毒理学石油的毒性.docx

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毒理学石油的毒性

石油的毒性

1.石油的组成及主要理化特征

石油是生物遗骸在地层深处经过漫长岁月和极其复杂的化学作用而形成的一种粘稠状液体。

人们在1859年才进行开采利用。

1.1烃类化合物

1.1.1链烷烃

乙烷、丙烷、丁烷、异丁烷等。

以链烷烃为主要成分的原油中，含有较多的蜡质，而含硫量较少；

1.1.2环烷烃

环戊烃、甲基环戊烷、环己烷、乙基环己烷等。

以环烷烃为主要成分的原油中，蜡质含量很少，而含有较多的沥青。

1.1.3芳香烃

芳香烃是不饱和环状烃，种类很多，有一个环的苯、甲苯、乙苯、二甲苯等；也有多环的芳香烃，例如萘、蒽、苯蒽、苯并芘等。

1.2非烃类化合物

1.2.1含S化合物

约占原油重量的0.1%～7%，主要有硫醇（烷烃硫醇）、硫醚（硫杂烷烃）、硫杂环戊烷、二硫醚（二硫杂烷烃）、噻吩（环硫醚）等。

当原油加热到75℃能分解出硫化氢。

1.2.2含N化合物

约占原油重量的0.01%～0.9%。

主要有吡啶、喹啉、吡咯等碱性氮化物类和吲哚、咔唑、苄腈、吩嗪等非碱性氮化物类。

1.2.3含O化合物

仅占石油重量的0.06%～0.4%。

主要有脂肪酸类、环烷酸类、酚类等。

1.2.4有机金属

常见的有钒、镍等金属，含量约在百万分之几至万分之几。

石油在环境中的运转

至少有90多种细菌和真菌以及某些藻类能分解石油中的某些成分。

生物降解作用可以从根本上清除石油，不会产生二次污染，不会波及其它环境介质，是一种彻底的自净作用。

2.石油污染对环境的危害

2.1水环境

A、大片油膜覆盖在海水表面，严重妨碍了海水的复氧功能，减弱自净、生物窒息；

B、油膜影响具有光合作用的浮游生物；

C、油膜和油珠具有很强的粘稠性，造成生物的物理性损伤；

D、造成鱼类等畸形产生；

E、使水产生物带有臭味。

2.2土壤环境

A、堵塞土壤空隙、降低土壤渗透性和破坏土质；

B、阻碍根部的呼吸和对水分、养分的吸收；

2.3大气环境

A、油膜挥发污染；

B、燃烧和炼制产生的废气污染：

含有大量有毒的物质——硫氧化物（SO2）、H2S、硫醇、硫醚、氮氧化物（NOX）、氨、CO、CO2、酚类化合物、甲醛及其它醛类化合物、多种结构类型的多环芳烃类化合物（如苯并（a）芘）、大量的碳粒（颗粒物），它们中绝大多数是大气中的主要污染物。

