十马立克氏病防治技术规范文档格式.docx

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病鸡和带毒鸡是最主要的传染源。

呼吸道是主要的感染途径，羽毛囊上皮细胞中成熟型病毒可随着羽毛和脱落皮屑散毒。

病毒对外界抵抗力很强，在室温下传染性可保持4～8个月。

2.2临床症状

本规范规定本病的潜伏期为4个月。

根据临床症状分为4个型，即神经型、内脏型、眼型和皮肤型。

神经型：

最早症状为运动障碍。

常见腿和翅膀完全或不完全麻痹，表现为“劈叉”式、翅膀下垂；

嗉囊因麻痹而扩大。

内脏型：

常表现极度沉郁，有时不表现任何症状而突然死亡。

有的病鸡表现厌食、消瘦和昏迷，最后衰竭而死。

眼型：

视力减退或消失。

虹膜失去正常色素，呈同心环状或斑点状。

瞳孔边缘不整，严重阶段瞳孔只剩下一个针尖大小的孔。

皮肤型：

全身皮肤毛囊肿大,以大腿外侧、翅膀、腹部尤为明显。

本病的病程一般为数周至数月。

因感染的毒株、易感鸡品种（系）和日龄不同，死亡率表现为2%～70%。

2.3病理剖检变化

常在翅神经丛、坐骨神经丛、坐骨神经、腰荐神经和颈部迷走神经等处发生病变，病变神经可比正常神经粗2～3倍，横纹消失，呈灰白色或淡黄色。

有时可见神经淋巴瘤。

在肝、脾、胰、睾丸、卵巢、肾、肺、腺胃和心脏等脏器出现广泛的结节性或弥漫性肿瘤。

常见毛囊肿大，大小不等，融合在一起，形成淡白色结节，在拔除羽毛后尸体尤为明显。

2.4实验室诊断

2.4.1病原分离鉴定（见附件1）

2.4.2病理组织学诊断

主要以淋巴母细胞、大、中、小淋巴细胞及巨嗜细胞的增生浸润为主，同时可见小淋巴细胞和浆细胞的浸润和雪旺氏细胞增生。

2.4.3免疫学诊断

免疫琼脂扩散试验（见GB/T18643）。

2.5鉴别诊断

内脏型马立克氏病的病理变化易与禽白血病（LL）和网状内皮增生症（RE）相混淆，一般需要通过流行病学和病理组织学进行鉴别诊断。

2.5.1与禽白血病（LL）的鉴别诊断

2.5.1.1流行病学比较

禽白血病（LL）一般发生于16周龄以上的鸡，并多发生于24～40周龄之间；

且发病率较低，一般不超过5％。

MD的死亡高峰一般发生在10～20周龄之间，发病率较高。

2.5.1.2病理组织学变化

禽白血病（LL）肿瘤病理组织学变化主要表现为大小一致的淋巴母细胞增生浸润。

MD肿瘤细胞主要表现为大小不一的淋巴细胞。

2.5.2与网状内皮增生症（RE）的鉴别诊断

网状内皮增生症（RE）在不同鸡群感染率差异较大，一般发病率较低。

其病理组织学特点是：

肿瘤细胞多以未分化的大型细胞为主，肿瘤细胞细胞质较多、核淡染。

有些病例也表现为大小不一的淋巴细胞。

现场常见MDV和REV共感染形成的混合型肿瘤，需做病原分离鉴定。

2.6结果判定

2.6.1临床诊断为疑似马立克氏病

符合流行病学2.1、临床症状2.2和剖检病变2.3的。

2.6.2确诊

符合结果判定2.6.1，且符合实验室诊断2.4.1；

或符合2.4.2和2.4.3的。

3疫情报告

3.1任何单位和个人发现患有本病或疑似本病的禽类，应立即向当地动物防疫监督机构报告。

3.2当地动物防疫监督机构接到疫情报告后，按国家动物疫情报告管理的有关规定执行。

4疫情处理

根据流行病学特点、临床症状、剖检病变，结合病原分离鉴定、组织病理学和免疫学检测做出的诊断结果可作为疫情处理的依据。

4.1发现疑似马立克病疫情时，养殖户应立即将发病禽群隔离，并限制其移动。

当地动物防疫监督机构要及时派员到现场进行调查核实，包括流行病学调查、临床症状检查、病理解剖、采集病料、实验室诊断等，根据诊断结果采取相应措施。

4.2当疫情呈散发时,须对病禽及同群禽进行扑杀和无害化处理（按照GB16548进行）。

同时，对禽舍和周围环境进行消毒，对受威胁禽群进行观察。

4.3当疫情呈暴发流行时按照以下要求处理

4.3.1划定疫点、疫区、受威胁区

由所在地县级以上（含县级）兽医主管部门划定疫点、疫区、受威胁区。

疫点：

指患病禽类所在的地点。

一般是指患病禽类所在的禽场（户）或其它有关屠宰、经营单位；

如为农村散养，应将自然村划为疫点。

疫区：

指疫点外延3公里范围内区域。

疫区划分时，应注意考虑当地的饲养环境和天然屏障（如河流、山脉等）。

