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D.10〜30%

E.60〜80%

10.做PCR引物设计时应注意()

引物扩增跨度以50〜80bp为宜B.两条引物间可以互补

避免引物内部出现二级结构D.允许5个以上

G成串排列E.以上均可

11.在

PCR反应中酶的浓度过高可引起()

高纯度产物

B.反应时间缩短

C.反应时间延长

产物量过高

E.非特异性扩增

12.在

PCR反应中酶的浓度过低可引起()

产物量减少

B.反应时间缩短

C.反应时间延长

E.非特异性扩增

13.在PCR反应中,dNTP应为()

A.5〜20mol/L

B.0.5〜21mol/L

C.500〜20001mol/L

D.50〜2001mol/L

E.0.05〜0.21mol/L

14.在PCR反应中,4种dNTP的浓度()

A.相等

B.A+T>

G+C

C.G+C>

A+T

D.A+T>

E.A+G>

T+C

15.关于PCR模板的制备,下列叙述错误的是(

A.用SDS破坏细胞膜,沉淀蛋白质

用蛋白酶K水解消化组蛋白

C.用乙醇提掉蛋白质和其它细胞组份D.

难以破碎的细菌,可用溶菌酶加EDTA

处理

E.RNA模板提取一般采用异硫氰酸胍或蛋白酶K法

16.对PCR扩增的特异性和产量有显著的影响的离子是(

A.Ca2+

B.Cu

17.在PCR反应中,如果

C.Mg

Mg2+浓度过高会造成()

D.Zn2+

E.Fe2+

反应特异性降低

反应特异性增高

反应时间缩短

反应时间延长

反应产物减少

18.PCR

反应的基本步骤包括(

退火--变性--延伸

B.变性--延伸--退火

C.退火--延伸--变

变性--退火--延伸

E.延伸--变性--退火

19.在

PCR反应中,

模板DNA的变性温度大致为()

A.90〜95C

B.80〜85CC.95〜100CD.85

90CE.80〜100C

20.在PCR反应中,

每完成一个循环需要()

 

21.在PCR反应中,退火温度多为(

A.20〜30CB.30〜50C

40〜50CD.40〜60CE.60〜70C

22.PCR反应约需多长时间能将目的基因扩增放大几百万倍(

A.1〜1.5h

B.1〜2h

C.2〜3h

D.3〜4h

E.4

5h

23.下列计算Tm值的公式,哪个是正确的()

A.Tm值=4(G+C)+2(A+T)

B.Tm值=4(A+T)

+2(G+C)

C.Tm

值=4(G+A)+

2(C+T)

D.Tm值=4(C+T)+2(G+A)

24.下列计算复性温度值的公式,

E.以上都不正确

哪个是正确的(

复性温度=Tm值-(1〜5C)

B.复性温度=Tm值-(10

15C)

复性温度=Tm值-(1〜15C)

D.复性温度=Tm值-(5〜10C)

E.以上都不正

25.在

PCR反应中,复性时间一般为(

A.3〜6sec

B.3〜6min

C.30〜60sec

D.30〜60min

E.1〜3min

26.PCR反应的延伸温度一般选择在(

A.50〜65C之间

B.60

85C之间

C.70〜75C之间

D.30〜45C之间

E.80

27.做PCR反应时,一般循环次数选在()

A.10〜20次

B.30〜40次C.20〜30次

D.40〜50次

E.50〜60

28.下列哪些方法可以用于PCR反应产物的检测()

酶联免疫吸附试验

B.荧光素染色凝胶电泳

C.纸层析法

凝胶过滤层析法

E.离子交换层析法

29.PCR

反应产物的生成量以何种方式增加()

指数

B.几何

对数

D.倍数

E.以上都不对

30.下列关于质粒的叙述错误的是

A.是染色体上的一段DNA

B.多为双链分子

C.多为闭合环状分子

D.以超螺旋状态存在

是染色体外的遗传单位

31.下列关于质粒的叙述正确的是(

A.主要发现于病毒中

不能

自我复制

C.不能转录

D.不能表达

E.能在子代细胞中保持恒定的拷贝数

32.下列关于碱变性法提取质粒DNA实验原理的叙述正确的是()

pH值高达

12.6

的碱性环境中,染色体的线性DNA的二硫键断裂

9.6

的碱性环境中,染色体的线性DNA的氢键断裂

10.6

的碱性环境中,

染色体的线性RNA的氢键断裂

染色体的线性DNA的氢键断裂

33.

