尿皮质醇的检测.doc
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磁微粒A2000皮质醇尿液样本检测流程-以本次为准
一、按照临床检验24小时尿液收集操作规范,采集待检者24小时尿液,并准确记录尿液量,按照每1000ml尿液中加入10g硼酸的比例,加入防腐剂进行防腐。
二、皮质醇尿液样本直接检测流程
1、加样量为25μl,检测的流程同皮质醇EDTA血浆样本检测流程。
3、检测加样方法、所用的试剂、拟合方法、计算方式等均同皮质醇血浆检测流程。
4、得到检测结果后,乘以24小时尿液量,为24小时皮质醇的总质量,例检测结果为5pg/ml,尿液量为2000ml,则24小时尿游离总皮质醇的质量为10μg/24h。
5、24h尿游离皮质醇直接检测正常范围可参考BeckmanAccess2系统尿皮质醇直接检测参考范围50-403μg/24h。
三、皮质醇尿液样本抽提检测流程
1、取1ml防腐过的尿液,加入一试管中,然后加入1ml乙酸乙酯,高速涡旋混匀30s。
2、700g离心分离5mins,抽取上清乙酸乙酯层200μl,转移至一干净的玻璃试管中。
3、在适宜的氮吹仪器或空气通风条件下蒸发至玻璃管变干。
4、使用PH=7.4的PBS溶液,具体配方百度上可以查询到,取200μlPBS溶液,加入至已蒸发干燥的玻璃管中,高速涡旋混匀1min。
5、取经涡旋混匀的样本,进行检测,检测具体流程同同皮质醇EDTA血浆样本检测流程。
6、24h尿游离皮质醇抽提检测正常范围可参考BeckmanAccess2系统尿皮质醇抽提参考范围21-111μg