引物设计

1、设计引物如何设计酶切位点经常有战友对一些常见问题在丁香园反复问答了很多遍,所以希望园子中一些战友,特别是低分与0分战友,能将好的帖子归纳总结了一下,并结合自己的经验整理,一方面这是个学习提高的过程,另一方面也能帮助大家解决这方面的问题.同时。

2、PCR引物流程设计详解PCR引物设计流程详解本文目的:复制出IL4基因片段一查找基因序列1进入NCBI主页,下拉选框选择Nucleotide,在搜索栏输入要查找的目的基因,即IL4,点击搜索2 在搜索结果选择灵长类Homo sapiens2。

3、 产物不能形成二级结构。
引物长度一般在1530碱基之间。
G+C含量在40%60%之间。
碱基要随机分布。
引物自身不能有连续4个碱基的互补。
引物之间不能有连续4个碱基的互补。
引物5端可以修。

4、G（ACGG）G（AC）G（CG）G（GG）（1.33.63.1）8.0 kcal/mol此计算方法特别适用于测定其3末端会形成双链的引物的相容性。
也可以用来计算发夹环结构的G。
不过，这时需要根据环。

5、C.需注意：对于同一基因的mRNA可能具有不同长度的剪切异构体，选择模板时不同物种应尽量选择同一异构体（一般选择最长的异构体）。
D.如需得到该基因所在基因组的序列信息（如扩增启动子区域时），在基因报告页面上部Genomic regi。

6、在Primer5窗口中，若觉得某一对引物合适，可以在搜索结果窗口中，点击该引物，然后在菜单栏，选择File-Print-Current pair，使用PDF虚拟打印机，即可转换为Pdf文档，里面有该引物的详细信息。
3、用Oligo验证。

7、荧光定量PCR引物设计荧光定量PCR引物设计专业的定量PCR设计软件:beacon Designer有时一对100分的引物扩增效率特别低,换了一对貌似很烂的引物,结果溶解曲线却长得很漂亮扩增效率也蛮高.个人认为这个跟你选择的位置有关看引物T。

8、PCR引物设计原则总结PCR引物设计原则总结PCR引物设计的目的是为了找到一对合适的核苷酸片段,使其能有效地扩增模板DNA序列.因此,引物的优劣直接关系到PCR的特异性与成功与否.要设计引物首先要找到DNA序列的保守区.同时应预测将要扩增的。