13寄生虫感染与嗜酸性粒细胞Word文件下载.docx

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具双层膜，内含电子致密的结晶状髓质。

结晶的周围有电子密度低的基质。

故常称为类结晶颗粒。

13.1.2.2.2小颗粒此种颗粒较小，直径为0.1〜0.5卩m圆形，有膜包绕，内容均匀。

富含酸性磷酸酶和芳基硫酸酯酶。

而在特异性颗粒中，很少含此两种酶类。

13.l.2.2.3包含体较典型的结晶颗粒稍大，看不到确切的包围膜和特征性的结晶状髓质，偶见有电子致密的物质呈离心式样如阳光四射状，故称包含体。

这种颗粒在患各种疾病伴发EOS增多症病人的EOS中常可见到。

组织化学分析，颗粒髓质中含有主要碱性蛋白（majorbasicprotein，

MBP）颗粒基质则含有嗜酸性粒细胞阳离子蛋白（eosinophilcationcprotein，ECP酸球神经毒素（eosinophil-derivedneurotoxin，EDN及

酸球过氧化物酶（eosinophilperoxidase，EPO等毒性蛋白质。

对侵入的病原体包括寄生虫及机体细胞有细胞毒作用。

另外颗粒中尚有组胺酶、芳基硫酸酯酶、磷酯酶D等，参与对I型变态反应的调节。

13.123嗜酸性粒细胞的趋化性EOS是可活动的，能通过内皮细胞间隙

进入组织或炎症区域。

EOS具有趋化性，并且是其附着、吞噬寄生物的先

chemotacticfactor，ECF），它可通过多种途径产生。

13.1.2.3.1

抗原-抗体复合物

称之为补体衍生的

免疫复合物激活补体产生的趋化性物质激活补体可产生C3aC5aC567对EOS有趋化作用,酸球趋化因子（eosinophilchemotacticfactorderivedfromcornplement，ECF-C）。

13.1.2.3.2过敏反应过程中释放的趋化性物质

（i）过敏症的酸球趋化因子（eosinophilchemotacticfactorofanaphylaxis，ECF-A）此种物质见于人、豚鼠和大白鼠的肥大细胞和嗜碱性粒细胞中。

在活体，它与C5a同时存在有协同使EOS趋化的作用。

它的氨基酸序列为缬-甘-丝-谷和丙-甘-丝-谷，人工合成的这种多肽类已证实有EOS趋化活性，且与高度纯化的天然ECF-A具有相同的选择性和趋化能力。

EOS与ECF-A或C5a培育后，出现EOS对继续用这种ECF的反应性减弱，称之为EOS的灭活。

用ECF桝较用C5a的EOS的灭活作用更完全和迅速。

这提供了一种对游走细胞的捕获机制学说，即细胞被吸引

到趋化因子存在部位后，由于对进一步的趋化性刺激无反应而留在炎症部位。

（ii）组织胺（histamine）

（iii）脂性酸球趋化因子（lipidECF）由肥大细胞所释放，在花生四烯酸代谢中的脂氧酶产物如白三烯B4（LTB4）、过氧化羟花生四烯酸（5-HPETE）、羟花生四烯酸（5程ETE12-HETE）等均对EOS有趋化性。

13.1.2.3.3由淋巴细胞释放的趋化物质

，ESP）致

（i）酸球刺激促动因子（eosinophilstimulationpromoter敏T淋巴细胞释放的淋巴素中有一种物质可促使EOS移动，称之为ESP或ECF-L。

（ii）酸球趋化因子前体（eosinophilchemotacticfactor

Precurosor，ECF-P）是由致敏T淋巴细胞产生的另一淋巴素，此物质具有趋化性前需要同类的抗原-抗体复合物激活，故称。

13.1.2.3.4由寄生虫产生的酸球趋化因子（eosinophilchemotactic

factorderivedfromparosite,ECF-P）试管中蛔虫抽出物对豚鼠EOS有

趋化活性；

泡尾带绦虫的囊虫抽出物对人体外周血中EOS有趋化活性;

