福建福州三月质检.docx

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福建福州三月质检

福建福州三月质检

将PVY病毒外壳蛋白基因（PVY-CP）导入马铃薯，并使之表达即可获得抗PVY病毒马铃薯。

图示是获得抗病毒马铃薯的部分操作，PVY-CP可以从质粒A中获取；质粒B是选用的运载体，另已知部分限制酶识别序列和切割位点：

BamHⅠ

HindⅢ

BglⅡ

SmaⅠ

G↓GATCC

CCTAG↑G

A↓AGCTT

TTCGA↑A

A↓GATCT

TCTAG↑A

CCC↓GGG

GGG↑CCC

请结合图像，运用所学知识回答问题：

（1）含有PVY-CP的质粒A保存在某细菌群体中，各个细菌含有相关不同的基因，这样的细菌群体称为_____________。

（2）关于步骤②中Ⅺenow酶的猜测，合理的是_____________。

A．催化合成的片段起引物作用

B．可以将DNA片段的粘性末端变成平末端

C．能催化DNA链的合成

D．与DNA连接酶的功能相同

（3）步骤④中应该使用的限制酶是________。

（4）利用农杆菌转化法进行转化，首先需要将质粒C导入________中，进而转化马铃薯薯片，然后通过________技术获得抗PVY病毒马铃薯苗，最后进行相关的鉴定。

（1）基因文库（部分基因组文库、基因组文库给分）。

（2）BC

（3）BglⅡ、SmaⅠ（仅答出一种酶给1分）

（4）农杆菌植物组织培养

湖北襄阳五中

（1）目的基因主要是指的基因，也可以是一些具有的因子。

（2）是基因工程的核心，cDNA文库属于基因文库，

（3）PCR是一项利用原理在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，其需要的酶是。

（4）从分子水平检测目的基因是否翻译可以用方法，若有出现，表明目的基因已形成蛋白质产品。

（1）编码蛋白质调控作用

（2）基因表达载体的构建部分

（3）DNA（双链）复制热稳定DNA聚合酶（Taq酶）（1分）

（4）抗原-抗体杂交杂交带

湖北襄阳五中

普通番茄细胞中含多聚半乳糖醛酸酶基因（用A表示），控制细胞产生多聚半乳糖醛酸酶，该酶能破坏细胞壁，使番茄易软化，不耐储藏。

抗多聚半乳糖醛酸酶基因可以使番茄不再产生多聚半乳糖醛酸酶，从而使番茄长时间抗软化，容易储存和运输。

下图是通过基因工程培育抗软化耐储藏番茄的过程及原理。

请分析回答下列问题：

（1）普通番茄（AA）也可以通过__________育种的方法，最终获得基因型为aa（不能合成多聚半乳糖醛酸酶）的抗软化、耐储存的番茄。

（2）利用基因工程将目的基因导入植物细胞，目前采用最多的方法是__________，该方法中用到的目的基因载体是__________，目的基因需插入到该基因载体的__________上。

