张建宇论文1 化学合成肽聚糖Word文件下载.docx

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1.2.4.2用于畜牧水产养殖业8

1.2.4.3用于微生物的分类鉴定8

1.2.5肽聚糖的发展前景8

1.3胞壁酰二肽9

1.4点击化学9

第二章实验设计10

2.1课题研究思路10

2.2实验具体设计10

第三章实验试剂与仪器11

3.1试剂11

3.1.1固体试剂11

3.1.2液体试剂12

3.1.3实验仪器与设备13

第四章实验部分14

4.1乙酰化反应14

4.1.1反应式15

4.1.2反应过程15

4.1.3小结15

4.2B化合物1位的溴代反应15

4.2.1反应式16

4.2.2反应过程16

4.2.3小结17

4.3B化合物1位的氯化18

4.3.1反应式18

4.3.2反应过程18

4.3.3小结18

4.4叠氮化反应19

4.4.1反应式19

4.4.2反应过程19

4.4.3小结20

4.5水解反应20

4.5.1反应式20

4.5.2反应过程20

4.5.3小结21

4.6上苄叉反应21

4.6.1反应式21

4.6.2反应过程21

4.6.3小结21

第五章课题总结与展望22

5.1课题总结22

5.2展望22

参考文献22

致谢25

承诺书26

学位论文使用授权声明27

摘要

内容摘要：

抗生素的普遍使用而导致抗生素残留问题愈发严重，然而天然合成的肽聚糖由于存在活性不稳定，易产生毒副作用等弊端，无法替代抗生素。

为了得到高纯度且实用性高的肽聚糖以取代抗生素，解决抗生素残留问题，本实验通过设计合理化学的途径合成胞壁酰二肽，再利用点击化学的方法来实现肽聚糖的合成，此方法具有高效简洁的特点，合成的肽聚糖具有纯度高，无杂质的干扰，水溶性可调控，利于对肽聚糖构效关系的研究和聚合度的研究。

关键词：

肽聚糖；

胞壁酰二肽；

点击化学

Abstract

Content:

KeyWords:

第一章研究背景

1.1抗生素残留

随着人们生活水平的提高和对动物性产品消费需求的不断增加，畜牧养殖业迅速的发展起来，由于抗生素具备防病、治病、促进动物生长、提高饲料转化率等功效而被作为饲料添加剂在畜牧养殖业生产中广泛应用。

但普遍使用抗生素在带来增产等经济效益的同时，也造成了兽药抗生素的残留和其他负面影响。

兽药抗生素残留直接影响着动物产品的安全与卫生、畜牧业的生产与经济,而且极大的威胁着土壤、水体等环境的质量安全和人类的身体健康与生存环境。

因此，兽药抗生素残留和造成的污染已成为重要的环境问题之一。

1.1.1抗生素残留的来源

兽药抗生素进入动物体内后,动物可以主动或被动地吸收抗生素,使抗生素分布全身。

大部分抗生素不能完全被机体吸收,而有高达85%以上的抗生素以原形或代谢物形式经由畜禽粪尿排出体外,经不同途径对土壤和水体造成污染。

导致抗生素残留的原因是多方面的，根据美国对抗生素残留的调查发现：

产生抗生素残留超标，76%的原因是不遵守休药期规定，18%是饲料污染和不正确使用抗生素，6%为其他原因【1】。

1.1.2动物性产品中的抗生素残留

动物在吸收抗生素后,通过代谢、泌乳和产蛋等过程，在肉、蛋、奶中形成残留。

1.1.2.1畜禽产品的抗生素残留

任永红等【2】随机采取石家庄市部分市场上销售的猪、牛肉样品100份，用色谱法对这100份猪、牛肉样品进行土霉素、四环素、金霉素残留量调查分析，发现50份猪肉样品土霉素、四环素、金霉素分别检出32、39和22份;