段义农（等）（1989，1996）实验证明，卫氏并殖吸虫分泌排泄物和成虫浸出液对脉鼠EOS在体内有明显的趋化作用，这些因子不断从寄生虫体内局部释放至周围组织或血液中，推测虫源性ECF与病变组织中炎症细胞

浸润有密切关系；

Niwa等（1996）体内、外实验均证实微小膜壳绦虫六钩蚴提取物对EOS有趋化作用，将其天然提取物或部分纯化的ECF向大鼠腹腔内注射引起优先的EOS浸润，并提示在感染期间，微小膜壳绦虫六钩蚴起源的ECF在体内促进小肠EOS增多；

Horii等（1990）在脉鼠体内研究围绕日本血吸虫卵EOSS积机制，从虫卵可溶性抗原（SEA）纯化出对EOS有趋化作用的2个成分，一是变应原，一是ECF后者在感染晚期阶段（感染后8小时）介导EOS蓄积。

另外，Okada等（1996）实验证明血小板激活因子（PAF）、白细胞介素

5（IL—5）对犬弓首线虫感染的兔肺EOS蓄积起作用；

Ushio等（1995）用长角血蜱幼虫侵袭大白鼠，早期反应（攻击后2天）EOS在局部蓄积依赖叮咬

部位肥大细胞、晚期反应（攻击后6天）依赖于T细胞释放的IL—5；

近年

能刺激中性粒细胞释放ECF在NSF刺激后5分钟，中性粒细胞即释放

ECF至40分钟时ECF释放达高峰。

段义农等（1989）在研究卫氏并殖吸虫成虫对EOSF口中性粒细胞体外趋化性时，也发现中性粒细胞可释放ECF进而作用于EOS强化其向虫体局部移动积聚。

13．2嗜酸性粒细胞在抗害生虫感染中的作用

EOS对小型寄生虫具有吞噬作用，对大型寄生虫的杀伤作用主要是通过细胞毒作用。

13.2.1吞噬

EOS可吞噬抗原一抗体复合物、抗体包被的红细胞、细菌、支原体、念珠菌、肥大细胞颗粒等，但其吞噬能力较中性粒细胞小。

在活体或试管中EOS吞噬抗原一抗体复合物特别有效，在蠕虫感染中，经常有抗原一抗体复合物形成，这种吞噬复合物的吞噬作用在蠕虫感染中特别重要。

另外，EOS对小型寄生虫也有吞噬作用，如Sanderson等（1979）提出在抗体存在的实验条件下，大白鼠的EOS可吞噬枯氏椎虫的椎鞭毛体。

13.2.2细胞毒作用

13.2.2.1ADCC这是一类由特异性抗体与非特异性细胞协同作用的细胞外非吞噬性的杀伤机制。

对个体较大的组织寄生蠕虫，此种效应机制尤为重要。

参与ADCC勺抗体为感染所诱导的特异性抗体，在不同的病程中,产生的各种抗体可以确切控制ADC（活性，使杀虫过程表现为持续的连锁反应。

目前已知的参与ADCC勺抗体有IgG、IgM、IgE和IgA。

它们通过抗原结合位点与寄生虫抗原结合，又以其Fc段与效应细胞膜表面的Fc受体结合，效应细胞通过释放活性氧中间产物、阳离子蛋白、溶酶体酶和其它蛋白水解酶等杀伤寄生虫。

已知抗寄生虫的ADCC效应细胞有巨噬细胞、EOS中性粒细胞、肥大细胞、血小板等。

这种细胞杀伤必须依赖特异性抗体的搭桥，所以称之为抗体依赖细胞介导的细胞毒作用即ADCC。

参与ADC（杀伤虫体的抗体和细胞类型因虫种、病程和作用部位而有不同的组合，已知在数种蠕虫感染中证实的搭配有IgG-IgE-EOS、IgG-IgM中性粒细胞、IgE-IgM-巨噬细胞及IgE-血小板等。

