全国通用届高考生物二轮复习基因工程和细胞工程专题卷5.docx
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全国通用届高考生物二轮复习基因工程和细胞工程专题卷5
基因工程和细胞工程
一、单选题
1．建立基因文库时，下列最可能作为载体是的（）
A.大肠杆菌B.大肠杆菌的质粒C.链状DNA分子D.环状RNA分子
【答案】B
【解析】本题考查基因工程中的运载体，要求考生识记基因工程中运载体的种类、功能，理解基因文库的构建过程，方可正确答题。
基因工程中使用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等，其中最常使用的是大肠杆菌的质粒，能携带目的基因进入受体细胞，构建基因文库，所以B正确，ACD错误。
【点睛】学生易错易混知识：
1．错误认为基因文库是直接保存基因。
建立基因文库时，需将目的基因导入受体菌细胞内，然后培养受体菌，即通过保存受体菌种以保存目的基因，而不是直接保存基因。
2.对质粒是基因工程中常用运载体的原因理解不清晰透彻。
质粒是基因工程中常用的运载体，是因为：
1）质粒中含有一个至多个限制酶切位点，供目的基因插入其中；2）具有自我复制能力，导入受体细胞后，能在受体细胞内进行自我复制，或是整合到染色体DNA上，随染色体DNA同步复制；3）质粒上有特殊的标记基因，供重组DNA的鉴定和筛选。
2．下列有关基因工程中启动子的说法正确的是
A.启动子是一段特殊的RNA片段
B.启动子是DNA聚合酶的识和结合位点
C.启动子可以驱动基因的转录
D.启动子和起始密码子是同一概念
【答案】C
【解析】启动子是一段有特殊结构的DNA片段，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录形成信使RNA，起始密码子存在于mRNA上，是翻译的起点，故C正确。
【点睛】解答本题要注意以下几点：
1、启动子是启动转录过程的结构，故启动子存在于DNA上。
2、启动子与起始密码子有本质的区别，起始密码子存在于mRNA上，是翻译的起点。
3．下列关于cDNA文库及其建立过程的叙述中，哪一项是不正确的（ ）
A.cDNA文库包含了某种生物的部分基因
B.需从特定组织或细胞中提取DNA或RNA
C.利用mRNA的反转录合成互补DNA片段
D.合成的互补DNA片段需要连接在载体上
【答案】B
【解析】建立cDNA文库需从特定组织或细胞中提取RNA，利用mRNA的反转录合成互补DNA片段，合成的互补DNA片段需要连接在载体上，导入受体菌群中保存。
由于特定组织或细胞中只有部分基因转录生成mRNA，所以cDNA文库只包含了某种生物的部分基因。
4．将一个用32P和35S充分标记的人体肝细胞与没有标记的小鼠肝细胞（2N=40）融合，所形成的杂种细胞
A．在有丝分裂后期时，含32P的染色体数共有46条
B．不具有发育成完整“人一鼠”杂种个体的潜在能力
C．能正常分化发育成动物个体
D．细胞膜上含35S的蛋白质均匀分布的过程体现了膜的结构特性
【答案】D
【解析】DNA复制是半保留复制，在有丝分裂后期时，含32P的染色体数共有92条；杂种细胞含有人－鼠细胞的基因，具有发育成完整“人一鼠”杂种个体的潜能；由于动物细胞高度分化，该杂种细胞不一定能正常分化发育成动物个体；细胞膜上含35S的蛋白质均匀分布的过程体现了膜的结构特性。
5．下图中的供体DNA中含有无限增殖调控基因，该基因能激发动物细胞的分裂，图示是利用该基因制备新型单克隆抗体的过程，相关叙述错误的是
A.经酶A处理后Ⅰ与质粒具有相同的黏性末端
B.Ⅱ是已免疫的B淋巴细胞
C.Ⅲ既能无限增殖又能分泌特异性抗体
D.该过程涉及转基因技术和动物细胞融合技术
【答案】D
【解析】供体DNA与质粒用同一种限制酶处理，可使I与质粒具有相同的粘性末端，A正确；II受体细胞，要具有分泌抗体的能力，所以是已免疫的B淋巴细胞，B正确；经检测和筛选所得到的重组细胞Ⅲ既有无限增殖的能力又能分泌特异性抗体，C正确；该过程涉及转基因技术和动物细胞培养技术，但没有涉及动物细胞融合技术，D错误。
【考点定位】转基因技术
