届 人教版 微生物的培养与应用单元测试6.docx
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届人教版微生物的培养与应用单元测试6
微生物的培养与应用
（时间：
90分钟 总分：
100分）
一、选择题（本大题共15小题，每小题2分，共30分，在每小题给出的四个选项中，只有一个是符合题目要求的。
不选、多选、错选均不得分）
1．含C、H、O、N的某大分子化合物可以作为
（ ）
A．异养微生物的氮源、能源
B．异养微生物的碳源、能源
C．自养微生物的碳源、氮源、能源
D．异养微生物的碳源、氮源、能源
解析 这道题首先要考虑含C、H、O、N的化合物可以提供的营养物质类型，然后再确定可以提供给何种类型的微生物。
含C、H、O、N的化合物，能够提供碳源、氮源。
这样的物质，可以是有机物蛋白胨等，也可以是无机物NH4HCO3等。
题干中指出该物质是大分子化合物，就不可能是无机物NH4HCO3等，只能是蛋白胨等。
这种化合物可以是异养微生物的碳源、氮源、能源。
答案 D
2．将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37℃恒温箱的目的是
（ ）
A．对比观察培养基有没有被微生物利用
B．对比分析培养基上是否生有杂菌
C．没必要放入未接种的培养基
D．为了下次接种时再使用
解析 设计对照实验目的是为了检测培养基制备是否成功，即是否被污染了。
答案 B
3．若在牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，对这一说法不正确的是
（ ）
A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用
B．在微生物生长的温度范围内保持固体状态
C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长
D．凝固剂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强
解析 理想的凝固剂应具备以下条件：
不被所培养的微生物分解利用，在微生物生长的温度范围内保持固体状态，凝固剂的凝固点不能太低，否则不利于微生物的生长，如琼脂凝固点为40℃，对所培养的微生物无毒害作用，并且在灭菌时不会被破坏，透明度好，凝固力强，配制方便，价格低廉。
常用凝固剂有琼脂、明胶。
答案 C
4．无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是
（ ）
A．对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌
B．将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌
C．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行
D．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触
解析 对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒，而不是灭菌。
答案 A
5.可以鉴定出分离分解尿素的细菌的方法是
（ ）
A．以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂
B．以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂
C．以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红试剂
D．以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂
解析 尿素在尿素分解菌的作用下分解产生氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，酚红指示剂变红。
答案 A
6．以尿素为唯一氮源筛选出多种具有较高尿素降解能力的微生物，其中有真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与下列哪种生物类似
（ ）
A．硝化细菌B．蓝藻
C．蚯蚓D．兔子
解析 尿素分解菌是以现成有机物为能量来源，营腐生生活的生物，类似于蚯蚓，属分解者；而硝化细菌和蓝藻为生产者，兔子是消费者。
答案 C
7．在进行分离分解尿素的微生物的实验中，要进行灭菌，下列对灭菌的理解中，不正确的是
（ ）
A．防止杂菌污染
B．培养基和相关器具都必须灭菌
C．灭菌就是杀死培养基中的一切细菌
D．灭菌必须在接种前
解析 灭菌的目的是防止杂菌污染，获得纯净培养物；培养基和相关器具都需要灭菌；培养基的灭菌是杀死其中的一切微生物，而不只是细菌，且灭菌必须在接种前。
答案 C
8．尿素分解菌的选择培养基有选择作用，原因在于培养基中加入了
（ ）
A．葡萄糖B．酚红
