高考生物四海八荒易错集专题16生物技术实践Word格式.docx
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单个微生物细胞繁殖所形成的细胞群叫菌落。
【答案】
（1）分解者
（2）鉴别 将蛋白胨改成尿素 酚红 （3）灭菌 消毒 （4）稀释涂布平板法 平板划线法 菌落 显微镜直接计数法
2．纤维素是自然界分布最广、含量最多的一种多糖，马、牛等食草动物具有消化纤维素的能力，请回答有关问题。
（1）与培养土壤中分离的纤维素分解菌相比，培养马胃中分离出的纤维素分解菌要调整培养基的pH，还要保证________条件。
配制好的培养基培养前应采用________法进行灭菌处理。
从功能上看，该培养基是________培养基。
（2）给锥形瓶内的培养液接种时应在酒精灯火焰附近进行，防止________污染培养基。
对无菌操作时用到的玻璃器皿要用________的方法彻底灭菌。
（3）某同学使用划线法分离纯化菌株，经一段时间培养，发现有的线上长满了菌，有的线上无菌落，造成这种情况的原因可能是划线操作时________。
（4）将筛选培养的纤维素分解菌破碎后，用________的方法可将纤维素酶溶液与其他细胞成分分离开。
纤维素酶能催化纤维素分解为还原性的葡萄糖，根据这一特性，可用________试剂判断提取物是否起到了降解纤维素的作用。
【答案】
（1）无氧 高压蒸汽灭菌 选择
（2）杂菌 干热灭菌 （3）接种环灼烧后未冷却 （4）离心 斐林
3．微生物在人们的生活中无处不在，请结合所学知识回答下列问题：
（1）在制作果酒过程中，发挥作用的微生物是酵母菌。
在制作果酒前期，装置中的酵母菌应该处于________（填“有氧”或“无氧”）条件下，同时将温度控制在________℃左右，有利于酵母菌的繁殖。
（2）制作果醋所需要的微生物是________，在制作果酒的酒精发酵旺盛阶段，加入该微生物能否将果汁中的糖转化为醋酸？
________，请说明理由：
________________________。
（3）泡菜的制作离不开乳酸菌，可用培养基培养大量纯净的乳酸菌菌种。
培养乳酸菌的培养基一般含有________、________、水和无机盐等营养物质，同时还要满足________等培养条件。
若对获得的乳酸菌菌种进行临时保存，可将菌种接种到试管的________培养基上，在合适的温度下保存。
（3）培养微生物的培养基成分一般含有碳源、氮源、水和无机盐。
【答案】
（1）有氧 20
（2）醋酸菌 不能 醋酸菌是好氧细菌，而果酒发酵是无氧环境（醋酸菌在有氧、温度为30～35℃条件下才能将糖转化为醋酸，而酒精发酵条件为无氧、温度为18～25℃）（合理即可）
（3）碳源 氮源 适宜的pH和温度、无氧 固体斜面
4．丁香油是从丁香花中提取的一种挥发性较强的植物芳香油。
下图是制备丁香油的流程图，请据图回答下列相关问题。
（1）提取丁香油采用的方法是____________。
丁香花作为提取丁香油的原料时，选用________（填“鲜”或“干”）丁香花更佳。
（2）过程①中加入的物质是________，作用是增加盐的浓度，使分层更明显。
然后用________分离油层。
（3）过程②中加入的是________，目的是吸收油层中的水分，再通过________除去固体Na2SO4得到丁香油。
（4）欲实现丁香种苗的快速繁殖，可采用____________技术，该技术所用的MS培养基中通常含有________，以启动细胞分裂、脱分化和再分化。
【解析】
（1）丁香油有很强的挥发性，因此采用水蒸气蒸馏法提取。
丁香油易挥发，鲜丁香花含有丁香油更多，故选用鲜丁香花提取丁香油更佳。
（2）加入NaCl可以增加盐的浓度，使分层更明显，然后用分液漏斗将油层和水层分开。
（3）加入无水Na2SO4，吸收油层中的水分，放置过夜，再通过过滤除去固体Na2SO4，从而得到丁香油。
（4）利用植物组织培养技术可达到种苗快速繁殖的目的，植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。
【答案】
（1）水蒸气蒸馏法 鲜
（2）NaCl 分液漏斗
（3）无水Na2SO4 过滤
（4）植物组织培养 植物激素（生长素和细胞分裂素）
易错起源1、微生物的利用和传统发酵技术
例1．（2016·
全国乙卷）空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。
某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。
实验步骤如下：
①配制培养基（成分：
牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O）；
②制作无菌平板；
③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；
④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。
回答下列问题：
（1）该培养基中微生物所需的氮来源于________。
若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是________。
（2）步骤③中，实验组的操作是________。
（3）若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。
若将30（即36—6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法________（填“正确”或“不正确”）。
【答案】
（1）牛肉膏、蛋白胨 琼脂
（2）将各实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上，开盖暴露一段时间
（3）污染 不正确
【变式探究】
（2016·
全国丙卷）某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。
分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。
（1）分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是__________________________________________________