【名师点睛】本题通过图示介绍了基因工程技术制备单克隆抗体的方法，还可以通过细胞工程实现：
向小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞，将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基筛选出既能够增殖又能产生抗体杂交瘤细胞，再将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖，然后从细胞培养液或小鼠的腹水中提取单克隆抗体。
6．水稻（基因型为AaBb）的花药通过无菌操作，接入试管，经过如下过程培育试管苗。
以下选项中正确的是（）
A．a用花药离体培养法获得单倍体植株；b通过有丝分裂产生愈伤组织；
c培养基中至少应有乙烯和脱落酸；d试管苗的生长发育不需要光照；
B．a用花药离体培养法获得二倍体植株；b通过减数分裂产生愈伤组织；
c培养基中至少应有生长素和细胞分裂素；d试管苗的生长发育不需光照
C．a用花药离体培养法获得单倍体植株；b通过有丝分裂产生愈伤组织；
c培养基中至少应有生长素和细胞分裂素；d试管苗的生长发育需要光照
D．a用花药离体培养法获得二倍体植株；b通过有丝分裂产生愈伤组织；
c培养基中至少应有乙烯和脱落酸；d试管苗的生长发育需要光照
【答案】C
【解析】
试题分析：
a用花药离体培养法获得单倍体植株，长的弱小，高度不育；b通过有丝分裂和脱分化产生愈伤组织；c培养基中至少应有生长素和细胞分裂素，在再分化过程中，生长素高，促进根的分化，细胞分裂是比例高，促进芽的分化d试管苗的生长发育需要光照，原因是①叶绿素的合成需要光照；②试管苗需要光进行光合作用制造有机物提供营养物质。
故选C。
考点：
本题考查植物组织培养的相关知识，意在考查学生的识图能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。
7．下列叙述中能说明目的基因完成表达的是
A.重组质粒成功地导入受体细胞中
B.能检检测到受体细胞中出现了标记基因
C.受体细胞内出现目的基因转录生成的mRNA
D.受体细胞中存在目的基因表达产生的蛋白质
【答案】D
【解析】由于基因的选择性表达，重组质粒成功地导入受体细胞中，不一定能够表达出相关的蛋白质，A错误；能检检测到受体细胞中出现了标记基因，说明目的基因可能已经导入受体细胞，但是不能说明目的基因已经表达，B错误；基因的表达的最终产物是蛋白质，而不是mRNA，C错误；受体细胞中存在目的基因表达产生的蛋白质，说明该基因已经成功表达了，D正确。
8．下列过程中，没有发生膜融合的是
A.植物体细胞杂交B.制备单克隆抗体
C.动物细胞培养D.浆细胞产生抗体
【答案】C
【解析】略
9．下图是人工种子的模式图，请据图判断正确的是
A．③④⑤分别相当于种子的种皮、胚乳和胚
B．③是一层半透膜，可通过生物降解分解
C．④是愈伤组织
D．在⑤中添加固氮细菌对增加产量没有作用
【答案】B
【解析】
试题分析：
根据图示分析可知，③④⑤分别相当于种子的种皮、胚和胚乳，A项错误；③是一层半透膜，可通过生物降解分解，B项正确；④是将来能发育成完整植株的结构，可以是胚状体或不定芽或顶芽或腋芽等，C项错误；在⑤中添加固氮细菌，有利于增加作物产量，D项错误。
考点：
植物的组织培养
10．2001年2月，一只背上长着“人耳”的老鼠在北京展览馆与观众见面，这只老鼠其实是一只切去脾脏的老鼠，它背上的“人耳”是一种高分子化学材料聚羟基乙酸作为模型支架用生物方法增殖成的，增殖“人耳鼠”的生物工程技术是（）
A．细胞培养B.细胞融合C.动物胚胎移植D.细胞核移植
【答案】A
【解析】动物细胞培养使细胞数目增多，而形成组织器官
11．某科研小组利用番茄细胞原生质体培育遗传学改良植株，据图判断，下列说法正确的是
A.①过程的目的是去除细胞膜
B.②过程中原生质体的变异是不定向的
C.③过程原生质体的分化程度提髙
D.④过程不需要光照处理
【答案】B
【解析】①过程的目的是去除细胞壁，A项错误；②过程中原生质体发生不定向的基因突变，B项正确；③过程为原生质体的脱分化，分化程度降低，C项错误；④过程需要光照处理，以利于叶绿素的形成，D项错误。
