山东理工大学教务处.docx
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山东理工大学教务处
山东理工大学教案
2007~2008学年第1学期
课程名称
授课对象
主讲教师
教师所在院（部）、系（室）
选用教材
学时/学分
基因工程原理
孟春晓
生命科学院生物技术与工程系
基因工程原理
48/3
生命科学学院
教案编写说明
教案是任课教师的教学实施方案。
任课教师应遵循专业教学计划制订的培养目标，以教学大纲为依据，在熟悉教材、了解学生的基础上，结合教学实践经验，提前编写设计好本门课程每次课的全部教学活动。
教案编写说明如下：
1、教学课型表示所授课程的类型，请在理论课、实验课、习题课、实践课、技能课及其它栏内选择打“√”。
2、教学内容：
是授课的核心。
将授课的内容按章、节或主题，有序的进行设计编排，并标以“*”和“#”符号以表示重点和难点。
3、教学方法和教学手段：
教学方法指讲授、讨论、示教、指导等。
教学手段指板书、多媒体、网络、模型、标本、挂图、音像等教学工具。
4、讨论、思考题和作业：
提出若干问题以供讨论，或作为课后复习时思考，亦可要求学生作为作业来完成，以供考核之用。
5、参考资料：
列出参考书籍、有关资料。
6、首次开课的青年教师的教案应由导师审核。
7、鼓励教师在教学内容、教学方法和教学手段等方面进行创新与改革。
8、所有开课课程必须按此标准编写教案。
山东理工大学教案
第1次课
教学课型：
理论课□实验课□习题课□实践课□技能课□其它□
主要教学内容（注明：
*重点#难点）：
第一章：
绪论
*基因工程的基本概念：
是一项将生物的某个基因通过基因载体运送到另一种生物的活性细胞中，并使其无性繁殖和行使正常功能，从而创造生物新品种或新物种的遗传学技术。
（还需要掌握移动基因、断裂基因、重叠基因、假基因、重复序列、基因组等的基本概念）
基因工程发展史（三大理论和技术基础）：
三大理论：
肺炎球菌转化实验；DNA分子结构的发现及DNA半保留复制机理的阐述；遗传信息中心法则的确立。
技术基础：
切割目的基因片段；扩增目的基因片段；重新连接目的基因片段。
基因工程的巨大意义（农业，工业，医药）
生物技术与基因工程
教学目的要求：
初步了解基因工程这门课程的诞生背景和研究意义
教学方法和教学手段：
讲授和多媒体
讨论、思考题、作业：
参考资料：
简明基因工程原理（第二版）贺淹才编著科学出版社
注：
教师讲稿附后
教师讲稿
第一章 绪 论
在研究生物演化的过程中，遗传和变异是两个重要的概念。
遗传性赋予生物种的稳定，保证生物种的延续不断。
变异性赋于生物种的进化，保证生物种对各种环境的适应。
在生物演变的长河中，自然发生的变异是非常缓慢的，随着生物科学的发展，人类开始学会干预生物的变异，经典遗传学的出现，使人们在几年至几十年内便可实现在自然界中需要千百万年才能出现的变异．从而改变了某些物种，有利于人类 20世纪是生物学发展最为迅速的时期，1953年由于认识了DNA的双螺旋结构，从而揭开了分子生物学研究的热潮。
在整个生物学研究进程或研究层次来说，其发展过程涉及到个体、组织器官、细胞、亚细胞水平，同时由于遗传学的兴起与发展，DNA作为生命遗传信息的物质基础被确定下来，从而导致分子生物学的诞生。
分子生物学严格来说应是从分子水平或核酸水平上进行研究的生物学，研究生物的生物学现象和本质，如DNA的结构、复制、表达、调控、遗传、变异等。
由于分子生物学的进一步发展，生物学的各个分枝学科都延伸到了分子水平，在这种情况下，传统分子生物学就是一个包罗万象的学科，大的可以说动、植、微生物的分子生物学，小的可以说某些物种的分子生物学，如水稻的分子生物学、链霉菌的分子生物学、芽胞杆菌的分子生物学。
在这种情况下，传统的分子生物学就好象是高级生物化学，阐述基因或者说DNA（核酸）的静态和动态化学本质。