3.原油及含硫化合物的毒性

3.1原油的毒性

含烷烃高的原油，其蒸气具有麻醉和痉挛作用；芳香烃含量高的原油，易出现慢性中毒，有的还具有致癌作用。

3.2含硫化合物及其毒性

A、石油中含硫化合物主要包括硫化氢、元素硫、硫醇、硫醚、二硫化物等，石油在炼制过程中，在高温作用下，二硫化物可热解成硫醇、硫醚，继而还可进一步析出硫化氢。

B、硫醇类：

有机硫化物，硫醇类遇高温能分解成硫化氢。

遇到氧化剂或在空气中能逐渐氧化为二硫化物，继而转成硫化氢。

硫醇类具有特殊恶臭。

具有麻醉作用。

分子量高的硫醇易通过皮肤引起中毒，甚至死亡。

C、硫醚类：

硫醚类具有轻微的醚味。

带有不饱和基的硫醚毒作用较大。

D、硫杂环化合物类：

很容易在生物体内蓄积，能在水生食物链中逐级放大。

毒性主要表现为致突变性和致癌性。

4.石油馏分及其毒性

4.1石油的主要馏分及其用途

气

液

固

4.2沥青的毒性

沥青是石油分馏后剩下的残渣，沥青成分很复杂，以芳烃、环烷烃为主，含少量链烷烃，还有硫、氧、氮的衍生物。

很多沥青中含有苯并（a）芘。

●沥青对机体有直接刺激作用，无论是沥青粉尘还是挥发出来的气体，对皮肤和粘膜都有刺激作用；

●致癌：

长期接触沥青的工人皮肤可有扁平疣状赘生物，并可癌变。

4.3石油及其燃料馏分的燃烧产物毒性

燃烧产物

●NO2、NOX、CO、SO2、

●致癌多环芳烃（苯并（a）芘）、硝基多环芳烃（NO2-PAHs）、

●醛类、氰化氢、氨、硫酸盐、

●碳粒、颗粒物等。

这些燃烧产物的毒性及其对环境造成的污染程度，都要比其燃烧前的原物质更为严重。

✧燃烧颗粒物的毒性：

A、燃烧产生的颗粒物绝大多数是含碳有机物的燃烧不完全产物，另有少量添加剂。

这些颗粒物的产量比燃煤颗粒产量少得多，但其毒性很强。

这些颗粒物的粒径都很小，容易沉积在呼吸道的深部，损伤细支气管和肺泡。

B、液化石油气的燃烧颗粒的致突变性明显高于燃煤颗粒。

C、汽油的燃烧颗粒物含有数十种有机成分，主要包括多环芳烃、苯类化合物、卤代烃、杂环化合物和环氧化物等，表现出明显的致突变效应。

D、柴油燃烧的颗粒物成分更为复杂。

已鉴定出100多种有机物。

其中多环芳烃约有40多种，硝基多环芳烃约有50多种。

IARC和USEPA都将柴油尾气定为“人类可能致癌物”。

✧硝基多环芳烃（NO2-PAHs）

由硝基与多环芳烃结合而成的一大类化合物。

其种类很多，约近百种。

常见的有1-硝基芘、二硝基芘、硝基苯并芘、二硝基荧蒽、四硝基芘等等。

硝基多环芳烃主要存在于柴油、汽油、原油等燃烧的颗粒中，硝基多环芳烃具有多种遗传毒性，并能与DNA结合，形成DNA加合物。

溶剂的毒性

溶剂的一般毒性

毒性性质

大多数溶剂都会对中枢神经系统产生抑制作用，所以被称为中枢神经毒物，溶剂的神经毒性所引起的症状类似于普通麻醉剂的作用。

作用的机理可能是溶剂和某些细胞的细胞膜间的物理作用致使细胞膜对离子的通透性发生改变。

一般症状

低浓度：

恶心、眩晕、欣快感、意识模糊、共济失调；

高浓度：

抽搐、昏迷和死亡。

链烷的毒性

链烷的基本毒理学特性

含有碳氢化合物的有机溶剂，常被称链烷，通式为C4H10以上的CnH2n+2，包括戊烷到十九烷。

A、大多数是高亲脂性的，它们易通过皮肤和肺吸收，能快速输送到全身。

不易直接排泄掉。

B、中枢神经系统的抑制剂。

C、由烷引起的毒性症状包括麻醉、昏迷、头痛、恶心、意识模糊，严重情况下会失去知觉。

碳数从1～8的烷碳氢化合物溶剂对中枢神经系统的毒性会逐渐增强。

D、没有发现烷能引起实验动物的畸胎、诱变及致癌作用。

正己烷的毒性特征

●正己烷（n-Hexane）CH3CH2CH2CH2CH2CH3

●正己烷主要作为溶剂，尤其是作为植物油的提取溶剂，以及合成橡胶、塑料、涂料、漆的溶剂，实验用试剂以及低温温度计的溶液等。

●吸收：

通过摄入残留正己烷溶剂的食物、蒸气吸入、皮肤吸附。

●分布：

正己烷是一种高亲脂质性物质，主要分布于脂质含量高的组织中，在脑、肝、肾中的含量最高。

●排泄：

人体脂肪组织中正己烷的半衰期为64小时，如从脂肪组织中完全排出正己烷需10天之久。

●毒性作用：

是一种神经抑制剂，慢性暴露能引起多种神经病症：

疲劳、肌肉无力，上下肢末梢出现感觉异常，有刺痛感。

正己烷的代谢物2,5-己二醇的神经毒性很大。

●芳香烃的毒性

●苯的毒性

●常用作涂料、塑料及橡胶的溶剂

●吸收与分布：

苯暴露的主要途径是吸入，吸入的苯30%～80%进入到血液循环中，苯在脂肪组织的含量最大。

●代谢：

吸收的苯有50%以原形态经肺部呼出，约有10%的苯以原型态在体内蓄积，其余的苯在体内肝脏中通过P450混合功能氧化酶系统进行代谢，苯的氧化物（如苯酚）是毒性最强的代谢物。

