农业行业标准.docx
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农业行业标准
CompanyDocumentnumber：
WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998
农业行业标准
中华人民共和国农业行业标准
NY/T327-1997
桑蚕一代杂交种检验规程
ThetestingrulesforF1hybrideggsofsilkworm（Bombyxmori.）
1987-12-19发布1998-05-01实施
中华人民共和国农业部发布
NY／T327一1997
前言
蚕种的生产和销售一直都由国家和省区统一管理，但是对于蚕种质量及其检验全国至今尚无一个统一的标准。
随着市场经济发展，蚕种的省际问、国际间的流通日益频繁，由于没有统一的质量检验标准，各省区的检验方法各异，给蚕种质量的管理带来不便。
因此，有必要制定一个统一的质量检验标准来规范蚕种的质量检验。
本标准的附录A和附录B均为标准的附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。
本标准起草单位：
农业部农业司、中国农业科学院蚕业研究所、浙江农业大学、浙江省蚕种公司、江苏省蚕种管理所、四川省蚕种管理总站、山东省丝绸总公司、广东省丝绸集团公司。
本标准主要起草人：
冯家新、沈兴家、许明芬、潘恒谦、叶夏裕、李奕仁、张国平。
本标准委托中华人民共和国农业部农业司负责解释。
中华人民共和国农业行业标准
桑蚕一代杂交种检验规程NY/T327一1997
ThetestingrulesforF1hybrideggsofsilkworm（Bombyxmori.）
1范围
本标准规定了桑蚕一代杂交种质量检验的检测项目、检测基本要求和结果报告。
本标准适用于桑蚕一代杂交种的检验。
2引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。
本标准出版时，所示版本均为有效。
所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。
NY326一1997桑蚕一代杂交种
3定义
本标准采用下列定义。
良卵率
一定数量的蚕卵中，良卵粒数占蚕卵总粒数的百分比。
简化催青
丙2一戊2胚胎（催青第1天至第4天）保护温度22℃，相对湿度75％～80％，自然感光；戊3-己5胚胎（第5天到第10天）保护温度～26℃，相对湿度80％，每日感光18h，孵化前一日遮暗。
实用孵化率
调查蚕卵样本中，最大二日孵化的蚁蚕头数占良卵总粒数的百分比。
杂交率
调查样本中，标明品种的一代杂交种蚕头数占调查总头数的百分比。
母蛾微粒子病率
指带微粒子抱子的母蛾占制种批（段）母蛾总数的百分比。
实际检验中按照规定的要求对母蛾进行抽样检验，以检出的微粒子病蛾集团数来衡量。
微粒子病卵率
带微粒子孢子的蚕卵占制种批蚕卵总数的百分比。
实际检验中按照规定的要求对成品蚕种进行抽样检验，以检出的微粒子病卵集团数来衡量。
4检验项目
母蛾微粒子病检疫（见附录A）
成品质量检验
4.2.1外观检验。
4.2.2卵量检验。
4.2.3良卵率检验。
4.2.4实用孵化率调查。
4.2.5杂交率调查。
4.2.6微粒子病卵率检疫（备检项目）。
5检验规则
按制种批抽样检验。
6检验方法
中华人民共和国农业部1997-12-19批准1998-05-01实施
母蛾微粒于病检疫
见附录A。
成品质量检验
6.2.1报检
越年种在浴消后，即浸种和冷浸种在制种结束后，将品种、批次、数量、用种季别、入库地点等报指定的质检部门检验。
6.2.2抽样
6.2.2.1划批：
按制种批划分。
6.2.2.2地点：
各蚕种冷库或浸酸点。
6.2.2.3时间：
即浸种和冷浸种在浸酸后抽样，复式冷藏越年种在中间感温期间抽样，单式冷藏越年种在试催青前抽样。
6.2.2.4方法：
在3个以上的样点，以盒（张）为单位随机抽取。
6.2.2.5数量：
