环氧乙烷灭菌工艺验证实施指南01.10.20Word文件下载.doc
《环氧乙烷灭菌工艺验证实施指南01.10.20Word文件下载.doc》由会员分享，可在线阅读，更多相关《环氧乙烷灭菌工艺验证实施指南01.10.20Word文件下载.doc（106页珍藏版）》请在冰点文库上搜索。
五、微生物性能验证…………………………………………………21
附录：
验证相关表单目录……………………………………………………32
第一章验证的目的和意义
一、验证的目的
每个生产企业在为生存和市场竞争的需要中，都应考虑采用以低的成本费用生产出满足规定要求，并有一定质量水准的产品的方法。
验证是通过检查和提供客观证据表明规定要求已经满足的认可（GB/T6583-1994idtISO8402:
1994），是企业优化生产工艺的一个好的途径。
验证的目的就是为生产过程制订必要的参数，使其处于受控状态，以达到预期的要求。
传统的质量管理是建立在质量检验基础上的，而现代的质量管理是建立在质量保证基础上的。
批量生产的产品通过抽样检验是不能保证每件产品全部达到技术要求的，由此，质量保证的理念开始逐步引起人们的重视。
“把质量建立在生产过程中”，以及提前对原材料、过程中产品进行控制，这些都喻示人们首先要对原材料和生产工艺进行验证，以确保最终产品的质量。
目前，世界上大多数国家都在医疗器械行业中实行质量保证体系规范，在ISO9001或ISO13485标准的要素中都提出了相关的基本要求。
对无菌医疗器械生产企业来说，在硬件方面，涉及到环境、厂房、设备、人员等内容，在软件方面涉及到工艺、卫生、检验、验证、管理等内容。
其目的是为了有效控制生产过程，保证产品质量，满足顾客要求。
当一个新建或改建无菌医疗器械洁净厂房完工后，或完成一项新产品的设计开发后，或编制一项新的工艺方案后，或确定选用新的材料后，下一步工作就是需要进行验证和确认：
1.厂房是否达到了设计要求；
2.设备的安装布局是否满足无菌医疗器械的生产；
3.研制开发的新产品是否满足法律法规和预期用途，是否进行了风险分析并将风险降低到可接受的范围；
4.编制的工艺能否保证产品质量；
5.选用的新材料是否对环境或人体产生新的危害。
对所有医疗器械生产企业来说，验证的主要目的可概括为：
1.为产品质量提供了可靠的保证；
2.为降低产品风险，提高安全性，满足预期用途提供了充分的证据；
3.为减少生产过程中的不合格品，提高经济效益打下了坚实的基础；
4.为减少顾客投诉，创立企业品牌，扩大市场占有率提供了可行的机会；
5.为符合法律法规要求，接受政府部门的监督检查，接受第二方或第三方质量认证提供了可证实性的文件资料。
二、验证的理由
1、由于政府规范的要求
医疗器械的发展经历了一个从粗放型到规范化的管理过程。
世界各国为了维护消费者的利益和提高本国医疗器械在国际市场的竞争能力，根据医疗器械生产和质量管理的特殊要求，结合本国国情，相继制定或修订了医疗器械质量管理规范。
在美国，联邦法律授权国家食品药物管理局（FDA）于1978年发布了世界上第一个《现行医疗器械质量体系规范》。
在欧洲，欧盟委员会公布了93/42/EEC《医疗器械指令》，90/385/EEC《有源植入性医疗器械指令》和IVD《实验室用诊断医疗器械指令》三个医疗器械的指令。
在日本，厚生省药务局颁发了《医疗用具质量体系》。
在我国，相继颁布并实施了《无菌医疗器械生产管理规范》和《医疗器械监督管理条例》。
八十年代后期开始对一次性无菌医疗器械产品实施许可证管理。
这标志我国医疗器械也同样进入依法管理的新阶段。
企业在市场经济环境下，为了建立质量保证体系，使生产的产品符合法律法规的要求，就必须对产品、工艺和系统进行必要的验证。
2、由于质量保证的要求
没有工艺验证就不可能很好地理解和控制好工艺，也不可能树立起对所生产的产品在质量方面的信心。
验证可以确定一个好的生产过程，制订一个好的生产工艺，可以稳定产品质量，降低产品质量的风险，并且提供采取纠正或预防措施的机会。
工艺验证是质量保证的基础。
3、由于降低生产成本的要求
经验和普通常识都指出一个验证过的工艺是一个比较有效的工艺，可以减少返工，降低不合格，减少损失。