10份牛肉样品土霉素、四环素、金霉素分别检出6、3和6份。

说明市场销售的猪、牛肉均不同程度残留抗生素。

据张莉等【3】对哈尔滨市农贸市场30份鸡肉、鸡肝的检测结果显示，鸡肉中土霉素的检出率为64.0%，鸡肝中土霉素的检出率为80%（土霉素的最低检出限为0.06）。

德国环境与自然保护联盟近期发布报告称，抽样检查显示目前德国超市出售的鸡肉中半数以上含有超量的抗生素残留物。

德国风险评估研究所2009年曾开展关与鸡肉中是否存在耐药细菌检测，结果发生在629份鸡肉样本中，22.3％的样本疑似含有耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），另在火鸡肉、猪肉、牛肉中也发现了这种葡萄球菌的痕迹。

1.1.2.2牛奶中的抗生素残留

崔海辉【4】对浙江省范围内的鲜牛奶与消毒牛奶中氯霉素、四环素类兽药残留量进行专项调查，并用酶标免疫试剂盒对鲜牛奶与消毒牛奶中氯霉素、四环素类兽药残留进行检测，共调查了鲜牛奶和消毒牛奶各140批次，涉及53个厂家，10个地区，合格为132和136批次，不合格为8和4批次，合格率为94.3%和97.1％。

高建新等【5】引进DeIvotestSP检测技术,对江西省各大超市、经销点销售的国产婴幼儿奶粉、液态奶及进口婴幼儿奶粉进行抗生素残留量检测，发现国产婴幼儿奶粉中抗生素残留阳性率34.40%，液态奶抗生素残留阳性率15.27%，进口婴幼儿奶粉抗生素残留阳性率0.00%。

说明国产婴幼儿奶粉及液态奶中抗生素残留超标严重。

张健等【6】在2006-2009年期间，采用随机抽样的方法分别对广州市十个区以及两个地级市共计302份奶类样品进行了抗生素残留、金黄色葡萄球菌以及葡萄球菌肠毒素的检测，发现302份样品中有62份检测到有抗生素残留，阳性率为20.53%；

奶粉类抗生素残留量高,为29.51%；

纯奶类次之,为22.67%。

而随机抽取的42份奶制品均未检出金黄色葡萄球菌，肠毒素检测阴性；

10份生奶有7份检出金黄色葡萄球菌,其中5份肠毒素检测呈阳性。

1.1.3抗生素残留的危害

1.1.3.1抗生素残留对人体的危害

人长期食用含有抗生素残留的动物性食品可产生毒性作用；

可导致病原菌产生耐药性；

可破坏人体胃肠道微生态环境，造成正常菌落失调；

可引发过敏反应；

可产生致畸、致癌、致突变作用；

可损害人的肝脏和听力。

1.1.3.2抗生素残留产生的社会问题

抗生素残留在对人体造成危害的同时也在危害作物、污染环境。

它通过施用畜禽粪尿进入土壤后，一方面通过雨水冲洗进入地表和地下水环境中，对水资源产生污染，危害以水产养殖业；

另一方面，抗生素可能含有持久性污染物如四环素类和磺胺类药物，在土壤中蓄积而被作物吸收积累，从而进入食物链对人体产生危害。

抗生素残留严重制约着我国畜产品的出口，现如今随着人们生活质量的提高，对食品的安全越来越重视，而抗生素残留正在成为国际食品贸易中最易引发贸易冲突的敏感问题，这也严重制约着我国畜产品的出口和创汇。

我国是世界上畜牧业生产大国，肉、蛋产量均居世界第一位，但年出口量仅60万吨，仅占总量的1%，其原因是以药物残留和耐药菌的检查作为重要指标影响了出口【7】。

1.1.4对策之用肽聚糖替代抗生素

肽聚糖（peptidoglycan，PGN）作为非特异性免疫增强剂，可应用于水产养殖以提高养殖动物的免疫力和机体的防御能力，增强动物的抗病力，而肽聚糖本身对环境无污染且无残留，根据这些优良的特性，用肽聚糖来替代抗生素应用于畜牧业生产中是很好的选择，而且前景广阔。

