高中生物实验总结模板文档格式.docx

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还原糖+斐林试剂～砖红色沉淀（水浴加热）

脂肪+苏丹III～橘黄色（滴液观察或制片显微镜观察）

脂肪+苏丹IV～红色

蛋白质+双缩脲试剂～紫色反应（不加热）

1、还原糖的检测

（1）材料的选取：

还原糖含量高，白色或近于白色，如：

苹果，梨，白萝卜。

（2）试剂：

斐林试剂（甲液：

0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：

0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。

（3）步骤：

取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（白色→浅蓝色→砖红色）

操作方法

注意问题

解释

1.制备组织样液。

（去皮、切块、研磨、过滤）

苹果或梨组织液必须临时制备。

因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。

2.取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。

3.向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。

应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存，使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；

切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。

斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu（OH）2在70~900C下分解成黑色CuO和水；

甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无CuOH生成。

4.试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，观察到溶液颜色：

浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）

最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。

也可用酒精灯对试管直接加热。

防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤；

缩短实验时间。

★模拟尿糖的检测

1、取样：

正常人的尿液和糖尿病患者的尿液

2、检测方法：

斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂或尿糖试纸

3、结果：

试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。

4、分析：

因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。

2、脂肪的检测

含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。

（2）步骤：

制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央

↓

染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精）

制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片）

镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒）

花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。

干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间可缩短。

因为浸泡时间短，不易切片；

浸泡时间过长，组织较软，切片不易成形。

切片要尽可能薄些，便于观察。

在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。

染色时间不宜过长。

用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，吸去酒精。

酒精用于洗去浮色，不洗去浮色，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。

同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。

用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴蒸馏水，盖上盖玻片。

滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。

低倍镜下找到花生子叶薄片的最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。

装片不宜久放。

时间一长，油滴会溶解在乙醇中。

3、蛋白质的检测

（1）试剂：

双缩脲试剂（A液：

0.1g/mL的NaOH溶液，B液：

0.01g/mL的CuSO4溶液）

试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察

制备组织样液。

（浸泡、去皮研磨、过滤。

）

黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。

鉴定。

加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；

再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。

A液和B液也要分开配制，储存。

鉴定时先加A液后加B液。

CuSO4溶液不能多加。

先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。

A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu（OH）2沉淀，而失效。

否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。

可用蛋清代替豆浆。

蛋清要先稀释。

如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。

附：

淀粉的检测和观察

用试管取2ml待测组织样液，向试管内滴加2滴碘液，观察颜色变化。

碘液不要滴太多

以免影响颜色观察

4、考点提示：

（1）常见还原性糖与非还原性糖有哪些？

葡萄糖、果糖、麦芽糖都是还原性糖；

淀粉、蔗糖、纤维素都是非还原

（2）还原性糖植物组织取材条件？

含糖量较高、颜色为白色或近于白色，如：

苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜等。

（3）研磨中为何要加石英砂？

不加石英砂对实验有何影响？

是为了使研磨更充分。

不加石英砂会使组织样液中还原性糖减少，使鉴定时溶液颜色变化不明显。

（4）斐林试剂甲、乙两液的使用方法？

混合的目的？

为何要现混现用？

斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成酒石酸络铜离子，酒石酸络铜离子和可溶性还原糖在加热条件下反应产生砖红色沉淀。

