维C银翘片中维生素C的测定.docx

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维C银翘片中维生素C的测定

酒泉职业技术学院

毕业设计（论文）

2009级应用化工及生产技术专业

题目：

维C银翘片中维生素C的测定

毕业时间：

2012年6月

学生姓名：

沈佩佩

指导教师：

郭文婷

班级：

2009应化（3）班

2011年6月20日

酒泉职业技术学院2012届各专业

毕业论文（设计）成绩评定表

姓名

沈佩佩

班级

2009级应化（3）班

专业

应用化工及生产技术

指导教师第一次指导意见

论文题目与内容相符，选材较好，逻辑顺序合理，文章整体结构完整，但实验部分条理不太清楚，格式问题较多，希望加以改正。

2011年4月8日

指导教师第二次指导意见

论文格式基本符合论文要求，条理清晰，思路明确，逻辑性强，实验部分设计思路较为清晰，但有部分格式仍存在问题。

希望参照学院化工系网站的论文格式要求进行修改，章节之间注意分页。

2011年5月18日

指导教师第三次指导意见

经过几次修改，实验条理清楚,格式符合论文要求，说服力强，逻辑性强。

2011年6月11日

指导教师评语及评分

该同学能在老师的严格要求下很好的完成整个毕业设计工作和论文的撰写。

界面安排合理，论文符合要求。

在整个毕业设计的过程，态度端正，学习也比较认真。

希望该同学在以后的工作或学习中，争取更大的提高和进步。

成绩：

优秀签字（盖章）2011年6月16日

答辩小组评价意见及评分

成绩：

签字（盖章）年月日

教学系毕业实践环节指导小组意见

签字（盖章）年月日

学院毕业实践环节指导委员会审核意见

签字（盖章）年月日

说明：

1、以上各栏必须按要求逐项填写.。

2、此表附于毕业论文（设计）封面之后。

摘　　要

本文主要是对维C银翘片的化学性质以及维C银翘片中维生素C的测定进行了研究，由于维生素C具有较强的还原性，对光敏感，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，脱氢抗坏血酸仍然具有生理活性。

进一步水解则生成2，3-二酮古洛糖酸，并失去生理活性。

食品中的维生素C主要以前2种形式存在，通常以二者的总量表示食品中维生素C的含量。

紫外测定法是维生素C快速测定的方法，操作简单，不受其它还原性物质等成分的干扰。

其原理是根据维生素C具有对紫外光产生吸收、对碱不稳定的特性，在243nm处测定样品液与碱处理样品液两者吸光度值之差，并通过标准曲线，即可计算出维生素C的含量。

关键词：

维C银翘片，维生素C，紫外分光光度计，化合物的电子光谱

一、绪论

（一）维C银翘片的成份

　　金银花、连翘、荆芥、淡豆豉、牛蒡子、桔梗、薄荷油、芦根、淡竹叶、甘草、维生素C、马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚13味。

辅料为淀粉、氧化镁、硬脂酸镁、蔗糖、滑石粉、明胶、柠檬黄、亮蓝。

本品性状为薄膜衣片。

除去包衣后显灰褐色，略带有少许白色斑点；气微、味微苦。

（二）课题研究的背景

维C银翘片是由13味药制成的中西药复方制剂，其中含有维生素C、马来酸氯苯那敏（又称扑尔敏）、对乙酰氨基酚（又称扑热息痛）3种化药成分。

维C银翘片为非处方药，具有辛凉解表，清热解毒的作用，患者可以自行购药。

　　2004年1月1日至2010年4月30日，国家药品不良反应监测中心病例报告数据库中有关维C银翘片的病例报告数共计1885例，严重病例报告共计48例，无死亡报告。

严重病例的不良反应表现为：

全身发疹型皮疹伴瘙痒、严重荨麻疹、重症多形红斑型药疹、大疱性表皮松解症；肝功能异常[1]；过敏性休克、过敏样反应、昏厥；间质性肾炎；白细胞减少、溶血性贫血等。

　　病例报告数据库信息分析显示，维C银翘片的安全性问题与其所含的相关成分有一定关联性。

分析还显示，维C银翘片的使用存在超说明书使用现象，表现为未按照说明书推荐的用法用量使用，同时合并使用与维C银翘片成分相似的其他药品以及对维C银翘片所含成分过敏者用药。