天然提取的肽聚糖是具有活性的。

张向武等【8】采用青霉素诱导结合凝胶层析技术从金黄色葡萄球菌获取纯度及生物学活性较高的可溶性肽聚糖。

马西艺等【9】用通过分离乳酸杆菌细胞壁得到的肽聚糖，进行小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验，C3b受体实验以及血清溶菌酶活力实验，证实所分离纯化肽聚糖的免疫学活性未受影响。

上面的实例都能说明天然提取的肽聚糖是具有活性的，但是由于不同细菌的化学成分不同，天然提取的肽聚糖来源比较复杂，活性不是很好。

天然提取的肽聚糖也被证实部分水解时的活性好于完全水解或完全不水解时的活性，但在提取过程中难以控制使其达到部分水解。

而且，部分水解说明天然提取的肽聚糖聚合度不高。

天然提取肽聚糖因操作方法的不同也导致其活性存在差别。

天然提取的肽聚糖水溶性难以控制，而且提取中含有较多杂质，故容易产生毒副作用和药物残留。

可见天然提取肽聚糖存在种种制约和弊端，而用化学方法来合成肽聚糖是一种新的途径，它具有高效简洁的特点，合成的肽聚糖纯度高，可避免杂质的干扰；

其水溶性可以得到调控；

利于构效关系的研究和聚合度的研究。

1.2肽聚糖的研究进展

肽聚糖（peptidoglycan，PGN）是构成细菌细胞壁基本骨架的主要成分，结构具有多样性的特点。

除嗜盐菌等极少数细菌外，几乎所有细菌的细胞壁都含有肽聚糖【10】。

某些革兰氏阳性细菌细胞壁中的肽聚糖含量高达95％，而革兰氏阴性细菌一般在5％-10％的含量【11】。

因为肽聚糖具有免疫增强和抗肿瘤等方面的特性，而受到广泛的关注。

1.2.1结构与分类

图1.1.1Lys型和Dap型肽聚糖结构

肽聚糖又称胞壁质（murein）、粘肽（mucopeptide）等，是构成细菌细胞壁基本骨架的主要成分。

它位于细胞壁与原生质膜之间的那层胞外质空间，是由N-乙酰葡萄糖胺（N-acetylglucosamine简写G）和N-乙酰胞壁酸（N-acetylmuramicacid简写M）构成的糖链和肽链组成的（如图1）。

聚糖链骨架是由G和M通过β-1，4糖苷键交替联接而成。

肽链则是通过一个酰胺键与M相连。

肽链与M之间的连接不是一个真正的“肽键”，而是一个酰胺键。

因为连接的双方，一方是氨基糖【12】，另一方是氨基酸。

通常，在肽聚糖的结构中，有一个由4种氨基酸构成的短肽链，邻近的短肽链彼此通过肽桥相连，从而构成胞壁的网状骨架结构。

用G+细菌中的金黄色葡萄球菌（staphylococcusaureus）肽聚糖分子为例，它由聚糖和肽链两部分组成，其中的聚糖是由N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸两种单糖相互间隔连接而成的长链，肽链包括四肽尾和肽桥两大部分。

每一个肽聚糖单体由3部分组成：

①双糖单位。

②四肽尾（或称四肽侧链）。

S.aureus的四肽尾是接在N-乙酰胞壁酸上的L-Ala、D-Glu、L-Lys、D-Ala，其中两种D型氨基酸一般仅在细菌细胞壁上见到。

③肽桥（或称肽间桥），S.aureu的肽桥为甘氨酸五肽，起着连接前后两个肽尾分子的桥梁作用。

G-细菌（以E.coli为例）与G+细菌（以S.aureus为例）的肽聚糖存在着差别，这种差别在于G-细菌四肽尾的第三个氨基酸分子是内消旋二氨基庚二酸（m-DAP），而不是L-Lys。

