基因工程复习文档格式.doc

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3、寄主控制的限制与修饰现象由两种酶活性配合完成的，一种叫内切酶，另一种叫修饰酶。

4、反转录酶来自AMV或Mu－MLV，即依赖于RNA的DNA聚合酶，它有聚合酶活性，但无外切酶活性。

5、末端转移酶来源于小牛胸腺，是存在于前淋巴细胞及分化早期的类淋巴样细胞内的一种不寻常的DNA聚合酶，在二价阳离子存在下，末端转移酶催化dNTP加于DNA分子的3'

羟基端。

得分

三、选择题（每小题1.5分，共15分）

1、迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于（C）。

A、既可以作用于双链DNA，又可以作用于单链DNA；

B、只能作用于单链DNA；

C、只能作用于双链DNA；

D、只能作用于RNA。

2、下列哪一种酶作用时需要引物（B）。

A、末端转移酶；

B、反转录酶；

C、DNA连接酶；

D、限制酶。

3、DNA被某种酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散，下列原因中，哪一项不太可能（D）。

A、蛋白质（如BSA）同DNA结合；

B、有外切核酸酶污染；

C、酶失活；

D、酶切条件不适合。

4、以下各项中不是PCR反应所必须的是（D）。

A、模板和引物；

B、dNTP；

C、Taq酶和buffer；

D、甘油。

5、关于PCR技术的叙述，下列哪项是错误的？

（B）

A、以DNA复制为基础而建立起来的技术；

B、利用PCR技术可完全无误地扩增基因；

C、反应体系需模板、一对引物、4种dNTP、耐热DNA聚合酶和缓冲溶液；

D、以变性-退火-延伸为一周期。

6、以下不是表达载体所必须的条件是（C）。

A、必须具备很强的启动子；

B、必须具备很强的终止子；

C、启动子需要受控制；

D、所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号。

7、以下不属于核酸探针的是（D）。

A、RNA探针；

B、基因组探针；

C、cDNA探针；

D、抗体。

8、关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确（B）。

A、在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点；

B、在不同的宿主中具有不同的复制机制；

C、在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶；

D、在不同的宿主中具有不同的复制速率。

9、从细胞或组织中分离DNA时常用蔗糖的作用是（C）。

A、抑制核酸酶的活性；

B、加速蛋白质的变性；

C、保护DNA，防止断裂；

D、有利于细胞破碎。

10、氯霉素的工作原理为（D）。

A、可以抑制细胞壁肽聚糖的合成；

B、可以与核糖体30S亚基结合并抑制蛋白质合成；

C、可以抑制核糖体的转位；

D、可以与核糖50S亚基结合并抑制蛋白质合成。

1、限制性内切核酸酶可以特异性地识别（C）。

A、特定的三联密码；

B、双链DNA的特定碱基对；

C、双链DNA的特定碱基序列；

D、单链DNA的特定碱基序列。

2、在切口平移方法标记DNA探针时只能使用（B）。

A、Klenow酶；

B、DNA聚合酶Ⅰ；

C、DNA聚合酶Ⅱ；

D、DNA聚合酶Ⅲ。

3、在下列进行DNA部分酶切的条件中，控制哪一项最好（C）。

A、反应体积；

B、酶反应温度；

C、反应时间；

D、酶量。

4、PCR扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（B）。

A、退火温度过低；

B、退火温度过高；

C、dNTP浓度过高；

D、循环次数过多。

5、以下不属于PCR的应用的为（D）。

A、随机扩增多态性DNA（RAPD）；

B、扩增片段长度多态性（AFLP）；

C、RACE；

D、S1酶作图。

6、pUC18与pUC19的区别在于（B）。

A、二者的选择标记不同；

B、二者的多克隆位点方向相反；

C、pUC18无lacZ基因；

D、pUC19无lacZ基因。

7、有关DNA序列自动化测定的不正确叙述是（D）。

A、用荧光代替了同位素标记；

B、激光扫描分析代替人工读序基；

C、本原理与手工测序相同；

D、不再需要引物。

8、下列哪一项不是质粒载体必备的基本特征（D）。

A、可以独立复制；

B、有选择标记；

C、有多克隆位点；

D、含lacZ。

9、在分离DNA过程造成DNA分子断裂的因素很多，下列说法中哪一项是不正确的（C）。

A、核酸酶的降解；

B、化学降解；

C、保存液中未加一滴氯仿；

D、物理剪切。

10、氨苄青霉素的工作原理为（A）。

B、可以与核糖体30S亚基结合并抑制蛋白质合成；

D、可以与核糖50S亚基结合并抑制蛋白质合成。

1、星活性：

高浓度的酶、高浓度的甘油、低离子强度、极端pH值等，会使一些核酸内切酶的识别和切割序列发生低特异性，即Staractivity现象。

2、插入型载体：

只具有一个可供外源DNA插入的克隆位点。

3、反转录PCR：

在逆转录酶的作用下、以mRNA为模板合成互补的cDNA，再以cDNA为模板进行PCR反应。

4、感受态：

受体细胞经过一些特殊方法（如：

CaCl2，RuCl等化学试剂法）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许多有外源DNA的载体分子通过的感受态细胞。

5、考斯质粒：

考斯质粒是一类人工构建的含有l-DNAcos序列和质粒复制子的特殊类型的载体

6、Klenow片段：

用枯草杆菌蛋白酶处理大肠杆菌DNA聚合酶I可以切掉N端的5’®

3’外切酶活性部分，就成为Klenowfragment。

7、置换型载体：

两个多克隆位点区以反向重复形式分别位于lDNA的非必须区两端，用酶切后，可以将中间的区段切下来，与用同样酶切成的外源DNA片断置换。

8、引物：

人工合成的单链DNA小片断，碱基顺序分别与所要扩增的模板DNA双链的5‘端相同。

9、转化：

大肠杆菌捕获质粒DNA的过程。

10、噬菌粒：

噬菌粒是一类人工构建的含有单链噬菌体包装序列、复制子以及质粒复制子、克隆位点、标记基因的特殊类型的载体。