（3）图1中获得导入抗多聚半乳糖醛酸酶基因的番茄细胞，需要经过__________技术获得转基因番茄，细胞先经脱分化形成__________，再形成丛芽和根。

（4）根据图2分析抗多聚半乳糖醛酸酶基因能使番茄抗软化的原理是两个基因分别转录出的mRNA__________，从而阻断了__________过程。

（1）诱变（1分）

（2）农杆菌转化法Ti质粒T-DNA（3）植物组织培养愈伤组织

（4）结合形成双链RNA基因的表达

福建福州五月质检

为了提高乙肝疫苗的预防效果，科学家们对于该疫苗的研发过程做如下的改进：

提取乙肝病毒（HBV）基因重组后，与β-半乳糖苷酶基因结合，形成重组质粒BPT（如图1），随后的操作如图2，请回答下列问题：

特异性免疫应答

HBV重组基因

B

A

β-半乳糖苷酶基因

图一图二

（1）在图一中_____（A/B）插入终止子。

构建重组质粒BPT必须使用__________作为工具酶。

（2）从大肠杆菌中提取融合蛋白P-BPT仍需进一步修饰、纯化。

其主要原因是因为大肠杆菌不具备__________（细胞器）。

（3）实验中抽取小鼠脾的淋巴细胞进行细胞培养，在培养基中需要添加_______防止杂菌生长。

从分子水平上使用__________对特异性免疫应答结果进行检测。

（1）B（2分）限制酶，DNA连接酶（2分）

（2）内质网，高尔基体（2分）

（3）抗生素（2分）抗原-抗体杂交（2分）

河北名师俱乐部

右图是基因工程的模式图，请据图回答下列问题：

（1）常用的获取目的基因的方法有从基因文库中获取和；从基因文库中提取的目的基因通过PCR进行扩增时，需使用一种特殊的酶是。

（2）构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中，且能够表达和发挥作用。

它的组成中的启动子、终止子的化学实质为。

（3）将表达载体导人动物的受精卵中，一般采用技术。

在抗虫农作物的培育过程中，将Bt毒蛋白基因导入农作物受体细胞时，常用的方法是。

将目的基因导入大肠杆菌时，需用Ca2+处理，使其成为一种细胞。

（4）检测细菌的目的基因是否转录出mRNA时，需要作探针，再与相应的物质杂交。

（1）人工合成（1分）热稳定的DNA聚合酶（或Taq酶）（2分）

（2）稳定存在并遗传给下一代（2分）一段（有特殊结构的）DNA片段（2分）

（3）显微注射（2分）农杆菌转化法（2分）感受态（2分）

（4）标记的目的基因（2分）

河北保定定兴三中

转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。

图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。

下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

（1）若要获得抗病基因，能否用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割？

________，说明理由_________。

要获得含抗病基因的重组质粒能否用PstⅠ、ApaⅠ限制酶切割质粒？

________。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。

欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有________基因，作为标记基因。

（3）②、③阶段是否可使用同种培养基？

________；理由是______。

（4）④阶段是否可使用不添加植物激素的培养基？

________；理由是_______。

（1）不能　对SmaⅠ位点进行切割破坏了抗病基因的结构　不能　

（2）抗卡那霉素　（3）不能　2个阶段培养基中生长素与细胞分裂素的比值不同　（4）可以因为芽能产生生长素促进根的生长

河北保定定兴三中

下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程，请据图回答下列有关问题：

（1）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—↓GATC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，那么在①过程中，应用限制酶________切割质粒，用限制酶________切割抗虫基因。

①过程在________（体内/体外）进行。

（2）将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有________的培养基上，能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入，该培养基从功能方面属于________培养基。

（3）重组质粒导入大肠杆菌的目的是________。

（4）⑤过程所用技术称为________，从遗传学角度来看，根本原因是根细胞具有________。

（1）Ⅱ　Ⅰ（Ⅰ和Ⅱ）　体外

（2）四环素　选择（3）大量复制目的基因（抗虫基因）（4）植物组织培养　发育成完整个体所需的全套遗传物质

甘肃兰州质检

降钙素是一种原料稀缺、提取工艺复杂的多肽类激素，临床上用于治疗人的骨质硫松症等。

某基因公司研发利用生物技术生产新型降钙素，原理如下图。

回答下列问题：

（1）人工合成降钙素DNA的过程中，需要用Klenow酶来补平双DNA中缺失的脱氧核苷酸，从功能上看，Klenow酶是一种________________酶。

（2）图中该DNA与细菌的质粒相结合要依靠___________酶，其作用部位是_________，然后将重组质粒移植到酵母菌体内，酵母菌在基因工程中称为____________。

（3）一个基因表达载体的组成，除了有目的基因外，还应在首端有驱动基因转录的____________。

为方便筛选，其上还应具有某些____________________。

（4）将目的基因导入微生物细胞时，常常用_______处理细胞，使其形成_________细胞，以便易于吸收环境中的DNA分子。

吉林期末

转基因草莓中有能表达乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来预防乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示（①至④代表过程，A至C代表结构或细胞）：

