高考生物试题分项详解专题五年高考分类汇编15 现代生物科技.docx
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高考生物试题分项详解专题五年高考分类汇编15现代生物科技
2009-2011生物高考试题分类详解专题汇编
15现代生物科技
2011年高考生物试题
1.（2011广东卷）华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有:
转基因
核移植
体外受精
体细胞克隆
胚胎移植
A.
B.
C.
D.
答案D:
解析：
本题考查胚胎工程的应用，属于对识记、理解层次的考查。
试管动物技术是指把经过体外受精获得的早期胚胎移植到假孕动物子宫发育而产生的动物。
2.（2011浙江卷）将ada（腺苷酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。
下列叙述错误的是
A.每个大肠杆菌细胞至少含一个重细胞质粒
B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点
C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada
D.每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子
3、（2011江苏卷）关于现代生物技术应用的叙述，错误的是
A．蛋白质工程可以合成自然界不存在的蛋白质
B．体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体
C．植物组织培养技术可以用于植物茎尖脱毒
D．动物细胞培养技术可用于转基因动物的培养
答案：
B
解析：
克隆动物应用的是细胞核移植技术，所以B选项叙述错误。
4、（2011江苏卷）下列关于胚胎工程的叙述，错误的是
A．体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精
B．受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植
C．早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需要加入血清
D．试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术
答案：
B
解析：
受精卵发育到囊胚阶段就可以进行胚胎移植，所以B选项的叙述是错误的。
5.（2011天津卷）下列叙述正确的是
A．胚胎发育过程中不存在细胞衰老或凋亡现象
B．用小鼠不同器官和组织构建的cDNA文库相同
C．垂体功能受损的幼犬会出现抗寒能力减弱等现象
D．刺激支配肌肉的神经，引起该肌肉收缩的过程属于反射
6.（2011浙江卷）培育“试管山羊”的基本过程如下图所示。
若要培育成功，下列叙述正确的是
A甲过程中可通过给母山羊注射有关激素使用其超数排卵
B乙过程的目的之，是促进卵母细胞和精子的成熟
C丙过程与乙过程中应采用相同成分的培养液
D丁过程中早期胚胎须移植到与供体性状相同的代孕母羊子宫内
答案：
A
解析：
本题考查有关体外受精等相关的知识。
首先是精子的采集和获能，卵母细胞的采集和培养，在此过程中为了让雌性动物排出更多的卵母细胞，甲应为对雌性动物采用注
射促性腺激素让其超数排卵，乙过程是促进其完成体外受精，丙过程是早期胚胎发育过程，丁过程是在母体内完成胚胎发育全过程；所以A选项是正确的；乙过程是完成受精作用，所以B选项是错误的；C选项是乙过程在专用获能培养液或受精溶液中，而丙过程是细胞培养过程，所以培养液的成分是不同，C错误；D选项中早期胚胎移植到与供体处于同期发情即同时采用促性腺激素处理的母体内，所以D选项是错误的。
7.（2011安徽卷）Ⅱ.（9分）家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。
将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。
（1）进行转基因操作前，需用___________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。
（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。
（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。
改PCR反应体系的主要成分应该包含：
扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，的细胞会产生接触抑制。
通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以_________________增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。
8、（2011江苏卷）请回答基因工程方面的问题：
（1）利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞同DNA复制类似（如下图所示）。
图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为 ▲ 。