目前的分子生物学，朝着发育、结构和遗传生物学的方向发展。
如果说传统的分子生物学是静态分子生物学的话，那么这些学科可以说是动态分子生物学，即在分子水平（核酸）上，研究生物的生长、分化、死亡以及遗传和变异的内在规律。
在以上这些研究中，均涉及在DNA水平的操作，本门课程就是要讲述这相关的原理，为分子生物学的研究服务。
通过分子生物学内在的原理，如DNA结构、复制、转录、表达、调控等，讲述研究方法和技术的设计原理。
从本世纪70年代初，基因工程学诞生，在短短不过30年的时间内已经取得了许多激动人心的成果。
它的最大特点，就是以重组DNA的技术，开辟了在短时间内改造生物遗传性的新天地。
它填补了生物种属间不可逾越的鸿沟，克服了常规育种的盲目性，使人类有可能按照需要定向培育生物新品种、新类型乃至创造自然界从未有过的新生物。
目前，基因工程正以新的势头迅猛发展，成为当今生物科学研究领域中最有生命力、最引人注目的前沿科学之一。
本课程就是为了讲述在核酸水平上对基因进行研究所涉及的方法、技术和策略的原理，主要是基本的、通用的原理，对于涉及到具体的学科或领域的原理不在此范围内。
一．基因工程的基本概念
基因工程产生以来，还没有一个统一的公认定义。
一般认为基因工程是指：
把体外核酸分子（无论采取什么方法从细胞中取得）组合到任何病毒、细菌质粒或其它载体系统（分子），形成遗传物质的新组合，并使之进入到原来没有这类分子的宿主体内，而能持续稳定地繁殖。
或者说，它是对DNA大分子上的遗传单元（基因）进行体外操作，把不同来源的基因按照设计的蓝图，重新构成新的基因组（即重组体），再把它引入细胞中，构成具有新的遗传特性的生物。
从上面定义可以看出基因工程的一个重要特征，就是强调了外源DNA分子的新组合被引入到一种新的寄主生物中进行繁殖。
这种DNA分子的新组合是按照工程学的方法进行设计和操作的。
这就赋于基因工程跨越天然物种屏障的能力，克服了固有的生物种间的限制，扩大和带来了定向创造新生物的可能性，这是基因工程的最大特点。
基因工程问世以来，各种相关的名称相继问世。
在文献中常见的有遗传工程（Geneticemgineering）、基因工程（Geneengineering），基因操作（Genemanipulation）、重组DNA技术（RecombianantDNAtechnique）、分子克隆（Molecularcloning）、基因克隆（Genecloning）等，这些术语所代表的具体内容彼此具有相关性，在许多场合下被混同使用，难以严格区分。
不过它们之间还是存在一定的区别的。
例如，遗传工程比基因工程有更广泛的内容，凡是人工改造生物遗传性的技术如物理化学诱变、细胞融合、花粉培育、常规育种、有性杂交等，还包括基因工程在内。
因此，遗传工程包括基因工程，遗传工程不等于基因工程。
又如重组DNA技术，它是基因工程的核心内容，但严格地说，基因工程除上述的定义所阐明的内容以外，还应包括体外DNA突变，体内基因操作以及基因的化学合成等。
总之，凡是在基因水平上操作而改变生物遗传性的技术都属于基因工程。
而重组DNA技术不等于就代表基因工程。
至于生物工程，它是更大范围内改造生物并生产生物产品的工程技术，是现代生物学中一切工程技术的总称，除遗传工程、基因工程外，还有酶学工程，细胞工程、发酵工程、农业工程等。
克隆（Clone）一词有必要加以解释。
当它作为名词使用时，是指从一个祖先通过无性繁殖方式产生的后代，或具有相同遗传性状的DNA分子、细胞或个体所组成的特殊的生命群体。
当克隆作动词使用时，是指从同一祖先生产这类同一的DNA分子群或细胞群的过程。
因此，基因工程也可称为基因克隆或DNA分子克隆。
二．基因工程发展史
（一）基因工程的诞生
基因工程诞生于1973年，它是数十年来无数科学家辛勤劳动的成果、智慧的结晶。
从40年代开始，科学家们从理论和技术两方面为基因工程的产生奠定了坚实的基础。