【点睛】组织培养过程中光照的处理：
（1）脱分化阶段：
不进行光照，以免伤害细胞；
（2）再分化阶段：
需要光照，以利于叶绿素的形成。
12．下列有关人工种子及其培育过程的叙述不正确的是（）
A．人工种子一般用离体的植物细胞通过组织培养技术获得
B．人工种子克服了有些作物品种繁殖能力差或发芽率低等问题
C．同一批次的人工种子可以保证具有相同的遗传物质
D．人工种子的胚状体是由未分化的、具有分裂能力的细胞构成
【答案】D
【解析】
试题分析：
人工种子是用离体的植物细胞经过植物组织培养技术获得的，故A正确；人工种子克服了有些作物繁殖能力差或发芽率低的问题，故B正确；因为植物组织培养属于无性繁殖，同一批次的人工种子可以保证有相同的遗传物质，故C正确；人工种子的胚状体已经发生了细胞分化，故D错误。
考点：
本题考查人工种子的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
13．关于应用基因工程治疗人类遗传病的叙述，不正确的是（）
A.基因治疗是治疗遗传病的最有效手段
B.进行基因治疗时，基因的受体细胞是受精卵
C.基因治疗并不是对患者体内细胞的缺陷基因改造
D.基因治疗时可只对患者部分细胞输入正常基因
【答案】B
【解析】基因治疗是治疗遗传病的最有效手段，A正确；进行基因治疗时，基因的受体细胞是有基因缺陷的体细胞而不是受精卵，B错误；基因治疗并不是对患者体内细胞的缺陷基因改造而是对患者部分细胞输入正常基因，C、D正确。
14．下表是基因工程操作中鉴定含目的基因植株的4种方法。
请预测同一后代种群中，4种方法检出的含目的基因植株的比例最小的是（）
选项
方法
检验对象
检测目标
A
PCR扩增
基因组DNA
目的基因
B
分子杂交
总mRNA
目的基因转录产物
C
抗原-抗体杂交
总蛋白质
目的基因编码的蛋白质
D
喷洒除草剂
幼苗
抗除草剂幼苗
A.AB.BC.CD.D
【答案】D
【解析】PCR扩增技术可以在体外大量增殖目的基因，A含量最多；导入到受体细胞中的目的基因不一定完成转录，则利用分子杂交检测目的基因转录产物，含量不一定多；导入到受体细胞中的目的基因不一定完成表达，则利用分子杂交检测目的基因转录产物，含量不一定多；将目的基因（抗除草剂基因）导入受体细胞的概率较小，则喷洒除草剂检测幼苗，其中抗除草剂幼苗出现的概率较低。
故D项检出的含目的基因植株的比例最小。
故选D。
15．全能干细胞能够让植物在整个生命周期中产生新的器官，是植物生长发育的源泉和信号调控中心，但是到目前为止，人们对于干细胞组织中心建立和维持的机制仍然知之甚少。
中国科学院遗传与发育生物学研究所的李传友课题小组发现了一个在植物根尖干细胞维持中起重要作用的基因，这一研究结果于2010年11月3日作为封面文章发表于国际著名杂志The Plant Cell上。
下列说法不正确的是（）
A．植物全能干细胞分化形成不同组织细胞是基因选择性表达的结果
B．植物全能干细胞有
细胞周期，全能干细胞分化形成的导管细胞没有细胞周期
C．植物全能干细胞分化形成根、茎、叶的过程一般是不可逆的
D．植物全能干细胞分化形成根、茎、叶的过程体现了细胞的全能性
【答案】D
【解析】略
16．“多利”的产生与下列哪项技术无关（）
A.人工授精B.胚胎移植
C.体外培养D.核移植
【答案】A
【解析】
17．从基因型为Aa的绿色植物某器官中获取组织，显微观察如下图。
下列对该图所示细胞的叙述正确的是（）
A．若将X细胞离体培养成完整植株，此过程要涉及胰蛋白酶和胶原蛋白酶
B．若将Y细胞离体培养成幼苗后用秋水仙素处理，目的是使其发生染色体结构变异
C．X与Y两个细胞进行杂交，形成杂种细胞，发育成基因型为AAaa的杂种植株是不可育的
D．如果X与Y细胞所含蛋白质种类有明显差异，其根本原因是信使RNA的不同
【答案】D
【解析】植物细胞经离体培养成完整植株，此过程不需要纤维素酶和果胶酶，进行植物细胞融合时则需要纤维素酶和果胶酶处理植物细胞，去除细胞壁；将幼苗用秋水仙素处理的主要目的是诱导染色体数目加倍；X与Y两个细胞进行杂交，形成杂种细胞，发育成基因型为AAaa的杂种植株为四倍体是可育的；如果X与Y细胞所含蛋白质种类有明显差异，其根本原因是基因的选择性表达形成不同的信使RNA，从而指导合成了不同的蛋白质。
