《DNA的粗提取与鉴定》实验教学设计文档格式.doc

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要求

掌握DNA提取和鉴定的原理和实验操作

教

学

目

标

知识与能力

能够说出DNA的提取、纯化与鉴定的实验原理

过程与方法

通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力

情感、态度与价值观

通过实验的学习，让学生了解到生物世界的奥秘

教学

重点

提取和鉴定DNA的原理与实验操作

难点

提取和鉴定DNA的实验原理与实验操作

方法

讲授法、小组合作法、边讲边练

教学程序设计

过

程

及

方

法

环节一明标自学

过程设计

二次备课

【学习目标】

1、能够说出DNA的提取、纯化与鉴定的实验原理

2、通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力

3、通过实验的学习，让学生了解到生物世界的奥秘

【新课导入】

【自学指导】

根据《导学案》自主阅读选修一内容，归纳提取DNA的原理

1、实验原理

【自学效果展示】

一、DNA的提取

1、提取DNA的原理：

1）、DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。

当NaCl的物质的量浓度为0.14mol／L时,DNA的溶解度最低。

利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

2）、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。

利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。

鉴定DNA的原理：

DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。

2、实验过程：

师生共同学习

以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取

鸡血细胞做实验材料的原因

①鸡血细胞核的DNA含量丰富，材料易得

②鸡血细胞极易吸水胀破，而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心，对设备要求较高，操作繁琐，历时较长

①柠檬酸钠作用及作用机理

防止血液凝固。

柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应，生成柠檬酸钙络合物，血浆中游离的Ca2+大大减少，血液就不会凝固

②注意事项

鸡血细胞破碎以后释放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，所以在提取过程中为了减少DNA的损失，最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液

讨论：

提取鸡血中的DNA时，为什么除去血液中的上清液？

答：

血液分为两部分，一部分是血浆，一部分是血细胞，离心后除去的上清液是血浆

3、过程（结合导学案边做边学）

①提取鸡血细胞的细胞核物质

②溶解细胞核内的DNA

【合作释疑一】

（1）为什么要加入蒸馏水？

加入蒸馏水后细胞会有什么变化？

让细胞内浓度大于周围溶液的浓度，细胞会吸水以至胀破

（2）用玻璃棒搅拌有什么意义？

用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。

注意应沿一个方向快速搅拌，但也不能太快太猛，防止打碎DNA

（3）滤去的是什么物质？

得到的是什么？

过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质；

得到的是与蛋白质等物质结合在一起的DNA

③析出含DNA的粘稠物

④滤取含DNA的粘稠物

⑤将DNA的粘稠物再溶解

⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液

⑦提取含杂质较少的DNA

【合作释疑二】

（1）为什么要加50mL的冷酒精？

因为DNA不溶于冷酒精，而其他物质可以溶解在酒精中，使含杂质较少的DNA丝状物可以析出,悬浮于溶液中

（2）观察丝状物呈什么颜色？

白色

环节二合作释疑环节三点拨拓展

二、DNA的鉴定

【讨论：

】

（1）比较两个试管中溶液的颜色有什么不同？

有丝状物的试管变成蓝色，另一试管还是原来颜色

（2）这一鉴定结果说明什么问题？

提取出的丝状物是DNA

（3）DNA的直径约为20×

10-10m，实验中出现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的大小？

DNA分子直径只有2nm。

丝状物是多个DNA子聚在一起形成的

【点拨拓展：

（1）此实验过程中有几次使用蒸馏水？

几次过滤，几次析出，几次搅拌？

分别在哪一步？

整个实验共“两次蒸馏水，三次过滤，两次析出，六次搅拌”

①两次蒸馏水

第一次：

细胞吸水胀破第一步

第二次：

使DNA黏稠物析出第三步

②三次过滤

DNA存在于滤液里第一步

DNA被留在纱布上第四步

第三次：

DNA存在于滤液里第六步

过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关，第二次要用其滤出的黏稠物有关，所以要使用多层纱布，第一次和第三次均要用其滤液，使用的纱布为1－2层

③两次析出

用0.14mol／L的NaCI溶液含杂质多第三步

用冷却的95％的第七步

④六次搅拌：

第一、二、三、五、七步

其中除第八步外，其余均要朝一个方向搅拌，在第三、五步搅动还要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，这样才能保证得到完整的DNA

（2）为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？

用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；

用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。

因此，通过反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质

达标检测评价指南3

过程

环节四检测

1、为什么要加入蒸馏水？

2、为什么要加50mL的冷酒精？

3、为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？

课堂

小结

提取DNA的实验中实验原理、实验材料以及实验的注意事项是重点，要求大家必须掌握在操作中多次用到玻璃棒以及搅拌、加蒸馏水的目的。

除此之外

课后

作业

导与练习P52-53课堂练习

板

书

设

计

4.1.2提取和鉴定DNA

一、提取DNA

1、原理2、步骤3、注意事项

二、鉴定DNA

1、原理2、现象

课

后

反

思

4