概括起来，从40年代到70年代初的基因工程诞生，在现代分子生物学领域理论上的三大发现及技术上的三大发明对基因工程的诞生起到了决定性的作用：
1．理论上的三大发现
（1）首先，40年代发现了生物的遗传物质是DNA。
l934年，Avery在美国的一次学术会上首次报道了著名的肺炎球菌的转化实验结果。
超越时代的科学成就，往往不容易很快被人接受，Avery的论文没有得到公认。
事隔十年，这一成果才得以公开发表。
事实上，Avery不仅证明DNA是生物的遗传物质，而且也证明了DNA可以把一个细菌的性状转给另一个细菌，理论意义十分重大。
正如诺贝尔奖金获得者Lede-rbevg指出的，Avery的工作是现代生物科学的革命开端，也可以说是基因工程的先导。
（2）50年代搞清楚了DNA的双螺旋结构和半保留复制机理。
1953年，Walson和Crick提出了DNA结构的双螺旋模型。
对生命科学的发展，足以和达尔文学说、盂德尔定律相提并论。
（3）60年代确定了遗传信息的传递方式。
确定遗传信息是以密码方式传递的，每三个核苷酸组成一个密码子，代表一个氨基酸。
到了1966年，破译了64个密码子，编排了一本密码字典，叙述了中心法则。
从此，千百年来神秘的遗传现象，在分子水平上得到了揭示。
2．技术上的三大发明
（1）限制性核酸内切酶的发现
从40年代到60年代，虽然从理论上已经确立了基因工程的可能性，科学家们也为基因工程设计了一幅美好的蓝图。
但是，科学家们面对着庞大的双链DNA（dsDNA），尤其是真核生物，其DNA分子是相当巨大的，仍然束手无策，不能把它切成单个的基因片段。
尽管那时酶学知识已得到相当的发展，但没有任何一种酶能对DNA进行有效的切割。
直到1970年，Smith和wilcox在流感嗜血杆菌中分离并纯化了限制性核酸内切酶HindIII，使DNA分子的切割成为可能。
1972年Boyer实验室又发现了名叫EcoRI的核酸内切酶，这种酶每遇到GAATTC序列，就会将双链DNA分子切开形成DNA片段。
以后，又相继发现了大量类似于EeoRI这样的限制性核酸内切酶，这就使研究者可以获得所需的DNA特殊片段，为基因工程提供了技术基础。
（2）对基因工程技术的突破的另一发现是DNA连接酶的发现
1967年，世界上有五个实验室几乎同时发现了DNA连接酶。
这种酶能够参与DNA缺口的修复。
1970年，美国的Khorana实验室发现了一种叫T4DNA连接酶，具有更高的连接活性。
（3）基因工程载体的发现
科学家有了对DNA切割与连接的工具（酶），还不能完成DNA体外重组的工作。
因为大多数DNA片段不具备自我复制的能力。
所以，为了能够在寄主细胞中进行繁殖，必须将DNA片段连接到一种特定的、具有自我复制的DNA分子上。
这种DNA分子就是基因工程载体（Vector）。
基因工程的载体研究先于限制性核酸内切酶。
从1946年起，Lederberg开始研究细菌的性因子～F因子，经过50和60年代，相继发现其它质粒，如抗药性因子（R因子），大肠杆菌素因子（CoE）。
到1973年，Cohen将质粒作为基因工程的载体使用。
具备了以上的理论与技术基础，基因工程诞生的条件已经成熟。
两位科学的“助产士“——Berg和Cohen把基因工程接到了人间。
．
1972年，美国斯坦福大学的P．Berg领导的研究小组，在世界上第一次成功地实现了DNA体外重组。
他们使用限制性内切酶EcoRI，在体外对猿猴病毒SV40的DNA和λ噬菌体的DNA分别进行酶切，然后再用T4DNA连接酶把两种酶切的DNA片段连接起来，结果获得了包含有SV40和λDNA重组的杂种DNA分子。
（基因工程的雏形）
1973年，斯坦福大学的S．Cohen等人，也成功地进行了另一个体外重组实验并实现了细菌间性状的转移。