在坚持质量标准的同时，追求低成本高效率的工艺优化是验证的自然结果。
实际上一个工厂在一定程度上都验证过自己的工艺，他们不可能使用那些连自己也没有把握可以生产合格产品的机器和（或）工艺。
三、验证的分类
医疗器械的验证以形式的不同可以分成系统验证、工艺验证、能力验证；
以验证的目的不同可以分成设计验证、预期型验证、同步验证、再验证。
1、系统验证是企业通过验证优化产品加工的过程。
如以无菌形式提供的医疗器械产品应以最短的加工过程和达到十万级洁净度的生产条件来保证无菌产品对初始污染菌的要求或灭菌前的产品要求，在建造生产厂房时就应按验证过的加工过程来进行生产布局，减少产品在生产过程被污染的机会，生产不同的产品所选用的生产设备是否满足规定要求。
由此可见，系统验证是全厂性的，是贯穿从建厂初期到产品生产全过程的。
系统验证可以由企业内部组织进行，也可以请企业外专家来帮助进行。
国家已明确规定了加工过程和生产条件的，企业通过验证可以来检验是否满足国家规定的条件。
2、工艺验证是系统验证在局部的验证，是针对一个工序、一个工艺而进行的验证。
生产工艺通过验证得到优化，并且明确受控的条件，提高生产效率、稳定产品质量。
工艺验证是质量保证体系中不可缺少的一个部分，是高效率生产的基础。
工艺验证可以从整个产品结构来考虑，从人的因素来考虑，也可以从设备条件和管理因素来考虑。
灭菌工艺的验证是无菌医疗器械生产中的最重要的工艺验证。
3、能力验证也称过程能力验证。
过程能力是指一个过程在质量上可能达到的水平，也可理解为在人、机、料、法、环等因素均处于受控的正常工作状态下的作业能力。
企业通过对过程能力的验证，可以合理的安排生产计划。
对设备生产能力的验证可以挖掘设备的潜力，合理使用设备，合理安排设备的使用范围和保养、合理编制维修计划。
对人员生产能力的验证，可以调动人的积极性，合理分工，安排生产任务，并可适时安排培训。
在企业，一台高精度注塑机与一台已使用多年的普通注塑机其过程能力是不相同的；
一名经验丰富的老工人与一名刚进厂的新工人的过程能力也是不相同的。
过程能力通常用6倍标准差（6ó
）来表示过程能力的大小，对于单侧控制则用3ó
表示。
过程能力可以用过程能力指数（Cp）来衡量。
过程能力不应与生产能力相混淆。
4、设计验证是在设计的适当阶段，为确保设计输出满足设计输入的要求而进行的验证。
设计验证的方法有设计评审，变换方法进行计算，以验证原来的计算分析结果的正确性，或进行模型或样机试验。
医疗器械在设计阶段还需要对产品的安全性和使用的可靠性在模拟过程的实验加以验证。
风险分析，在动物体外和体内的试验，生物学评价，临床研究和评价均可作为验证的一部分。
5、预期型验证是对生产前的工艺、过程、材料等进行的验证，是一般在产品没有历史资料和外来资料借鉴的情况下，根据预先计划好的大纲建立起某个工艺做了书面证据。
这时的预期型验证可以认为是确保产品安全生产的先决条件。
6、同步验证是指在生产过程中进行的验证。
如工艺在实际贯彻过程中，通过获得的相关资料来证实某项工艺已经达到预期的规定要求，如果与预期型验证的数据进行比较，可以获得工艺的重现性和有效性的证据。
无菌医疗器械生产中所采用的EO灭菌工艺就必须进行灭菌的同步验证，以证明制订的工艺能确保产品合格，确保灭菌效果的有效性。
7、再验证是指对已经验证过的过程、工艺、材料、设备等在运行一定时间后的验证，或验证过的系统的参数改变时针对改变部分进行的验证确认。
在验证可以采用审阅分析历史数据，对过程重新确认。
GB18279-2000《医疗器械—环氧乙烷灭菌确认与常规控制》标准中就规定了对验证过的灭菌过程至少每年要进行一次再验证，确认已验证过的系统是安全的，工艺是可行的、有效的。
验证的目的是识别出重要的工艺参数，确定这些参数的合格范围并提出控制这些参数的方法。
没有中间过程的控制，验证是没有什么意义的。
为了使验证过的工艺发挥出应有的作用，要求各方面的人员严格遵循操作规程，不要随意改动系统和工艺参数。
四、验证的范围
就无菌医疗器械生产方面的考虑，根据YY0036的规定，一般需要验证的有原料、运输、机械加工、配件清洗、人工组装、过程控制、包装、灭菌、产品检测等。