国家食品药品监管局建议医生处方或药店售药时，应提示患者维C银翘片为中西药复方制剂，含马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚及维生素C。

对本品所含成分过敏者禁用，过敏体质者慎用。

患者应严格按说明书用药，避免超剂量、长期连续用药。

用药后应密切观察，出现皮肤瘙痒、皮疹、呼吸困难等早期过敏症状应立即停药并及时处理或立即就诊。

出现食欲不振、尿黄、皮肤黄染等症状应立即停药并监测肝功能，及时就诊。

　　与此同时，国家食品药品监管局要求生产企业完善产品说明书和包装、标签，增加相关安全性信息，并加强上市后安全性研究，确保产品的安全性信息及时传达给医生和患者。

　　近日曾报道维C银翘片可能引起一些不良反应。

在第32期《药品不良反应信息通报》中，国家食品药品监管局证实，如果未按照说明书推荐的用法用量使用，同时合并使用与维C银翘片成分相似的其他药品，或者对维C银翘片所含成分过敏者用药，可能引发药品不良反应。

两种西药成分引起“不良反应”

　　作为中西药复方制剂，维C银翘片由金银花、连翘、荆芥、淡豆豉、牛蒡子、桔梗、薄荷油、芦根、淡竹叶、甘草、维生素C、马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚13味药制成。

维C银翘片不良反应病例分析显示，其药品不良反应多为所含化学成分已知的不良反应，如对乙酰氨基酚（又称“扑热息痛”）的不良反应主要表现为皮疹、荨麻疹、药热、肝肾功能损害以及严重过敏反应等；马来酸氯苯那敏（又称“扑尔敏”）的不良反应主要表现为困倦、虚弱感、嗜睡、口干、咽喉痛、心悸等。

中国中医科学院首席研究员翁维良告诉记者，引起不良反应的主要是指这两种西药成分，而这样的类似反应在其他感冒药中也不同程度存在，并非维C银翘片药品本身有什么质量问题。

　　国家食品药品监管局此次通报维C银翘片的不良反应问题，事实上也给广大百姓使用非处方药提了个醒——在服用不同药品之前，务必看清说明书，也要对自身的药物过敏情况有所了解。

　　维C银翘片说明书明确提示：

本品不能同时服用与本品成分相似的其他抗感冒药。

翁维良告诉记者：

“由于每个人体质不同，对同一种药，并非所有人都能发生不良反应。

患者要了解自己对哪些药有过敏反应并在购药时说明情况，请专业人士给予帮助。

”

（三）维C银翘片现在的使用

“事实上，只要是大品牌的厂家生产的药品，质量还是有保障的。

毕竟不良反应并不等同于药物有质量问题。

”在翁维良看来，相比于其他纯中药制剂，中西药复方制剂的特点是见效快，价格也相对便宜。

翁维良表示，我国维C银翘片的生产厂家一直以来都按质量标准组织生产，大厂的药品质量是有保证的。

为降低用药风险，国家食品药品监管局在维C银翘片安全性提醒中建议：

医生处方或药店售药时，应提示患者维C银翘片为中西药复方制剂。

对本品所含成分过敏者禁用，过敏体质者慎用。

患者在使用维C银翘片等感冒制剂时，应严格按说明书用药，避免超剂量用药。

（四）药物作用

疏风解表、清热解毒。

用于外感风热所致的流行性感冒，症见发热、头痛、咳嗽、口干、咽喉疼痛。

（五）药物规格

　　每片含维生素C49.5mg、对乙酰氨基酚105mg、马来酸氯苯那敏1.05mg

（六）不良反应

　　可见困倦、嗜睡、口渴、虚弱感；偶见皮疹、荨麻疹、药热及粒细胞减少；长期大量用药会导致肝肾功能异常。

严重不良反应表现为：

呼吸困难；全身发疹型皮疹伴瘙痒、严重荨麻疹、重症多形红斑型药疹、大疱性表皮松解症；肝功能异常；过敏性休克、过敏样反应、昏厥；间质性肾炎；白细胞减少、溶血性贫血等。

