的。
41.不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统,如葡聚糖与聚乙二醇(PEG)按一定比例与水混合后,溶液先呈浑浊状态,待静置平衡后,逐渐分成互不相溶的两相,上相富含PEG,下相富含葡聚糖。
42.不同高分子化合物的溶液相互混合可形成两相或多相系统,如葡聚糖与聚乙二醇(PEG)按一定比例与水混合后,溶液先呈浑浊状态,待静置平衡后,逐渐分成互不相溶的两相,下相富含PEG,上相富含葡聚糖。
43.超临界流体温度不变条件下,溶解度随密度(或压力)的增加而增加,而在压力不变时,温度增加情况下,溶解度有可能增加或下降。
44.盐析是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异,向溶液中加入一定量的中性盐,使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。
45.硫酸铵在碱性环境中可以应用。
46.在低盐浓度时,盐离子能增加生物分子表面电荷,使生物分子水合作用增强,具有促进溶解的作用。
47.向含有生化物质的水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂,能使生化物质沉淀析出。
48.丙酮沉析作用小于乙醇。
49.有机溶剂与水混合要在低温下进行。
50.有机溶剂沉析分辨能力比盐析高。
51.若两性物质结合了较多阳离子,则等电点pH降低。
52.等电点沉淀在实际操作中应避免溶液pH上升至5以上。
53.纳米过滤膜孔径最小。
61.阴树脂易受有机物污染,可用有机溶剂浸泡或淋洗。
64.层析分离是一种化学的分离方法。
70.凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。
79.渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种,适用于易于破碎的细胞,如动物细胞和革兰氏阳性菌。
85.当气体的温度超过其临界温度,压力超过临界压力之后,物质的聚集状态就介于气态和液态之间,成为超临界流体。
86.盐析反应完全需要一定时间,一般硫酸铵全部加完后,应放置30min以上才可进行固-液分离。
91.采用溶剂提取法提取中草药有效成分时,选择溶剂的原则是“相似相溶原则”。
(√)
92.凝聚与絮凝作用的原理是相同的,只是沉淀的状态不同。
93.冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构,增加其亲水性和通透性来破坏细胞的。
95.丙酮,介电常数较低,沉析作用大于乙醇,所以在沉析时选用丙酮较好。
97.盐析作用也能减少有机溶剂在水中的溶解度,使提取液中的水分含量减少。
可以促使生化物质转入有机相从而提高萃取率。
98.珠磨法中适当地增加研磨剂的装量可提高细胞破碎率。
99.要增加目的物的溶解度,往往要在目的物等电点附近进行提取。
102.凝胶层析会使得大分子物质后流出,小分子物质先流出。
103.透析设备简单、操作容易,可用于工业化生产(×
106.蛋白质变性后溶解度降低,主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。
109.离心操作时,对称放置的离心管要达到体积相同才能进行离心操作。
111.甲醇沉淀作用与乙醇相当,但对蛋白质的变性作用比乙醇、丙酮都小,所以应用广泛。
15.盐析一般可在室温下进行,当处理对温度敏感的蛋白质或酶时,盐析操作要在低温下(如0℃~4℃)进行。
(√)
116.蛋白质类的生物大分子在盐析过程中,最好在高温下进行,因为温度高会增加其溶解度。
118.沉淀法、吸附法、萃取法、超滤法都是进行初步纯化。