他们将大肠杆菌（E．Coli）的抗四环素（TCr）质粒PSCl01和抗新霉索（Ner）及抗磺胺（Sr）的质粒R6一3，在体外用限制性内切酶EcoRI切割，连接成新的重组质粒，然后转化到大肠杆菌中。
结果在含四环素和新霉素的平板中，选出了抗四环素和抗新霉素的重组菌落这是基因工程发展史上第一次实现重组体转化成功的例子。
基因工程从此诞生，这一年被定为基因工程诞生的元年。
（二）基因工程的成就
基因工程是一门创造性的科学，有着惊人的发展潜力和广阔的应用前景。
基因工程诞生30年来，已经带来了一批突破性的成果，有些已在人们的生产和生活中作出了重大贡献。
基因工程从1977年起出现了飞跃的发展。
在这一年中，遗传工程取得了一项震撼人心的重要成果。
例如：
（1）Itakara等使化学合成的激素抑制素基因与大肠杆菌β一半乳糖（苷）酶基因和PBR322质粒重组到一起，然后转化到大肠杆菌中，结果产生出含激素抑制素的嵌合型蛋白质，经溴化氰处理后，有活性的激素抑制素便释放出来。
这是真核生物的人造基因首次在原核生物中表达，这一成果的取得大大增强了人们对遗传工程的兴趣和信心。
他们用价值几美元的9升培养液生产出50毫克的生物活性物质，相当于50万头羊脑的提取量，意义非常重大。
（2）1978年，Goedd．1等使化学合成的人胰岛素基因在大肠杆菌中表达，他们将人胰岛索两条肽链的基因引入到大肠轩菌，培养后大肠杆菌产生了人胰岛素的A链和B链，经二硫键连接后形成人胰岛索分子。
有人估计，全世界约有六千万名糖尿病患者，用猪和牛的胰脏提取的胰岛素已经不能满足他们的需要。
因此，人胰岛素基因在大肠杆菌中表达成功，使胰岛素人工大量合成成为可能，为广大的糖尿病患者带来了福音。
（3）1979年，Gooddel等使人生长激素基因在大肠杆菌中表达成功。
人生长激素由191个氨基酸组成，能促进几童生长，治疗侏儒症。
医用人生长激素是从人尸体的脑下垂体分离获得的，来源极为有限。
遗传工程菌能产生人生长激素，为这种激素开辟了广阔的来源。
（4）1980年，Nagata等使干扰素基因在大肠杆菌中表达成功。
干扰素具有抗病毒、抗肿瘤和调节免疫功能的作用。
用遗传工程菌大量生产干扰素，获得成功，使大规模临床试验成为可能。
此外，日本的科技人员使大豆的遗传基因插入大肠杆菌的质粒中，人工合成大豆蛋白获得成功。
美国Abbott公司用基因工程方法使大肠杆菌产生出人体尿激酶。
（5）1981年，从遗传工程菌获得的新产物有动物口蹄疫疫苗，乙型肝炎病毒表面抗原和核心抗原以及牛生长激素等。
上述产物的获得，对人乙型肝炎的诊断和防治，饲养动物的口蹄疫防治以及提高牛肉牛奶的产量具有重要意义。
我国乙型肝炎病毒（HBV）基因工程研究工作自1983年开始。
上海生化所，中国预防医学科学院病毒所，中国医学科学院基础所，军事医学科学院以及上海生物制品所等许多单位相继开展了HBV的分子克隆和DNA全序列测定、基因定位等理论工作。
军事医学科学院还用E．coli生产HBcAg作为肝炎的诊断试剂出售。
但一般来说，表达的水平都不太高。
可以预料，用基因工程疫苗治疗乙肝的日子已为期不远。
（三）重组DNA技术发展史的某些重要事件
三．基因工程的巨大意义
工业领域：
受益较早的是发酵工业和医药工业，使反应在常温常压下进行。
基因工程菌的使用使细菌在发酵中的产率提高；提供原来只有动物体内才能产生的物质，如抗原、抗体和其他生物制品；大大减少原材料资源的过度浪费和工业废物的排放，可减轻环境污染。
农业领域：
利用基因工程技术改良甚至创造作物新品种。
医学领域：
基因工程技术发展成为基因诊断和基因治疗等，此外还可以包括制备有生物活性的肽类和蛋白质在医疗上的应用等，并且用基因工程技术生产生物制品，社会效益和经济效益都是可观的。
四．生物技术与基因工程
生物技术：
是研究怎样利用生物体、生命体系或生命过程，来制造产品和造福人类社会的一门新兴技术科学。
有人将微生物技术的利用分为三类，酶工程、发酵工业、酿造工业。