（七）药物相互作用

1.与其他解热镇痛药并用，有增加肾毒性的危险。

2.如与其他药物同时使用可能会发生药物相互作用，详情请咨询医师或药师。

（八）每片药中成分的含量

金银花180g连翘180g荆芥72g淡豆豉90g淡竹叶72g牛蒡子108g

芦根108g桔梗108g甘草90g马来酸氯苯那敏1.05g对乙酰氨基酚105g维生素C49.5g薄荷油1.08ml

二、实验部分

（一）　实验原料及仪器药品

1.实验原料

实验原料：

维C银翘片

采集时间：

2011年5月27日

采集地点：

酒泉职业技术学院医务室

2.主要仪器

表1　主要仪器及材料

仪器或材料名称

型号（容量）

生产厂家

紫外分光光度计

723型

天津市津维电子仪表有限公司

离心机

GT10-1（原LG10-2.4A）

北京时代北利离心机有限公司

分析天平

AL204型

北京华昊伟业实验器材销售中心

容量瓶

10ml、25ml

/

移液管

0.5ml、1.0ml

/

吸管

/

/

研钵

/

/

3.主要试剂

表２　主要试剂列表

试剂

纯度

生产厂家

锌试剂

分析纯

上海蓝源生物科技有限公司

无水醋酸钠

分析纯

天津新技术应用园区化学试剂有限公司

冰醋酸

分析纯

淮安市永佳染料化工有限公司

二氯甲烷

分析纯

河北金谷油脂科技有限公司

4.实验目的

建立用分光光度法测定维C银翘片中马来酸氯苯那敏含量均匀度的方法。

方法利用马来酸氯苯那敏在酸性水溶液中与锌试剂形成1：

1络合物的光谱特征，选择533nm为测定波长。

结果马来酸氯苯那敏在7～28μg/ml的范围内与吸收度呈良好线性关系，r=0.9994，平均回收率100.81%，RSD=0.79%。

该方法快速、简单，准确可靠，可用于测定维C银翘片中马来酸氯苯那敏的含量均匀度。

（二）实验过程

1.方法

（1）试剂与对照品溶液的配制①pH=4.5醋酸盐缓冲液：

称取无水醋酸钠11g，置1000ml量瓶中，加冰醋酸10ml，再加蒸馏水适量，振摇使溶解，然后加蒸馏水至刻度，摇匀。

②锌试剂试液：

称取锌试剂35mg，置50ml量瓶中，加0.1mol/L氢氧化钠溶液5ml，振摇使溶解，然后加水至刻度，摇匀。

③马来酸氯苯那敏对照品溶液：

取105℃干燥至恒重的马来酸氯苯那敏70mg精密称定，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度。

精密量取5ml，置50ml量瓶中，加丙酮20ml，用pH4.5醋酸盐缓冲液稀释至刻度。

（2）最大吸收波长选择精密量取马来酸氯苯那敏对照品溶液2ml，置100ml分液漏斗中，加pH4.5醋酸盐缓冲液5ml，锌试剂试液2ml，再加水3ml，然后精密加入二氯甲烷10ml，振摇5min，放置20min；分取二氯甲烷层，置1cm吸收池中，以二氯甲烷为空白，用紫外分光光度计在400～600nm波长范围扫描得吸收图谱，结果示其最大吸收波长为533nm，确定为测定波长。

（3）空白干扰试验称取按生产工艺制成的空白样（约相当于1片量），置100ml分液漏斗中，加水30ml，用0.1mol/L氢氧化钠液调pH值至10，二氯甲烷提取四次（15，15，15，10ml），分取二氯甲烷层，置100ml量瓶中，加二氯甲烷至刻度，摇匀；精密量取10ml，置100ml分液漏斗中，按2.2项操作，在533nm波长处测定吸收度，干扰极小。