，除此之外，需要验证的还有厂房条件、设备、制水、周围环境、人员卫生等。
凡是与无菌医疗器械生产有关联的、能影响产品质量的因素、都应开展验证工作。
无菌医疗器械生产过程的验证工作面大量广，涉及到物理学、化学、机械工程学、生物学、医学、高分子材料学等多方面的专业基础知识，是一个庞大的系统工程。
五、验证的程序
验证工作在无菌医疗器械生产企业中是一项全厂性的、综合性的、经常性的工作。
生产企业必须对验证及验证结果最终负责。
因此各部门应密切配合开展工作。
验证的一般程序为：
1、成立验证工作小组；
2、调查收集有关文献资料；
3、组织学习相关标准规范要求；
4、咨询有关专家（必要时）；
5、起草编制验证方案；
6、验证实施与协调；
7、汇总验证数据，形成验证报告；
8、验证文档的管理。
六、验证的组织机构
由于验证工作在企业不是由某一个部门可以单独完成的，因此验证工作需要由企业的管理层作出决策，着手策划，并且配备资源，一般是专门设立验证工作小组，可以由质量、生产、技术、采购、安全、设备等部门参加，当然根据不同的验证，验证工作小组也可以是其中几个部门或是吸收其他部门人员参加。
参与验证工作小组的人员应有较高的文化素质，有较强的责任心，有解决问题的能力，有人际间交流的能力和口头及书面沟通的能力。
在技术方面有发现问题和解决问题的能力是验证的基础。
参加验证的人员应经过必要的培训。
在验证过程中，参与部门的主要职责为：
技术部门：
制定验证计划，确定待验证的工艺条件，标准，检验和试验的方法，起草编制验证方案和必要的人员培训方案。
并对验证工作提供技术性指导。
质量部门：
组织验证计划和方案的实施，确定抽样方案、负责检测、评价，确认出具验证结果报告。
生产部门：
参与验证方案制定，协同组织实施验证方案，收集验证资料，会签验证报告。
设备部门：
培训操作人员，安装调试设备，确认验证方案中对设备验证要求。
生产车间：
负责验证工作的现场实施，安排验证过程所必需物质资源及人力资源，为开展好验证提供必要的环境条件。
验证的计划和方案应经授权人审核，管理者批准。
各职能部门在验证过程中的相互配合是至关重要的，只有通力合作，才能保证验证工作的正常开展。
才能获得正确、完整的验证数据。
七、验证方案的制订
验证过程一般有方案的制订，计划书的编制，方案的实施，结果的评价四个步骤。
一般来说验证过程需要对几组方案进行检查或试验，从中选择满足指标、符合要求的结果，将方案转化成生产工艺文件或用来确定生产条件。
好的验证是要有一个以上的试验方案，记录的参数适合于进行比较，适合于判断，选定的方案重复性好。
当验证项目确认后，验证方案一般包含计划的安排，验证方法的选用，检验和试验方法的确认，验证结果的评价等四个方面，基本内容如下：
1、计划安排；
1）成立验证小组
2）收集文献资料
3）确定验证范围
4）编制技术要求
5）确定验证步骤
6）方案审批
2、验证方法选用；
1）方法设计
2）选用分析
3）确认
3、检验方法确认；
1）方法选用
2）过程出证
3）仪器选用
4）仪器校准
5）确认试验
6）再确认
4、验证结果；
1）评价过程分析
2）结果评价
3）结果确认
4）结果批准。
对于无菌医疗器械来说，涉及到多方面验证项目，其中各项目的验证目的、验证方法不同，因此，在编制验证方案时，要考虑到不同的验证方法和具体的操作步骤。
编制好的验证方案要经授权人审批后实施。
当验证方案确定后，就要编制一份验证计划书。
验证方案书的内容必须包括对验证对象（如设备、工艺过程、检测方法等）用流程式文字作简单明了的描述，一般的验证方案书可按下列内容和要求进行编写：
1）验证项目名称；
2）验证目的；
3）验证小组的构成；
4）验证依据；
5）验证项目；
6）验证条件；
7）验证方法；
8）确认出证；
9）结果评价。
八、验证的实施
在验证计划经过各方协商后，应按照计划的规定去做好准备工作，首先，要检查一下实施验证的一些必需条件，资源是否具备，例如各种标准器、检验化验仪器、试剂、记录仪器、测量仪器等等。
这些工具都必须在验证前准备完善。
另外，验证过程中所需要的各种记录表格，也应准备完毕，不得随意代用。
