中药有效成分的分离纯化技术研究概况Word下载.docx

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Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔ；

Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ

中药为中华民族的健康、种族的繁衍做出了不可磨灭的贡献，但是对于大部分临床疗效肯定的中药，人们并不清楚是哪种成分起作用的，用一般提取法得到的中药提取液或提取物仍然是混合物，而且体积较大，有效成分含量低，杂质具体的分离多，所以需要进一步去除杂质，进行分离与纯化。

与纯化的方法随着中药性质的不同而不同，下面就将近年来用于中药有效成分分离与纯化的新技术做一简单的归纳与

总结。

１分离和纯化的目的

１．１减少体积，提高有效成分含量，以适应剂型的需要和临床

用药的需要。

由于杂质含量高、体积大，不能制成适当大小的滴丸剂、胶囊剂或其他剂型。

片剂、

粘液１．２提高药物的稳定性，由于提取物中含有大量树脂、胶质、鞣质、蛋白质等杂质，使得液体制剂在存放中不稳质、

［７］魏彩莲．头针治疗神经性耳聋４３例［Ｊ］．中国针灸，２００３，２３

（２）：

９１

［１４］陈刚．针灸结合星状神经节封闭治疗突发性耳聋临床观察

［Ｊ］．中医外治杂志，２００４，１３（６）：

４３

［１５］李种泰．针灸结合复方麝香注射液穴位注射治疗突发性耳

聋临床观察［Ｊ］．时珍国医国药，２００５，１６（１０）：

９７６

［８］梁大鑫．针刺治疗抗生素中毒性耳聋５７例小结［Ｊ］．湖南中医

杂志，１９９９，１５（３）：

３６－３７

［９］赖新生．耳三针治疗神经性耳鸣耳聋的临床应用［Ｊ］．针灸临

床杂志，１９９５，１１（６）：

１８

［１６］郑振，石晶．眼针治疗突发性耳聋４２例疗效观察［Ｊ］．中国针

灸，２００２，２２（８）：

５２３－５２４

［１０］徐天舒．近颈夹脊穴为主治疗耳鸣耳聋６３例［Ｊ］．南京中医

药大学学报，１９９７，１３（４）：

２２９－２３０

耳聋１００例［１１］田家耐．疏通少阳针刺法治疗肝胆火旺耳鸣、

［１７］周敬佐．针灸及穴位贴敷治疗耳聋耳鸣的临床观察［Ｊ］．中

国针灸，２００２，２２（７）：

４４０

［１８］王长海，杨兰文，王宏才，等．针刺治疗突发性耳聋及其对

８７－８８血液流变学的影响［Ｊ］．中国针灸，２００３，２３

“内听宫”穴对突发性耳聋［１９］张晓彤，袁国莲，许珉，等．针刺

患者听觉脑干诱发电位的影响［Ｊ］．中国针灸，２００３，２３（３）：

［Ｊ］．新中医，１９９７，２９（５）：

２７

［１２］赵雪，张超，张志芬，等．针药并用治疗突发性耳聋２８例［Ｊ］．

中华临床医药杂志，２００３，（６１）：

１０１１６－１０１１７

［１３］陈颖，杨金华，李淑英．针灸配合高压氧治疗突发性耳聋［Ｊ］．

中国临床康复，２００３，７（１０）：

１６０５

１７１－１７２

（收稿日期：

２００８－０１－０２

编辑：

李海洋）

提出效果。

定，易出现沉淀。

在配制前应尽量除去这些杂质。

１．３中药注射剂对原料有特殊的要求，以有效部位为组份的

注射剂，有效部位的含量应不低于总固体的７０％，静脉注射用的不低于８０％；

以净药材为组份的注射剂，所测成分的总含量这就要求对有不低于总固体的２０％，静脉注射用不低于２５％。

效部位和中药提取中间体进行纯化。

２．４大孔吸附树脂分离纯化大孔吸附树脂是一种不含离

子集团的网状结构高分子聚合物吸附剂，具有吸附性强、解吸附容易、机械强度好、可反复使用、流体阻力小等优点，其溶剂因素和被分离的化合物性质分离性能与树脂本身性质、

等有关。

其原理是采用特殊的吸附剂，利用其吸附性和筛选性相结合，从中药复方煎液中有选择的吸附其中有效成分，去除无效成分。

特别适用于从水溶液中分离低极性或非极性化合物。

例如川芎化合物成分相当复杂，主要含有挥发性的生物碱、阿魏酸、酚性成分内酯等，而其总生物碱和酚性成分有较采用大孔吸附树脂分离出的川芎总提取物明显的生理活性。

中，川芎嗪和阿魏酸含量约为２５％－２９％，收率为０．６％［８］。

另外袁海龙等［９］将大孔吸附树脂法应用于测定栀子金花丸中栀子苷的含量，利用ＨＰＬＣ法检测大孔吸附树脂处理过的样品液，操作步骤少，色谱柱污染少，柱压低，具有分离度高、重现性好、专属、灵敏之特点。