C．NaClD．尿素
解析 尿素分解菌的选择培养基以尿素为唯一氮源，能够分解尿素的微生物可生长繁殖，而不能分解尿素的微生物则会被淘汰，从而起到选择尿素分解菌的作用。
答案 D
9．尿素是尿素分解菌的氮源，因此在配制培养基时
（ ）
A．葡萄糖在培养基中含量越多越好
B．尿素在培养基中含量越少越好
C．尿素分解菌有固氮能力，培养基中的尿素为无机氮
D．尿素分解菌无固氮能力，培养基中的尿素为有机氮
解析 葡萄糖是微生物最常用的碳源，但在培养基中不能加入过多，否则，会使细胞无法吸水而死亡；尿素在培养基中可以提供氮源，加入要适量而非越少越好；同时尿素是尿素分解菌的有机氮源，而不是无机氮源，在分解过程中，尿素会被尿素分解菌分解为氨。
答案 D
10．果胶酶常在0℃～4℃下保存，其原因是
（ ）
A．此温度条件下，酶的活性最高
B．此温度条件下，酶变性失活
C．低温可降低酶的活性，但酶不变性失活
D．自然条件下，果胶酶常在0℃～4℃下发生催化作用
解析 酶的活性受温度影响。
酶都有一个最适温度，但果胶酶的最适温度是45℃～50℃，而不是0℃～4℃。
保存果胶酶时，降低温度，使其活性降低，但酶并不失活，当温度恢复到适宜时，酶的活性也恢复最高。
答案 C
11．加工橘子罐头，采用酸碱处理脱去果皮（橘络），会产生严重污染。
目前使用酶解法去除橘络，可减少污染。
下列生长在特定环境中的4类微生物，不可以大量产生所用酶的是
（ ）
A．生长在麦麸上的黑曲霉
B．生长在酸奶中的乳酸菌
C．生长在棉籽壳上的平菇
D．生长在木屑上的木霉
解析 本题考查酶的专一性。
橘络的主要成分是纤维素，要将其分解需要纤维素酶，麦麸、棉籽壳、木屑的主要成分也是纤维素，所以生长在上述三种成分的黑曲霉、平菇、木霉肯定能产生纤维素酶，所以可以利用。
而乳酸菌的培养基为酸奶，其主要成分是蛋白质，不含纤维素，所以乳酸菌不能产生纤维素酶。
答案 B
12．关于固定化酶技术的说法正确的是
（ ）
A．固定化酶技术就是固定反应物，将酶依附着载体围绕反应物旋转的技术
B．固定化酶的优势在于能催化一系列的酶促反应
C．固定化酶中的酶无法重复利用
D．固定化酶是将酶固定在一定空间的技术
解析 本题主要考查对固定化酶的概念及其作用特点的理解和掌握。
固定化酶是指通过物理或化学的方法，将水溶性的酶与不溶性的载体结合，使酶固定在载体上，并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。
因此，固定化酶技术固定的不是反应物而是酶。
而被固定的只是一种酶，所以不能催化一系列的酶促反应，但固定的酶可以重复利用。
答案 D
13．下列关于果胶酶的叙述，不正确的是
（ ）
A．是特指一种酶
B．是指一类酶的总称
C．能分解果胶，瓦解植物的细胞壁
D．果胶甲酯酶是果胶酶的一种
解析 果胶酶并不特指某一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括果胶酶和果胶甲酯酶等。
答案 A
14．研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的，如将从大肠杆菌中提取的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成的制剂，可用于降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的
（ ）
A．温度B．pH
C．水分D．营养
解析 微生物降解有机磷农药时，需要营养物质，而固定化酶却不需要营养物质。
答案 D
15．某校学生尝试用琼脂作载体，用包埋法固定α－淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。
实验结果见下表（假设加入试管中的固定化淀粉酶量与普通α－淀粉酶量相同）。
实验表明1号试管中淀粉未被水解，你认为最可能的原因是（ ）
1号试管
2号试管
固定化淀粉酶
√
普通α－淀粉酶
√
淀粉溶液
√
√
60℃保温5min，取出冷却至室温，滴加碘－碘化钾溶液
现象
变蓝
不变蓝
A.实验中的温度过高，导致固定化淀粉酶失去活性
B．淀粉是大分子物质，难以通过琼脂与淀粉酶接触
C．水浴保温时间过短，固定化淀粉酶未将淀粉水解
D．实验程序出现错误，试管中应先加入碘－碘化钾溶液后保温
解析 由于固定化酶是用包埋法固定的，而淀粉是大分子物质，它不能通过琼脂与酶接触，导致淀粉不能被水解而遇碘－碘化钾溶液呈现蓝色。
答案 B
二、非选择题（本大题共8小题，共70分）
16．（9分）果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，常用于果汁的生产。
（1）果胶酶用于果汁生产，是因为它能分解果胶，可解决果肉出汁率低和________等问题。
（2）果胶由________和________组成。
（3）若要检测苹果汁中是否还含有果胶，可取一定量的果汁与________混合，若出现________现象，说明果胶还没有被完全分解。
（4）如图为某同学进行的澄清苹果汁生产实验，下列相关叙述正确的是