在验证方案实施前，还应对所有使用的仪器仪表进行校准检定，以确保验证的数据正确无误。
在验证实施过程中所有参加验证工作的人员，必须要对验证方案进行认真的学习，掌握了解所规定的验证方法和要求，及有关的参数引用文件的规定。
严格按验证方案的规定去进行操作，检查并记录各种运行状态，确认有关数据。
若可能会出现对验证方案进行补充和修改的情况，可以另外起草一份补充方案，并说明修改或补充的内容和理由，待整个验证工作结束后，再重新改写。
补充方案应经原方案批准人审批。
九、验证结果的审批
验证工作结束以后，验证人员应将验证结果整理汇总，形成一份验证试验报告。
在准备验证报告时，可按照验证方案的内容和项目进行描述，评价验证最终结果是否符合设定的工艺参数或标准，对偏离或不符合规定的结果应予以说明，必要时可重新进行验证。
验证报告应包括或参照以下内容：
1）灭菌产品的说明（包括、包装、灭菌柜内的装载图）；
2）灭菌器的技术条件；
3）设施验证数据；
4）所有性能的物理记录和生物记录；
5）所有仪表记录仪等在进行性能验证时的校准说明；
6）复审和重新验证的方案（如需要）；
7）验证方案；
8）所用程序的文件资料；
9）所有人员的培训记录与证书（复印件）；
10）文件化操作规程，包括过程界限；
11）程序维持与校核。
验证报告在获得最终批准之前，所有参加验证方案会签的人员应对其内容进行审核确认，授权人正式签字批准后，形成正式文件，并将验证结果通报有关职能部门，作为制定工艺文件或作业指导书的一个重要依据。
验证结束后，有关的资料应由职能部门负责整理归档，便于今后的验证工作或新的项目实施验证时参考。
验证文件、资料的保管按性质可分为两大类：
厂房、设备性的验证资料应作为长期保存，生产过程工艺性的验证资料可根据企业情况制订保存期限。
第二章环氧乙烷灭菌验证基本概念
一．微生物
微生物是存在于自然界中的一群形体微小、构造简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍、甚至几万倍才能观察到的低等生物。
微生物一般由单细胞构成也有简单的多细胞，具有一定的形态、结构、生理功能，并能在适宜的环境中快速地生长和繁殖。
微生物的种类繁多，至少十万种以上，按其结构.组成等差异可分成三大类:
1、非细胞型微生物：
体积微小,能通过滤菌器,只能在活细胞内生长繁殖。
病毒属此类。
2、原核细胞型微生物：
仅有原始核，无核仁和核膜，缺乏完整的细胞器。
如：
细菌衣原体，支原体，螺旋体和放线菌。
3、真核细胞型微生物：
细胞核的分化程度较高，有核膜、核仁和染色体，胞浆内有完整的细胞器。
真菌属此类。
由于病毒、细菌、真菌等形态结构、生理活动、代谢产物等不尽相同，它们又可各自进一步分类。
必须指出，细菌形态保证在分类中仅仅是初步的鉴定依据，一般需按其生理特征，抗原构造和DNA硷基组成等鉴定。
二、细菌
细菌是一类具有细胞壁的单细胞微生物。
细菌形态微小、结构简单，无典型的细胞核，只有核质（染色体），无核膜和核仁，不进行有丝分裂，除核蛋白体外无其他细胞器。
细菌在一定环境下有相对恒定的形态结构。
细菌的结构与其生理功能、致病、免疫等特性有
关。
细菌个体很小须用显微镜放大数百倍才能看见。
一般以微米
（1μm=1/1000mm）作为测量其大小的单位，不同种类的细菌大小不一，同一种细菌也可受菌龄和环境因素的影响，其大小有所差异。
细菌的外形有球形、杆形、螺形三种基本形态，分别称为球菌、杆菌和螺旋菌。
三、产品初始污染菌要求
指灭菌前，附着在包装材料和医疗用品上的全部活的微生物之和。
灭菌产品管道类内腔≤10cfu/件次，外部≤100cfu/件次；
非管道类≤100cfu/件次；
敷料类≤100cfu/g；
消毒产品≤1000cfu/件次或重量（g）。
应当指出，初始污染菌是产品从原料、加工、外协件、组装、过程检验、车间与员工卫生状况、传递、包装等环节中被污染的，它提供微生物污染信息，了解微生物污染水平，有利于分析污染微生物分类，用以提高产品安全卫生水平。
初始污染菌的检验是方法结果，没有一个方法能检出产品存活全部微生物。
二种检测方法比较
项目
GB15980
EN1174-1
洗涤剂
培养基