（4）标准曲线测定及稳定性试验精密量取马来酸氯苯那敏对照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0ml，分别置100ml分液漏斗中，照2.2项操作，在533nm波长处测定吸收度，以马来酸氯苯那敏浓度（mg/ml）为横坐标，以吸收度为纵坐标计算，回归方程为：

x=0.03333y＋0.001863r=0.9994（n=7）经30、60、120min复测，吸收度值无明显变化。

（5）回收率试验取空白样品5份（约相当于1片量），分别置100ml分液漏斗中，分别精密加马来酸氯苯那敏对照品溶液（0.2mg/ml）2.5、3.0、3.5、4.0、4.5ml，加水30ml溶解，用0.1mol/L氢氧化钠液调pH值至10，用二氯甲烷提取4次（25，25，25，20ml），加二氯甲烷至100ml，精密量取10ml置分液漏斗中，按2.2项操作，在533nm波长处测定吸收度，计算。

见表1。

表1回收率测定结果。

（6）样品测定取样品1片，除去糖衣，研细，用水30ml分3次移置100ml分液漏斗中，用0.1mol/L氢氧化钠液调pH值至10，用二氯甲烷提取4次（25，25，25，20ml），加二氯甲烷至100ml摇匀，精密量取10ml置分液漏斗中，按2.2项操作，在533nm波长处测定吸收度。

2.鉴别

方法一：

取维生素C含量测定项下的续滤液适量，用氨试液调节pH至中性，加入适量活性炭（每30ml续滤液中加约0.5g活性炭），加热至沸，滤过。

取二氯靛酚钠试液数滴置点滴板上，滴加滤液数滴，试液的蓝色即消褪。

方法二：

取本品6片，除去糖衣，研细，加乙醇30ml，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液置水浴上蒸干，残渣用10ml水分次溶解，并加于已处理好的氧化铝大孔树脂柱[内径1cm，下层：

D<[101]>型（60～80目）大孔树脂，高7cm，上层氧化铝（100～150目），高3cm。

两层之间铺少许棉花使隔开]上，先用水20ml洗脱，弃去洗液，然后用20%乙醇50ml洗脱，收集乙醇洗脱液，置水浴中蒸干,残渣用甲醇1ml溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液。

另取金银花对照药材1g，加水20ml，置水浴中浸渍1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇30ml，加热回流1小时，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。

再取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。

照薄层色谱法试验,吸取上述三种溶液各2～4ml，分别点于同一以含4%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂的硅胶G薄层板上，以醋酸丁酯-甲酸-水（2：

1：

1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，加热数分钟,置紫外光灯（365nm）下检视。

供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点。

方法三：

取本品6片，除去糖衣，研细，加水25ml，小火煎煮30分钟，滤过，用盐酸溶液（1→2）调节pH值至2，用乙醚提取2次（30、30ml），合并乙醚液，挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，滤过，取滤液作为供试品溶液。

另取连翘对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

照薄层色谱法试验,吸取上述二种溶液各2～4μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯─醋酸乙酯-醋酸（20:

6:

0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

方法四：

取本品2片，除去糖衣，研细，加氯仿10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用1ml氯仿溶解，作为供试品溶液。

另取马来酸氯苯那敏对照品、对乙酰氨基酚对照品，加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。

照薄层色谱法试验,吸取上述两种溶液各2μl,分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-浓氨试液（15：

1：

0.2）为展开剂，展开,取出,晾干,熏以碘蒸气。

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

3.含量测定

取本品10片，除去糖衣，精密称定，研细，混匀，充分研磨,精密称取适量（约相当于维生素C0.2g），置100ml量瓶中，加新煮沸的冷开水10ml、稀醋酸10ml,振摇使充分溶解，用水稀释至刻度，