（ ）
A．实验中所用的固定化果胶酶可由某些物质吸附，吸附后的酶可连续使用
B．果胶酶是一类催化剂，其本质是RNA
C．植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶
D．果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊
（5）固定化酶技术是将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使酶能与________接触，又能与________分离。
（6）在“α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测”这一实验中，α淀粉酶固定在石英砂上，使用了下图中的________。
答案
（1）果汁浑浊
（2）半乳糖醛酸 半乳糖醛酸甲酯
（3）乙酸 浑浊 （4）A
（5）底物（反应物） 产物 （6）③
17．（8分）请回答下列与大肠杆菌有关的问题：
（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于________，它的异化作用类型是________。
从细胞壁被革兰氏染色剂的着色情况看，大肠杆菌属于革兰氏________菌。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________，操作者的双手需要进行清洗和消毒。
（3）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。
对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜温度下放置适宜时间后，观察培养基上是否有________产生。
若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过________处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
（4）利用培养基不仅可以分离、培养微生物，在植物组织培养的过程中，也要配制培养基，培养基根据是否加入琼脂等凝固剂分为固体、半固体和液体培养基，若将大肠杆菌进行扩大培养则用________培养基，若是将大肠杆菌进行分离，则用________培养基。
解析 大肠杆菌的代谢类型为异养兼性厌氧型，它属于革兰氏阴性菌，在生态系统中属于分解者。
（2）操作过程中为了防止杂菌污染，需对培养基和器皿进行高压蒸汽灭菌。
（3）为了排除培养基被污染的可能性，应把未接种的培养基在适宜温度下放置一定的时间，观察有无菌落产生。
（4）大肠杆菌分离时用的是固体培养基，而在扩大培养时用的是LB液体培养基。
答案
（1）分解者 兼性厌氧型 阴性
（2）灭菌 （3）菌落 灭菌 （4）液体 固体
18．（9分）尿素是一种高浓度氮肥且长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌的分解作用、才能被植物吸收利用。
某同学要分离出土壤中能分解尿素的细菌，并尝试进行计数，培养基配方如下：
K2HPO4
NaCl
H2O
葡萄糖
尿素
酚红
琼脂
0.12g
0.12g
15mL
0.025g
2.0g
0.25mg
0.5g
（1）分解尿素的细菌都能合成____________，该种细菌在生态平衡中起到什么作用？
____________。
写出细菌分解尿素的反应式。
____________________________________________________________________。
（2）根据培养基的成分判断，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？
________（能/不能），原因是__________________________________________________________________
________________________________________________________________。
（3）分离得到分解尿素的细菌后，如果要扩大培养，则应选择________培养基进行培养。
培养一段时间后，使用________对微生物细胞进行计数。
计数过程中，下列哪种行为会影响计数的准确性？
________。
A．计数时直接从静置培养的试管底部取培养液进行计数
B．如果方格内微生物细胞数量多于300个，培养液先稀释后再计数
C．如果微生物细胞有粘连，要数出团块中的每一个细胞
D．压在方格线上的细胞只计左线和上线上的细胞数
（4）为了提高尿素肥效，可以将分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”。
为了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用________技术。
解析