【考点定位】植物组织培养，植物细胞杂交
18．下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，不正确的是（）
A.制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养
B.需要用选择培养基筛选杂交瘤细胞
C.需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞
D.利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞
【答案】D
【解析】制备单克隆抗体过程是先效应B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，接着筛选出能产生抗体的杂交瘤细胞进行体内和体外培养，提取单克隆抗体，则运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养，A正确；单克隆抗体的制备过程需要两次筛选，第一次是用选择培养基筛选杂交瘤细胞，去除未融合的细胞和自身融合细胞，B正确；第二次筛选是从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的细胞，再进行体内和体外培养，提取单克隆抗体，C正确；利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体的定位导向作用将药物带到癌细胞所在的位置，D错误。
【考点定位】单克隆抗体的制备过程
【名师点睛】单克隆抗体制备的细胞来源：
B淋巴细胞：
能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞：
不产生专一性抗体，体外能无限繁殖．杂交瘤细胞的特点：
既能大量增殖，又能产生特异性抗体。
两次筛选：
①筛选得到杂交瘤细胞（去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞）；②筛选出能够产生特异性抗体的细胞群。
生物导弹：
单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞．疗效高，副作用小，位置准确）。
19．科学家将β－干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使β－干扰素第十七位的半胱氨酸，改变成丝氨酸，结果大大提高了β－干扰素的抗病毒活性，并且提高了储存稳定性。
该生物技术为（）
A.蛋白质工程B.基因工程
C.基因突变D.细胞工程
【答案】A
【解析】据题意可看出，通过定点突变干扰素基因，从而改造干扰素这种蛋白质的结构，属于蛋白质工程中的小改。
【考点定位】蛋白质工程
20．基因工程切割目的基因的工具是（）
A.DNA酶B.限制酶
C.DNA连接酶D.DNA聚合酶
【答案】B
【解析】基因工程切割目的基因的工具是限制酶（限制性核酸内切酶）；DNA酶能将DNA水解成基本单位，A不符合题意；DNA连接酶能将DNA片段连接成链，C不符合题意；DNA聚合酶能将脱氧核苷酸连接成链，D不符合题意。
故选B。
【考点】基因工程
【点睛】熟悉基因工程所用到的工具，以及相关酶的作用。
二、非选择题
21．（2015秋•朔州校级期末）自然界中有一种含有叶绿体的原生动物﹣﹣眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活．某同学提出问题：
“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？
”他尝试设计出下列具体的实验方案．结合实验方案回答：
实验原理：
根据眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的．实验步骤如下：
（1）①中选的植物材料细胞中，必须有的细胞器是．
（2）③过程所用的酶是．
