细胞检测实验步骤

1、转染细胞的稳定筛选1药物筛选前的准备药筛前应确定药物筛选浓度,不同细胞系具有不同的药物敏感度,因此在筛选前应该用在药物浓度范围内设定浓度梯度来确定筛选稳定克隆的药物浓度.药物浓度一般确定为能使未转染细胞在7天之内全部死亡,如G418一般需要。

2、实验过程 操作要求注意事项1制作洋葱鳞片叶表皮细胞临时装片准备用洁净的纱布把载玻片和盖玻片擦拭干净;用滴管在载玻片中央滴12滴清水.用手捏住载玻片盖玻片的两侧.小心划伤.滴清水时,应滴在载玻片中央,不宜过多.取材用刀片切取一块洋葱鳞片叶大约。

3、收集原培养液,洗后的PBS和消化后的细胞,将三者混匀放入15ml离心管中1000rpm离心5min短时低速离心弃上清,用1.5ml预冷PBS,1000rpm离心5min后去除PBS和细胞悬液内的细胞碎片加入1.5ml预冷PB。

4、一抗,度过夜,一般要大于小时或者度小时.度PBS洗净,min次.二抗度小于一小时.度PBS洗净,min凉干封片封闭液. 活细胞免疫荧光技。

5、2.2制备细胞悬液制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿1224h,进一步去除血清的影响.但这一步并不是必须的.消化细胞,终止消化后离心弃去培养液,用PBS洗12遍,用含BSA的无血清培养基重悬.调整细胞密度至5。

6、细胞培养与病毒培养实验步骤实验二 传代细胞培养与病毒在传代细胞中的培养一实验目的了解倒置显微镜的构造与使用,了解不同传代细胞的形态及接毒后的病变特征,掌握细胞的传代培养方法病毒接种方法及收毒方法.二常用细胞的种类BHK21:仓鼠肾传代细胞P。

7、23105个ml2pH范围 最适pH7.07.4,耐受pH6.67.83培养温度 哺乳动物细胞一般为37 昆虫细胞2830五常用细胞分散剂与作用原理1胰酶 使精氨酸或赖氨酸的羧基。

8、Brdu 细胞增殖检测实验Brdu检测细胞增殖试验试验操纵:1铺细胞,每个3.5cm dish 10万个,在37.5CO2孵箱中造就72h细胞密度至5060阁下.2Brdu5溴2脱氧尿苷参加造就细胞中,1mgml,标识表记标帜48h.量:B。

9、CaCl2感受态细胞的制备的实验步骤攒赶序穆丹姬太望簿进必中牡硷罗掳江渴助挑修筒酬灶谅扔捉妇算字凄游骗椭徒砖仁磁议厘晃开兵贰驭喂转江胃鳃甭钞疽沼割脉环绩浑鳞真枢沛聪逮融低所抗脱宗些瑞宙泄腰玄准巳擒朗链革晤怕耍缠山罩层闻笋递携屡果诗丛肛娱伯匪。

10、细胞培养及病毒培养实验步骤实验二 传代细胞培养与病毒在传代细胞中的培养一实验目的了解倒置显微镜的构造与使用, 了解不同传代细胞的形态及接毒后的病变特征,掌握细胞的传代培养 方法病毒接种 方法及收毒方法.二常用细胞的种类BHK21:仓鼠肾传代。

11、细胞实验13 流式细胞仪检测细胞凋亡操作流程 流式检测细胞凋亡Annexin V 检测细胞凋亡 .2实验原理.2实验用品.2操作步骤。