（1）含有脲酶的细菌通过降解尿素为氨获得生长的氮源，从而也起到维持生物圈中氮元素平衡的作用。
（2）从培养基的成分看，因为含有琼脂，所以不能分离出分解尿素的细菌，因为琼脂是一种未被纯化的混合物，内含一定量的含氮化合物，不利于以尿素为氮源的细菌的筛选。
（3）扩大培养需要使用液体培养基，对微生物或者酵母菌等进行计数时常用血细胞计数板。
计数过程需要注意操作规范，如A选项所述的操作会影响计数的准确性，应该把试管振荡数次，使细菌分布均匀后取样。
（4）固定化酶技术可以提高酶的利用率。
答案
（1）脲酶 参与了氮循环（或维持氮平衡）
（NH2）2C＝O＋H2O
2NH3＋CO2（分子式、符号、条件缺一不可）
（2）不能 琼脂是未被纯化的混合物，内含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能选择出只以尿素为氮源的微生物
（3）液体 血细胞计数板 A
（4）固定化酶
19．（7分）请回答微生物培养和分离的有关问题：
（1）欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌：
以________为唯一氮源且加入了________指示剂的培养基，用________法分离细菌。
若培养基平板上有菌落存活且颜色变________，则说明分离成功。
（2）分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基，其成分________。
A．前者含琼脂，后者不含琼脂和琼脂糖
B．两者都含有琼脂
C．前者含有琼脂糖，后者不含琼脂糖但含琼脂
D．两者都不含琼脂和琼脂糖
解析
（1）分离能利用尿素的细菌，只需以尿素为唯一氮源，加酚红作指示剂，采用涂布分离法分离细菌，只要培养基中的指示剂变红，标志着存在脲酶水解尿素的作用，证明菌株可以以尿素为氮源。
（2）分离以尿素为氮源的细菌所用培养基应含有琼脂糖，而分离大肠杆菌所用培养基则不含琼脂糖而含琼脂。
答案
（1）尿素 酚红 涂布分离（或涂布） 红
（2）C
20．（10分）下表是用于从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基的配方。
试剂
用量
试剂
用量
牛肉膏
5g
琼脂
20g
蛋白胨
10g
水
1000mL
Nacl
5g
请回答：
（1）培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、________、________和无机盐。
（2）该培养基配制完成后，一般还需调节pH并对培养基进行________处理，实验过程中为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________附近操作。
（3）在土壤中分离纯化细菌最常用的方法是________和________。
在分离纯化前需将菌体放入液体培养基中________，在固体培养基上划好线后须将培养皿倒置的原因是____________________________________________。
（4）实验结束后，使用过的培养基应进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是________________________________________________________________。
解析
（1）各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、生长因子和无机盐。
（2）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的污染，培养基配制完成后，需进行灭菌处理，在实验过程中，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
（3）在土壤中分离纯化微生物最常用的方法是划线分离法和涂布分离法。
在分离纯化前需将菌体放入液体培养基中扩大培养。
划线后将培养皿倒置的原因是防止皿盖上的水珠落入培养基中，造成污染。
（4）用过的培养基不可随便丢弃，一定要进行灭菌处理，以免污染环境。
答案
（1）氮源 生长因子
（2）灭菌 酒精灯火焰
（3）划线分离法 涂布分离法 扩大培养 防止皿盖上的水珠落入培养基中，造成污染
（4）防止造成环境污染
21．（10分）工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出汁率，为探究温度对果胶酶活性的影响，某学生设计了如下实验：
①将果胶酶与苹果泥分装于不同试管，在10℃水浴中恒温处理10min（如图A）。
②将步骤①处理后的果胶酶和苹果泥混合，再次在10℃水浴中恒温处理10min（如图B）。
③将步骤②处理后的混合物过滤，收集滤液，测量果汁量（如图C）。
④在不同温度条件下重复以上实验步骤，并记录果汁量，结果如表：
温度/℃
10
20
30
40
50
60
70
80
果汁量/mL
8
13
15
25
15
12
11
10