（3）④过程除了用电激之外，还可以用、等作为诱导因素．
（4）在整个实验过程中，要强调所用的器械的灭菌和无菌操作，原因是各种杂菌可以在培养基上面迅速生长，培养基一旦被污染，迅速生长的各种杂菌不但会和争夺营养，而且这些杂菌生长的过程中会生成大量导致培养物迅速死亡．
（5）在⑤⑥过程中，通常要添加血清，原因是．
【答案】
（1）叶绿体
（2）纤维素酶和果胶酶
（3）灭活的病毒、聚乙二醇、振动、离心（任意两个）
（4）培养物对培养物有害的物质
（5）补充合成培养基中营养物质的缺乏
【解析】
试题分析：
分析题图：
图示为动物细胞和植物细胞的杂交过程，①→②表示脱分化过程；③表示去壁过程；④是诱导细胞融合的过程；⑤是动物细胞培养过程；⑥是融合的胚胎细胞；⑦→⑧表示胚胎移植过程；⑧→⑨表示妊娠过程．
解：
（1）根据题意，眼虫中含有叶绿体，实现植物与动物细胞杂交，选择的植物细胞要有叶绿体．
（2）植物细胞壁的主要成分是纤维素素和果胶，去除植物细胞壁用纤维素酶和果胶酶．
（3）诱导原生质体融合可用灭活的病毒、聚乙二醇、振动、离心、电激等方法．
（4）培养基一旦被污染，培养基的培养物与杂菌之间是竞争关系，两者争夺营养，并且杂菌生长的过程中会生成大量对培养物有害的物质导致培养物迅速死亡．
（5）人们对细胞所需要的营养物质还没有完全搞清楚，所以动物细胞培养时需要添加血清，补充合成培养基中营养物质的缺乏．
故答案为：
（1）叶绿体
（2）纤维素酶和果胶酶
（3）灭活的病毒、聚乙二醇、振动、离心（任意两个）
（4）培养物对培养物有害的物质
（5）补充合成培养基中营养物质的缺乏
考点：
细胞融合的概念及方法；动物细胞与组织培养过程．
22．选考内容课本填空
（1）葡萄酒制作过程中，在没有严格灭菌的条件下，通过和的措施，使酵母菌大量繁殖而成为优势菌种。
（2）某水样的大肠杆菌严重超标，常采用法统计样品中活菌数。
如果要对水样中的大肠杆菌进行扩大培养，常用的培养基应选取
A．MS固体培养基B．MS液体培养基
C．LB固体培养基D．LB液体培养基
（3）进行植物组织培养时，待生根后，将苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持以上的湿度，2~3天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止。
（4）“二娃”政策实施后，大量高龄夫妇选择“试管婴儿”技术孕育二胎：
要使精子和卵细胞在体外成功融合，首先须采集到成熟的卵细胞，此时需要用（激素）处理女方，达到的目的；同时对于男方提供的精子，须经系列处理与培养，以达到状态。
受精卵形成后，经人工培养至特定阶段，借助胚胎移植技术回输至女方体内，经过自然孕育，即得试管婴儿。
（5）对大面积烧伤病人，借助技术可获取大量自身健康皮肤用于移植。
培养的条件需要、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO2混合气体（维持培养液的pH）。
【答案】
（1）控制温度通入氧气
（2）稀释涂布平板D（3）80%
（4）促性腺激素超数排卵获能（5）动物细胞培养无菌、无毒的环境
【解析】
（1）葡萄酒制作过程中，在没有严格灭菌的条件下，通过控制温度和通入氧气的措施，使酵母菌大量繁殖而成为优势菌种；
（2）对样品中的菌进行计数时常采用稀释涂布平板法，如果要对水样中的大肠杆菌进行扩大培养，常用LB液体培养基进行培养；
（3）进行植物组织培养时练苗时，要用玻璃罩或塑料布保持80%以上的湿度，2~3天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼，直到将罩全部打开处于自然湿度下为止；
（4）采集卵母细胞时，需要用促性腺激素处理女方，使其超数排卵，同时对于男方提供的精子，须经获能处理才能进行受精；
（5）对于大面积烧伤病人，借助动物细胞培养技术可获取大量自身健康皮肤用于移植，培养的条件需要无菌、无毒的环境、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO2混合气体（维持培养液的pH）。
【考点定位】发酵工程、胚胎工程