E.coli肽聚糖中相邻两单体间仅通过甲四肽尾的第四个氨基酸（D-Ala）的羧基与乙四肽尾的第三个氨基酸（m-DAP）的氨基直接相连，其原因是它的构造中没有特殊的肽桥。

革兰氏阳性细菌肽聚糖可以分为A群和B群，其依据是连接在N-乙酰胞壁酸上的相邻的两条短肽（肽亚单位）之间交联方式的不同。

A群短肽链的第三位氨基酸为双氨基的氨基酸，如L-鸟氨酸、L-赖氨酸，与邻近肽链以3～4交联，乳酸菌多属于这种类型；

B群短肽链的间肽桥在两条肽亚单位的2位和4位之间交联，它的第三位结构不固定，中间肽桥包括两种氨基酸，第二位的D-谷氨酸和第四位的D-丙氨酸。

B群肽聚糖比A群少见，现在的研究中，只在某些棒状细菌特别是植物病原性棒状杆菌中发现。

把所有的阴性菌的肽聚糖都归属于同一类型，其原因是革兰氏阴性细菌的肽聚糖结构变化不大，其中短肽链中只含有D-谷氨酸、中体双氨基庚二酸和D，L-丙氨酸。

1.2.2肽聚糖的生物合成和分离纯化

1.2.2.1肽聚糖的生物合成

肽聚糖的生物合成可分为三个阶段，其划分依据是合成的部位不同。

第一个阶段：

合成UDP-NAMA-五肽，在细胞质中进行；

第二阶段：

包括NAG与NAMA一五肽结合形成肽聚糖单体以及类脂载体的再生，在细胞膜上进行；

第三阶段：

肽聚糖链通过肽链间的连结发生交联，在细胞壁上进行。

科学家们已经对肽聚糖的生物合成进行了深入的研究【13,14】。

肽聚糖在合成的不同阶段会受到某些抗生素的抑制作用，磷霉素作用于PEP转移酶，阻止UDP-GNAc与PEP进行反应；

D-环丝氨酸作用于丙氨酸消旋酶，阻止L-丙氨酸转变成D-丙氨酸；

杆菌肽作用于焦磷酸化酶，阻止脂类载体再生；

瑞斯托菌素和万古霉素作用于转糖苷作用，使双糖单位不能向肽聚糖链上转移；

青霉素作用于转肽作用，阻止肽聚糖进行交联。

总之，这些抗生素都是作用于肽聚糖生物合成的抗生素，它们当中的任何一种都能使细菌无法形成完整的细胞壁。

图1.1.2.1金黄色葡萄球菌肽聚糖的生物合成图示

图2所示为金黄色葡萄球菌（staphylococcusaureus）肽聚糖的生物合成途径、场所以及某些抗生素的作用部位。

G：

NAG；

M：

NAMA；

C55-P：

类脂载体；

①：

L-丙氨酸；

②：

D-谷氨酸；

③：

L-赖氨酸；

④：

D-丙氨酸；

⑤：

α-丙氨酸；

o：

甘氨酸；

二：

抗生素作用部位；

Ⅰ：

磷霉素；

Ⅱ：

D-环丝氨酸；

Ⅲ：

持久霉素；

Ⅳ：

杆菌肽；

Ⅴ：

万古霉素；

Ⅵ：

青霉素。

1.2.2.2肽聚糖的分离纯化

目前国内外研究者已经对多种细菌细胞壁肽聚糖进行了分离纯化，其方法包括超声波法、溶菌酶法、三氯乙酸法等，但超声波法和溶菌酶法实验步骤较三氯乙酸法繁琐，需经过多次离心和洗涤，在这个过程中不可避免会造成肽聚糖的损失，会使得肽聚糖得率大大降低。