●毒性作用：

急性暴露于苯会导致中枢神经系统的抑制和血液毒性（如再障和白血病），有致癌作用：

急性成骨细胞白血病是与苯暴露有关的最常见的恶性肿瘤。

烷基苯的毒性：

●常见的有甲苯、二甲苯和乙苯

甲苯：

●甲苯可经呼吸道、皮肤和消化道吸收。

经消化道可完全吸收。

与苯相似。

●甲苯的脂溶性更强，主要分布于富含脂肪的组织，肾上腺、脑、骨髓和肝脏最多。

●进入体内的甲苯约80%被氧化为苯甲醇，进而代谢成为苯甲酸，并与甘氨酸结合形成马尿酸从尿中排出。

甲苯的半衰期为15～20小时，人体对甲苯的解毒能力很强。

●急性暴露于甲苯主要影响中枢神经系统，症状包括头痛、昏迷、疲劳、肌肉无力、眩晕、麻木；长期慢性暴露于甲苯中可造成神经衰弱症候群，但不会诱发癌症及引起造血系统和骨髓的损害。

二甲苯：

●二甲苯通过吸入能快速吸收，约60%~65%。

吸入的二甲苯约90%被氧化为甲基苯甲酸，以甲基马尿酸的形式被排泄。

二甲苯的半衰期为20～30小时，与蛋白质紧密结合。

●它是主要的皮肤刺激物，长期暴露，它会产生脱脂性皮炎。

●二甲苯也能抑制中枢神经系统，其症状是疲劳、恶心、头痛和共济失调。

●动物暴露于纯二甲苯中不会引起苯所特有的对造血系统的损害；不表现出致癌、致突和致畸作用。

乙苯：

为低毒类溶剂。

醇的毒性

醇类在工业上和实验室常用作溶剂，主要作用于神经系统，对视神经有特殊的选择作用，主要具有麻醉作用，其作用随碳原子数目的增加而增强。

顺序为：

叔丁醇>正丁醇>丙醇>乙醇>甲醇。

甲醇的毒性CH3OH

甲醇中毒主要表现为急性中毒：

一般误食甲醇或饮用含甲醇浓度较高的酒精时所致。

如误服5～10ml，可导致严重中毒，15ml可致失明，30ml左右可致死，潜伏期常为8～36小时，有饮酒史，则潜伏期可延长。

抑制中枢神经系统，症状包括：

头痛、眩晕、恶心、呕吐、严重的上腹痛、视觉模糊、心动过缓、浅慢呼吸、昏迷和死亡。

作用机理是：

甲醇在肝中被醇脱氢酶代谢为甲醛，然后生成甲酸。

大量摄入甲醇后，生成的甲醛或甲酸损害视神经，由此导致失明，甲醛的作用可能更强。

乙醇的毒性C2H5OH

●通过肺、胃肠道和皮肤，乙醇可被迅速吸收，可按照身体水分含量被分布到全身，容易通过血脑屏障被运输。

●吸收的乙醇90%被代谢为乙醛，然后生成乙酸，并通过糖酵解途径生成CO2和H2O。

残余乙醇通过呼出或由尿、汗、唾液排出。

●高剂量的醇被认为是中枢神经系统的抑制剂，乙醇的主要毒理学影响是对发育胎儿的影响，乙醇易通过胎盘进入胎儿循环中，造成胎儿乙醇综合征。

1,l,1-三氯乙烷（甲基氯仿）CH3CCl3

主要用于氯化聚高分子材料生产中的溶剂。

●通过肺和胃肠道，1,l,1-三氯乙烷被快速吸收。

●作用的靶器官主要是中枢神经系统，症状包括：

头痛、定向力障碍、嗜睡、抽搐、麻木、昏迷、死亡。

●1,1,2,2-四氯乙烷CHCl2CHCl2

●抑制中枢神经，是工业使用的氯化碳氢化合物中毒性最强的一种。

●具有潜在肝脏毒性，对肝脏的损伤主要表现为急性或亚急性的坏死或脂肪变性。

●对肾脏的损害能引起肾炎，如在尿中可出现白蛋白、管状物等。

●三氯乙烯（TCE）Cl2C＝CCl

●广泛用作干洗剂、脱脂剂和溶剂，还可作为溶剂从咖啡中提取咖啡因。

曾在医学上用作麻醉剂。

●暴露于三氯乙烯蒸气能引起眼睛、鼻和喉的刺激。

严重的会出现中枢神经系统抑制症状。

三氯乙烯也能对肾和肝造成损害。

●有研究认为三氯乙烯是一种致癌物。

●四氯乙烯（全氯乙烯）Cl2C＝CCl2

●暴露于四氯乙烯中会引起中枢神经系统症状，主要表现为头痛、混乱、定向障碍、昏迷、死亡。

●有研究认为它是一种致癌物。

第九章环境内分泌干扰物

环境内分泌干扰物的定义及其关注历史

环境内分泌干扰物定义

内分泌干扰物筛选和测试顾问委员会（EDSTAC，1998）：

内分泌干扰物是指可以改变内分泌系统结构或功能，在生物个体、其后代、种群或亚种群水平造成有害效应的外源性化学物质或混合物。

这种定义目前广为接受。

内分泌干扰问题自1990s以来被快速关注的原因

大量关于男性生殖健康担忧的报道

精子数目减少和睾丸癌、尿道下裂以及隐睾的发生率增加。

人们对这些趋势的建议解释是对某些环境化学物质暴露的增加。

野生动物生殖健康的各种不利趋势

人们已经注意到野生动物生殖健康的各种不利趋势并将它们归因于污染。

内分泌干扰作用已经被怀疑是一种普遍的机制。

大量实验室研究的证据

许多被广泛使用的，且常常在环境中分布广泛的化学物质可以结合并激活雌激素受体上。

像天然雌激素一样，可能在很低水平时会产生深远的影响。

对环境内分泌干扰物的关注历史

时间

事件

1930s

研究发现人工合成的羟基联苯化合物有雌激素样活性。

之后的研究又发现，当时经常使用的有机氯农药DDT也有雌激素样活性。

1962

卡尔松的著名科普著作《TheSilentSpring》（“寂静的春天”）出版，该书指出农药可引起内分泌紊乱，引起了公众的广泛关注。

1980s—

世界各地均观察到野生生物的生殖发育异常现象，如雄性雌性化、雌雄同体等，与此同时，越来越多的研究证实，许多环境化学污染物对生物体的内分泌功能有干扰作用。

1996

由美国人科尔波恩等撰写的《OurStolenFuture》（“我们被偷走的未来”）出版后，各国政府、工业界、学术界和公众对环境内分泌干扰物的关注进一步高涨。

2001

联合国环境规划署提出首批控制12种持久性有机污染物（POPs），即DDT、多氯联苯、六氯苯、多氯代二苯并-二恶英、多氯代二苯并呋喃、艾氏剂、狄氏剂、异狄氏剂、灭蚁灵、氯丹、毒杀芬、七氯。