但是另一方面大孔吸附树脂纯化中药有效成分易受从提取液、树脂、洗脱等方面等影响［１０］。

２２．１

分离纯化的方法超速离心法

是通过离心机的高速运转，使药液中杂质

其原理是利用混合液密度差来分沉淀一并除去的一种方法。

离料液，比较适合于分离含难于沉降过滤的细微粒或絮状物的悬浮液。

奉建芳［１］以浸膏得率、多糖含量为考查指标，对高速离心法制备归脾口服液的工艺条件进行了优选，并考察了离心速度对归脾口服液外观质量的影响，结果以１００００－１５０００ｒ・

ｍｉｎ－１离心为好，对浸膏得率和多糖含量影响均不大，口服液

澄明度明显得到改善。

同时以有效成分含量为指标，对高速离心法、多级过滤法、水醇法用于制备中药口服液进行了比较研究。

结果表明，用高速离心法制备的归脾汤、小柴胡汤、一贯煎等中药口服液在保留多糖、黄芪甲苷、黄芩苷等有效成分的含量及保证成品的澄明度上明显优于水醇法［２］。

２．５高速逆流色谱技术高速逆流色技术（Ｈｉｇｈ－ｓｐｅｅｄＣｏｕｎ－ｔｅｒｃｕｒｒｅｎｔＣｈｒｏ－ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．ＨＳＣＣＣ）是由Ｉｔｏ．Ｙ．在液液分配色

它依靠聚四氟乙烯（ＰＴＦＥ）谱的基础上建立的一项分离技术［１１］。

蛇形管的方向性及特定的高速行星式旋转产生的离心场作用，使无载体支持的固定相稳定的保留在蛇形管中，并使流动相单向、低速通过固定相，在短时间内实现样品在互不相溶的两相溶剂系统中高速分配，继而达到连续逆流萃取分离物质的目的。

高速逆流色谱分离法不仅适用于非极性化合物的分离，也适用于极性化合物的分离，还可以应用于进行中药粗提物中各组分的分离或进一步的纯化精制。

袁黎明等［１２］利用ＨＳＣＣＣ对传统中药黄柏中生物碱类活性成分进行制备分离，两相溶剂分离系统采用氯仿－甲醇－０．５

２．２凝胶层析法交联葡聚糖ＬＨ－２０（ＳｅｐｈａｒｄｅｘＬＨ－２０）和交

联葡聚糖ＬＨ－６０（ＳｅｐｈａｒｄｅｘＬＨ－６０）是凝胶过滤介质经过羟丙基改性后的适合中小分子药物分离纯化的介质，其分离机理是分子筛效应，即被分离物质的分子质量不同，能够渗入凝胶颗粒内部的程度不同，它们在凝胶柱中层析时被洗脱下来的速度也不同，从而实现不同分子质量物质的分离。

金伟等［３］运用凝胶层析法从虻虫中提取出具有抗凝血作用的有效成分，经检测，这种有效成分不是蛋白质，而是多糖类物质。

张慧利［４］采用葡聚糖凝胶ＬＨ－２０层析柱料和适当的分离条件，对人参皂苷Ｒｅ的分离方法进行了研究。

结果表明：

通过该方法分离人参皂苷Ｒｅ收率为５８．１６％，得到的人参皂苷Ｒｅ的纯度为９６．１２％，达到了较好地分离人参皂苷Ｒｅ的目的。

而使用周期长、再生容易、重复性且此分离方法的柱料用量少、好，是一种省时、省力的分离方法。

ｍｏｌ／ＬＨＣｌ（２∶１∶１），并对制备物进行薄层色谱分析，证实生物碱

该实验对含黄柏药材的制剂的质量研究成分，检出小檗碱。

具有一定的指导意义。

Ｆｕｑｕａｎ等［１３］利用ＨＳＣＣＣ法，以氯仿－甲从乌（ＡｃｏｎｉｔｕｍＳｉｎｏｍｏｎ－醇－０．３ｍｏｌ／ＬＨＣｌ（４∶１．５∶２）为溶剂系统。

２．３膜分离技术膜分离技术以选择性透过膜为分离介质，

当膜两侧存在某种推动力（如压力差、浓度差、电位差等）时，原料侧组分选择性的透过膜，以达到分离、提纯的目的［５］。

该技术具有可常温操作分离过程不发生相变化（除渗透汽化外）、能耗低、分离系数较大的特点。

王世岑等［６］人用超滤法对黄芩中有效成分黄芩苷的提取进行了初步考察，结果表明超滤法在收率、纯度及颜色方面均较常法为优，且一次超滤即可达到注射剂要求，不需再进行精制，工艺简单，生产周期缩短。