朱丽等[15]采用三氯乙酸法提取了植物乳杆菌细胞壁肽聚糖，通过红外光谱分析，证实提取物具有肽聚糖特征性结构。

马西艺等[9]通过超声破碎法对肽聚糖进行分离，粗细胞壁分离，SDS处理、SDS加胰蛋白酶处理及TCA处理，并通过小白鼠腹腔巨噬细胞的吞噬实验、C3b受体实验以及血清溶菌酶活力实验，证实SDS处理、SDS加胰蛋白酶处理及TCA处理的肽聚糖提取物均具有免疫学活性，所以此方法所分离纯化肽聚糖的免疫学活性未受影响，可用于活性肽聚糖的提取。

刘景圣等[16]分别采用超声波法、溶菌酶法、三氯乙酸法对嗜酸乳杆菌细胞壁肽聚糖进行分离提取，结果表明超声波法的最优提取条件为超声功率400w，超声时间30min，水浴温度40℃，肽聚糖得率10.2％；

溶菌酶法的最优提取条件为溶菌酶添加量4mg／mL，水浴温度55℃，作用时间5h，pH7，肽聚糖得率10.0％；

三氯乙酸法提取肽聚糖得率15.8％。

乐军、胡宏[17]在双歧杆菌细胞壁完整肽聚糖（wholepeptidoglycan,WPG）的实验中是采用国内分离的双歧杆菌菌株Bif[10]，通过用TritonX-100处理BL肉汤培养物，高速离心分离不可溶沉渣，经蛋白酶E、胃蛋白酶、α-糜蛋白酶、胰酶、核酸酶消化，甲醇与氯仿除脂，0.01NH2SO4处理等步骤提纯而得到完整肽聚糖。

以上研究结果表明当今研究者们分离纯化多种细菌细胞壁肽聚糖的技术已经趋于成熟，但在提高肽聚糖的得率、纯度以及完整性方面的研究仍有很大空间。

1.2.3肽聚糖的生物学活性及功能

在哺乳动物体内，肽聚糖片段发挥着各种各样的生物学活性，如免疫调节、感染、抗肿瘤、抗新陈代谢活性、致热性、细胞毒性（依赖于肽聚糖片段的大小和组成）等[9]。

革兰氏阴性菌肽聚糖具有很高的药理活性，相对而言，革兰氏阳性菌肽聚糖的活性较弱，但却十分重要[18]，其重要性体现在抗肿瘤等方面，Goguel[19]等研究表明从革兰氏阳性菌提取的肽聚糖具有抗肿瘤活性。

1.2.3.1免疫调节

肽聚糖是人类免疫系统的激活剂，它能刺激单核噬菌细胞和内皮细胞释放免疫调控物质[20,21]，如肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素（IL1,IL6,IL8,IL12）、干扰素A，以及减少氧的种类和脂质。

少量肽聚糖对于宿主重要生理功能（如免疫系统）的维持和促进是非常重要的。

相反，在严重的细菌感染过程中，大量的肽聚糖被释放进入血液，过度地刺激免疫系统会造成病理生理反应，这些病理生理反应表现为发烧、体温降低、血压过低、多器官衰竭和败血性休克等症状[21]。

细菌细胞壁肽聚糖可经口服或非胃肠道途径增强宿主的免疫监视功能，加强各种细胞因子和抗体（IgA）的产生，提高NK和巨噬细胞活性等，提高局部或全身的免疫功能，发挥自稳调节和抗感染、抗肿瘤效应[18]。

苏广伟等[22]将乳酸杆菌肽聚糖以腹腔注射方式刺激小鼠，检测其对细胞免疫因子的作用，结果发现乳酸杆菌肽聚糖能提高受刺激小鼠腹腔巨噬细胞中炎性细胞因子白介素1、TNF-α仅及脾淋巴细胞IFN-γ的分泌。