ADC（杀伤的靶子在蠕虫主要是针对宿主体内发育过程中的幼虫阶段，如血吸虫的童虫、旋毛虫

新生幼虫、微丝蚴等，而对成虫作用不明显。

在原虫，ADC（作用来自巨噬细胞的活性氧产物。

EOS是一种高度特化的效应细胞，其细胞膜表面有IgG和IgE两种抗体的Fc受体（即FcyR、Fc£

R）,故可借这两种受体与结合于寄生虫的特

异性IgG和IgE结合，使EOS与虫体表面密切接触，脱颗粒，释放出其中的毒性蛋白如MBPECPEPO等对组织阶段蠕虫进行杀伤。

巨噬细胞往往在EOS损伤虫体的基础上才进一步发挥杀虫作用。

Capron（1992）报道，EPC在IgE依赖活性后被释放，ECP在IgG和IgA依赖的EOS舌性后被释放。

13.2.2.2CDCC人类EOS表面有C3bC3dC4受体。

当EOS与血吸虫童虫、补体在体外培育可杀死童虫；

用正常大白鼠血清与曼氏血吸虫童虫一起培养，EOS便粘附于虫体上，并在18小时内杀死绝大多数童虫。

Klei等（1992）发现正常血清介导的粘附可通过热灭活被消除，提示这种非特异的现象是补体介导的效应。

Ramalho等（1978）实验证实EOS通过C3介

导粘附于血吸虫童虫体表而杀死血吸虫童虫的能力，要比EOS通过抗体的Fc介导粘附于虫体体表而杀死童虫的能力大。

这种杀伤活性的增强可能是因补体激活所产生的趋化因子使更多的EOS占附于虫体表面之故;

因此认为EOS通过补体激活介导的粘附作用可能是宿主破坏血吸虫童虫

的主要机制。

一些趋化因子，如肥大细胞脱颗粒产生的组织胺、ECF桝及脂氧酶类产物（5-HETE、LTB）等可加强补体受体的作用。

13.223嗜酸性粒细胞的脱颗粒现象电镜观察EOS兑颗粒现象分3个阶段：

粘附由异特性抗体或补体介导EOS占附于虫体表面，其细胞变扁以增大接触面积，并见伪足形成。

脱颗粒和空泡形成粘附后，EOSt的类结晶颗粒移向细胞底部（与寄生虫接触部位），数个类结晶颗粒相融合而形成空泡。

其它类结晶颗粒继

续与空泡融合，而使空泡增大。

这种空泡可能是酶的激活场所。

EOS颗粒首先结合到空泡中，激活酶，然后空泡内容突到虫体表面。

分泌EOS颗粒的基质及髓质均释放到空泡中，基质中的EPC及髓质中的MBP入空泡，接着再分泌到寄生虫体表，使浓集而有力的毒性物质到达大的寄生虫体表。

电镜观察可见，最初见到的损伤是颗粒酶中的磷酯酶使富含脂质的外表皮破裂，接着出现皮层空泡。

13.2.2.4影响嗜酸性粒细胞细胞毒的因素

EOS的细胞毒作用受幼虫虫龄、EOS的激活与否、药物及循环抗原-抗体复合物的存在等因素的影响。

Ventiuriello等（1993,1995）研究人类EOS对旋毛虫新生幼虫的细胞毒活性，发现来自正常个体的EOS除粘附于NBLd在37r培养20小时的旋毛虫幼虫）外，还粘附于NBL（虫龄小于2小时的旋毛虫新生幼虫），但

杀死仅NBLo,而来自具EOS增多的感染者的EO列杀死各龄NBL推测

NBL成熟和EOS激活状态对ADC（是决定性的。

Klei（1992）研究也发现来自EOS性小马的EOS粘附寻常圆线虫第3期幼虫（L3），来自无寻常圆线虫感染的小马EOS在免疫血清存在情况下。

不能固定寻常圆线虫的L3,提示EOS在EOS动物体内的激活。

Mazza等（1991）实验鉴定来自肯尼亚感染曼氏血吸虫个体血清中衍生的EOS激活因子，发现几种血清因子，其中包括IL-5。

它们增加EOS表面CRa链的表达，推测感染血清中EOS激活因子的存在可能不仅对EOS毒性的提高有作用，而且对EOS表面受体的表达也是必要的。

Milbourne等（1993）研究发现，EOS在肝片形吸虫SEAg或IL?

