微生物-志贺氏菌.ppt

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闽北职业技术学院食品与生物工程系,

（一）形态与染色革兰氏阴性短杆菌、无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。

23um0.50.7um,一、生物学特性,闽北职业技术学院食品与生物工程系,

（二）培养特性,1、需氧或兼氧性厌氧，最适温度37，PH7.27.42、在普通琼脂和SS平板上，能形成圆形、微凸、光滑湿润、无色半透明、边缘整齐、在中等大小的菌落3、宋氏志贺氏菌菌落较大，较不透明，粗糙而扁平，在SS平板上可迟发酵乳糖，菌落呈玫瑰红色。

4、在肉汤中呈均匀混浊生长，无菌膜。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,（三）生化反应,1、发酵葡萄糖，产酸不产气，除宋氏志贺氏菌外，均不发酵乳糖。

2、不发酵侧金盏花醇、肌醇、水杨苷。

3、不产生H2S，不分解尿素，V-P试验阴性，不能利用柠檬酸盐。

4、甲基红阳性。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,二、志贺氏菌的致病性与食物中毒,

（一）传染源食物、病人、粪便、苍蝇等,

（二）志贺氏菌的致病性,致病因素：

侵袭力、菌体内毒素、外毒素。

临床症状：

A、急性细菌性痢疾：

急性典型、急性非典型、急性中毒性菌痢。

B、慢性细菌性痢疾：

慢性迁延型、慢性隐伏型、慢性急性发作型。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,GB/T4789.5-2003中志贺氏菌检验程序,三、志贺氏菌的检验,闽北职业技术学院食品与生物工程系,

（一）实验内容,样品处理选择性增菌选择性平板分离生化学试验结果报告,第一天样品处理和增菌培养,闽北职业技术学院食品与生物工程系,第二天接种选择性平板进行分离培养

（一）接种选择性平板取增菌液1环，划线接种于HE琼脂平板或SS琼脂平板1个；另取1环划线接种于麦康凯琼脂平板和EMB（伊红美蓝）琼脂平板各1个。

（二）培养放于36培养1824h。

结果：

志贺氏菌在这些培养基上呈现无色透明不发酵乳糖的菌落。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,HE平板原理及反应,发酵乳糖的肠杆菌,不发酵乳糖的某种肠道菌，而且产生硫化氢，可能是沙门氏菌,不发酵乳糖，菌落呈蓝绿色或蓝色可能就是志贺氏菌,闽北职业技术学院食品与生物工程系,SS平板原理及反应SSAgar（SalmonellaShigellaAgar）,大肠杆菌或者别的发酵乳糖的肠杆菌。

是沙门氏菌。

有黑色中心。

如果没有黑色中心，就很可能是志贺氏菌了。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,麦康凯琼脂平板,菌落为粉红色，半透明的，可能为志贺氏菌。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,EMB平板照片及原理,菌落为无色半透明状，可能为志贺氏菌。

大肠杆菌,闽北职业技术学院食品与生物工程系,第三天初步生化试验

（一）接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体培养基从HE或SS、麦康凯或EMB琼脂平板、挑取平板上的可疑菌落，接种三糖铁琼脂和葡萄糖半固体各1管。

一般应多挑几个菌落，以防遗漏。

经36培养1824h，分别观察结果。

（二）培养放于36培养1824h。

结果：

乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体），无动力。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,志贺氏菌在TSI生长的结果（现象）：

（1）斜面产碱仍为红色或粉红色；

（2）底层产酸不产气，变黄色；（3）不产H2S，不出现黑色。

志贺氏菌在葡萄糖半固体培养基生长：

沿线生长，无动力。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,三糖铁（TSI）琼脂试验的原理,2志贺氏菌3沙门氏菌4大肠杆菌,葡萄糖半固体原理及结果,1.铜绿假单胞菌2.志贺氏菌3.枯草芽孢杆菌,闽北职业技术学院食品与生物工程系,在志贺氏菌检验中可弃去的培养物：

（1）在TSI表面上呈现蔓延生长的培养物

（2）在1824h发酵乳糖、蔗糖的培养物（3）不分解葡萄糖，只在半固体培养基表面生长的培养物。

（4）产气的培养物（5）有动力的培养物（6）产H2S的培养物,闽北职业技术学院食品与生物工程系,第四天进一步的生化试验,凡是乳糖、蔗糖不发酵，葡萄糖产酸不产气（福氏志贺氏菌6型可产生少量气体），无动力的菌株，可做进一步的生化试验和生化分型实验。

（一）进一步生化试验,即：

葡萄糖铵，西蒙氏柠檬酸盐，赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶，pH7.2尿素，KCN生长，以及水杨苷和七叶苷的分解，36培养。

志贺氏菌属的培养物均为阴性结果。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,

（二）生化分群试验,接种生化培养基从三糖铁琼脂上挑取培养物上,拌种到：

5%乳糖、靛基质培养基中，36培养。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,各项生化试验现象,葡萄糖铵：

阳性者斜面上有正常大小的菌落生长，阴性者不生长或生长极微小的菌落。

西蒙氏柠檬酸盐：

阳性者斜面上菌落生长，培养基由绿色转为蓝色，阴性者不生长。

赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶：

阳性者为紫色，阴性者为黄色。

pH7.2尿素：

阳性者为红色，阴性者为黄色。

KCN：

阳性者细菌生长，阴性者细菌不生长。

水杨苷和七叶苷：

阳性者产气。

闽北职业技术学院食品与生物工程系,（三）结果报告综合生化试验结果判定菌型并作出报告。