郭玉娟[23]研究表明给彭泽鲫注射接种灭活嗜水气单胞菌苗，然后投喂含有肽聚糖的饲料，测定鲫鱼白细胞吞噬活性、血清和体表粘液溶菌酶活性、抗体效价以及活菌攻毒后的免疫保护率等免疫指标，结果显示各项免疫指标显著提高，表明A3α肽聚糖可增强受免彭泽鲫的免疫应答效果。

山崎正利在其专利中指出含有作为活性成分的基本不含胞壁酰二肽、且分子量不大于10000的肽聚糖的口服免疫增强剂，它通过口服给予后有可能增强哺乳动物的免疫力。

以上研究结果说明细菌细胞壁肽聚糖是一种免疫增强剂，主要通过诱导各种免疫调控物质的释放或表达来刺激免疫系统发挥相应的免疫功能。

肽聚糖的免疫作用机制被认为是宿主通过识别肽聚糖结构，对入侵细菌作出相应的免疫应答[24]。

天然免疫系统中存有一系列模式识别受体，可以识别入侵细菌的肽聚糖等病原体相关分子模式，通过不同的信号传导途径释放相同的免疫调控物质，如白介素（IL）、TNF-α等多种细胞素，在抵抗入侵病原体中发挥免疫功能。

研究发现，免疫作用的可能机制是当不同类病原体（如G-细菌、G+细菌或真菌）侵入宿主时，可被不同的模式识别受体识别，激活相应的信号转导途径，诱导各种免疫反应[25]。

1.2.3.2抗肿瘤作用

王立生等[26]以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型，观察了分叉双歧杆菌的完整肽聚糖体内对大肠癌生长的抑制作用，并从细胞增殖活性方面探讨了它的抑瘤机制，实验结果表明完整肽聚糖注射组大肠癌移植瘤的生长速度、平均瘤重以及增殖细胞核抗原（PCNA）阳性细胞密度均明显低于肿瘤对照组（P<

0.01）。

从此实验结果可以看出分叉双歧杆菌的完整肽聚糖体内能明显抑制大肠癌的生长，其抑瘤机制之一是降低肿瘤细胞的增殖活性。

郑玉寅等[27]从乌贼墨中提取出肽聚糖，纯化后作用于DU-145和PC-3这两种前列腺癌细胞，发现他对这两种细胞均有较明显的增殖抑制效应，且抑制作用具有明显量效依赖关系，说明乌贼墨肽聚糖具有明显的抗前列腺癌作用。

齐占朋等[28]研究表明经双歧杆菌表面分子完整肽聚糖处理过的大肠癌Lovo细胞生长被抑制，早期凋亡细胞明显增加，其抑制作用与诱导癌细胞早期凋亡有关。

Sekine等将婴儿双歧杆菌细胞壁中的完整肽聚糖和MethA纤维肉瘤细胞混合接种到小鼠皮下，结果证实它能显著抑制该瘤生长，此外将完整肽聚糖注射于荷瘤鼠的MethA纤维肉瘤的瘤体内，也具有较明显的抗肿瘤作用[29]。

由此认为完整肽聚糖是双歧杆菌发挥抗肿瘤作用的主要成分，也是一种无任何毒副作用的生物反应调节剂。

1.2.3.3细胞毒性

细菌感染严重时，一些炎症细胞因子通过肽聚糖诱导而大量释放，从而诱发动物机体感染。

蒋玫等[30]将油包水淋球菌PGN乳剂注入Lewis鼠，可引起严重的伴有血管翳的滑膜炎，并可侵蚀软骨和骨组织。

细菌细胞壁肽聚糖-多糖（PG-PS）聚合物可引起急性炎症反应，并可发展为病程迁延的轻症慢性炎症过程。

炎症反应可通过许多细菌（包括正常菌群和致病菌）的PG-PS来诱发。

目前研究发现PG-PS引起的动物实验性疾病包括轻型兔皮肤结节性损害，类似风湿性心脏炎的小鼠心脏炎，兔膝关节滑膜炎，Lewis鼠肉芽肿小肠结肠炎，鼠肠出血，鼠慢性、轻型侵蚀性关节炎，这些提示PG-PS可引起多系统疾病[30]。