这些污染物都属于环境内分泌干扰物，它们能在环境中持久地存在，通过食物链进行生物富集，并能够在环境长距离迁移进而对人和动物的健康以及生态环境产生严重的危害。

9.1.4人们对环境内分泌干扰物的关注目标

●进一步研究以确认在人类和野生动物生殖健康中所报道的有害效应趋势的存在和严格性。

●在有害效应得到确认的情况下，需要确立一种或几种环境化学物质暴露的明确的因果联系。

建立检测可以引起有害效应的化学物质的可靠方法，现存方法可能足以检测但需要进行修改或发展全新的检测方法。

对怀疑的内分泌干扰化合物按照可能的管理措施优先顺序进行排列。

●在适宜的情况下，应当采取措施限制某些化学物质对环境的释放。

9.2已知或潜在的环境内分泌干扰物种类与来源

世界野生动物基金会（WWF）已经确定了68种。

主要包括有机氯杀虫剂、工业污染物、天然化学物质、医药用品等。

9.2.1有机氯杀虫剂（OCs）

●六六六

●氯丹

●氯氰菊酯

●二溴氯丙烷

●滴滴涕（DDT）

●DDT代谢物－DDE和DDD

●开乐散（三氯杀螨醇）

●艾氏剂

●狄氏剂

●异狄氏剂

●硫丹

●七氯

●开蓬

●甲氧氯

●灭蚁灵

●苄氯菊酯

●毒杀酚

●五氯酚

●2,4,5-T

●2,4-D

7.2.2工业污染物

①多环芳烃（PAHs）

⊙种类

PAHs种类多，如蒽、苯并芘、甲（基）胆蒽、β-萘黄酮。

⊙来源

地表径流、石油泄漏、游船和工业用船、城市污水处理厂出水和大气沉降等。

城市中大部分的PAHs被认为是化石燃料燃烧产生的烃类通过大气沉降而来。

②多氯联苯（PCBs）

PCBs产品主要用于大部分耐用电容器和变压器，同时还用作润滑剂、液压流体、软化剂、绝缘剂、灭火剂等。

在1200℃以下焚烧塑料，烟灰中也会产生PCBs。

PCBs理论上最多可有209种氯代同系物，它们的生物活性随氯取代位置和数目不同而异。

③二恶英和相关化合物－二恶英类

多氯代二苯并二恶英（PCDDs）和多氯代二苯并呋喃（PCDFs）产生于各种家庭及工业过程，包括塑料的燃烧、工业中氯烃的使用、化石燃料的燃烧以及用氯漂白的制浆过程。