摇匀，滤过,精密量取续滤液50ml,加淀粉指示液3ml,用碘滴定液（0.1mol/L）滴定至终点（溶液显蓝色并在30秒钟内不褪），即得。

每1ml碘滴定液（0.1mol／L）相当于8.806mgC6H8O6。

本品每片含维生素C（C6H8O6）应为标示量的90.0%～110.0%。

对乙酰氨基酚精密称取维生素C含量测定项下的细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚50mg）,置100ml量瓶中，加适量无水乙醇，超声处理5分钟，使充分溶解，加无水乙醇至刻度，摇匀,滤过，精密量取滤液1ml，置100ml量瓶中，加无水乙醇至刻度,摇匀,作为供试品溶液。

另取对乙酰氨基酚对照品,加无水乙醇制成每1ml含对乙酰氨基酚5μg的溶液,作为对照品溶液。

照分光光度法,在249nm和289nm波长处测定吸收度，分别求出供试品溶液和对照品溶液在两个波长处的吸收度差值△A<[供试品]>、△A<[对照品]>。

△A＝A<[249]>-A<[289]>按下式计算每片中对乙酰氨基酚的含量相当于标示量的百分值：

△A<[供试品]>×对照品浓度×平均片重相当于标示量的百分值=×100%△A<[对照品]>×取样量×稀释体积比×每片标示量，本品每片含对乙酰氨基酚（C8H9NO2）应为标示量的90.0%～110.0%。

另外,在服用药物时忌烟、酒及辛辣、生冷、油腻食物，不宜在服药期间同时服用滋补性中成药。

不适用于风寒感冒，表现为恶寒明显，无汗，头痛身酸，鼻塞流清涕。

本品含马来酸氯苯那敏、对乙酰氨基酚、维生素C。

服用本品期间不得饮酒或含有酒精的饮料；不能同时服用与本品成份相似的其他抗感冒药；肝、肾功能不全者慎用；膀胱颈梗阻、甲状腺功能亢进、青光眼、高血压和前列腺肥大者慎用；孕妇及哺乳期妇女慎用；服药期间不得驾驶机、车、船、从事高空作业、机械作业及操作精密仪器。

心脏病、糖尿病等慢性病严重者应在医师指导下服用。

儿童、年老体弱者应在医师指导下服用。

服药3天后症状无改善，或症状加重，或出现新的严重症状如胸闷、心悸等应立即停药，并去医院就诊。

对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用。

本品性状发生改变时禁止使用。

儿童必须在成人监护下使用。

请将本品放在儿童不能接触的地方。

如正在使用其他药品，使用本品前请咨询医师或药师。

3、结果与讨论

（一）分离方法的选取

薄层色谱法通常指以吸附剂为固定相的一种液相色谱法，即将吸附剂在光洁的表面，如玻璃、金属或塑料等表面上均匀地铺成薄层，而后在薄层板上点样品，以流动相展开。

继而组分不断的被吸附剂吸附，又被流动相溶解，解附而向前运动。

由于吸附剂对不同组分有不同的吸附能力，流动相也有不同的解析能力，因此在流动相向前流动的过程中，不同组分移动不同的距离，使不同物质得到分离。

这种分离的机制是吸附力的强弱差别，所以一般薄层色属于吸附色谱法的范畴。

薄层色谱可应用于判断两个化合物是否相同（同一展开条件下是否有相同的移动值）；也可用于确定混合物中含有的组分数；还常用于为柱色谱选择合适的展开剂，监视柱色谱分离状况和效果；还可应用于检测反应过程。