②在第 ▲ 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。
（2）设计引物是PCR技术关键步骤之一。
某同学设计的两组引物（只标注了部分碱基序列）都不合理（如下图），请分别说明理由。
①第1组：
▲ ；②第二组 ▲ 。
（3）PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为 ▲ 。
（4）用限制酶EcoR、MboⅠ单独或立命切割同一种质料，得到的DNAT片段长度如下图（1kb即1000个碱基对），请在答题卡的指定位置画出质料上EcoR、MboⅠ的切割位点。
答案：
（1）15/16三
（2）引物和引物局部发生碱基互补配对而失效
引物自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
（3）DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上
（4）见下图
9.T-DNA可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。
用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：
种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌（其中的T-DNA上带有抗除草剂基因）悬浮液中以实现转化。
在适宜条件下培养，收获种子（称为T1代）。
（1）为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除 ，因为后者产生的 会抑制侧芽的生长。
（2）为筛选出已转化的个体，需将T1代播种在含 的培养基上生长，成熟后自交，收获种子（称为T2代）。
（3）为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将T2代播种在含 的培养基上，获得所需个体。
（4）经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。
为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与 植株进行杂交，再自交 代后统计性状分离比。
（5）若上述T-DNA的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性 。
（6）根据T—DNA的已知序列，利用PCR技术可以扩增出被插入的基因片段。
其过程是：
提取一植株的DNA，用限制酶处理后，再用 将获得的DNA片段连接成环（如右图），以此为模板，从图中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取 作为引物进行扩增，得到的片段将用于获取该基因的全序列信息。
10（2011福建卷）一对表现型正常的夫妇，生了一个镰刀型细胞贫血症（常染色体隐性遗传病）患儿。
在他们欲生育第二胎时，发现妻子的双侧输卵管完全堵塞，不能完成体内受精。
医生为该夫妇实施了体外受精和产前基因诊断，过程如右图。
请回答：
（1）过程①是指在体外进行的处理，从而使精子与卵子结合形成受精卵；过程②称为。
（2）在对胎儿进行镰刀形细胞贫血症的产前基因诊断时，要先从羊水中的胎儿细胞提取物质③进行PCR扩增。
然后用
Ⅱ对扩增产物进行切割，产生多个片段的酶切产物。
据此判断，
Ⅱ是一种酶。
（3）不同长度的酶切产物在电泳时移动的速率不同，形成不同的电泳条带。
该家庭成员的镰刀型细胞贫血症基因分析的电泳带谱如④，据此判断胎儿为
（正常/患者/携带者）。
11.（2011山东卷）人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的探讨及治疗药物的筛选。
利用正常大鼠制备遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如图所示。
（1）卵母细胞除从活体输卵管中采集外，还可从已处死的雌鼠________中获取。
（2）图中的高血压相关基因作为__________，质粒作为_________,二者需用________切割后连接成重组载体，该过程与质粒上含有________有关。
（3）子代大鼠如果________和__________，即可分别在分子水平和个体水平上说明高血压相关基因已成功表达，然后可用其建立高血压转基因动物模型。
（4）在上述转基因大鼠的培育过程中，所用到的主要胚胎工程技术是___________、早期胚胎培养和胚胎移植。
12.（2011四川卷）北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列，该序列重复次数越多，抗冻能力越强。
下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图，有关叙述正确的是
A过程①获取的目的基因，可用于基因工程和比目鱼基因组测序
B多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因，不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白