有研究表明细菌成分肽聚糖可通过Toll样受体激活嗜碱性粒细胞（尤其有变态反应性疾病遗传史时）释放介质，可能是变态反应性疾病发病增加的原因[31]。

1.2.3.4其他活性

肽聚糖还具有粘附作用，是真核生物免疫系统识别的理想靶位。

双歧杆菌能在哺乳动物的胃肠道定植形成一层生物屏障，避免致病菌及其他有害微生物与肠壁接触，粘附是其机制的第一步，也是该菌发挥生理作用的前提。

邓一平[32]等用提纯的双歧杆菌（B.Bif1103）做体外粘附实验证明，PGN对猪胃粘膜糖蛋白具有一定的粘附作用。

不同种动物的细胞中存在PGN识别蛋白，它能够与PGN结合，从而发挥一定的免疫功能。

1.2.4肽聚糖的应用

1.2.4.1用于疾病的诊治研究

目前国外医学界已广泛应用ELISA测量抗肽聚糖血清的效价，再用此血清鉴定病人的疾病。

研究表明肽聚糖是人类免疫系统的免疫增强剂，它能刺激单核噬菌细胞和内皮细胞释放免疫调控物质[25]。

它所具有的抗肿瘤等活性，可以开发成有重要价值的人类医药产品，但在剂量上应做到合理、适当，原因是肽聚糖也具有一定的生物学毒性。

1.2.4.2用于畜牧水产养殖业

黄偼，王秀华[33]等在对日本对虾的研究中发现肽聚糖可以明显的提高对虾血清中的凝集素、溶血素、酚氧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶的活力。

王秀华等[34]在室内用添加肽聚糖的饵料投喂日本对虾后，用对虾病毒进行浸浴感染，结果显示所有添加肽聚糖的试验组的对虾成活率在85％-100％之间，均显著高于对照组15％-30％，这说明肽聚糖用于对虾养殖，可以增强对虾对病毒的抵抗能力，提高对虾在病毒感染状态下的存活率，且将肽聚糖添加到饵料中对对虾生长有促进作用。

永胜等[35]从干酪乳杆菌细胞壁提取的肽聚糖作为佐剂，将其与禽流感疫苗混合后致免小鸡，证实它对禽流感疫苗有免疫协同作用。

宋晓玲等[36]将肽聚糖制剂添加到普通对虾饲料中，制成分别含肽聚糖制剂1％和0．1％的免疫饲料，按常规方法投喂凡纳对虾，凡纳对虾摄食添加了肽聚糖制剂的免疫饲料后，明显提高了对虾抵御WSSV感染的能力，到实验结束时累计死亡率只有10％，实验结果表明在对虾饲料中添加肽聚糖可提高对虾抗病毒感染能力，从而达到防病治病、增加生产收益的目的。

以上研究表明通过把肽聚糖作为畜禽饲料添加剂或以增强免疫力的药物添加剂的方式，来减少抗生素药物的使用量。

这样就能有效解决水产养殖中为防治病害而大量使用抗生素药物所导致的生物抗药性问题，也可以有效解决食品的药物残留问题，而且还能增加水产养殖的收益。

1.2.4.3用于微生物的分类鉴定

细菌肽聚糖分子中肽尾第三位氨基酸的种类肽桥的结构以及临近肽尾交联的位置，常被用作现代微生物分类鉴定中的重要依据[37]。

其中四肽侧链的第3个氨基酸常被称作诊断性氨基酸（diagnosticaminoacid），是因其存在多样性，在分类上有较大的应用价值，如第三位为赖氨酸（Lys），与邻近肽尾以3-4交联者，为Streptococcus（链球菌属）、Staphy