每一制种批散卵种10盒以上，平附种10张以上。
6.2.2.6样卵保存条件：
同原制种批。
6.2.3检验
6.2.3.1检验流程（见图1）。
6.2.3.2外观检验：
检验散卵种的盒、箱和装盒、装箱的质量，平附种的卵面情况等。
6.2.3.3卵量和良卵率检验：
将散卵种样卵逐盒称量，同时每盒抽样卵2.00g共20g，混合后平分成两份，其中一份供调查用，另一份留样备查。
平附种从抽得的10张样卵中随机抽取两张，其中一张供调查用，另一张留样备查。
散卵种称取3个1.00g样卵，平附种取三个20cm2蚕连纸的样卵，分别调查良卵粒数和不良卵粒数，取平均数。
按式
（1）计算良卵率、每盒（张）良卵粒数。
………………………………………………
（1）
散卵种的每盒良卵粒数=平均每克良卵粒数×每盒平均重量克数……………
（2）
平附种的每张良卵粒数=20cm2良卵粒数×20………………………（3）
6.2.3.4实用孵化率调查：
a）试催样卵：
散卵种从6.2.3.3调查用过的3.00g样卵中称取两个1.00g样卵。
平附种从样张中取两个20cm2连纸的蚕卵。
b）试催时间：
复式冷藏越年种中间感温后进行，单式冷藏越年种用种前进行，浸酸种浸酸后进行。
c）试催条件：
春期按简化催青标准催青；夏秋期催青开始第1天到第4天24℃保护，其他条件与简化催青标准相同。
e）调查计算：
样卵孵化后，逐日统计孵化卵数，按式（4）计算实用孵化率。
………………………（4）
6.2.3.5杂交率调查：
散卵种从样卵中称取0.50g，平附种从样张中框取10cm2连纸的蚕种进行催青、饲养，不得淘汰各龄迟眠蚕和弱小蚕，统计纯种头数，按式（5）计算杂交率。
………………………（5）
6.2.3.6微粒子病卵率检疫：
见附录B。
7数据修约
卵粒数取整数，百分率按数字修约规则保留两位小数。
8签发合格证书
对合格蚕种签发合格证书，其格式见表1。
表1桑蚕一代杂交种质量检验合格证书
检验编号
生产场名
品种名
批次
制种时间
用种时间
数量，盒或张
平均每张良卵数，粒
良卵率，%
实用孵化率，%
母蛾微粒子病率，%
成品卵微粒子病率，%
外观质量
检验单位
（盖章）
检验人员（签名）
签证人员（签名）
检验日期年月日发证日期年月日
附录A
（标准的附录）
母蛾微粒子病检疫
生产一代杂交种的母蛾实行抽样检验。
抽样方案与允许病蛾集团数，系根据NY326的规定，即：
病蛾率小于％、判别信赖度大于％（风险率小于％），按统计学原理设计而成。
A1母蛾抽样
制种批和母蛾检疫批的划分
凡同场、同品种、同季、同一条件下生产的蚕种作为一制种批，可按制种批抽样袋蛾送检，也可以在同一制种批下分日、分户、按张袋蛾送检。
抽样袋蛾
按表A1、表A2规定的数量随机抽取母蛾样本，装入蛾盒（袋）。
蛾盒（袋）上标明生产场名、品种名、批次、蛾盒号；采用分段、分户、按张袋蛾的，应注明日、段、户、张号。
表A1桑蚕一代杂交种母蛾微粒子病检疫
抽样装盒规定与合格标准表（散卵种）
制种批
第一样本，盒
第二样本，盒
抽样率
%
允许病蛾集团数，个
毛种数盒
母蛾数蛾
第一样本C1
第一，二样本C2
25以下
26～50
51～75
76～100
101～150
151～250
251～500
501～1000
1001～1500
1501～2000
2001～2500
2501～3000
3001～3500
3501～4000
4001～4500
4501～5000
5001～5500
5501～6000
6001～6500
6501～7000
7001～7500
7501～8000
8001～8500
8501～9000
9001～9500
9501～10000
1000以下
1001～2000
2001～3000
3001～4000
4001～6000
6001～10000
10001～20000
20001～40000
40001～60000
60001～80000
80001～100000
100001～120000
120001～140000
140001～160000
160001～180000