C过程②构成的重组质粒缺乏标记基因，需要转入农杆菌才能进行筛选
D应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达
答案：
B
解析：
过程1获得的目的基因已不含非编码区和内含子，因此不能用于比目鱼基因组测序，因此A错。
导入农杆菌是为了扩增和更易导入蕃茄细胞，C错。
DNA探针技术不能检测基因是否完全表达，D错。
13.（2011广东卷）登革热病毒感染蚊子后，可在蚊子唾液腺中大量繁殖，蚊子在叮咬人时将病毒传染给人，可引起病人发热、出血甚至休克。
科学家用以下方法控制病毒的传播。
（1）将S基因转入蚊子体内，使蚊子的唾液腺细胞大量表达S蛋白，该蛋白可以抑制登革热病毒的复制。
为了获得转基因蚊子，需要将携带S基因的载体导入蚊子的细胞。
如果转基因成功，在转基因蚊子体内可检测出、和。
（2）科学家获得一种显性突变蚊子（AABB）。
A、B基因位于非同源染色体上，只有A或B基因的胚胎致死。
若纯合的雄蚊（AABB）与野生型雌蚊（aabb）交配，F1群体中A基因频率是，F2群体中A基因频率是。
（3）将S基因分别插入到A、B基因的紧邻位置（如图11），将该纯合的转基因雄蚊释放到野生群体中，群体中蚊子体内病毒的平均数目会逐代，原因是。
14.（2011重庆卷）拟南芥是遗传学研究的模式植物，某突变体可用于验证相关的基因的功能。
野生型拟南芥的种皮为深褐色（TT），某突变体的种皮为黄色（tt）,下图是利用该突变体验证油菜种皮颜色基因（Tn）功能的流程示意图。
（1）与拟南芥t基因的mRNA相比，若油菜Tn基因的mRNA中UGA变为ＡＧＡ，其末端序列成为“－ＡＧＣＧＣＧＡＣＣＡＧＡＡＣＵＣＵＡＡ”，则Tn比ｔ多编码 个氨基酸（起始密码子位置相同，ＵＧＡ、ＵＡＡ为终止密码子）。
（２）图中①应为 。
若②不能在含抗生素Ｋａｎ的培养基上生长，则原因是.若③的种皮颜色为，则说明油菜
基因与拟南芥T基因的功能相同。
（3）假设该油菜
基因连接到拟南芥染色体并替换其中一个t基因，则③中进行减数分裂的细胞在联会时的基因为；同时，③的叶片卷曲（叶片正常对叶片卷曲为显性，且与种皮性状独立遗传），用它与种皮深褐色、叶片正常的双杂合体拟南芥杂交，其后代中所占比列最小的个体表现为；取③的茎尖培养成16颗植珠，其性状通常（填不变或改变）。
（4）所得的转基因拟南芥与野生型拟南芥（填是或者不是）同一个物种。
答案：
（1）2
（2）重组质粒（重组DNA分子）；重组质粒未导入；深褐色（3）TnTntt。
；黄色正常、黄色卷曲；不变（4）是
解析：
通过对基因工程和遗传知识相结合来考查学生对该部分知识的掌握，属中档题，较难。
油菜Tn基因的mRNA中UGA变为AGA，而末端序列为“——AGCGCGACCAGACUCUAA——”，在拟南芥中的UGA本是终止密码子不编码氨基酸，而在油菜中变为AGA可编码一个氨基酸，而CUC还可编码一个氨基酸，直到UAA终止密码子不编码氨基酸。
假设油菜Tn基因连接到拟南芥染色体并替换其是一个t基因，注意拟南芥是指实验有的突变体tt，所以③转基因拟南芥基因型为Tnt，减数分裂联会时形成四分体是由于染色体进行了复制，基因也进行了复制，因而基因型为TnTntt。
设③转基因拟南芥的叶片卷曲与正常叶是由B、b基因控制，正常叶为显性，而该对性状与种皮性状为独立遗传，则这两对性状遵循基因的分离与自由组合定律。
则：
③转基因拟南芥╳双杂合拟南芥
TntbbTtBb
进行逐对分析：
Tnt╳Tt1/4TnT、1/4Tnt、1/4Tt、1/4tt
由于Tn和T的功能相同，所以表示为3/4T--（深褐色）、1/4tt（黄色）
bb╳Bb1/2Bb（正常叶）、1/2bb（卷曲叶）
所以后代中有四种表现型；
3/8种皮深褐色正常叶；3/8种皮深褐色卷曲叶
1/8种皮黄色正常叶；1/8种皮黄色卷曲叶
取③转基因拟南芥的茎尖培养为植物组织培养为无性生殖，所以后代性一般不变。
（排除基因突变）
由上可知所得③转基因拟南芥Tnt和野生型拟南芥TT两个品种相当于发生基因突变，没有隔离，能杂交产生可育后代，因此是同一个种。
15.（2011天津卷）絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀，起到净化污水的作用。
为进一步提高对石油污水的净化效果，将絮凝性细菌和石油降解菌融合，构建目的菌株。
其流程图如下。
据图回答：
（1）溶菌酶的作用是_________________________。
（2）PEG的作用是_________________________。
（3）经处理后，在再生培养基上，未融合的A、B难以生长。
图中AB融合菌能生长和繁殖的原因是________________________________________________________。
（4）目的菌株的筛选：
筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有_________________的培养基上生长的AB融合菌，选择效果最好的最为目的菌株。
（5）为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果，将目的菌株进行发酵培养，定时取发酵液，加入石油污水中：
同时设置_____________________________为对照组。
经搅拌、静置各3分钟后，分别测定上层水样的石油浓度COD值（COD值越高表示有机物污染程度越高）,计算石油去除率和COD去除率，结果如下图。