119.渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种,适用于易于破碎的细胞,如动物细胞和革兰氏阴性菌。
121.化学萃取即溶质根据相似相溶的原理在两相间达到分配平衡,萃取剂与溶质之间不发生化学反应。
122.若两性物质结合了较多阳离子(如Ca2+、Mg2+、Zn2+等),则等电点pH升高。
123.采用凝胶过滤分离蛋白质主要取决于蛋白质分子的大小,先将蛋白质混合物上柱然后进行洗脱,小分子的蛋白质由于所受排阻力较小首先被洗脱出来。
(×
124.树脂使用后不可再回收。
125.多肽和蛋白质类药物的纯化包括两部分内容,一是蛋白质与非蛋白质分开,二是将不同蛋白质分开。
(∨)
四、填空
1.发酵液常用的固液分离方法有(离心)和(过滤)等。
2.常用的蛋白质沉析方法有(等电点沉淀),(盐析)和(有机溶剂沉淀)。
3.阳离子交换树脂按照活性基团分类,可分为(强酸型),(弱酸型)和(中等强度);
其典型的活性基团分别有(磺酸基团),(羧基),(磷酸基)。
4.过饱和溶液的形成方式有:
(饱和溶液冷却),(部分溶剂蒸发),(化学反应结晶法)和(解析法)。
6.为使过滤进行的顺利通常要加入(惰性助滤剂)。
7.离子交换分离操作中,常用的洗脱方法有(pH梯度)和(离子强度(盐)梯度)。
8.阴离子交换树脂按照活性基团分类,可分为(强碱型),(弱碱型)和(中等强度);
其典型的活性基团分别有(季氨基)、(伯、仲、叔氨)、(强弱基团都具备)。
11.常用的化学细胞破碎方法有(渗透冲击),(酶消化法),(增溶法),(脂溶法)和(碱处理法)。
12.DEAESepharose是(阴)离子交换树脂,其活性基团是(二乙基氨基乙基)。
13.影响离子交换选择性的因素有(离子化合价),(离子水化半径),(溶液浓度),(离子强度),(溶液的pH值),(有机溶剂),(树脂物理结构)和(辅助力)。
14.CMSepharose是(阳)离子交换树脂,其活性基团是(羧甲基)
15.工业离心设备从形式上可分为(管式),(套筒式),(碟片式),等型式。
16.膜分离过程中所使用的膜,依据其膜特性(孔径)不同可分为(微滤膜),(超滤膜),(纳滤膜)和(反渗透膜)。
17.工业上常用的超滤装置有(板式),(管式),(螺旋卷式)和(中空纤维式)。
18.影响吸附的主要因素有(吸附剂的性质),(吸附质的性质),(温度),(溶液pH值),(盐浓度)和(吸附物浓度和吸附剂用量)。
19.影响盐析的因素有(溶质种类),(溶质浓度),(pH值)和(温度)。
20.在结晶操作中,工业上常用的起晶方法有(自然起晶法),(刺激起晶法)和(晶种起晶法)。
24.超临界流体的特点是与气体有相似的(粘度(扩散系数)),与液体有相似的(密度)。
25.离子交换树脂的合成方法有(共聚(加聚))和(均聚(缩聚))两大类;
28.根据分离机理的不同,色谱法可分为(吸附色谱),(离子交换色谱),(凝胶色谱),(分配色谱)和(亲和色谱)。
29.典型的工业过滤设备有(板框压滤机)和(真空转鼓过滤机)。
30.常用离心设备可分为(离心沉降)和(离心过滤)两大类;
32.根据吸附剂与吸附质之间存在的吸附力性质的不同,可将吸附分为(物理)、(化学)、(极性)和(交换)吸附;
33.离子交换操作一般分为(动态)和(静态)两种;
34.蛋白质等生物大分子,在溶液中呈稳定的分散状态,其原因是由于(分子表面电荷)和(水化层);
35.盐析用盐的选择需考虑(盐析作用强)、(溶解度大)、(生物学惰性)和(来源丰富、经济)等几个方面的因素;
36.影响有机溶剂沉淀的因素有(温度)、(pH)、(样品浓度)、(中性盐浓度)和(金属离子)。
37.结晶包括三个过程(过饱和溶液的形成)、(晶核的形成)和(晶体的生长)。
38.过饱和溶液的形成方法有(饱和溶液冷却)、(部分溶剂蒸发)、(解析)和(化学反应结晶)。
41.液-液萃取从机理上分析可分为(物理萃取)和(化学萃取)两类;
46.根据膜结构的不同,常用的