34.

35.

下列关于碱变性法提取质粒DNA实验原理的叙述正确的是()

染色体的线性DNA的离子键断裂

碱变性处理后,

以上说法都正确

染色体DNA双链完全分离,质粒DNA双链不完全分离

染色体DNA双链不完全分离,质粒DNA双链完全分离

染色体和质粒DNA双链均完全分离

染色体和质粒DNA双链均不完全分离

下列关于碱变性法提取质粒DNA实验的叙述正确的是()

经碱及乙酸钾处理后,

染色体

DNA和质粒DNA均不能复性

DNA和质粒DNA均能复性

在碱变性法提取质粒DNA实验中,

DNA复性,而质粒DNA不能复性

DNA不能复性,而质粒DNA能复性

pH4.8的KAc和HAc的作用是()

A.使染色体DNA双链变性B.

使质粒DNA双链变性

C.使染色体DNA双链

复性

D.使质粒DNA双链复性

36.用碱裂解法提取质粒时,加入溶液

将反应体系的pH值调节至酸性

n(LB)后裂解时间不应超过多长时间()

A.10min

B.20min

C.5min

D.30s

E.15min

37.用碱裂解法提取质粒时,加入溶液n(LB)和溶液川(NB)后剧烈震荡混匀()

A.可能把基因组DNA剪切成碎片从而混杂在质粒中

B.破坏细胞器

C.破坏蛋白质D.破坏RNAE.没有什么影响

38.用碱裂解法提取质粒时,溶液1(RB)、n(LB)、川(NB)处理并离心后溶液应为

39.

提取质粒时使用过多菌体培养液,

会导致()

40.

41.

A.使提取操作更容易

D.提取质粒纯度增高

质粒得率增加

以上说法均不正确

提取质粒时,最好选在细菌的什么生长期时提取(

A.迟缓期

B.对数期

C.稳定期

在碱裂解法提取质粒实验中,关于溶液I的作用,

A.裂解细菌

B.使细菌沉淀

C.菌体裂解不充分

衰退期

E.任何时期

下列说法正确的是()

C.使基因组DNA裂解

D.使细菌沉淀完全分散E.溶解质粒DNA

42.

在碱裂解法提取质粒实验中,关于溶液n的作用,

B.使细菌沉淀

C.使RNA裂解

D.使细菌沉淀完全分散

E.使质粒DNA复性

43.

在碱裂解法提取质粒实验中,溶液

(LB)的pH值接近()

44.

A.3-4

B.5-6

C.7-8

D.9-10

E.12-13

在碱裂解法提取质粒实验中,

溶液

LB)的主要成分是()

A.NaOH、RNaseA

B.RnaseA、冰HAC

C.冰HAC、KAC

D.NaOH、SDS

E.RnaseA、KAC

45.

下列哪些原因可造成质粒得率过小()

A.细菌培养时间不够

B.细菌沉淀重悬于溶液I时,没有完全分散

C.加溶液n后,裂解得不充分

D.各种液体放置时间过长而失效

E.上述原因均有可能

46.

在碱裂解法提取质粒实验中,需要剧烈震荡混匀的步骤是()

A.加入溶液I(RB)后B.加入溶液n(LB)后C.加入溶液川(NB)后

D.各步骤均不需要

E.各步骤均需要

47.下列关于琼脂糖凝胶电泳的说法正确的有()

A.分离、纯化、鉴定DNA片段的常用方法B.用琼脂糖作支持介质的一种电泳方

C.具有简便、快速的优点

是免疫学的核心技术之

E.以上说法都不对

48.琼脂糖凝胶电泳兼有哪两种作用(

A.“载体”和“电泳”

分子筛”和“载体”

C.“扩增”和“电泳”

49.

在常规的电泳缓冲液中

pH约8.5)()

核酸分子带正电荷,

在电场中向正极移动

核酸分子带负电荷,

在电场中向负极移动

以上说法都不正确

50.