斐林试剂甲和斐林试剂乙混合后会因酒石酸有一定的还原性而自发地缓慢产生氧化亚铜沉淀，而氧化亚铜是砖红色沉淀，这就会给实验带来误解。

因此斐林试剂一般为现用现配。

（5）还原性糖中加入斐林试剂后，溶液颜色变化的顺序为：

浅蓝色棕色砖红色

（6）花生种子切片为何要薄？

只有很薄的切片，才能透光，而用于显微镜的观察。

（7）转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？

切片不均匀。

（8）脂肪鉴定中乙醇作用？

洗去浮色。

（9）双缩脲试剂A、B两液是否混合后用？

先加A液的目的。

怎样通过对比看颜色变化？

不能混合；

先加A液的目的是使溶液呈碱性；

先留出一些大豆组织样液做对比。

实验三观察叶绿体和细胞质流动

1、材料：

新鲜藓类叶、黑藻叶或菠菜叶，口腔上皮细胞临时装片

2、原理：

叶绿体在显微镜下观察，绿色,球形或椭球形。

用健那绿染液染色后的口腔上皮细胞中线粒体成蓝绿色,细胞质接近无色。

知识概要：

取材制片低倍观察高倍观察

考点提示：

（1）为什么可直接取用藓类的小叶，而不能直接取用菠菜叶？

因为藓类的小叶很薄，只有一层细胞组成，而菠菜叶由很多层细胞构成。

（2）取用菠菜叶的下表皮时，为何要稍带些叶肉？

表皮细胞除保卫细胞外，一般不含叶绿体，而叶肉细胞含较多的叶绿体。

（3）怎样加快黑藻细胞质的流动速度？

最适温度是多少？

进行光照、提高水温、切伤部分叶片；

25℃左右。

（4）对黑藻什么部位的细胞观察，所观察到的细胞质流动的现象最明显？

叶脉附近的细胞。

（5）若视野中某细胞中细胞质的流动方向为顺时针，则在装片中该细胞的细胞质的实际流动方向是怎样的？

仍为顺时针。

（6）是否一般细胞的细胞质不流动，只有黑藻等少数植物的细胞质才流动？

否，活细胞的细胞质都是流动的。

（7）若观察植物根毛细胞细胞质的流动，则对显微镜的视野亮度应如何调节？

视野应适当调暗一些，可用反光镜的平面镜来采光或缩小光圈。

（8）在强光照射下，叶绿体的向光面有何变化？

叶绿体的受光面积较小有一面面向光源。

实验四、观察有丝分裂

洋葱根尖（葱，蒜）

2、步骤：

（一）洋葱根尖的培养

（二）装片的制作

3、实验原理：

（1）龙胆紫溶液能将染色体染成深色

（2）有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同，可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于那个时期。

制作流程：

解离→漂洗→染色→制片

1.解离:

药液:

质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精（1:

1混合液）.

时间:

3~5min.目的:

使组织中的细胞相互分离开来.

2.漂洗:

用清水漂洗约10min.目的:

洗去药液,防止解离过度,并有利于染色.

3.染色:

用质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）染色3~5min

目的:

使染色体着色,利于观察.

4.制片:

将根尖放在载玻片上,加一滴清水,并用镊子把根尖弄碎,盖上盖玻片,在盖玻片上再加一片载玻片.然后用拇指轻轻地按压载玻片.目的:

使细胞分散开来,有利于观察.

过程

方法

时间

目的

解离

上午10时至下午2时，剪去洋葱根尖2-3mm，立即放入盛入有盐酸和酒精混合液（1：

1）的玻璃皿中，在温室下解离。

3-5min

用药液使组织中的细胞相互分离开来

漂洗

待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。

约10min

洗去药液，防止解离过度

染色

把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色。

染料能使染色体着色。

制片

用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把根尖能碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。