180001～200000
200001～220000
220001～240000
240001～260000
260001～280000
280001～300000
300001～320000
320001～340000
340001～360000
360001～380000
380001～400000
全部
全部
32
43
48
61
67
74
81
85
89
94
98
102
107
111
115
120
128
140
148
157
165
174
185
195
32
43
48
61
67
74
81
85
89
94
98
102
107
111
115
120
128
140
148
157
165
174
185
193
0
1
1
2
2
2
3
3
3
4
4
4
5
5
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
0
2
4
6
7
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
23
26
28
30
32
34
37
39
注
1毛种按40蛾折合1张，每个蛾盒装30蛾。
2母蛾数不满570者,按实际蛾数盒装。
3先检第一样本，检出的病蛾数≤C1为合格，>C2为不合格，>C1而≤C2时再检第二样本，第一和第二样本合计检出的病蛾集团数≤C2为合格，>C2为不合格。
4如因毛种折算基数（即不按40蛾折合一张），制种批级差划分不同等，需要改变抽样方案，必须符合病蛾率小于%、判别信赖度大于%的设计要求，并报农业部审查同意后方可进行。
表A2桑蚕一代杂交种母蛾微粒子病检疫
抽样装盒规定与合格标准表（平附种）
无微粒子
蚕种率，%
病蛾率
%
无微粒子
蚕种率，%
病蛾率
%
无微粒子
蚕种率，%
病蛾率
%
100
99
98
97
96
95
94
93
92
91
90
89
88
87
86
85
84
0
83
82
81
80
79
78
77
76
75
74
73
72
71
70
69
68
67
66
65
64
63
62
61
60
59
58
57
56
55
54
53
52
51
50
注
1省级蚕种管理部门同意，生产和使用平附种的省（区），采取此标准。
2每一制种批（户）按每一大张一盒抽样，每盒25只母蛾。
3制种批（户）不足30大张时，应随机抽够30盒。
4判别蚕种合格与否，以制种批（户）为单位，若该批（户）蚕种的病蛾率≤1%，即无微粒子蚕种率≥78%，应判为合格蚕种，但检出有微粒子孢子的应整张（4张）淘汰；若病蛾率＞1%，即无微粒子蚕种＜78%，该批蚕种判为不合格蚕种，整批淘汰。
5同一批（户）分日制种时，若以批计算病蛾率＜1%，而其中一日病蛾率≥％，应淘汰当日蚕种和其他检出有微粒子孢子的蚕种；若批病蛾率合格，而每日的病蛾率＜％，则只需淘汰检出有微粒子孢子的蚕种。
A2母蛾干燥处理
母蛾盒分批收集，顺序排列，摊放于通风干燥的室内，袋蛾5天后烘蛾；即浸种可在5天后送检。
烘蛾温度不得超过71℃。
母蛾干燥程度以蛾头胸干燥，胸腹部稍软为宜。
烘于的母蛾要及时清理捆扎，妥善保管，及时送指定的检验单位检疫。
A3母蛾盒验收
填写送检母蛾盒清单一式二份（见表A3），双方签字后备存。
严格查验，凡蛾盒填写不清，批号、盒号错乱，批袋蛾盒数未达要求的及有发霉、虫蛀、鼠咬、烘焦和其他不符合规定的，检验单位应拒收，该批种作不合格种处理。
表A3桑蚕一代杂交种送检母蛾清单
场名：
年月日
批次
合计
说明
1．本表一式两份随同蛾盒送检疫单位验收，其中一份经验收盖章后返回生产单位。
2．即浸种母蛾每日送检，冷浸种和越年种在全部制种结束后一次送检。
品种名
制种型式
生产数量
越年种
毛种
估计净重
即浸种
毛种
估计净重
冷浸种
毛种
估计净重
送检蛾盒数
备注
A4检疫方法
集团磨蛾检疫。
检疫程序
抽样编号→拆盒投蛾→注液磨碎→静置过滤→离心沉淀→振荡取样→制片镜检→复检→记载结果。
操作步骤
A4.2.1抽样编号：
