不同蔬菜多糖提取条件的优化本科Word文件下载.docx
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4结果与讨论………….………..…………………………...……………...….......12
参考文献………………………………………………...……………...…................14
致谢……………………………..……………………...……………...…..................15
不同蔬菜多糖提取条件的优化
摘要：
本文介绍了多糖的一般定义，并以各种蔬菜为代表，对多糖的提取条件进行了优化，详细介绍了多糖的性质及应用，以此来打开多糖这一领域的大门，让大家更好的了解，并掌握多糖的性质以及用途。
关键词：
多糖；
多糖性质；
多糖的优化；
多糖的应用
TheResearchonExtractionConditions'
OptimizationofPoLysaccharideofDifferentVegetabLes
CoLLegeofChemistryandChemicaLEngineering
10ChemicaLEducation
CaoLianyong21007011005
Doctor:
ZhangNa（Lecturer）
Abstract:
ThispaperintroducesthegeneraLdefinitionofpoLysaccharides，andtoavarietyofvegetabLesastherepresentative，introducingquaLityandappLicationofpoLysaccharidesindetaiLinordertoopenthefieLdofpoLysaccharide'
sdoor，Lettingusbetterunderstand，andmastertheantioxidantquaLityandapplication.
Keywords:
PoLysaccharides;
thequaLityofpoLysaccharides;
theappLicationofpoLysaccharides;
theantioxidantapplication
1引言
多糖不是一种纯净物，而是一种混合物。
因为多糖是一种糖苷，所以可以进行水解，产生一系列的中间产物，最终会得到一种纯净物，便是单糖[1]。
多糖不仅含有单糖，同时还含有糖醛酸、去氧糖、氨基糖与糖醇等一系列的杂多糖，甚至别的取代基团。
本实验选取六种蔬菜分别进行多糖提取条件的优化：
金针菇，在自然界广泛存在，许多国家和地区均有分布。
金针菇当中含有丰富的多糖，例如蛋白聚糖等。
金针菇多糖被人体吸收，对人体健康的有着不可忽视的作用，越来越受到人们的广泛关注[2]。
生姜，指姜属植物的块根茎。
在风寒、预防感冒中具有很大的效果，其中含有的多糖在治疗腹泻、腹胀、腹痛、呕吐等方面也有很大的功效[3]。
黄瓜，广泛存在于世界各地，一般在亚热带地区比较常见。
黄瓜在夏季当中充当重要的食材作用，不仅可以生吃，还可以炒着吃，且黄瓜当中富含大量的营养元素，尤其是含有的多糖，对人体健康有着重要的作用。
葱白，是靠近葱的根部的一部分。
在我国各地均有种植，在烹饪当中具有重要的作用，葱白的主要成分为多糖类。
对抵抗感冒、疾病，有着显著的疗效。
葱白不仅能生吃，还可以作为烹饪材料加进食材当中，香味诱人。
洋葱，作为人类生活当中常见的蔬菜，在人体的健康中具有不可忽视的作用。
尤其是洋葱多糖，不仅在过敏、气喘及抑制糖尿病中有着重要的作用，而且还可以预防其它的疾病。
香菇，香菇中含有的多糖较多。
在抗肿瘤、高血压等疾病方面有着很大的用途。
香菇不仅可以炒着吃，还可以用作汤类的配料，尤其在作为汤类配料，味道更为鲜美。
2材料与方法
2.1实验材料与试剂
金针菇、生姜、黄瓜、葱白、洋葱、香菇均购买于学校门口的家得利超市，取各种样品于烘箱中低温烘干，用粉碎机粉碎，用40目筛筛取，留着备用。
无水乙醇，葡萄糖标准品，石油醚，丙酮，甲醇，氯仿，正丁醇等为国产分析纯，蒸馏水，蒽酮-硫酸溶液（现配现用），无水乙醚。
2.2实验器材
UV-1100紫外-可见分光光度计、SHA-水浴恒温振荡器、RE-52AA旋转蒸发器、DF-101干燥箱、AL104电子分析天平、SHZ—D（Ⅲ）循环水式真空泵、TDL—4型低俗枱式离心机、锥形瓶、吸量管（1mL、2mL、5mL）、洗耳球、比色管、容量瓶。
2.3实验方法
2.3.1金针菇多糖提取的方法[4]
将粉碎后的金针菇粉末放入锥形瓶中，在常温下加入4倍体积的无水乙醇浸泡2h，再进行过滤。
然后在进行热水提取，提取过后抽滤、滤液浓缩，加入3倍体积的无水乙醇，有沉淀和絮状凝胶物析出，常温静置过夜。