（1）这种新型疫苗，在免疫学中属于，图中可看出该疫苗的化学本质是。

图中①过程用到的酶是DNA连接酶，所形成的B叫做。

（2）②过程常用处理农杆菌，使之成为细胞，利于完成转化过程。

（3）图中③过程叫做脱分化，④过程叫做，将叶盘培养成草莓幼苗的技术的原理是。

（4）②过程采用最多的是农杆菌，在分子水平上，可采用的方法来检测转基因草莓果实提取液中有无相应的抗原。

（5）乙肝病毒表面抗原基因进入受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为。

⑴抗原蛋白质　基因表达载体（重组质粒重组DNA）　（各1分）

⑵CaCl2溶液（或Ca2+）　　感受态

⑶再分化（错字不给分）　　细胞的全能性

⑷抗原—抗体杂交（5）转化

甘肃天水一中六模

下图为利用基因工程培育花卉的过程（字母代表相应的物旦，转基因植物质或结构，数字代表过程或方法）。

请回答：

（1）花卉基因工程可细分为花色基因工程、花形基因工程、香味基因工程等，不同的基因工程所需要获取的（1分）不同。

（2）基因工程中最常用的运载体是，另外还有、动植物病毒等。

整合了目的基因的重组质粒，在组成上还含有启动子、终止子和。

（3）②过程常用的方法是，检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，需要

采用技术。

（4）外植体一般从受体植物的形成层处获取，原因是这部分细胞。

由外植体培养为转基因植株的③、④过程分别为，该过程的理论基础是。

（5）人工种子就是以形成b之后得到的、不定芽、顶芽和腋芽等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子。

（1）目的基因

（2）质粒λ噬菌体的衍生物标记基因（3）农杆菌转化法DNA分子杂交技术（4）分生能力强（易诱导形成愈伤组织）脱分化和再分化植物细胞的全能性（5）胚状体

湖北八校

图示为应用生物工程获得人们需要的生物新品种或新产品的方案。

请回答下列问题：

（1）方案Ⅰ中，通常利用Ti质粒将抗虫基因导入棉花受体细胞，为了使抗虫基因顺利连接到受体染色体基因组中，抗虫基因通常位于Ti质粒的____________片段中。

从分子水平检测抗虫棉是否培育成功的方法是：

________________________。

（2）推测方案Ⅱ中prG基因最可能的作用是______________________________。

（3）方案Ⅲ中的转抗血栓基因山羊可以通过分泌乳汁来生产抗血栓药物。

在构建的相应基因表达载体中，抗血栓基因的首端必须含有使其仅能在山羊______________细胞中特异性表达的___________，人们通常将此类转基因动物称为________________________。

（4）方案Ⅲ中的早期胚胎在移植入受体母羊子宫之前，必须对胚胎进行性别鉴定，一般是取处于____________时期的____________细胞进行检测。

（1）T-DNA抗原-抗体杂交法

（2）调控细胞（无限）增殖

（3）乳腺启动子乳腺生物反应器

（4）囊胚滋养层（1分）

广东十二校

南方的水果香蕉味香、富于营养，终年可收获，是南方的重要经济作物。

而把香蕉引种到北方后，植株矮小，乃至不能成活。

但在2012年，地处中国北方的辽宁大连居民，就可以吃到当地自产的自然成熟的香蕉了，这些香蕉是搭载经中国“神五”、“神六”飞船在太空遨游的品种，经过大连当地培育成活的。

请回答下列有关问题：

（1）香蕉在南方地区生长正常，而把香蕉引种到北方后，植株矮小，乃至不能成活不能成活，这种是由导致的变异，（填“可”、“不可”）遗传。

而搭载经中国“神五”、“神六”飞船在太空遨游的香蕉品种，发生的变异是（填“可”、“不可”）遗传的。

（2）香蕉是三倍体植物，无种子的生成，其原因

，因而培育香蕉应选用的繁殖方法是。

（3）近年来,香蕉生产中病毒感染较为严重，利用常规育种方法改良其品种周期长见效慢，若可以将利用生物工程技术，将外源的抗病基因导人香蕉，为香蕉的抗病育种提供一条新途径。

下图为转基因抗病香蕉的培育过程流程图，其中质粒上的PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶的识别序列及切割位点见下表。

请据图回答下列问题：

①形成重组质粒A时，应选用限制酶_________，对含抗病基因的DNA和质粒进行切割。

②图中①②表示组织培养过程中香蕉组织细胞的_________过程。

该技术表明，当植物细胞、组织处于_________状态时，在一定的外界条件的作用下，可表现出全能性，发育成完整植株。

湖南岳阳二检

科学家将人的胰岛素基因与质粒重组后，导入牛的受精卵，并成功从牛奶中提取到了人胰岛素。

回答下列相关问题：

（1）获取目的基因的主要途径包括直接提取和_________________________。

（2）在构建基因表达载体的过程中，目的基因和质粒用同一种__________________进行切割。

（3）在将基因表达载体导入牛的受精卵的过程中，常采用______________________法，若将基因表达载体导入大肠杆菌细胞中，则通常采用______________________溶液处理大肠杆菌，使其成为______________________细胞。