生物工程是分子遗传学、微生物学、细胞生物学、生物化学、化学工程和加工工艺学等学科的结合，应用范围十分广泛。
一般认为生物工程应包括基因工程、细胞工程、以发酵为主的微生物工程和酶工程等四大部分。
基因工程和细胞工程是生物工程的基础。
山东理工大学教案
第2次课
教学课型：
理论课□实验课□习题课□实践课□技能课□其它□
主要教学内容（注明：
*重点#难点）：
第一章：
绪论
我国基因工程发展现状
基因工程的安全性
我国的《基因工程安全管理办法》
*基因工程的基本过程（分、切、连、转、筛）：
1.目的基因的制取2.基因载体的选择与构建3.目的基因与载体DNA的拼接4.重组体分子导入受体细胞5.外源基因的表达和产物的分离纯化
基因工程的上游和下游
基因工程的上游工程—基因克隆
*基因工程基本流程
教学目的要求：
初步了解基因工程原理这门课程的相关技术手段
教学方法和教学手段：
讲授和多媒体
讨论、思考题、作业：
参考资料：
简明基因工程原理（第二版）贺淹才编著科学出版社
注：
教师讲稿附后
教师讲稿
五．我国基因工程发展现状
我国自20世纪70年代末即开始了基因工程研究工作，经过20多年的研究开发，我国的基因工程发展在医学、农业各个领域都取得了令人瞩目的成果，正逐步向产业化迈进。
六．基因工程的安全性
从基因工程诞生之日起，受到人类的极大关注。
其理论和实践的意义都非常重大，但和任何新生事物一样，其成长过程中也遇到了强大的阻力。
基因工程刚诞生的头几年，人们对它有不少争论。
举几个简单的例子：
1.人们担心“基因逃逸”问题，由于微生物之间通过转导、转化、接合进行基因转移。
“有害”基因是否会逃逸到人体或环境中。
科学家们经常使用大肠杆菌作为宿主菌。
重组质粒转入大肠杆菌中表达，人们担心大肠杆菌会通过研究者的消化道带出实验室。
经过连续两年对研究人员的粪便检查，均未发现大肠杆菌和质粒。
2.前段时间英国“多莉”的死亡。
希特勒。
美国科幻电影。
3.对转基因食品的安全性的问题。
随着全球人口增多，粮食紧张的问题日益严重。
许多生物学家致力于高产、高质的农作物。
提高农作物产量的方法主要有2方面：
一方面发现高产农作物（不大可能）；另一方面减少农作物生长中的损失（旱、涝、病毒、虫，腐烂等）。
目前，植物基因工程方面使用技术就是从其他物种上分离有效的基因，然后转移到农作物上（例如：
现在已有的，抗虫棉，水稻，土豆，西红柿，大豆，玉米等）。
现在产生的问题是，安全性问题。
特别是人们将大量的食用转基因食品，其安全性问题应该引起高度重视和科学地评价，确保人民健康，才能使基因工程顺利发展。
转基因植物食品的安全性主要包括2方面：
（1） 转基因植物食品有无毒性物质及有无过敏性蛋白。
（2）食品安全性中的另一个重要问题是标记基因的安全性评价。
nptⅡ（新霉素磷酸转移酶基因）、hpt（潮霉素磷酸转移酶基因）、gent（乙酰转移酶基因）及抗除莠剂的基因在转基因植物中得到高表达，人们食用大量转基因食品是否可能对抗生素产生抗药性。
4．基因工程与生态环境平衡
转基因作物栽到大田后，会不会和野生亲缘植物自然杂交，导致野生亲缘植物获得抗性，从而影响环境。
而导致产生新的杂草类型。
如除草剂对已俘获了抗除草剂基因的杂草不再具备除草性能；抗虫基因的俘获也许会导致害虫种类交替进化；这些都迫使人们使用更危险的化学药物。
可见转基因植物的大规模种植可能会群落带来极大的不利。
群落的影响不但难以预料，甚至可能产生更严重的后果；俘获了毒蛋白基因会由于食草动物难以伤害它而加剧繁衍蔓延，稀有植物品种也许会由于竞争，同种植物的遗传多样性便会减少，昆虫群落也会受到影响。
从以上例子可以看出，基因工程是个双刃剑，于是许多社会人士、政府官员、甚至科学家发出呼吁，要求制定法规，限制基因工程的研究。
