常用pH缓冲液缓冲液缓冲范围Word格式.docx
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把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与mlmol/LHCl混合均匀，加水稀释至100ml
5
邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠
把mlmol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml
6
六亚甲基四胺-盐酸
在200ml水中溶解六亚甲基四胺40g，加浓HCl10ml，再加水稀释至1L
7
磷酸二氢钾-氢氧化钠
把mlmol/L的磷酸二氢钾与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml
8
硼酸-氯化钾-氢氧化钠
把mlmol/L的硼酸-氯化钾与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml
9
氯化铵-氨水
把mol/L氯化铵与mol/L氨水以2：
1比例混合均匀
10
把mlmol/L的硼酸-氯化钾与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml
11
氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠
把mlmol/L氨基乙酸-氯化钠与mlmol/LNaOH混合均匀
12
磷酸氢二钠-氢氧化钠
把mlmol/LNa2HPO4与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml
13
氯化钾-氢氧化钠
把mlmol/LKCl与mlmol/LNaOH混合均匀，加水稀释至100ml
一、常用溶液的配制
（一）溶液配制注意事项
1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteedreagent，G．R．）、分析试剂（Antalyticalreagent，A．R．）化学纯（Chemicalpure，C．P．）和实验试剂（Laboratoryreagent，L．R．）等等。
工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。
2．药品称量要精确。
3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在~之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。
４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。
（二）（1/15）Mol/L磷酸缓冲液
1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：
称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．），用蒸馏水溶解后，倾入1000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1000ml）。
2．1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：
称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，.）（或者Na2HPO4·
2H2O）用蒸馏水溶解后，放入1000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1000ml）。
3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。
附表1磷酸盐缓冲液配制法（单位：
毫升）
pH
1/15Mol/LNa2HPO4
1/15Mol/LKH2PO4
（三）LPB液
附表2LPB液配制法
LNa2HPO4（ml）
LNaH2PO4（ml）
Na2HPO4·
2H2O分子量=L溶液含L。
12H2O分子量=L溶液含L。
NaH2PO4·
H2O分子量=L溶液含L。
（四）LPB缓冲液
附表3LPB缓冲液配制法
Mol/LNa2HPO4（ml）
LNa2HPO4·
2H2O溶液L
12H2O溶液含L
LNaH2PO4·
H2O溶液含L
2H2O溶液含L
欲配LPB缓冲液则在LPB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。
欲配制PBS液时，则在溶液中加％的NaCl溶液即可。
（五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS）
（LPH）
NaCl
KCl
Na2HPO4
（如为Na2HPO4·
12H2O，则为）
KH2PO4
将上述试剂依次溶于1000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。
此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。
（六）硼酸盐缓冲液（Boratesalinebuffer）
1．硼酸（Ｈ3BO3）
L硼酸：
硼酸加水至1000ml。
2．硼砂（Na2B4O7）
L硼砂：
硼砂加水至1000ml。
附表4不同pH的L硼酸缓冲液配制法
L硼砂（ml）
L硼酸（ml）
（七）巴比妥缓冲液
1．离子强度L巴比妥缓冲液
巴比妥钠
蒸馏水3000ml
HCl