（6）目的菌的种群增长曲线是_____________型。
在40～44小时，发酵液对石油污水的净化效果最好，其原因是___________________________________________________。
16（2011新课标全国卷）现有一生活污水净化处理系统，处理流程为“厌氧沉淀池
曝光池
兼氧池
植物池”，其中植物池中生活着水生植物、昆虫、鱼类、蛙类等生物。
污水经净化处理后，可用于浇灌绿地。
回答问题：
（1）经厌氧沉淀池。
曝气池和兼氧池后得到初步净化。
在这个过程中，微生物通过呼吸将有机物分解。
（2）植物池中，水生生物、昆虫、鱼类、蛙类和底泥中的微生物共同组成了（生态系统、菌落、种群）。
在植物池的食物网中，植物位于第营养级。
植物池中所有蛙类获得的能量最终来源于所固定的能。
（3）生态工程所遵循的基本原理有整体性、协调与平衡、和等原理。
一般来说，生态工程的主要任务是对进行修复，对造成环境污染和破坏的生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力。
答案：
（1）有氧和无氧（或细胞）
（2）群落一生产者太阳能（3）物种多样性物质循环再生（4）已被破坏的生态环境（或受损的生态系统）
解析：
本题综合考查群落和生态系统的结构、生态工程的基本原理等相关知识。
属于对识记层次的考查。
（1）在厌氧沉淀池，微生物进行无氧呼吸；在曝气池，微生物主要进行有氧呼吸；在兼氧池，微生物既能进行有氧呼吸，又能进行无氧呼吸。
（2）群落是栖息于一定地域或生境中各种生物种群通过相互作用而有机结合的集合体，包括给定区域的所有生物。
（3）生态工程的基本原理包括物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学与工程学原理。
（4）见答案。
2010年高考生物试题
基因工程、生物技术的安全和伦理问题
（2010浙江卷）2.在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（A）
A.用限制性核酸内切酶切割烟草茶叶病毒的核酸
B.用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体
C.将重组DNA分子导入原生质体
D.用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
解析：
本题考查基因工程的有关知识，基因工程的一般过程：
①用限制性核酸内切酶切割含目的基因的DNA分子（除草剂基因）和运载体（质粒），②用DNA连接酶连接切割好的目的基因和运载体③重组DNA分子导入受体细胞，因为是植物可以说是原生质体④用相应的试剂和病原体帅选转基因细胞⑤用植物组织培养技术抗除草剂的转基因烟草（表达）。
所以答案A。
（2010福建卷）32．[生物—现代生物科技专题]（10分）
红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）期间要生产流程如右图
（1）图中①所指的是技术。
（2）图中②所指的物质是，③所指的物质是。
（3）培养重组CHO细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换。
（4）检测rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。
分泌单克隆抗体的细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成
答案：
（1）PCR
（2）mRNArhEPO（3）培养液（4）杂交瘤
解析：
本题主要以人红细胞生成素生产为材料来考查基因工程和细胞工程中动物细胞培养技术、制备单克隆抗体技术。
获取目的基因的方法有四种（从基因文库中获取、用PCR扩增技术、用反转录法、用化学合成法）由图以核DNA为模板获得目的基因的方法可知①为PCR技术。
进行反转录的模板是mRNA。
由题意可知重组CHO细胞适用于生产重组人红细胞生成素（rhEPO），所以重组CHO细胞能过表达出重组人红细胞生成素（rhEPO）或者红细胞生成素。
培养动物细胞是用液体培养基——即培养液，细胞从培养液中吸收营养，并同时向培养液中排放代谢废物，当代谢废物积累时会危害细胞，因此要不断更新培养液。
制备单克隆抗体是让淋巴B细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，然后由杂交瘤细胞来分泌抗体。
（2010全国2）5.下列叙述符合基因工程概念的是
A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株
C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株
D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上
【解析】A:
属于动物细胞工程的内容C:
属于微生物的发酵工程的内容D:
自然状态下，一般不能自行形成重组DNA分子
（2010广东卷）22.新技术的建立和应用对生物学发展至关重要。
下列技术（或仪器）与应用匹配正确的是
1.PCR技术——扩增蛋白质
B.杂交瘤技术——制备单克隆抗体
C.光学显微镜——观察叶绿体的基粒