同PCBs一样，二恶英同样包含了大量的同系物（75种PCDDs和135种PCDFs）。

从焚烧炉中释放的气体中，2,3,7,8-四氯代二恶英（TCDD）和2,3,7,8-四氯代呋喃尤其受到关注。

④造纸厂和纺织厂出水

造纸厂在制浆漂白过程中产生的各种氯代酚和氯代有机酸将被释放到污水出水中，其中也含有来自降解木材和其它所用化学品的复杂混合物，其中的许多成分难以确定。

⑤工业清洗剂

自20世纪40年代以来就开始生产的烷基酚聚氧乙烯醚（APEs）是一大类非离子表面活性剂之一，它们被大量用作清洁剂、油漆、除草剂、杀虫剂以及其它化学品的添加成份。

在这类化学品中约有80%是壬基酚聚氧乙烯醚（NPEs），20%是辛基酚聚氧乙烯醚（OPEs）。

其中大约有60%最终进入水环境，主要经由污水处理厂排放，在污水处理过程中它们被降解为稳定的疏水物质（壬基酚和辛基酚），并在污泥和河流沉积物中进行累积。

⑥其它工业污染物

许多工业化学产品、它们的中间产物、副产物或降解物在生产、使用和处理过程中被释放到环境中。

●4-氯苯胺－生产偶氮染料、抗氧化剂、药物和化肥的中间产物

●3,4-二氯苯胺

●4-硝基酚

●双酚A（BPA）

●邻苯二甲酸酯

●多氯代萘（PCNs）

●多溴代二苯醚（PBDEs）

9.2.3天然化学物质

①植物雌激素

许多食品包括大豆、豆芽、卷心菜、菠菜、黄豆、谷物和蛇麻草的成分，主要种类由木质素和异黄酮。

②毒枝霉素（Mycotoxins）

可由污染农作物的真菌产生，其中有些如玉米烯酮具有雌激素性质。

③人和动物分泌的激素

主要包括雌激素如雌酮（E1）、雌二醇（E2）和雌三醇（E3）和雄激素如睾酮（T）。

7.2.4医用化学品

主要是一些激素药物（口服避孕药）的成分如己烯雌酚（DES）和乙炔雌二醇（EE2）等。

9.3人类和野生动物受环境内分泌干扰物暴露的主要途径

9.3.1人类受环境内分泌干扰物暴露的可能途径

①食物暴露

来源于食物的EEDs多数是天然产生的植物雌激素。

有证据表明激素紊乱在生命早期阶段（包括出生后的头几个月）可能影响最大。

在用大豆制成的婴儿奶粉中含有异黄酮，已经引起一些关注。

肉、奶制品和蛋中含有低水平的天然雌激素包括雌二醇、孕酮和睾酮。

许多用作食品包装的材料含有少量可以转移到食品中的化学品。

②医药品暴露

具有内分泌功能或副作用的药品很常见，在口服避孕药中雌激素性激素的使用尤其广泛。

药品及其代谢产物最终进入环境中，主要是经由排泄作用进入污水中。

③职业暴露

对EEDs的职业暴露具有潜在的危险。

实验和流行病学的证据表明对化学品如无机铅和汞，对有机化学品如二溴氯丙烷、乙烯乙二醇和二硫化碳的职业性暴露可以对男性生殖系统产生不利影响。

④空气暴露

焚烧产物如二恶英和多环芳烃。

⑤饮用水暴露

地下水对由雨水带来的化学物质的污染是相当脆弱的，这些化学物质是从垃圾处理厂或携带着工业或农业出水的废水中渗滤出来的。

此外，一些聚碳酸酯水管或用环氧树脂涂漆处理过的金属水管可以释放雌激素性的双酚A（BPA）。