在3500r/min的条件下离心15min，保留沉淀。
重复上述步骤，将滤液中的蛋白用Sevag法[5]除去。
用无水乙醇洗涤，过滤后干燥备用。
2.3.2生姜多糖提取的方法
取一定量的生姜粉。
先后按1:
5加入无水乙醇，在70℃的条件下回流2h，再加石油醚，50℃条件下回流2h脱去脂质和色素，重复2次；
过滤后干燥备用。
2.3.3黄瓜多糖提取的方法[6]
黄瓜进行匀浆，摇晃均匀，称取100g匀浆放于圆底烧瓶中，添加500mL石油醚进行脱脂。
取脱脂后的黄瓜组织50g于烧瓶中，在烧杯中加入10倍体积的蒸馏水，80℃水浴，回流提取4h，过滤。
重复上述步骤，将滤液合并，滤液浓缩，静置过夜。
进行离心，弃去上清液，沉淀加水溶解，将滤液中的蛋白用Sevag法除去，在进行干燥，即得黄瓜粗多糖样品。
2.3.4葱白多糖提取的方法[7]
采取热水提法提取葱白多糖，提取两次，将提取液进行合并，抽滤后可得葱白多糖粗提取液。
2.3.5洋葱多糖提取的方法[8]
将粉碎后的洋葱置于烧杯中，加入适当比例的水，进行热水提取，在水浴结束后，进行抽滤，将滤液浓缩，重复上述步骤，合并滤液，加入4倍体积的无水乙醇，静置过夜，再次进行离心，弃去上清液，让沉淀中的乙醇进行自由挥发，再进行干燥，即得洋葱粗多糖样品。
2.3.6香菇多糖提取的方法[9]
将粉碎后的香菇置于锥形瓶中，加入蒸馏水进行溶解，进行热水提取，在水浴结束后，然后进行抽滤，将滤液进行浓缩，重复上述步骤，合并滤液，以1:
4加入无水乙醇，静置过夜，再次进行离心，弃去上清液，让沉淀中的乙醇进行自由挥发，再用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤，进行干燥，即得香菇粗多糖样品。
2.4标准曲线的绘制[10]
先打开紫外分光光度计进行预热检测。
用台秤称取50g的蒽酮[11]。
将七个比色管洗净、干燥。
然后用电子分析天平称取0.1009g标准葡萄糖，加蒸馏水溶解后，转移于100mL容量瓶进行定容，得到葡萄糖标准溶液的浓度0.1009mg/mL。
然后用1mL的吸量管分别移取0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00mL的葡萄糖标准溶液于干燥的比色管中，再用1mL的吸量管分别移取0.90、0.80、0.60、0.40、0.20mL的蒸馏水到比色管中，补满1.00mL。
将七个比色管放在冰水浴中，用5mL的吸量管迅速移取4.00mL的蒽酮-硫酸溶液分别加入比色管内，摇匀。
然后将7个比色管同时放入水浴中15分钟，取出，再放入盛有冰水的大烧杯中冷却至室温。
在625nm波长下，用紫外分光光度计从低浓度到高浓度，分别测定它们的吸光度。
记下数据，以吸光度为纵坐标、葡萄糖浓度为横坐标，用Excel绘制葡萄糖标准溶液曲线，得到相关系数和回归方程。
图1葡萄糖的标准曲线
所得标准曲线回归方程为：
A=6.03×
10-3×
C-5.28×
10-4（R2=0.9865），式中C为葡萄糖浓度，A为吸光度。
2.4.1多糖的含量测定的方法
称取不同蔬菜的多糖粉末大约0.1000g，三份，加蒸馏水溶解后，于100mL容量瓶中定容。
移取0.40mL的稀释液于比色管中，再移取0.60mL蒸馏水补齐到1.00mL，将比色管放入冰水浴中，迅速加入4mL的蒽酮-硫酸溶液，摇匀。
将比色管同时放入水浴中15分钟，取出，再放入盛有冰水的大烧杯中冷却至室温。
迅速用紫外分光光度计在625nm的波长下，测得吸光度，然后代入回归方程求出多糖的浓度，计算出多糖在样品中的含量。
多糖提取率=多糖质量/样品质量×
100%
3结果与分析
3.1六种蔬菜多糖提取的条件优化及含量的测定
本实验在提取蔬菜的多糖时，存在很多因素会影响多糖的提取率。
我们选取了四种比较常见的对提取率有影响的因素，进行了单因素实验。
3.1.1料液比对不同蔬菜多糖提取率的影响
研究了不同料液比对多糖提取率的影响，其中不同蔬菜多糖的提取条件为：
金针菇多糖：
提取时间3h，提取温度70℃，提取1次
生姜多糖：
黄瓜多糖：
提取时间1h，提取温度40℃，提取1次
葱白多糖：
浸提时间2h，提取温度50℃，提取1次
洋葱多糖：
提取时间1h，浸提温度60℃，提取1次
香菇多糖：
图2-1料液比对金针菇多糖提取率的影响图2-2料液比对生姜多糖提取率的影响图2-3料液比对黄瓜多糖提取率的影响图2-4料液比对葱白多糖提取率的影响
图2-5料液比对洋葱多糖提取率的影响图2-6料液比对香菇多糖提取率的影响
3.1.2提取温度对不同蔬菜多糖提取率的影响
在选定的最佳实验条件下，研究了料液比对多糖提取率的影响，其中不同蔬菜多糖的提取条件为：
料液比为1:
30，提取时间3h，提取2次
5，提取时间2h，提取1次
20，提取时间1h，提取1次