D.花粉离体培养——培育单倍体植物
【解析】本题主要考查学生的理解能力。
PCR技术只能用来扩增核酸，不能用来扩增蛋白质；利用光学显微镜无法观察到叶绿体。
【答案】BD
（2010天津卷）7.（26分）
Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。
图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答：
（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。
筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。
（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是（填字母代号）。
A.启动子B.tetRC.复制原点D.ampR
（3）过程①可采用的操作方法是（填字母代号）。
A.农杆菌转化B.大肠杆菌转化C.显微注射D.细胞融合
（4）过程②可采用的生物技术是。
（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。
这利用了细胞的性。
（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用（填字母代号）技术。
A.核酸分子杂交B.基因序列分析C.抗原—抗体杂交D.PCR
Ⅰ.（14分）
（1）HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素
（2）A
（3）C
（4）胚胎移植技术
（5）全能
（6）C
I
（1）据图，仅将人乳铁蛋白基因切割出来，需要在人乳铁蛋白基因的左侧用BanHI切割，右侧用HindIII切割。
当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后，TETR基因被人乳铁蛋白基因隔开，不是完整的，而anpR基因是完整的，所以筛选含有重组载体的大肠肝菌首先需要字含氨苄青霉素的培养基上进行。
（2）基因表达的调控序列在启动子上。
（3）将重组质粒导入动物细胞，常采用显微镜的方法。
（4）过程②的左侧是早期胚胎，右侧是代孕牛，过程②采用的生物技术是胚胎移植。
（5）将细胞培养为个体，利用了细胞的全能性。
（6）检测目的基因在手提细胞中是否表达，常采用抗原-抗体杂交技术。
（2010江苏卷）18．下列关于转基因植物的叙述。
正确的是
A．转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传人环境中
B．转抗虫基因的植物．不会导致昆虫群体抗性基因撷宰增加
C．动物的生长激素基因转人植物后不能表达
D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题
【答案】A
【解析】本题考查了转基因技术的安全性问题。
转入到油菜的基因，可以通过花粉传入环境中，A项正确；由于植物与害虫间是相互选择的，转抗虫基因植物可使昆虫群体抗性基因频率增加，B项错误；动物生长素基因转入植物后也能表达，C项错误；转基因技术的安全性问题，要通过验证才能得到证实，D项错误。
（2010江苏卷）27．（8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。
请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有▲个游离的磷酸基团。
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越▲。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SrnaⅠ切割，原因是▲。
（4）与只使用EcoRI相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止▲。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入▲酶。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了▲。
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在▲的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
【答案】
（1）0、2
（2）高
（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
（4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化
（5）DNA连接
（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞
（7）蔗糖为唯一含碳营养物质
【解析】本题考查基因工程的限制性内切酶的作用特点
（1）质粒切割前是双链环状DNA分子，所有磷酸基团参与形成磷酸二酯键，故不含游离的磷酸基团。
从图1可以看出，质粒上只含有一个SmaⅠ的
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