（4）为了得到较多的卵细胞，可以对受体母牛注射适宜剂量的___________________；利用获能的精子进行体外受精，经过细胞培养至______________________期进行胚胎移植，最终获得“符合要求的个体”，这个“符合要求的个体”具体是指________________

______________________________。

（1）人工合成（1分）　　

（2）限制酶（3）显微注射CaCl2感受态

（4）促性腺激素桑椹胚或囊胚能分泌含人胰岛素牛奶的母牛

福建厦门质检

水貂病毒性肠炎是由水貂肠炎细小病毒引起的急性传染病，具有较高的发病率和死亡率。

某科研小组为制备水貂细小病毒空衣壳抗原（MEV－VP2蛋白），设计如下生产流程（①、②、③表示技术环节）：

⑴①中用PCR技术扩增目的基因，该过程中所用的模板是；在获得大量目的基因后，需要使用酶将其重组到病毒DNA上。

⑵被重组病毒感染后的蚕细胞需经过②，以达到增加疫苗产量的目的。

在此过程中需要通过控制通入量，以维持培养液的pH。

⑶为检测样液中是否含有有效成分，在③中使用进行检测。

⑴含有MEV－VP2蛋白基因的DNA片段限制酶和DNA连接⑵动物细胞培养CO2⑶MEV－VP2蛋白的抗体

福建龙岩高三质检

烟草在受到烟草花叶病毒的侵染后．产量会大大降低，我国科学家利用基因工程技术成功培育出抗烟草花叶病毒的烟草。

下图是转基因烟草培育过程示意图。

（1）PCR扩增的前提是要有一段已知_____________的核苷酸序列。

以便合成引物I、Ⅱ。

（2）构建基因表达载体时，需将抗烟草花叶病毒基因插入到Ti质粒的_____________上，然后通过农杆菌的转化作用。

将其插入到烟草细胞的_____________上，使抗烟草花叶病毒的性状能得以稳定维持和表达。

（3）图中过程②依据的原理是_____________,②过程中细胞增殖的主要方式是_____________。

（1）抗烟草花叶病毒基因（写目的基因给1分）

（2）T-DNA染色体DNA

（3）植物细胞的全能性有丝分裂

安徽合肥质量检测

下面是获取某种二倍体抗虫植株的技术流程图：

请完成下列问题：

（1）上图中二倍体植物愈伤组织是外植体在适宜的__________________________及温度、PH等条件下培养形成的，这一过程被称为________________________。

（2）在获取抗虫植物的技术流程中，_________________、__________________和工具酶等物质均来自微生物。

（3）下图中A、B、C、D四段DNA单链是根据毒蛋白基因对应片段合成的。

假定在该DNA复制中，以a链为模板，子链由左向右延伸。

则在流程图的过程①中应选择_____________________（填字母）作为引物。

如果选取的引物，使过程①的效率很低，则所选的引物中可能存在___________________________________和______________________________________________________________。

（4）如果要获取检测毒蛋白的单克隆抗体，通常要在动物细胞工程中___________________和________________________等技术的支持。

（1）营养和激素；脱分化

（2）抗虫（或目的）基因；运载体（3）AD；两种引物可以发生互补配对；两种或其中一种引物可以发生自身配对（4）细胞融合；细胞培养

海南高考压轴卷

已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。

SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。

某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。

其简要的操作流程如下：

（1）实验步骤①所代表的反应过程是▲。

（2）步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和▲酶，后者的作用是将限制性内切酶切割的▲和▲连接起来。