核酸分子在琼脂糖凝胶中泳动时,

下列说法正确的是(

具有载体效应和分子筛效应,

但主要为分子筛效应

但主要为载体效应

具有电荷效应和分子筛效应,

但主要为电荷效应

51.

A.分子越大,迁移得越慢

B.分子越小,

迁移得越慢

C.无论分子大小,迁移速率均慢

D.无论分子大小,迁移速率均快

52.

超螺旋环状DNA>

线状DNA>

切口环状

DNA

线状DNA>

超螺旋环状DNA>

切口环状

切口环状DNA>

线状DNA>

超螺旋环状

切口环状DNA>

切口环状DNA>

超螺旋环状DNA>

线状

E.以上说法都不对在琼脂糖凝胶中泳动时,同分子量不同构象的核酸分子迁移率不同,下列说法正确的

53.

A.DNA分子越小,迁移得越慢

B.DNA分子的构象不影响迁移率

在琼脂糖凝胶电泳中,关于核酸分子迁移率的影响因素下列说法正确的是()

C.采用不同浓度的琼脂糖可以区分不同大小范围的DNA分子

D.在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成反比

E.用蒸馏水配制凝胶一样可以进行电泳

54.

做琼脂糖凝胶电泳时误用蒸馏水配制凝胶,DNA几乎不移动,这与下列哪个因素有关

A.DNA分子大小

B.DNA分子构象C.琼脂糖浓度D.电源电压

E.电泳缓冲液的离子强度

55.

做琼脂糖凝胶电泳时,下列关于上样缓冲液的叙述错误的是()

增加样品密度

B.临上样之前混合上样缓冲液和样品

使样品带有颜色从而使操作者易于上样

其中含有荧光染料,可与样品DNA结合显色

其中的染料颜色使操作者易于观察电泳速率及进度

56.

下列哪些不是琼脂糖凝胶电泳中需要用到的仪器()

A.水平式凝胶电泳槽

B.微波炉

C.微量移液器

57.

58.

59.

60.

61.

62.

63.

64.

D.紫外分光光度计

E.电泳仪

做琼脂糖凝胶电泳后,DNAMARKEF条带扭曲可能是下列哪项原因造成的()

A.电泳时电压过高B.加样量过小C.琼脂糖浓度过低D.EB过量

E.电泳缓冲液过量

琼脂糖凝胶电泳常用的电泳缓冲液包括()

A.Tris

B.EDTA

C.TAE

D.PBS

E.LB

琼制糖凝胶电泳时,DNA上样量过高会导致(

A.DNA带型格外清晰

D.核酸跑出胶外

B.DNA条带明显但带型模糊

E.琼脂糖融化

琼制糖凝胶电泳时,DNA上样量过低会导致()

A.条带信号弱甚至缺失

B.DNA条带明显但带型模糊

出现杂带

C.出现杂带

在琼制糖凝胶电泳中,

点样时需要向样品中加入()

A.EDTA

B.TAE

C.PBS

E.TBE

在琼脂糖凝胶电泳中,

loadingbuffer

D.loadingbuffer

中溴酚兰的主要作用是(

A.沉淀剂

B.DNA

染色剂

缓冲剂

D.固定剂

前沿指示剂

中蔗糖或甘油的主要作用是

在琼制糖凝胶电泳时,

下列正确的电源接通方法是()

A.红色—正极;

黑色—负极

B.红色—负极;

黑色—正极

C.蓝色—正极;

D.黑色—正极;

蓝色—负极

65.

在琼制糖凝胶电泳时,电泳缓冲液没过凝胶多少为宜(

66.

67.

68.

69.

70.

71.

A.5mm

B.4mm

C.3mm

D.2mm

E.1mm

下列关于真核生物DNA的叙述正确的是

A.位于细胞核内,是双链线性分子

C.位于细胞核内,是单链线性分子

E.位于细胞质内,是单链环状分子

位于细胞质内,

提取真核生物的基因组DNA,使蛋白质变性的是(

A.蛋白酶A和SDS

D.蛋白酶K和SES

是双链线性分子

是双链环状分子

B.蛋白酶K和SDS

E.以上都不对

提取真核生物基因组DNA中,不需要用到下列哪种仪器

A.酶标仪B.高速离心机C.恒温水浴箱D.