校正因子
无菌生理蓝水
营养琼脂
无
含蛋白胨，表面活性剂
胰酪大豆琼脂
有
初始污染菌的检测，灭菌产品分别检验管道内腔与外部染菌数。
对一次性使用医疗器具如输液器、输血器、注射器等，检验管道内初始污染菌尤为重要。
附：
GB15980-1995《一次性使用医疗用品卫生标准》附录C：
初始污染菌数检测：
C1采样方法
C1．1对可用破坏性方法取样的医疗用品，如输液（血）器、注射器、注射针、透析器及各类导管等，按中华人民共和国药典（1990年版）规定执行。
C1．2对不能用破坏性方法取样的特殊医疗用品可用浸有生理盐水的棉拭子涂抹采样，被采表面<
100cm2取全部表面；
被采表面≥100cm2取100cm2。
C1．3敷料类可用无菌手续取10g，放入100mL生理盐水中，充分振荡后取样。
C1.4采样数量：
各类产品每批随机抽取10件样品。
C2检验方法和结果计算
将每样取5份平行样，检验方法参照GB7918.2《化妆品微生物标准检查方法》规定执行。
计算公式为：
平均菌数*稀释倍数
菌数/每件次（或g）=—————————
件次或重量（g）
四、消毒
用物理或化学方法杀灭或清除传播媒介上的病原微生物，使其达到无害化。
试验菌杀灭率≥99.9%以上，或对自然菌杀灭率≥90%以上可判为符合消毒使用要求。
五、灭菌：
使产品无任何类型存活微生物的过程。
即用物理或化学方法杀灭传播媒介上所有的微生物，使其达到无菌。
在杀菌试验中为便于给结果做出评价，除有特殊规定外，将试验菌芽孢（菌量≥106cfu）灭菌指数达到106，也就是说，灭菌后1000000（一百万件）灭菌物中，只允许有一件以下有活的微生物存在，或自然微生物全部杀灭者为灭菌合格≥99.9999%。
六、生物指示物
对特定灭菌处理有确定的抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体。
用于监测消毒或灭菌效果。
指示物包括指示卡、片、条、带、器等各种形式的指示器件。
对用于监测环氧乙烷灭菌效果的菌片，试验微生物的额定总数必须不小于1*106cfu。
环氧乙烷灭菌以枯草杆菌黑色变种芽孢（ATCC9372）为指示菌，灭活指数达到106。
生物指示物分菌片式生物指示物和自含式生物指示物二种。
自含式生物指示物是兼菌片与培养基为一体的生物指示物。
生物指示物国家标准：
GB18281.2-2000《医疗保健产品灭菌生物指示物第2部分：
环氧乙烷灭菌用生物指示物》
生物指示物的性能会受到使用前的贮存环境、使用方法或暴露于灭菌工艺所用技术的影响，因此，应遵守生产者的建议进行贮存和使用，而且应当在暴露于灭菌工艺之后，尽快地把生物指示物转至规定条件下复苏。
生物指示物超过了规定的有效期不得使用。
进行微生物性能鉴定时对生物指示物应选用：
1、有卫生许可证与产品注册证的产品；
2、产品应符合GB18281.2--2000标准；
3、产品应有合格证；
应使用同一生产厂家的同一批号产品，做灭菌验证。
应根据GB1828.2--2000检验含菌量，并符合标准要求。
通过活菌计数，进行该数目的追溯性测定。
假若所获得的数目是在生产者规定的额定总数-50%和+300%范围之内，或处于生产者规定总数的最小值与最大值中间，应判为合格。
检验方法：
GB18281.2--2000标准附录A
七、化学指示物
暴露于灭菌工艺后，以显示物质发生物理和（或）化学变化来指示灭菌过程的化学制品。
常通过颜色或形态改变来指示杀菌因子强度或消毒灭菌情况。
化学指示物包括指示卡、片、条、带、器等各种形式的指示器件。
用于指示环氧乙烷灭菌过程化学指示物，常用的有天津大学的圆形纸质化学指示片和美国3M公司的“斑马带”。
目前环氧乙烷化学指示物变色原理有三大类：
1、酸碱法
2、偶氮染料反应法
3、特效反应法
根据变色原理，化学指示物在使用前或灭菌后应避免化学物接触，使指示物变色或产生可逆反应。
化学指示物国家标准：
GB18281.1-2000《医疗保健产品灭菌化学指示物第1部分：
通则》
八、环氧乙烷
环氧乙烷（EthyleneOxide简称EO）,又名氧化乙烯，分子式C2H4O,化学结构式CH2-CH2
升级会员 