薄层色谱法的基本操作，包括点样、展开、显点定位等步骤，先分别概述如下：

（二）薄层色谱（TLG）

1.点样

（1）点样量

点样量的多少与薄层的性能、厚薄及显色剂的灵敏度有关，和具体样品的浓度也有关。

点样量对组份的分离结果有很大的影响，点样量太少，可能斑点模糊或完全不显出斑点。

单点样量太多时，展开后往往出现斑点过大或拖尾等情况，从而使Rf指相近的斑点连接起来，达不到分离的效果。

适宜的样品量，主要是根据显色定位的灵敏度考虑。

在进行含量测定时则根据最后测定方法的灵敏度而定。

一般说来，常用量为几至几十微克，这也与具体样品的浓度有关。

总之点样量随分离目的和具体情况而定。

（2）点样方式

点样时要求严格、准确和小心操作，尤其是在定量时只有准确点样才能重现真实的实验结果。

一般用管口平整的毛细管吸取试样在硅胶板上已划好的线上的圆点轻轻点几下。

样点直径一般不大于3mm，否则会影响展板效果。

2.展开

展开就是使流动相即溶剂沿薄层板从点有样品的一端向另一端流动的过程。

在此过程中，样品中的组分被流动相带动向前移动，并由于与固定相的亲和力不同而得到分离。

在对具体样品进行展开时，需根据样品的极性大小选择其展开剂的比例，使Rf值保持在0.15~0.75之间，否则应该调整展开剂的极性。

当Rf小于0.15说明展开剂的极性太小，试样中的各个组分在原点附近无法分开。

当Rf大于0.75，说明展开剂的极性太大，试样中的组分都会随着展开剂展到硅胶板的前沿附近，这样多种成分会混在一起，未得到有效的分离。

比移值（Rf值）是表示色谱图上斑点位置的数值，可按下式计算：

Rf=a/b

式中：

a—溶质的最高浓度中心至样点中心的距离

b—溶剂前沿至样点中心的距离

3.显色定位

经上诉展开至溶剂前沿到达薄层板的另一端时，即可将薄层板取出，待展开剂挥发干后即可显色，确定组分斑点的位置，薄层色谱法的优点之一就是可以用多种方法显示斑点位置。

若被分离的化合物有颜色，则很容易识别出其上的样点。

但多数情况下化合物都没有颜色，要识别样点，必须使样点显色。

一般多用碘显，也可以使用紫外线显色、硫酸显色等。

其中碘蒸气显色就是将展好的薄层板，待展开剂挥发干后，放在盛有碘晶体的封闭容器中，升华的碘蒸气能与有机物分子形成有色的缔合物，即完成了显色。

而紫外线显色就是用紫外分析仪照射已展好的干燥薄层板，板上的有机物会吸收紫外线，在板上出现相应的色点，就可被观察到了，再用铅笔做标记，方便以后的研究。

（三）紫外可见分光光度计

1.仪器名称

（1）原理

　　物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。

由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。

分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

　　紫外可见分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔（Lambert-Beer）定律。

即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比

（2）实验仪器的应用

　检定物质：

根据吸收光谱图上的一些特征吸收，特别是最大吸收波长虽ax和摩尔吸收系数是检定物质的常用物理参数。

这在药物分析上就有着很广泛的应用。

在国内外的药典中，已将众多的药物紫外吸收光谱的最大吸收波长和吸收系数载入其中，为药物分析提供了很好的手段。

　　（3）与标准物及标准图谱对照

　　将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸收光谱。

若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。

如果没有标样，也可以和现成的标准谱图对照进行比较。

这种方法要求仪器准确，精密度高，且测定条件要相同。

　　（4）比较最大吸收波长吸收系数的一致性

　　（5）纯度检验

　　（6）推测化合物的分子结构

　　（7）氢键强度的测定

　　实验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判断化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。

　　（8）络合物组成及稳定常数的测定

　　（9）反应动力学研究

　　（10）在有机分析中的应用

　　有机分析是一门研究有机化合物的分离、鉴别及组成结构测定的科学，它是在有机化学和分析化学的基础上发展起来的综合性学科。

　　2.分光光度计数据采集原理

（1）双光束分光光度计原理

分光光度计利用的基本原理是郎伯特一比尔（Larnbert一Beer）定律，即溶液的吸光度Abs与溶液的吸收系数a，浓度C，液层的厚度L成正比。

即:

Abs=-Lg；T=Lg；I0/I1=aCL

式中:

T为透过率，I0为人射光强，I1为透过光强。

每种物质都有特定的吸收光谱曲线，通过测量不同波长处待测物质的吸光度或透过率值得到其吸收谱线，与已知谱线比较即可鉴别该物质或测定该物质的浓度。

常用分光光度计基本结构如图1所示，由光源、单色仪、样品池、探测