存在条件下，其EPO舌性升高。

Medina-DelaGarza等（1990）研究发现乙胺嗪枸橼酸盐治疗可以提高盘尾丝虫病人EOS对微丝蚴的粘附率及固定率。

另外，在多种寄生虫感染中可测出循环抗原。

抗体复合物，

它可抑制EOS介导的对寄生虫幼虫的杀伤。

此现象解释为，EOS膜上的

Fc受体事先被复合物所阻断。

Glauert等（1985）体外实验中证实，牛EOS损伤肝片形吸虫童虫的部位必须是童虫体表的糖萼未与牛抗体形成絮状免疫复合物的部位，由此证明在有特异抗体存在情况下，EOS对肝片形吸虫的杀伤受这些保护膜的制约。

Camlona等（1993）体外实验发现，从肝片形吸虫成虫分泌或排泄产物提纯的组织蛋白酶L蛋白酶可以预防EOS对新脱囊幼虫的抗体介导的粘附作用，从而推断这一蛋白酶在免疫逃避中起重要作用。

13.3嗜酸性粒细胞对害生虫感染引起的I型变态反应的调节

13.3.1I型变态反应的机制

在寄生虫感染中，过敏反应是常见的，尤其是蠕虫感染，如钩虫、蛔虫感染后幼虫移行期出现的EOS性哮喘及苇麻疹；

棘球蚴囊液渗出引起的过敏反应；

海群生治疗杀死血中大量微丝蝴可引起血管神经性水肿、喉头水肿与过敏性休克等等。

过敏反应是由于寄生虫抗原刺激机体产生特异性IgE,IgE与肥大细胞及嗜碱性粒细胞表面的Fc£

R结合，当相同

的抗原再次进入机体与结合于细胞表面的特异性18E结合，引起肥大细胞和嗜碱性粒细胞脱颗粒，释放出组织胺、白三烯、血小板激活因子及

ecf-a等活性物质，作用于靶器官产生一系列过敏反应的症状。

介质中的组织胺、ECF-A等对EOS有趋化作用。

13.3.2嗜酸性粒细胞对I型变态反应的调节

I型变态反应释放的组织胺、白三烯及ECF-A等对EOS的趋化作用,吸引EOS至反应局部，EOS可释放组胺酶（histaminase）以灭活组织胺、释放芳基硫酸酯酶（aryl-sulfatase）灭活白三烯、释放磷酯酶

D（phospholipaseD）灭活血小板激活因子，释放前列腺素（ProstaglandinsE1，E2）抑制嗜碱性粒细胞脱颗粒。

另外EOS还可吞噬肥大细胞及嗜碱性粒细胞释放的颗粒及抗原-抗体复合物，尤其是IgE免疫复合物，从而有反馈抑制I型变态反应加剧的作用。

13.4嗜酸性粒细胞对宿主组织造成损伤

EOS具双重功能，一方面表现在寄生虫感染中对机体产生保护作用,

即吞噬小型寄生虫及免疫复合物、参与ADC（及CDCC调节I型变态反应,另一方面也参与寄生虫感染的病理过程。

近年来认识到，EOS在I型变态反应中，不仅能调节I型变态反应,对宿主有利,而且还是I型变态反应炎症的重要效应细胞,具有损伤作用。

在I型变态反应中，活化的肥大细胞产生纫胞因子如IL-5、肿瘤坏死因子（TNF）等，引起内皮细胞表达内皮细胞粘附分子-l（ELAM-1），同时IL-5使EOS增殖、成熟、分化并吸引EOS参与I型变态反应的延缓相反应。

在延缓相反应的渗出物中富含EOSEOS与表达ELAM-l的内皮结合，释放出大量的致炎因子如LTB、LTC和PAF及上皮毒性物质如MBPECP

是一种血中无微丝蚴的隐性丝

EPC和EDN对组织造成损伤。

如热带肺性嗜酸性粒细胞增多症（tropicalpul-monaryeosinophil,TPE）虫病，从病人体内分离出的EOS能自动释放过量氧自由基（O2-、1402）损伤肺实质，产生肺间质病变。