（3）如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能▲，也不能▲。

（4）为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特性，可用

▲与▲进行抗原——抗体特异性反应实验，从而得出结论。

（5）步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列▲（相同、不同），根本原因是▲。

（1）逆转录（2分）

（2）DNA连接载体S基因

（3）复制合成S基因的mRNA（2分）

（4）大肠杆菌中表达的S蛋白（2分）SARS康复病人血清（2分）

（5）相同表达蛋白质所用的基因相同（2分）

海南生物模拟

已知玉米因受到玉米螟危害而减产，玉米螟食用某种原核生物分泌的ɤ-蛋白后死亡。

因此，可将ɤ-蛋白基因转入到玉米体内，使玉米获得抗玉米螟危害的能力。

请据此回答下列问题：

（1）为了获得ɤ-蛋白的基因，在已知ɤ-蛋白的氨基酸序列的基础上，推测出ɤ-蛋白的序列，据此可利用方法合成目的基因。

获得ɤ-蛋白的基因还可用、方法。

高考资源网

（2）如下图，若用限制酶E和F从原核生物基因组DNA上切下ɤ-蛋白的基因，并将之取代质粒Z1上相应的E—F区域（0.4kb，1kb=1000对碱基）。

（图中E、F、G、H是4种识别序列完全不同的限制酶及其部分识别位点）

①此时所形成的重组质粒Z2的大小为5.4kb，问目的基因的大小是_________；

②若用限制酶E和F处理Z2，则会出现Z2____________；

A．既能被E也能被F切开B．能被E但不能被F切开

C．既不能被E也不能被F切开D．能被F但不能被E切开

③若用限制酶G切割Z1，可得到一种2.5kb的DNA片段；若用限制酶G切割Z2，可得到2.5kb、1.4kb和0.1kb三种片段，问Z2上有个限制酶G识别位点。

（3）若用含有重组质粒的土壤农杆菌直接感染玉米植株的根部伤口，则该植株的种子中（填“含有”或“不含”）ɤ-蛋白基因。

34.

（1）基因（DNA碱基）　化学　基因文库　PCR

（2）①0.8kb②A③4（3）不含

黑龙江大庆实验中学

我国部分地区出现了H7N9禽流感疫情，H7N9为一种RNA病毒，请据图回答有关问题：

（1）要获得单个受体细胞，需用处理动物组织．在受体细胞的培养过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的。

（2）图中①过程的核心步骤是，要检测导人的基因在受体细胞中是否成功表达，可采用方法。

（3）图中X细胞表示，②表示过程。

（4）若要获得更耐储存的抗体，可以利用工程技术对其进行改造，此技术是在的基础上延伸出来的。

（1）胰蛋白酶 （1分） 抗生素

（2）基因表达载体的构建   抗原-抗体杂交

（3）骨髓瘤细胞   细胞融合

（4）蛋白质  基因工程

湖北三校

下图为利

用生物技术获得生物新品种的过程。

据图回答：

（1）A→B必需的工具酶有。

（2）在基因工程中，B表示。

（3）B→C为转基因绵羊的培育过程，其中④用到生物技术主要有。

（4）若使用棉花的体细胞为受体细胞，⑤表示的生物技术是。

请简述利用棉花受体细胞培育成转基因抗虫棉幼苗的过程：

。

（5）要确定目的基因（抗虫基因）是否导入受体细胞，检测的方法是。

目的基因（抗虫基因）是否能稳定遗传并表达，在个体水平上通过进行检测和鉴定。

（6）转基因工程改良动植物的品种，最突出的优点是。

（当代中学生报2014模拟）

运用现代生物技术的育种方法，将抗菜青虫的Bt基因转移到优质油菜中，培育出转基因抗虫的油菜品种。

这一品种在生长过程中能产生特异的杀虫蛋白，对菜青虫有显著抗性，能大大减轻菜青虫对油菜的危害，提高油菜产量，减少农药使用，保护农业生态环境。

油菜

（1）Bt毒蛋白基因插入Ti质粒后，不能影响Ti质粒的。

（2）将目的基因导入受体细胞的方法有很多种，题中所用的是。

（3）转基因抗虫油菜的培育是否成功，最简便的检测方法是。

（4）已知转基因油菜中杀虫蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。

而该杀虫蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞表面。

（5）转基因油菜获得的是由Bt毒蛋白基因的表达产物来体现的，苏云金芽孢杆菌中的Bt毒蛋白基因和油菜细胞中的Bt毒蛋白基因所控制合成的Bt毒蛋白在功能和序列上是相同的。

（1）复制

（2）农杆菌转化法（3）用油菜叶饲喂害虫（4）无相应的特异性受体（5）抗虫性状；氨基酸

安徽淮南二模

玉米中赖氨酸的含量较低，原因是赖氨酸合成过程中，天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性受细胞内赖氨酸浓度的影响。

为此，有人通过基因修饰或合成，获得赖氨酸高产的玉米。

请回答：

（1）将改造后的基因在体外大量扩增，常用的方法是___________.在基因改造后，构建基因表达载体时需要用到的2种工具酶是_________、__________.

（2）将改造后的基因导入玉米时，常用_______________法，它与常见的双子叶植物的导入方法不同。

一般情况下，导入目的基因后，是否可以稳定表达其遗传特性，还需要进行检测与鉴定，检测对象是______________,有时还要进行个体生物学水平的鉴定。

（