然后，用拇指轻轻的按压载玻片。

使细胞分散开来，有利于观察

（三）观察

1、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：

细胞呈正方形，排列紧密,有的细胞正在分裂。

（长方形：

伸长区）

2、换高倍镜下观察：

分裂中期→分裂前、后、末期→分裂间期。

（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。

其中，处于分裂间期的细胞数目最多。

（1）培养根尖时，为何要经常换水？

增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。

（2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？

为什么？

应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。

（3）为何每条根只能用根尖？

取根尖的最佳时间是何时？

为何？

因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；

上午10时到下午2时；

因为此时细胞分裂活跃。

（4）解离和压片的目的分别是什么？

压片时为何要再加一块载玻片？

解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来；

再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。

（5）若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？

压片时用力过大。

（6）解离过程中盐酸的作用是什么？

丙酮可代替吗？

分解和溶解细胞间质；

不能，而硝酸可代替。

（7）为何要漂洗？

洗去盐酸便于染色。

（8）细胞中染色最深的结构是什么？

染色最深的结构是染色质或染色体。

（9）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么？

染液浓度过大或染色时间过长。

（10）为何要找分生区？

分生区的特点是什么？

能用高倍物镜找分生区吗？

因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂；

分生区的特点是：

细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态；

不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。

（11）分生区细胞中，什么时期的细胞最多？

间期；

因为在细胞周期中，间期时间最长。

（12）所观察的细胞能从中期变化到后期吗？

不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。

（13）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体？

不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。

（已分化的细胞不分裂）

（14）若观察时不能看到染色体，其原因是什么？

没有找到分生区细胞；

没有找到处于分裂期的细胞；

染液过稀；

染色时间过短。

实验五、比较酶和Fe3+的催化效率

（1）为何要选新鲜的肝脏？

因为在不新鲜的肝脏中，过氧化氢酶的活性会由于细菌的破坏而降低。

（2）该实验中所用试管应选较粗的还是较细的？

应选用较粗的，因为在较细的试管中容易形成大量的气泡，而影响卫生香的复燃。

（3）为何要选动物的肝脏组织来做实验，其他动植物的组织的研磨液能替代吗？

因为肝脏组织中过氧化氢酶含量较丰富；

其它动植物组织也含有少量的过氧化氢酶，所以能够替代。

（4）相同质量的块状肝脏和肝脏研磨液，哪一个催化效果好？

研磨液效果好；

因为它增加过氧化氢酶与过氧化氢的接触面积。

（5）滴入肝脏研磨液和氯化铁溶液时，可否共用下个吸管？

不可共用，防止过氧化氢酶与氯化铁混合，而影响实验效果。

实验六色素的提取和分离

1、原理：

（1）叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂丙酮或无水乙醇——提取色素

（2）各色素在层析液中的溶解度不同,随层析液在滤纸上扩散速度不同——分离色素

（1）称取5g绿色叶片并剪碎

提取色素研钵→研磨→漏斗过滤→

（2）加入少量SiO2、CaCO3和5ml丙酮收集到试管内并塞紧管口

（1）将干燥的滤纸剪成6cm长，1cm宽的纸条，剪去一端两角（使层析液同时到达滤液细线）

制滤纸条

（2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线

（1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线

滤液划线

（2）干燥后重复划2-3次

（1）向烧杯中倒入3ml层析液（以层析液不没及滤液细线为准）

纸上层析

（2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中

（3）用培养皿盖盖上烧杯

观察结果：

滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）

最宽：

叶绿素a；

最窄：

叶绿素b；

相邻色素带最近：

叶绿素a和叶绿素b；

相邻色素带最远：

胡萝卜素和叶黄素。

（1）对叶片的要求？

为何要去掉叶柄和粗的时脉？

绿色、最好是深绿色。

因为叶柄和叶脉中所含色素很少。

（2）二氧化硅的作用？

不加二氧化硅对实验有何影响？

为了使研磨充分。

不加二氧化硅，会使滤液和色素带的颜色变浅。

（3）丙酮的作用？

它可用什么来替代？

用水能替代吗？

溶解色素。

它可用酒精等有机溶剂来代替，但不能用水来代替，因为色素不溶于水。

（4）碳酸钙的作用？

不加碳酸钙对实验有何影响？

保护色素，防止在研磨时叶绿体中的色素受到破坏。

不加碳酸钙，滤液会变成黄绿色或褐色。

（5）研磨为何要迅速？

要充分？

过滤时为何用布不用滤纸？

研磨迅速，是为了防止丙酮大量挥发；

只有充分研磨，才能使大量色素溶解到丙酮中来。

色素不能通过滤纸，但能通过尼龙布。

（6）滤纸条为何要剪去两角？

防止两侧层析液扩散过快。

（7）为何不能用钢笔或圆珠笔画线？

因为钢笔水或圆珠笔油中含有其它色素，会影响色素的分离结果。

（8）滤液细线为何要直？

为何要重画几次？

防止色素带的重叠；

增加色素量，使色素带的颜色更深一些。

（9）滤液细线为何不能触到层析液？

防止色素溶解到层析液中。

（10）滤纸条上色素为何会分离？

由于不同的色素在层析液中的溶解度不同，因而它们随层析液在滤纸条上的扩散速度就不同。

（11）色素带最宽的是什么色素？

它在层析液中的溶解度比什么色素大一些？

最宽的色素带是叶绿素a，它的溶解度比叶绿素b大一些。

（12）滤纸条上相互间距最大的是哪两种色素？

胡萝卜素和叶黄素。

（13）色素带最窄的是第几条色素带？

第一条色素带，因为胡萝卜素在叶绿体的四种色素中含量最少。

14、扩散最快的是胡萝卜素（橙黄色），扩散最慢的是叶绿素b（黄绿色）。

实验七观察质壁分离和复原

1、条件：

细胞内外溶液浓度差，活细胞，大液泡

2、材料：

紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞（具紫色大液泡），质量浓度0.3g/mL的蔗糖溶液，清水等。

3、步骤：

制作洋葱鳞片叶外表皮细胞临时装片→观察→盖玻片一侧滴蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引→观察（液泡由大到小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离）→盖玻片一侧滴清水,另一侧用吸水纸吸引→观察（质壁分离复原）

4、结论:

细胞外溶液浓度＞细胞内溶液浓度，细胞失水质壁分离

细胞外溶液浓度＜细胞内溶液浓度，细胞吸水质壁分离复原

制片观察加液观察加水观察

（1）洋葱为何要选紫色的？

若紫色过淡怎么办？

紫色的洋葱有紫色的大液泡，便于观察液泡的大小变化；

缩小光圈，使视野变暗些。

（2）洋葱表皮应撕还是削？

表皮应撕不能削，因为削的表皮往往太厚。

（3）植物细胞为何会出现质壁分离？

动物细胞会吗？

当细胞失去水分时，其原生质层的伸缩性大于细胞壁的伸缩性；

动物细胞不会发生质壁分离，因为动物细胞没有细胞壁。

（细胞壁全透性：

所有物质都能通过）

（4）质壁分离时，液泡大小和颜色的变化？

复原时呢？

细胞发生质壁分离时，液泡变小，紫色加深；

当细胞质壁分离复原时，液泡变大，紫色变浅。

（5）若发生质壁分离后的细胞，不能发生质壁分离复原，其原因是什么？

细胞已经死亡（可能是外界溶液浓度过大，细胞失水过多或质壁分离时间过长）

（6）放大倍数与视野中细胞大小、多少、视野明暗的关系？

放大倍数越大，视野中细胞越大、数目越少、视野越暗。

（反之）

（7）更换目镜，若异物消失，则异物在目镜上；

更换物镜，若异物消失，则异物在物镜上、移动载玻片，若异物移动，则异物在载玻片上。

（8）怎样利用质壁分离现象来测定植物细胞液的浓度？

①配制一系列浓度从小到大的蔗糖溶液②分别用以上不同浓度的溶液制成某植物细胞的临时装片③用显微镜观察某植物细胞是否发生质壁分离。

某植物细胞液的浓度就介于不能引起质壁分离的浓度和能引起质壁分离的浓度之间。

（9）具有中央大液泡的成熟植物细胞才能发生质壁分离现象；

死细胞、动物细胞、未成熟的植物细胞不能发生质壁分离现象。

实验八、DNA的粗提取与鉴定

（1）鸡血能用猪血代替吗？

不能，因为哺乳动物的红细胞中没有细胞核，不能提取DNA。

（2）鸡血中为何要加柠檬酸钠？

为何要弃去鸡血细胞的上清液？

防止血液凝固；

因为上清液是血浆，不含细胞和DNA。

（3）胀破细胞的方法？

能用生理盐水吗？

向血细胞中加入蒸馏水，使细胞大量吸水而胀破；

不能用生理盐水，因为血细胞在蒸馏水中不能吸收水分。

（4）该实验中最好应用玻璃烧杯还是塑料烧杯？

最好用塑料烧杯，因为玻璃烧杯容易吸附DNA。

（5）前后三次过滤时，所用纱布的层数分别是多少？

第一次用一层纱布，有利于核物质透过纱布进入滤液；

第二次用多层纱布，能防止DNA丝状物透过纱布进入滤液；

第三次用两层纱布，既有利于DNA透过纱布，又能防止其它杂质透过纱布。

（6）若实验中所得黏稠物太少，其原因是什么？

第一次加蒸馏水过少，细胞未充分胀破；

第二次加蒸馏水过多或过少；

第一次过滤用了多层纱布；

第二次过滤用了一层纱布。

（7）两次加入蒸馏水的目的分别是什么？

①第一次是为了使血细胞吸水胀破；

②第二次是为了降低氯化钠的浓度，有利于DNA有析出。

（8）实验中搅拌溶液时，为何总要沿一个方向搅拌？

防止DNA分子受到损伤。

（9）两次析出DNA的方法分别是什么？

原理分别是什么？

第一次是加蒸馏水，降低氯化钠的浓度，促使DNA析出；

第二次是加入冷酒精，因为DNA不溶于酒精溶液。

（10）三次溶解DNA的液体分别是什么？

第一次、第二次都是用浓度为2mol/L的氯化钠溶液，第三次用的是0.015mol/L（或2mol/L）的氯化钠溶液。

其原理是DNA在氯化钠中的溶解度，是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。

当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低。

2mol/L的氯化钠溶液和0。

015mol/L的氯化钠溶液对DNA的溶解度都比较高。

（11）鉴定DNA时为何要用两支试管？

其现象分别是什么？

其中不加DNA的试管起对照作用。

该试管溶液不变色，另一支加有DNA的试管溶液变蓝色。

实验九、探究酵母菌的呼吸方式

1、原理:

酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水：

C6H12O6＋6O2＋6H2O6→CO2＋12H2O＋能量

在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化碳：

C6H12O6→2C2H5OH＋2CO2＋少量能量

2、装置：

（见课本）

3、检测：

（1）检测CO2的产生：

使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。

（2）检测酒精的产生：

橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色。

实验十、观察细胞的减数分裂

1、目的要求：

通过观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别减数分裂不同阶段的染色体的形态、位置和数目，

加深对减数分裂过程的理解。

2、材料用具：

蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，显微镜。

3、方法步骤：

（1）在低倍镜下观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片，识别初级精母细胞、次级精母细胞和精细胞。

（2）先在低倍镜下依次找到减数第一次分裂中期、后期和减数第二次分裂中期、后期的细胞，再在高倍镜下仔细观察染色体的形态、位置和数目。

4、讨论：

（1）如何判断视野中的一个细胞是处于减数第一次分裂还是减数第二次分裂？

（2）减数第一次分裂与减数第二次分裂相比，中期细胞中的染色体的不同点是什么？

末期呢？

实验十一、低温诱导染色体加倍

用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，于是，植物细胞染色体数目发生变化。

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