9.3.2野生动物受环境内分泌干扰物暴露的可能途径

主要有污染环境的直接暴露和通过食物链的传递暴露。

在大多数生态系统中，持久性化学品具有生物积累和生物放大的倾向，处于食物链较高层次的生物比那些低层次的生物积累较多。

总的来看，水生动物遭受大多数污染物的暴露比陆生动物更为严重，因为水环境是大多数垃圾的最终沉积处。

9.4环境内分泌干扰物与人类和野生动物的健康

9.4.1环境内分泌干扰物与人类的健康

EEDs可能引起人类出现一些有害效应，并与人类的一些疾病的发病率增加有关（还需寻找充分的证据）：

①精子数量和质量下降、睾丸癌和前列腺癌发生率增加、隐睾症和尿道下裂增加、与二恶英暴露有关的性别比例改变和女性乳腺癌的发生率增加。

②可能与妇女的多囊肿卵巢和子宫内膜异位、心血管疾病、甲状腺紊乱

9.4.2环境内分泌干扰物与野生动物的健康

到目前为止，人们普遍认为环境中大量EEDs的存在是对许多野生动物的健康造成有害效应的重要原因。

多数情况涉及到与野生动物种群下降有关的生殖畸形。

①哺乳动物

雌性佛罗里达黑豹、波罗的海轮海豹、普通海豹和白鲸的生育力的紊乱归因于受到PCBs和其它有机氯化合物的污染所致。

②鸟类

已经发现蛋壳变薄（导致繁殖失败）正是由于对有机氯农药（如DDT）的暴露引起的

③爬行动物

美国佛罗里达Apopka湖的鳄鱼，在20世纪80年代，一次较大的化学物质（包括有机氯杀虫剂三氯杀螨醇）泄漏后，其种群出现下降。

雌雄个体都有发育不正常的生殖器官和异常的血液激素水平。

雄性的生育力受到有害影响。

④鱼类

许多研究已经显示生活污水和工业废水中的物质可以引起鱼类的许多异常变化，包括出现雌雄间体（在精巢中出现卵细胞）、成年雄性和未成年雌性个体产生卵黄蛋白原和不正常的精巢发育。

⑤海洋软体动物

油螺（Nucellalapillus）生殖器官的变化（imposex，雌性生殖器官与雄性的部分类似）是由于受到三丁基锡（TBT，在船舶和海港设备中用于防污油漆的成分）的暴露造成。

这是目前最清楚的关于生物内分泌干扰的报道，它已经导致出现种群水平的影响，这也是唯一报道的内分泌干扰实例中由于采取了补救措施已经导致受影响生物种群的恢复。

9.5甄别环境内分泌干扰物的常用方法

离体测试

Invitrotest

活体测试

Invivotest

☻MCF-7细胞增殖测试

☻转基因酵母标志酶诱导测试

☻鱼类的持久肝细胞系测试

☻鼠肝癌细胞系（H4IIE）测试

☻鱼类原代肝细胞测试

优点：

快速、低成本、使用的实验动物少；作用机制研究

缺点：

不能反应测试化合物的代谢和内分泌系统不同部分之间的相互作用等

☻Tier1—14天短期筛选

☻Tier2—21天发育与繁殖测试

☻Tier3—全生命周期测试

（OECD的鱼类测试方法）

优点：

可以确认化合物的内分泌干扰活性，并可以提供化合物对生物个体或种群水平上影响的信息

缺点：

成本高，试验周期较长，使用的实验动物较多