王世岑等［７］还进一步对超滤法提取黄芩苷的最佳工艺条件进行了研究，实验结果表明选用适宜孔径的超滤膜（截留分子量为６０００－１００００）是提高黄芩苷收率和质量的关键，同时升高药液温度或降低浓度，使药液黏度降低，严格控制ｐＨ值，可显著提高超滤速度，获得最佳

ｔａｎｕｍＮａｋａｉ）的总生物碱粗提物中分离出高乌碱、ｒａｎｎａｃｏｎｉ－

陈存社等ｔｉｎｅ、Ｎ－去乙酰基高乌碱和Ｎ－ｄｅａｃｅｔｙｌｒａｎｎｅｃｏｎｉｔｉｎｅ。

［１４］

发现以氯仿∶甲醇∶丙酮∶水＝９∶８∶１∶８为溶剂系统分离纯化芦荟

有效成分，效果最佳。

冯顺卿等［１５］用ＨＳＣＣＣ分离长瓣金莲花中的黄酮类物质，并成功地得到一纯化学成分，通过红外光谱确证其为牡荆甙。

２．６分子蒸馏技术又称短程蒸馏，属于一种新技术。

该技

术特别适合对高沸点、热敏性物料进行有效物损分离，尤其是那些香味、有效成分的活性等对温度极为敏感的天然产物的分离，如玫瑰油、霍香油、桉叶油、山苍子油等［１６］。

分子蒸馏蒸馏温度低于常规的真空蒸馏且物料的特点在于真空度高、

受热时间短［１７］。

张忠义、雷正杰等人［１８］采用超临界ＣＯ２流体萃

１１９

２９５

取（ＳＦＥ－ＣＯ２）与分子蒸馏（ＭＤ）两项技术对干姜有效成分进行萃取与分离，并用气相色谱－质谱联用技术对于姜超临界ＣＯ２萃取物及其分子蒸馏液进行分析，发现ＭＤ液中有效成分含量高，而且杂质含量少，与普通蒸馏相比，分子蒸馏温度低，受热时间短，故适合于热敏性有效成分的分离，其有效成分的分离主要受蒸馏温度和真空度的影响，不同的蒸馏温度和真空度所获得的有效成分种类及其相对含量不同，调节适宜的蒸馏温度和真空度可获得相对含量较高的有效成分。

郭晓玲等［１９］先用超临界提取技术（ＳＦＥ）从川芎药材中提出粗提物，丁基酞内酯和脂肪酸类物ＧＣ－ＭＳ分析川芎中含有藁本内酯、

质。

然后采用分子蒸馏技术对有效成分进行富集，去除脂肪酸类成分，轻组分馏出液中藁本内酯等有效成分含量可达到

［５］郭立玮，金万勤，彭国平．２１世纪的植物药深加工现代化技

术—膜分离［Ｊ］．南京中医药大学学报，２０００，１６（２）：

６５－６７１

［６］王世岑，郑殿宝．超滤法提取黄芩苷的初步考察［Ｊ］．中成药

研究，１９８８，（３）：

５１

［７］王世岑．超滤法一次提取黄芩苷的工艺研究［Ｊ］．中成药，１９９４，１６（３）：

２１

［８］邓少伟．用大孔吸附树脂分离川芎总提物［Ｊ］．中草药，１９９９，３０（１）：

２３－２５

［９］袁海龙，李仙逸，赵艳玲．大孔吸附树脂－ＨＰＬＣ法测定金花

丸中栀子苷的含量［Ｊ］．中药材，２０００，２３（２０）：

６３

［１０］刘友平，鄢丹，秦春梅．大孔吸附树脂纯化中药有效成分的

影响因素［Ｊ］．中药新药与临床药理，２００３，１４（３）：

２１２－２１４

８０％以上。

２．７

多种分离纯化技术的联合使用

近年来，药学工作者为

取得更好的分离纯化效果，采用两种或两种以上的分离技术。

周本杰，张忠义等［２０］应用超临界ＣＯ２流体萃取与分子蒸馏连用技术捉取分离川芎，经ＧＣ／ＭＣ分析显示：

川芎超临界ＣＯ２萃取物所含化学成分经分子蒸馏后明显减少，且挥发油中主要成分２，３－丁二醇，α－蒎烯，桧烯等经分子蒸馏后相对含量均有明显提高，从而证实了ＳＰＥ、ＭＤ连用技术对挥发性成分陈寅生［２１］使用膜分分离纯化的作用明显优于单一ＳＰＥ技术。