23．[生物一一选修3:
现代生物科技专题]
某重点实验室课题研究组欲将一株野生杂草的抗病基因转给一双子叶农作物。
该农作物含有高茎基因，植株过高容易倒伏，科学家欲通过基因工程操作抑制高茎基因的表达。
结合所学知识分析下列问题：
（1）课题研究组已经获得了抗性基因，欲体外大量扩增该目的基因需采用___________技术，该技术的基本反应过程：
目的基因受热______________后解链为单链，__________与单链相应互补序列结合，然后在___________DNA聚合酶的作用下进行______________。
（2）该基因工程操作的核心是____________。
本研究中，欲将目的基因转入受体细胞，常采用_________法。
（3）科学家将高茎基因的__________基因转入受体细胞，该基因产生的mRNA能够与高茎基因转录出的mRNA互补结合，形成____________，抑制高茎基因的表达。
【答案】PCR变性引物Taq热稳定性延伸基因表达载体的构建农杆菌转化反义双链RNA
【解析】试题分析：
本题结合转基因农作物的培养过程，考查基因工程和PCR技术等相关知识，要求熟记基因工程的原理、工具及操作步骤，掌握各步骤中应注意的细节，在此基础上结合题意作答。
（1）要在体外大量扩增该抗性基因可以采用PCR技术，利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热变性，形成单链并与引物结合，在Taq热稳定性聚合酶的作用下延伸形成DNA。
（2）基因工程操作的四个基本步骤是：
获取目的基因，基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定，其中核心步骤是基因表达载体的构建。
当植物细胞作受体细胞时，一般采用农杆菌转化法将目的基因导入。
（3）科学家将高茎基因的反义基因转入受体细胞，反义基因转录产生的mRNA能够与高茎基因转录出的mRNA互补结合，形成双链RNA，导致核糖体无法与高茎基因转录出的mRN结合，而翻译受阻，从而抑制高茎基因的表达。
24．回答下列
（一）、
（二）小题。
（一）回答与果酒、果醋制作有关的问题。
（1）在酿酒过程中，酵母菌只有在无氧条件下才能进行___________。
发酵开始时，发酵瓶内看不到气泡冒出的原因可能是酵母菌的___________使发酵瓶内出现负压。
（2）下列各项中，与果酒中的酒精浓度有关的是___________（多选）。
A.发酵时间
B.发酵温度
C.培养液中糖的含量
D.酵母菌对酒精浓度的耐受程度
（3）不同地域所酿制的葡萄酒风味会有一定的差异，出现风味差异的原因除了与当地相应的土壤、气候等地理环境因素和葡萄品种有关外，还可能与不同地域酿酒时所用的___________等生物因素有关。
（4）在利用果酒制作果醋过程中，如果已获得醋化醋杆菌菌种，可先在液体培养基中进行_____培养，然后接种到发酵瓶中。
发酵瓶下口直角玻璃管内塞有松紧合适的脱脂棉球，其作用是___________。
开始收集果醋前，应检测发酵瓶流出液的___________。
（二）通过农杆菌介导转入法培养转基因植物的过程如下图（图中①〜④表示相应操作过程）。
请回答：
（1）如果外源基因的核苷酸序列是未知的，可以建立一个包括外源基因来源生物中所有基因的_________来获取外源基因。
图中②过程涉及的工具酶是___________。
（2）将外源遗传物质与受体植物细胞（包括原生质体受体）遗传物质重新组合，除了转基因技术外，还有___________等方法，这些方法解决了传统育种方法存在的___________的缺陷。
植物原生质体的获取可以在较高渗透压环境下，用___________酶处理根尖、叶片、愈伤组织或悬浮培养细胞的细胞壁。
（3）如果构建重组细胞的目的是为了获取重要的次生代谢产物（如某些中药），可以通过大量培养特定______________________来达成目的。
（4）如果农杆菌侵染对象为某植物叶片，将被侵染的叶片除菌后
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