在提取真核生物基因组DNA的操作中,加入蛋白酶K和

A.破碎细胞而不破坏基因组DNA的完整性

C.可以除去部分蛋白

蛋白酶A和SES

紫外分光光度计E.匀浆

SDS不具有哪些作用()

B.除去质粒DNA

D.使核蛋白体从DNA上解离

E.变性Dnase

下列关于紫外吸收测定法的说法错误的是(

A.DNA

C.DNA

E.DNA

280nm

230nm

260nm

240nm

处有最大的吸收峰,

提取真核生物基因组DNA后,

A.A

C.A

E.A

值为

72.DNA纯品的

A.1.2

蛋白质在

蛋白质在

相当于大约

50

70

90

处有最大的吸收峰

用紫外吸收法测定基因组DNA含量,下列说法正确的是

g/ml

A260/A280比值为(

B.1.8

双链

C.1.4

B.A

D.A

1相当于大约60卩g/ml双

1相当于大约80卩g/ml双

D.2.0

E.1.6

73.下列关于用紫外分光光度法测定DNA纯度的叙述,错误的是(

A.DNA在260nm处有最大的吸收峰

B.DNA纯品的A260/A280比值为1.8

D.A260/A280比值高说明含有RNA

C.根据A260/A280比值可以估算DNA的结构

E.A260/A280比值较低说明有残余蛋白74.下列关于SDS-PAGE的正确解释是()

A.SDS琼脂糖凝胶电泳B.SDS聚合酶链反应C.SDS离子交换层析技术

D.SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳E.SDS凝胶过滤层析技术75.下列关于SDS的正确说法是

十二烷基盐酸钠

十二烷基硫酸钠

十二烷基磺酸钠

十二烷基硝酸钠

十二烷基醋酸钠

76.在

SDS-PAGE中,

向样品中加入还原剂的作用是(

打开氢键

B.破坏蛋白分子的一级结构

C.打开二硫键

打开离子键

E.打开肽键

77.在

SDS的作用是()

阳离子去污剂B.阴离子增稠剂

C.阳离子增稠剂D.阴离子催化剂

78.在

阳离子去污剂和强还原剂

阳离子洗涤剂和强还原剂

阴离子去污剂和强氧化剂

阳离子去污剂和强氧化剂

阴离子洗涤剂和强还原剂

阴离子去污剂

SDS-PAGE中,待测样品中需要加入(

79.在

分子量的大小B.所带电荷的多少

三级结构空间构象D.A+B

A+C

80.在

PAGE中,

凝胶由哪两种物质聚合而成(

A.Aer+Bis

B.Acr+Bis

C.Acr+Bos

D.Aer+Bos

E.Bcr+Ais

81.在SDS-PAGE

中,催化凝胶聚合常用化学聚合法,起催化作用的是()

A.AB+TEMED

B.AP+TIMED

C.AP+TEMED

D.EIP+TEMID

E.AIP+TEMID

SDS-PAGE中,蛋白质亚基的电泳迁移率主要取决于()

82.SDS-PAGE可以用于测定蛋白质的

A.分子构型

B.分子侧链

C.分子电荷

D.分子氨基酸构成

分子量

83.在SDS-PAGE中,制胶缓冲液使用的是()

A.Tris—HCL缓冲系统

B.Tris—HNO缓冲系统

C.Tris-甘氨酸缓冲系

D.Tris—H2SO4缓冲系统

E.Tris

-Tween缓冲系统

84.在SDS-PAGE中,电极缓冲液使用的是

A.Tris—HCL系统

B.Tris

-甘氨酸缓冲系统

C.Tris-酪氨酸缓冲

系统

-HNO3缓冲系统

85.在SDS-PAGE中,下列关于浓缩胶的叙述错误的是()

A.pH环境呈弱酸性B.甘氨酸解离很少C.电场的作用下,Cl-泳动最慢

D.电压梯度较高

E.蛋白质分子浓缩为一狭窄的区带

86.在SDS-PAGE中,下列关于分离胶的叙述错误的是

A.pH环境呈碱性

甘氨酸大量解离

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