离及大孔树脂吸附方法，提取、分离、纯化赤芍总苷。

结果提取得到的赤芍总苷，其总苷含量以芍药苷计达８５％以上；

其中芍药苷含量可达７５％。

［１１］ＩｔｏＹ，ＳａｎｄｌｉｎＪ．Ｈｉｇｈ－ｓｐｅｅｄｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅｃｏｕｎｔｅｒ－ｒｅｎｔｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｗｉｔｈａｃｏｉｌｐｌａｎｅｔｍａｔｏｇｒＡ，１９８２，２４４：

２４７－２５１

［１２］袁黎明，吴平，夏滔，等．高速逆流色谱制备分离中药黄柏

中的生物碱［Ｊ］．色谱，２００２，２０（２）：

１８５－１８６

ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏ－

［１３］ＦｕｑｕａｎＹ，ＩｔｏＹ．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｌａｐｐａｃｏｎｉｔｉｎｅ，

ｒａｎ２ａｃｏｎｉｔｉｎｅ，Ｎ－ｄｅｃｅｔｙｌｌａｐｐａｃｏｎ－ｉｔｉｎｅａｎｄＮｏｄｅａｃｅｔｙｌｒａｎａ－ｃｏｎｉｔｉｎｅｆｒｏｍｃｒｕｄｅａｌｋａｌｏｉｄｓｏｆｓａｍｐｌｅＡ－ｃｏｎｉｔｕｍｓｉｎｏｍｏｎｔａｎｕｍＮａｋａｉｂｙｈｉｇｈ－ｓｐｅｅｄｃｏｕｎｔｅｔ－ｃｕｒｒｅｎｔｃｈｒｏ－ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＡ，２００２，９４３：

２１９－２２５［１４］陈存社，刘玉峰，周志兰．高速逆流色谱分离纯化芦荟中的

活性物质［Ｊ］．色谱，２００３，２１（４）：

４３５

３结语

综上所述，不同的方法具有不同的特点，在中药分离纯化过程中的使用也不应盲目，因为中药配方各异，成分复杂，不同的方法对不同药物有效成分的影响也不同，其用法用量、精制工艺条件对成品质量的影响也很大，所以应根据临处方中各药物的化学性质及所制备的剂型的床治疗的需要、

要求，选择比较不同的分离和纯化方法。

同时加大新的分离纯化技术的应用，将会大大促进中药产业的发展，为我国的经济发展和人类健康作出更大的贡献！

［１５］冯顺卿，李药兰，邱玉明，等．高速逆流色谱分离长瓣金莲

花中的黄酮类物质［Ｊ］．色谱，２００３，２１（６）：

６２７

［１６］刘华，葛发欢．分子蒸馏技术在天然产物分离和其他领域

中的应用［Ｊ］．中药材，１９９９，２２（３）：

１５２－１５６

［１７］王军武，许松林，徐世民，等．分子蒸馏技术的应用［Ｊ］．化工

进展，２００２，２１（７）：

４９９－５０１

［１８］张忠义，雷正杰，王鹏，等．超临界ＣＯ２—分子蒸馏对干姜

有效成分的萃取与分离［Ｊ］．中药材，２００１，２４（８）：

５７６－５７６．

［１９］郭晓玲，冯毅凡，梁汉明，等．川芎超临界Ｃ０２萃取物化学成

参考文献：

［１］奉建芳，罗杰英．高速离心法制备归脾口服液工作条件选择［Ｊ］．中成药，１９９７，１９（１）：

１２２

［２］奉建芳，罗杰英．高速离心法等制备中药口服液比较研究［Ｊ］．中成药，１９９６，１８（２）：

７２８

［３］金伟，王亚威．虻虫抗凝血物质的提取与鉴定［Ｊ］．中医药学

报，２０００，（３）：

５８－５９

分的ＧＣ－ＭＳ分析［Ｊ］．中国医药工业杂志，２００５，３６（８）：

４７２－

４７４

［２０］周本杰，张忠义，石勇，等．超临界Ｃ０２流体萃取与分子蒸馏

联用技术提取分离川芎挥发性成分及其ＧＣ／ＭＣ分析［Ｊ］．第一军医大学学报，２００２，２２（７）：

３５２－６５３

［２１］陈寅生，姚仲青．膜分离与大孔树脂吸附技术在赤芍总苷

提取与分离中的应用［Ｊ］．南京中医药大学学报，２００６，２２

［４］张慧丽，孙印石，郑毅男．葡聚糖凝胶ＬＨ－２０柱层析法分离

人参皂苷Ｒｅ的研究［Ｊ］．吉林农业大学学报，２００５，２７（３）：

２９３－

（６）：

４０６－４０８