受威胁区：

指疫区外延5公里范围内的区域。

4.3.2处置要求

在动物防疫监督机构的监督指导下，扑杀发病禽及同群禽，并对被扑杀禽和病死禽只进行无害化处理；

对环境和设施进行消毒；

对粪便及其它可能被污染的物品，按照GB16548进行无害化处理；

禁止疫区内易感动物移动、交易。

禽类尸体需要运送时，应使用防漏容器，并在动物防疫监督机构的监督下实施。

4.3.3进行疫源分析和流行病学调查

4.3.4处理记录

对处理疫情的全过程必须做好完整的详细记录，以备检查。

5预防与控制

实行“以免疫为主”的综合性防治措施。

5.1加强饲养管理，提高环境控制水平

饲养、生产、经营等场所必须符合《动物防疫条件审核管理办法》（农业部15号令）的要求，并须取得动物防疫合格证。

饲养场实行全进全出饲养方式，控制人员出入，严格执行清洁和消毒程序。

5.2加强消毒管理，做好基础防疫工作

各饲养场、屠宰厂（场）、动物防疫监督检查站等要建立严格的卫生（消毒）管理制度。

5.3免疫

应于雏鸡出壳24小时内进行免疫。

所用疫苗必须是经国务院兽医主管部门批准使用的疫苗。

5.4监测

养禽场应做好死亡鸡肿瘤发生情况的记录，并接受动物防疫监督机构监督。

5.5引种检疫

国内异地引入种禽时，应经引入地动物防疫监督机构审核批准，并取得原产地动物防疫监督机构的免疫接种证明和检疫合格证明。

附件1

马立克氏病病原分离

1用细胞作为MDV分离和诊断的材料

1.1细胞来源

应来自病鸡全血（抗凝血）的白细胞层或刚死亡鸡脾脏细胞。

1.2方法

1.2.1将白细胞或脾脏细胞制成含有106～107个活细胞/ml的细胞悬液。

1.2.2将0.5ml样品，分别接种2瓶（大小25㎝2）用SPF鸡胚制备的成纤维细胞。

另取1瓶做空白对照。

1.2.3将接种病料的和未接种病料的对照细胞培养瓶均置于含有5％CO2的37.5°

C的二氧化碳培养箱内。

1.2.4每隔3天，换一次培养液。

1.2.5观察有无细胞病变（CPE），即蚀斑，一般可在3～4天内出现。

若没有，可按上述方法盲传1～2代。

2用羽髓作为MDV分离和诊断的材料

这种方法所分离的病毒为非细胞性的，但不常用。

2.1取长约5mm的羽髓或含有皮肤组织的羽髓，放入SPGA－EDTA缓冲液〔0.2180M蔗糖（7.462g）；

0.0038M磷酸二氢钾（0.052g）；

0.0072M磷酸二氢钠（0.125g）；

0.0049ML－谷氨酰胺（0.083g）、1.0％血清白蛋白（1g）和0.2％乙二胺四乙酸钠（0.2g），蒸馏水100ml，过滤除菌，调节pH值到6.3〕中。

2.2病毒的分离与滴定方法

上述悬浮液经超声波处理，通过0.45μm微孔滤膜过滤后，接种于培养24小时的鸡肾细胞上，吸附40分钟后加入培养液，并按上述方法培养7天。

3上述方法可以用于1型和2型MDV的分离

所分离的病毒如果是免疫禽群，也可以分离到疫苗毒。

有经验的工作人员可根据蚀斑出现的时间、发展速度和形态，即可对各型病毒引起的蚀斑作出准确鉴别。

HVT蚀斑出现较早，而且比1型的要大，而2型的蚀斑出现晚，比1型的小。

附件2

消毒

1消毒前的准备

1.1消毒前必须清除有机物、污物、粪便、饲料、垫料等；

1.2必须选用对马立克氏病病毒有效的消毒药品，如烧碱、醛类、氧化剂类、酚制剂类、氯制剂类、双季胺盐类等。

1.3备有喷雾器、火焰喷射枪、消毒车辆、消毒防护用具（如口罩、手套、防护靴等）、消毒容器等。

1.4注意消毒剂不可混用.

2消毒范围

禽舍地面及内外墙壁，舍外环境；

饲养、饮水等用具，运输等设施设备以及其它一切可能被污染的场所和设施设备。

3消毒方法

3.1金属设施设备的消毒，可采取火焰、熏蒸等方法消毒；

3.2圈舍、场地、车辆等，可采用消毒液清洗、喷洒等方法消毒；

3.3养禽场的饲料、垫料等，可采取深埋发酵处理或焚烧处理等方法消毒；

3.4粪便等可采取堆积密封发酵或焚烧处理等方法消毒；

3.5饲养、管理等人员可采取淋浴等方法消毒；

3.6衣帽鞋等可能被污染的物品，可采取浸泡、高压灭菌等方法消毒；

3.7疫区范围内办公、饲养人员的宿舍、公共食堂等场所，可采用喷洒的方法消毒；

3.8屠宰加工、贮藏等场所以及区域内池塘等水域的消毒可采取相应的方法进行，并避免造成有害物质的污染。