按要求抽取第一样本（包括苗、末蛾）进行编号。
A4.2.2拆盒投蛾：
按每盒母蛾为一集团投蛾。
拆开蛾盒检查袋蛾情况，若符合条件，则将母蛾全数投入磨蛾杯内，撕下蛾盒上写有批号的盖纸连同编号，随磨蛾液传递，避免错乱；若该盒母蛾未装满，则不予以镜检并作记载，再从第二样本中抽补。
A4.2.3注液磨碎：
在磨蛾杯中加注％碳酸钾（或％碳酸钠）溶液80～90mL，磨碎后取出（如磨蛾转速为8000r／min，磨蛾时间应不少于90s）。
A4.2.4静置过滤：
静置2min后，将蛾液倒入有过滤材料的漏斗内过滤，禁止用棒搅动，加水校正离心管液量。
A4.2.5离心沉淀：
离心沉淀3min（3000r／min），倒去上层清液，在沉淀物中加入1％～2％氢氧化钾溶液1mL。
A4.2.6振荡取样：
离心管内液体经振荡后，每管取4个样本。
A4.2.7制片镜检：
按规定将上述4个样本制2个镜片标本，用600倍以上显微镜两人对检，每人检两个样本，每个样本观察不少于5个视野，若对检结果不一致，应复检确认。
A4.2.8记载结果：
将镜检结果将准确填入镜检单（见表A4）,有微粒子孢子者用“+”，无微粒子孢子者用“-”。
表A4桑蚕一代杂种蛾检疫单
年期
有微孢子蛾号
生产场名
空蛾号
品种名
检验蛾数
批号
复检员
初检员
A5清洗消毒
检验时发现微粒子孢子，立即用盐酸或1%有效氯漂白粉液对污染用具浸消30min后，用清水冲洗干净备用。
检验室工作人员要更衣、换鞋入室。
检验室每天用含有效氯1%漂白粉液洗消用具及地面;每一期对用具、门窗、地面及室外环境进行清理、消毒。
A6合格标准与签证
合格标准
见表A1、表A2。
签证
检验单位向生产单位出具蚕种母蛾检验证书（见表A5）,并按合格蚕种数量配发“蚕种检验合格证”。
表A5桑蚕一代杂交种各场批母蛾检验情况表
生产场名
品种名
抽样盒数
有微粒子盒数
微籽子病率，％
检验组别
备注
附录B
（标准的附录）
成品卵微粒子病检疫
B1抽取样卵
在6.2.3.3供调查的一份（10g）样卵中，其中3g已用于实用孵化率、杂交率等的调查，其余7g册用于微粒子病卵率的检验。
B2检验方法
将上述7g样卵分别装入7个小棉纸袋中，每袋1g卵。
粘贴在硬质纸上，标明生产场名、品种名、批次、数量。
B2.2将上述活性化的蚕种置于29℃，相对湿度85％以上的环境中催青。
待孵化的蚁蚕在高温多湿中自然死亡（4天）后进行检验。
根据制种批的大小和第一、第二样本数量的要求（见表B1）,将每一纸袋的死蚁放于17-18个乳钵孔中（根据克卵粒数而定）,每孔约100头蚁蚕即一个集团,用乳棒将蚁蚕磨碎。
然后,滴入4-10滴2%氢氧化钾溶液再细研磨。
表B1桑蚕一代杂交种成品卵微粒子病检疫抽样规定与不合格判定标准
批蚕种数量
盒或张
抽检蚕卵集团数，个
不合格判定标准病卵集团数
信赖度，％
第一样本
第二样本
第一检
第二检
50以下
51－100
101－500
501－1000
1001－1500
1501－2000
2001以上
28
30
32
36
38
42
42
14
26
36
42
50
56
70
2
3
4
5
6
7
8
注
1第一样本检查完毕后,如果没有检出病卵集团,则判该批蚕种合格,不作第二次检查;如果检出的病2第一样本检出的病卵集团未达表列不合格判定标准,则检查第二样本。
两次检出的病卵集团个数合并计算，如果仍未达表列不合格判定标准，则该批蚕种判为合格;否则,判为不合格。
按乳钵序号点板制标本两套,送初检员2个对检,每个样本观察不少于10个视野。
初检无微粒子孢子的样本按每小板（14个乳孔）点盘标本由复检员复检,复检无微粒子孢子,则通知冲洗;有微粒子孢子,则通知初检人员重新点板回查。
初检有微粒子孢子的样本送复检员复检员复核,并登记（见表B2）。
表B2桑蚕一代杂交种各场批成品检验情况表
生产场名
品种名
抽样盒数
微粒子孢子盒
微粒子病率，％
合格与否判别
备注
消毒冲洗。
整理原始记录.
B3不合格定标准
见表B1
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