_____________________________________________________________________
___________________________________________________________。
（2）推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有________和________。
分离纯化时应挑选出________的菌落作为候选菌。
（3）乳酸菌在－20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________（填“蒸馏水”“甘油”或“碳酸钙”）。
【答案】
（1）无菌水 泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落
（2）鉴别乳酸菌 中和产生的乳酸（或酸） 具有透明圈 （3）甘油
全国甲卷）苹果醋是以苹果汁为原料经发酵而成的。
（1）酵母菌的呼吸代谢途径如图所示。
图中过程①和②是苹果醋生产的第一阶段，在酵母菌细胞的________中进行，其产物乙醇与________试剂反应呈现灰绿色，这一反应可用于乙醇的检验；
过程③在酵母菌细胞的________中进行。
与无氧条件相比，在有氧条件下，酵母菌的增殖速度________。
（2）第二阶段是在醋酸杆菌的作用下将第一阶段产生的乙醇转变为醋酸的过程，根据醋酸杆菌的呼吸作用类型，该过程需要在________条件下才能完成。
（3）在生产过程中，第一阶段和第二阶段的发酵温度不同，第一阶段的温度________（填“低于”或“高于”）第二阶段的。
（4）醋酸杆菌属于________核生物，其细胞结构中________（填“含有”或“不含有”）线粒体。
【解析】
（1）图中过程①和②是酵母菌无氧呼吸产生乙醇的过程，无氧呼吸的场所是细胞质基质。
乙醇可用酸性重铬酸钾试剂检测，颜色由橙色变为灰绿色。
过程③为有氧呼吸的第二和第三阶段，场所为线粒体。
在有氧条件下酵母菌进行有氧呼吸，产生更多的能量供酵母菌繁殖利用，故有氧条件下酵母菌的繁殖速度更快。
（2）醋酸杆菌是好氧型细菌，因此，在醋酸杆菌作用下，将乙醇转变为醋酸的过程需要在有氧条件下才能完成。
（3）在生产过程中，第一阶段酵母菌产生乙醇的适宜温度为18～25℃，第二阶段醋酸杆菌产生醋酸的适宜温度为30～35℃，第一阶段的温度低于第二阶段的。
（4）醋酸杆菌属于原核生物，原核细胞中的细胞器只有核糖体一种，不含线粒体。
【答案】
（1）细胞质基质 重铬酸钾 线粒体 快
（2）有氧 （3）低于 （4）原 不含有
【名师点睛】
1．理清微生物的培养的基本技术
（1）培养基的制备
计算→称量→溶化→灭菌→倒平板
（2）无菌技术
①消毒：
煮沸消毒法、巴氏消毒法以及使用化学试剂进行消毒。
②灭菌：
对培养基进行灭菌，常采取高压蒸汽灭菌；
对接种环灭菌采取灼烧灭菌；
对玻璃器皿灭菌采取干热灭菌。
（3）微生物的纯化技术
①平板划线法：
通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法：
将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将其分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而在培养基表面形成单个菌落。
（4）倒平板操作：
待培养基冷却至50__℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
【锦囊妙计，战胜自我】识记传统发酵食品技术的有关知识点
食品
菌种
呼吸类型
原理
温度
果酒
酵母菌
无氧
无氧呼吸产生酒精
18～25_℃
果醋
醋酸菌
需氧
糖（酒精）→醋酸
30～35_℃
腐乳
毛霉等
蛋白酶、脂肪酶水解蛋白质、脂肪
15～18℃
泡菜
乳酸菌
无氧呼吸产生乳酸
—
易错起源2、生物材料中有效成分的提取
例2．回答与胡萝卜素有关的问题：
（1）胡萝卜含有的胡萝卜素中，最主要的是________（填“α 胡萝卜素”、“β 胡萝卜素”或“γ 胡萝卜素”），该胡萝卜素在人体内可以转变成两分子________，后者缺乏会引起人在弱光下视物不清的病症，该疾病称为________，胡萝卜素是________（填“挥发性”或“非挥发性”）物质。
（2）工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，________（填“需要”或“不需要”）将新鲜的岩藻干燥。
（3）现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中的________作为胡萝卜素的萃取剂，不选用另外一种的理由是___________________________________
【答案】 （15分）
（1）β 胡萝卜素 维生素A 夜盲症 非挥发性（每空2分，共8分）
（2）需要（2分）
（3）乙酸乙酯（2分） 萃取胡萝卜素的有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂（3分，其他合理答案也给分）
1．植物有效成分提取的3种方法的比较
提取方法
实验原理
适用范围
水蒸气
蒸馏法
利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层
适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油
压榨法
通过机械加压，压榨出果皮中的芳香油
适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料中芳香油的提取
有机溶
剂萃取
使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可获得芳香油
适用范围广，要求原料的颗粒要尽可能细小，能充分溶解在有机
溶剂中
【锦囊妙计，战胜自我】
识记植物有效成分提取的实验流程
（1）提取玫瑰精油的实验流程
鲜玫瑰花＋清水（1∶4）→水蒸气蒸馏→油水混合物分离油层除水玫瑰油。
（2）提取橘皮精油的实验流程
石灰水浸泡橘皮→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油。
（3）提取胡萝卜素的实验流程
胡萝卜→粉碎→干燥→萃取→过滤→浓缩→胡萝卜素。
1．已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。
脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。
回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用________染色。