通过大量文献复习，近几年来国外报道虫、海异尖线虫、犬钩虫、犬弓首线虫、粪类圆线虫等感染可引起嗜酸性粒细胞性小肠结肠炎；

蓝氏贾第鞭毛虫感染引起EOS性腹膜炎；

罗阿丝虫、肝片形吸虫感染引起EOS性胸膜炎；

口腔毛滴虫异地发育、丝虫、犬弓首线虫感染引起EOS性肺炎；

犬弓首线虫、广州管圆线虫、旋毛虫、弓形虫感染引起脑膜-脑炎；

旋毛虫、丝虫感染引起心肌心内膜损伤；

棘颚口线虫感染引起EOS性脑脊髓炎；

墨西哥并殖吸虫感染引起心包炎等。

13.5细胞因子对嗜酸性粒细胞的作用

13.5.1IL-5

IL-5在蠕虫感染时介导选择性EOS增多中特别重要。

IL-5为45〜50kD二聚体糖蛋白，主要由激活的CD+表标志的Th2淋巴细胞分泌。

Yamaguchi等（1990）用Northernblot分析感染犬弓首线虫EOS鼠脾细胞在感染后第4、5天检测到一弱的mIL-5（鼠IL-5）mRNA,并在体外PCF扩增被确定;

Takarnoto等（1993）研究感染犬弓首线虫的无胸腺裸鼠（nu/nu）肺细胞也可产生IL-5，其杂合子代（nu/+）的肺细胞及脾细胞均产生IL-5;

Kusama等（1995）进一步研究发现感染犬弓首线虫第5天，IL-5mRNA在nu／+大鼠肺和脾细胞表达，在nu／nu大鼠肺细胞表达;

表明IL-5除了

CD+T细胞产生外，也可由鼠的肺细胞和脾细胞产生。

IL-5通过刺激增殖成熟母细胞的增殖而增加EOS前体数量，并促进EOS成熟和存活。

它是寄生虫引起的EOS增多的骨髓依赖期所需的基本调节分子，可引起骨髓、外周血及局部组织EOS增多。

抗IL-5单克隆抗体治疗，可显著抑制骨髓、外周血及组织中EOS增多。

其它细胞因子如IL-4、IL-2、IL-10可增强

IL-5的分泌。

Cheever等（1992、1993）先后对曼氏和日本血吸虫感染鼠用抗IL-2单克隆抗体治疗，抗1L-2单抗可抑制感染鼠脾细胞对抗原和有丝分裂原刺激反应中IL-5的产生，并抑制外周血和组织EOS增多；

另外，Shi等（1994）研究缺乏锌大鼠（Zn-）较锌供应充足的大鼠（Zn+）IL-4、

IL-5、

a-IFN（干扰素）等细胞因子产生减少，外周血EOS增多减轻。

感染线虫的小鼠实验表明，一系列不同的寄生虫产物包括全虫和（或）组织匀浆和蛋白水解酶可诱导与宿主免疫有关的IL-5的产生。

Strath等

（1992）研究IL-5转基因鼠感染Mesocestoidescorti后，在感染后的1〜4周尽管IL-5水平高，但EOS在骨髓、外周血和脾中数量降低，通过对培养中骨髓产生EOS能力的分析，发现EOS前体降低，推测存在一控制机制限制产生EOS的数量，这一控制机制好象作用于前体产物水平并可能与高的IL-5水平无直接关系。

这一实验提示存在一种能限制对IL-5产生反应的EOS增殖的调控机制；

运用IL-5单克隆抗体进一步评价IL-5在抗蠕虫感染中的作用，一系列实验指示，虽然IL-5在初次感染时对肠道寄生虫的排斥并非重要，但它可能通过改变粘膜的免疫而影响小肠EOS和IgA的合成，从而影响着寄生虫在小肠寄生的初步建立。