10，提取时间30min，提取1次
20，提取时间2h，提取1次
香菇多糖：
料水比为1:
10，提取时间为1h，提取1次
图2-7温度对金针菇多糖提取率的影响图2-8温度对生姜多糖提取率的影响
图2-9温度对黄瓜多糖提取率的影响图2-10温度对葱白多糖提取率的影响
图2-11温度对洋葱多糖提取率的影响图2-12温度对香菇多糖提取率的影响
3.1.3提取时间对不同蔬菜多糖提取率的影响
在选定的最佳实验条件下，研究了提取时间对多糖提取率的影响，其中不同蔬菜多糖的提取条件为：
30，提取温度80℃，提取2次
5，提取温度70℃，提取1次
5，提取温度50℃，提取2次
10，提取温度60℃，提取1次
20，提取温度40℃，提取1次
10，提取温度40℃，提取1次
图2-13时间对金针菇多糖提取率的影响图2-14时间对生姜多糖提取率的影响
图2-15时间对黄瓜多糖提取率的影响图2-16时间对葱白多糖提取率的影响
图2-17时间对黄瓜多糖提取率的影响图2-18时间对葱白多糖提取率的影响
3.1.4不同的提取次数对多糖提取率的影响
30，提取温度80℃，提取时间1h
10，提取温度70℃，提取时间1h
5，提取温度70℃，提取时间1h
10，提取温度40℃，提取时间2h
20，提取温度40℃，提取时间1h
料水比1:
10，温度40℃，提取时间1h
图2-19次数对金针菇多糖提取率的影响图2-20次数对生姜多糖提取率的影响
图2-21次数对黄瓜多糖提取率的影响图2-22次数对葱白多糖提取率的影响
图2-23时间对洋葱多糖提取率的影响图2-24时间对香菇多糖提取率的影响
3.2六种蔬菜提取条件的优化实验方案及数据
由上述单因素实验[12]结果，我们可以分别得出最佳的料液比、提取时间、提取温度和提取次数。
根据数据显示，也看出了这四个因素对提取率的影响很大。
为了得到提取多糖的最佳组合条件，我们采用了L12（34）的正交实验法[13]。
3.2.1金针菇提取条件的正交实验
表1正交实验方案
因子水平
温度A（℃）
时间B（h）
料液比C（g/mL）
次数D
1
60
2
1:
30
70
3
35
80
4
40
表2正交实验及数据
实验编号
温度（℃）
时间（h）
料液比（g/mL）
次数
提取率（%）
0.613
0.635
0.641
0.801
5
0.817
6
0.799
7
0.877
8
0.864
9
0.892
k1
0.630
0.764
0759
0.774
k2
0.806
0.772
0.770
k3
0.878
0.768
0.778
R
0.248
0.008
0.019
0.005
在对四大因素的正交实验数据分析下，我们可以得到最佳提取条件为：
温度80℃，料液比1:
30，提取时间3h，提取2次。
3.2.2生姜提取条件的正交实验
15
90
2.5
20
100
25
6.41
7.01
6.43
6.73
6.84
6.72
6.42
6.25
6.74
6.62
6.52
6.46
6.66
6.70
6.83
6.47
6.63
0.29
0.18
0.37
0.25
从实验数据中，我们不能看出，料液比是对提取率影响最大的因素，因此我们可以得出生姜的最佳提取条件为：
料液比1:
20，温度90℃，提取时间2.5h，提取3次。
3.2.3黄瓜提取条件的正交实验
6.23
6.54
8.21
8.16
8.11
7.95
7.97
8.01
6.39
7.46
7.44
7.45
7.56
7.59
7.53
7.98
7.51
1.77
0.1
0.15
0.08
从数据结果中，我们发现温度对提取率的影响远远大于其它的因素，于是我们得到的最佳提取条件为：
25，提取时间2h，提取3次。
3.2.4葱白提取条件的正交实验
提取温度A（℃）
提取时间B（h）
提取次数D
50
提取温度（℃）
提取时间（h）
提取次数
多糖提取率（%）
8.03
8.34
8.47
9.36
10.54
10.21
10.15
10.13
10.24
8.28
9.18
9.46
9.60
10.04
9.67
9.31
10.17
9.64
9.72
9.32
1.89
0.49
0.41
0.28
在对葱白多糖影响因素的分析下，我们得到的最佳提取条件是：
温度80℃，提取时间2h，料液比1:
30，提取3次。
3.2.5洋葱提取条件的正交实验
2.54
3.32
3.41
3.76
4.34
4.13
3.37
3.43
3.16
3.09
3.22
3.35
4.08
3.70
3.54
3.57
3.71
3.53
0.99
0.48
0.34
0.19
综合考虑，我们可以得到洋葱多糖的最佳提取条件是温度70℃
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