（NHCl=193ml浓HCl加1807ml蒸馏水）
⑴将巴比妥钠溶于3000ml蒸馏水。
⑵加NHCl55ml。
⑶用HCl调节pH到，并加蒸馏水至4265ml。
2．L巴比妥缓冲液
巴比妥
加蒸馏水至1
3．L巴比妥缓冲液
加蒸馏水1
（八）L醋酸盐缓冲液见表附表5
附表5L醋酸盐缓冲液配制法
L
Tris（ml）
HCl（ml）
23℃
37℃
25
5
（九）三羟甲基甲烷—盐酸缓冲液（Tris—HCl缓冲液）
不同pH，L
L三羟甲基氨基甲烷加х，加水稀释至100ml（见下表）
附表6Tris—HCl缓冲液配制法
（ml）
三羟甲基氨基甲烷（Tris）
分子量=
L三羟甲基氨基甲烷：
，加水至1000ml。
：
取，加水至1000ml。
（十）L碳酸盐缓冲液
NaHCO3
Na2CO3
溶于蒸馏水中即得。
不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。
最好小量配制。
（十一）甘油磷酸缓冲液
1．配制磷酸缓冲液
LNa2HPO4
NaH2PO4
混合即可
2．9份甘油与1份磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。
用途：
用于免疫荧光试验。
（十二）Hank’s液
1．贮存液
12H2O
葡萄糖
％酚红液
双馏水加至
115℃高压灭菌15min，冰冻保存。
2．工作液
贮存液1份
双馏水9份
115℃高压灭菌15min。
临用时用灭菌的％NaHCO3液调pH值至左右（溶液呈橙红色）。
（十三）萘（钠）氏试剂（Nessler’sreagent）
配方1：
氯化汞
碘化钾
20％NaOH30ml
加蒸馏水至100ml
配方2：
碘化汞
碘化钾8g
蒸馏水50ml
（完全溶解后）过滤，加20％NaOH50ml。
检测溶液中氨离子。
（十四）阿氏（Alsever’s）液
柠檬酸钠
氯化钠
蒸馏水100ml
溶解后，以10%柠檬酸调节pH至，过滤，分装，10磅10min灭菌，4℃保存。
（十五）青、链霉素混合液（简称S．P．液或双抗液）
青霉素（40万U）5支
链霉素（200万μg）1支
分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中，混合后分装小瓶，置-10℃~-20℃冰箱保存备用（1万单位μg/ml）。
临用时，按1%的量加入营养液或其他溶液中，最后浓度是青霉素100U/ml，链霉素100ug/ml。
（十六）洗液（清洁液）
重铬酸钾150g
蒸馏水300ml
浓硫酸3000ml
将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发热过剧则稍停，冷却后再继续加。
此为强洗液。
盛清洁液的容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。
洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。
如将这样洗液加热，再加适量重铬酸钾，又可重新使用。
浓硫酸50%
蒸馏水50%
重铬酸钾5%
此为中等强度洗液。
配方3：
重铬酸钾100g
蒸馏水1000ml
加热溶解，冷却后缓慢加入
工业硫酸100ml
此液为弱洗液，为棕红色。
使用此液时，必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净，经自来水冲洗，沥干然后才能浸入，否则该洗液很快失效。
缓冲液名称及常用浓度缓冲pH范围主要物质分子量
MES（2吗啉代乙磺酸）
Bis-Tris
HEPES
PIPES
MOPS
Tricine
TEA（三乙醇胺）
甘氨酸-盐酸缓冲液（L）甘氨酸Mr=
邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（L）邻苯二甲酸氢钾Mr=
磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液磷酸氢二钠Mr=
柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液柠檬酸Mr=
柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（L）柠檬酸Mr=柠檬酸钠Mr=
乙酸-乙酸钠缓冲液（L）乙酸钠Mr=乙酸Mr=
邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠缓冲液邻苯二甲酸氢钾Mr=
磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（L）
磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液（1/15molL）
磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（L）
巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）巴比妥钠Mr=
Tris-盐酸缓冲液L25℃）三羟甲基氨基甲烷（Tris）Mr=
甘氨酸-氢氧化钠缓冲液L）甘氨酸Mr=
硼砂-氢氧化钠缓冲液L）硼砂Na2B4O710H2OMr=
碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液L）碳酸钠Mr=碳酸氢钠Mr=
碳酸钠-氢氧化钠缓冲液L）
磷酸氢二钠-氢氧化钠缓冲液
氯化钾-盐酸缓冲液（L）氯化钾Mr=
氯化钾-氢氧化钠缓冲液（L）氯化钾Mr=
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