13.5.2巨噬细胞分泌的细胞因子

EL-cheika（1990,1991）研究发现曼氏血吸虫急性期由肉芽肿内CD4+T细胞分泌的11-5的活性占优势，而慢性期EOS全身性骨髓外供给是由局部肉芽肿和弥漫性炎症反应中动员的巨噬细胞介导EOS局灶性增生，巨噬细胞分泌的细胞因子与IL-5不同，IL-5引起EOS增殖和分化。

而此因子不引起EOS成熟，有效的抗鼠IL-5中和性单克隆抗体不能消除该因子的刺激活性；

Guesken等（1991）实验研究曼氏血吸虫慢性期EOS的外周增殖也是由存在于肉芽肿中的巨噬细胞分泌的一种细胞因子介导。

13.5.3TNF及IFN

Finkelman等（1991）报道在人体IFN-a可抑制EOS勺生长和分化,

IFN-a可用于治疗EOS增多的病人。

Uraban等（1993）用a-rIFN或y-ylFN

治疗可抑制接种巴西日圆线虫后外周血EOS增多的升高和肺血管周围组织EOS增多的强度。

13.6嗜酸性粒细胞增多症与寄生虫感染

一般认为外周血EOS绝对计数超过0.5X1O9/L为EOS增多症。

夕卜周血和损伤处EOS增多是许多寄生虫病尤其是蠕虫感染的特征性征象。

那些侵袭宿主组织的寄生虫通常引起高度EOS增多。

因此动物传染病性寄生虫如领口线虫属、并殖吸虫属和管圆线虫属的种类等由于持久的幼虫移行引起持续的高度EOS反应；

那些在宿主体内由发育阶段短暂移行的寄

生虫引起短暂的EOS增多，如线虫引起的Loeffler'

s综合征；

慢性EOS

增多见于持续的组织炎症反应，如旋毛虫病和血吸虫病。

此外，丝虫感染、鞭虫感染、猪囊虫病、猪带绦虫病、牛带绦虫病、肺吸虫病、肝片形吸虫病及姜片虫病等均出现EOS增多症；

相反那些生活在肺组织但并不侵犯组织的寄生虫可能不引起嗜酸性粒细胞增多；

那些即使在组织中寄生而能成囊的寄生虫，它所引起的EOS反应是可变的。

如猪带绦虫感染早期常观察到EOS增多症，而慢性的猪囊虫病284例中仅10%的病人有轻度的EOS增多。

棘球蚴病人约I/3EOS绝对计数在0.5X1O9/L以上,这种EOS增多是由于棘球蚴囊液缓慢渗出之故，当囊破裂时则出现严重的EOS增多。

内脏幼虫移行的幼虫（如ToxocaraCanis或T.Cati）定居于眼球中时，常可不发生EOS增多。

因此对EOS增多症的病人，作一般的寄生虫病原学或免疫学检查，其诊断价值既是明确的，也是有限的，

而且即使不能找到寄生虫卵或寄生虫，也不能排除寄生虫作为EOS增多

的病因。

蠕虫感染容易引起EOS增多的机制，主要是寄生虫长期与宿主组织接触而不断释放出抗原物质，大多数寄生蠕虫的寄生部位是富含肥大细胞

和EOS的环境，如肠粘膜、肺部等，这些部位也是IgE抗体产生较多的部位，从而诱发I型变态反应，由于各种置ECF的释放，使EOS在局部和（或）血液循环中增多。

另外也可由于激活的补体或迟发型变态反应以及虫体本身对EOS产生趋化作用之故。

因此推想，在通常情况下，可能是这些因素中的某几个或全部综合作用的结果。

一般来说，原虫感染时EOS增多是不典型的。

Davis等（1991）报道,人感染恶性疟原虫后EOS数呈双相性变化，与对照组比，急性期EOS减

少，且持续到退热和原虫血症消失，治疗后恢复期EOS增高，一月时达高峰。

卡氏肺抱子虫感染可引起EOS增多。

阿米巴病人粪便中可查到夏科雷登氏结晶。