根据上述实验，请分析回答下列问题：
（1）果胶酶能破除植物细胞壁，是因为果胶酶可以促进细胞壁中果胶的水解，产物是________。
（2）实验结果表明，当温度为________左右时，果汁量最多，此时果胶酶的活性________。
（3）为什么该实验能够通过测定过滤出的苹果汁的体积大小来判断果胶酶活性的高低？
__________________________________________________________________
________________________________________________________________。
（4）果胶酶作用于一定量的某种物质（底物），保持温度、pH在最适值，生成物量与反应时间的关系如图。
在35min后曲线变成水平是因为________________。
若增加果胶酶浓度，其他条件不变，请在图中画出生成物量变化的示意曲线。
解析 从实验数据分析：
在40℃附近时，果汁量最多，说明此时的果胶酶催化活性最高。
因为底物的量是一定的，所以底物消耗完时，生成物的量达到最大值，其后不再发生变化；增加酶的浓度可以使反应更快地达到平衡点，即更早结束反应，但生成物的总量不会发生变化。
答案
（1）半乳糖醛酸
（2）40℃ 最高
（3）果胶酶将果胶分解为小分子物质，小分子物质可以通过滤纸，因此苹果汁的体积反映了果胶酶催化分解果胶的能力
（4）底物消耗完毕 如图
22．（7分）如图为固定化酶的反应柱示意图，请据图回答：
（1）请在横线上填出各标号的名称。
①________；
②________；
③________。
（2）与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是________________________________________________________________。
固定化细胞的优点是________________________________________________________________。
（3）③的作用是________________________________________。
（4）制作固定化α淀粉酶所用的方法是________。
解析 与一般的酶制剂相比，固定化酶不仅能与反应物充分接触，还能与产物分离，并且可以反复利用。
但是与固定化细胞相比，固定化酶不能催化一系列的化学反应，并且固定化细胞成本更低，操作更容易。
使用固定化酶技术往往利用一个反应柱，下端有一个分布着小孔的筛板，酶颗粒无法通过筛板，而反应溶液却可以自由出入。
制作固定化α淀粉酶的方法是吸附法。
答案
（1）反应柱 固定化酶 分布着小孔的筛板
（2）既能与反应物充分接触，又能与产物分离并且能被反复利用 成本更低，操作更容易 （3）使酶颗粒无法通过③，反应溶液却可以自由出入 （4）吸附法
23．（10分）某同学进行苹果汁制作实验，工艺如下图所示。
请回答：
（1）图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是________。
黑曲霉提取液中含有的________可水解果胶，从而使果汁澄清。
固定化柱中填充的石英砂通过________方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去________。
（2）实验中，操作流程A和B的先后顺序为________。
在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是________。
要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶，可取一定量的果汁与等量的________混合，如果出现________现象，说明果胶还没有被完全水解。
为使果胶完全水解，应将流速调________。
（3）实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被________使用。
解析
（1）KMnO4有杀菌消毒的作用，可将苹果表面的杂菌杀死。
果汁中因含有果胶等而使苹果汁浑浊，用果胶酶处理可使果胶水解，使果汁澄清。
固定化酶技术是将酶固定在固定化柱的载体上，固定化柱内填充的石英砂可以起到很好的吸附作用。
酶被固定后用蒸馏水冲洗是为了除去未被固定的酶。
（2）具体操作时，先提取果胶酶，将果胶酶固定在固定化柱中，再将阀2打开，使苹果汁进入固定化柱，与酶接触，固定的果胶酶就能将果汁中的果胶分解，而果胶酶不流失。
果胶中的果胶酸钙能与乙醇作用形成沉淀，故可用乙醇鉴定果汁中的果胶，如有浑浊现象，说明果汁中仍有果胶存在，此时应控制阀门2的流量，调慢果汁流速。
（3）酶被固定化后，便于与反应物和产物分离，可反复利用，提高酶的利用率。
答案
（1）消毒 果胶酶 吸附 未被固定的酶等
（2）A、B 阀1 乙醇 浑浊（沉淀） 慢 （3）反复
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