近年来关于转基因植物的安全性问题引起世界性的争论，众说风云，更激起各国的重视投入大量人力、物力进行科学地研究，美国国立卫生研究院（NIH）成立了一个专门委员会处理这些诉颂事宜，并于1975年制定了“通用重组DNA分子研究准则”，尽管已经对基因工程的安全防护作了许多规定，仍有不少科学家联名要求取消危险的实验。
对基因工程争论的焦点是害怕基因工程创造的杂种生物会从实验室逸出，在自然界造成难以控制的危害。
有害的杂种细菌或病毒与化学物质不同，它们会在自然界不断增殖，造成的危害更大。
研究结果表明，从本质上讲转基因植物与常规育种是一样的。
两者都是在原有的基础上对现有品种的某些性状进行修饰，或增加新性状，或者消除不良性状，最后培育出优质高产稳产和抗病、抗逆的新品种，它们的区别只是技术和方法问题。
基因工程只是利用现代分子生物学进行单基因或多个基因的转化，增强了育种的目的性和可操作性I缩短了育种周期，应该说是更科学和更安全。
例如在常规育种时，父母本的不良基因、甚至是有害基因都传递给下一代。
基因工程育种只是把好的基因、有用的基因传递给下一代，使下一代不断优化。
关于目的基因的结构与功能应该进行严格科学地研究和选择，堵截有害基因的使用就可以避免上述安全性的疑虑。
七．我国的《基因工程安全管理办法》
我国于1993年12月发布《基因工程安全管理办法》，在利用基因工程造福人类的同时，也高度重视基因工程的安全管理。
八．基因工程的基本过程
（1）从生物有机体复杂的基因组中，分离出带有目的基因的DNA片段。
（2）在体外，将带有目的基因的DNA片段连接到能够自我复制并具有选择标记的载体分子上，形成重组DNA分子。
（3）将重组DNA分子引入到受体细胞（亦称宿主细胞或寄主细胞）。
（4）带有重组体的细胞扩增，获得大量的细胞繁殖群体（菌落）。
（5）从大量的细胞繁殖菌落中，筛选出具有重组DNA分子的细胞克隆。
（6）将选出的细胞克隆的目的基因进行进一步研究分析。
（7）将目的基因克隆到表达载体上，导入寄主细胞，使之在新的遗传背景下实现功能表达，产生出人类所需要的物质。
九．基因工程的上游和下游
很多人把基因的全过程分为上游技术和下游技术，一般把分子生物学研究技术称之为基因工程上游技术，而把生物化学研究技术和应用称为基因工程下游技术。
这种划分是人为的，基因工程上、下游技术并没有严格的界限。
一般把“分、切、连、转”的步骤作为上游技术，而把“筛”的过程作为下游技术。
上、下游技术必须相互依存才具有生命力。
我国目前在上游技术方面与发达国家差距较小，在下游技术方面则差距较大。
十．基因工程的上游工程—基因克隆
基因工程的上游工程主要是目的基因的制取和无性繁殖。
具体的说就是从生物体的组织、器官或细胞制取目的基因，或者人工合成目的基因，使目的基因与载体的DNA拼接，使重组体分子导入受体细胞，筛选和进行无性繁殖。
这个过程可以称为基因克隆。
十一.基因工程的流程
基因工程实验设计可以是多种多样的,具体的操作方法可灵活变动,各不相同,但基本过程大体一致。
可把基因工程的全部工艺流程概括为下面的模式图。
山东理工大学教案
第3次课
教学课型：
理论课□实验课□习题课□实践课□技能课□其它□
主要教学内容（注明：
*重点#难点）：
第二章：
基因工程的工具酶
工具酶的基本概念：
基因工程的工具酶是应用于基因工程的各种酶的总称，包括核酸序列分析、标记探针制备、载体构建、目的基因选取重组体DNA制备等程序中所需要的酶类。
主要是限制性内切核酸酶和DNA连接酶，其他还有末端转移酶、单链核酸酶和反转录酶等。
限制性核酸内切酶（限制与修饰，类型，#影响因素，命名，*特点与应用，限制性酶切图谱）
教学目的要求：
了解基因工程各种限制性核酸内切酶的基本性质，功能和用途
教学方法和教学手段：
讲授和多媒体
讨论、思考题、作业：
1、某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时
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