微生物A产生的油脂不易挥发，可选用________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用________直接计数；
若要测定其活菌数量，可选用________法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。
为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕________℃设计后续实验。
（4）降解等量的油脂，需要的酶量越多，说明此温度下的酶的活力越小。
所以三种温度中45℃下酶的活力最小。
从三种温度下的实验结果可知，40℃下酶的活力最大，所以要想测定该酶的最适温度，应围绕该温度设计不同温度梯度，进行后续实验。
【答案】
（1）苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ） 萃取法
（2）油脂 （3）血细胞计数板 稀释涂布平板 （4）45 40
2．受中医古籍《肘后备急方》中将青蒿“绞汁”用药的启发，屠呦呦采用低温提取的方法，从黄花蒿中直接提取得到青蒿素，是治疗疟疾的特效药。
青蒿素易溶于有机溶剂，不溶于水，不易挥发，对热不稳定。
（1）青蒿素的提取________（填“适宜”或“不宜”）采用水蒸气蒸馏法提取，原因是______________________________________________________。
（2）屠呦呦采用乙醚浸提法提取青蒿素，其提取流程与胡萝卜素的提取具有相似之处。
在用乙醚浸泡提取前，要对黄花素茎叶进行________和干燥，以提高萃取效率；
干燥过程应控制好________和干燥时间，以防止________。
（3）青蒿素是从野生植物黄花蒿中提取，曾被世界卫生组织称作是“世界上唯一有效的疟疾治疗药物”，这一实例表明了生物多样性的________价值。
青蒿素还对癌细胞的生长具有显著抑制作用，它能诱导多种癌细胞的凋亡。
细胞凋亡是由________所决定的细胞________的过程。
【答案】
（1）不宜 青蒿素不易挥发，且对热不稳定
（2）粉碎 干燥温度 青蒿素分解 （3）直接 基因 自动结束生命
3．回答下列有关泡菜制作的问题：
（1）制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是________。
为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的作用是___________。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行______________________的过程。
该过程发生在乳酸菌细胞的________中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有________、________和________等。
（4）从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。
这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是________________________，原因是
__________________________________________________________。
【解析】 结合泡菜制作过程的相关知识回答问题。
（1）制作泡菜时需要先形成无菌环境，所用盐水需煮沸，以杀灭盐水中的杂菌。
想要缩短制作时间，应该缩短菌株的生长时间，陈泡菜液中含有一定量的乳酸菌，这样菌体数量扩增速度会加快。
【答案】
（1）杀灭杂菌 增加乳酸菌数量
（2）无氧呼吸 细胞质 （3）温度 腌制时间 食盐用量 （4）乳酸菌数量增多，杂菌数量减少 乳酸菌比杂菌更为耐酸
4．利用紫外线诱变选育高产β－胡萝卜素的三孢布拉霉负菌，未突变菌不能在含有一定浓度的β－紫罗酮的培养基上生长，菌体随β－胡萝卜素含量增加从黄色加深至3橙红色。
图甲为选育及提取获得β－胡萝卜素流程，请回答下列问题：
图甲
图乙
（1）用紫外线照射三孢布拉霉负菌的目的是__________________。
为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加__________________，在接入菌种前，应对培养基进行____________，以避免杂菌污染。
（2）某同学进行正确的接种操作后，平板经培养后的菌落分布如图乙所示。
该同学的接种方法是______________（填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”）；
由于__________________________________________________，
所以培养基上只有少数菌能生长形成菌落。
（3）进行③过程时，应选取________色的菌落接种至液体培养基。
过程⑥是________，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品。
（4）将萃取的胡萝卜素样品与β－胡萝卜素标准样品层析后进行比对，结果如图，从图中分析可知，色带________为β－胡萝卜素。
（4）分析图示可知，通过与标准样品层析结果对比可判断色带Ⅰ为β－胡萝卜素。
【答案】
（1）诱导其发生基因突变 一定浓度的β－紫罗酮 高压蒸汽灭菌
（2）稀释涂布平板法 基因突变频率低，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖 （3）橙红 浓缩 （4）Ⅰ
5．薄荷叶富含维生素、蛋白质和薄荷油，具有疏散风热、清利咽喉、消炎镇痛的作用。
请回答下列问题：
（1）植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和________等。
提取薄荷油可以用水蒸气蒸馏法，该方法能利用水蒸气将____________的薄荷油携带出来。
（2）在提取薄荷油的过程中，向得到的油水混合物加入NaCl后，薄荷油将分布于液体的________（填“上层”或“下层”），然后用________将这两层分开。
分离得到的薄荷油油层中含有一定量的水分，可用____________吸水。
（3）可用植物组织培养的方法对薄荷进行扩大培养，在接种前工作台需用__________________擦拭一遍。
之后所有的接种操作都必须在____________旁进行。
培养基中的生长素用量与细胞分裂素用量的比值________（填“低”“高”或“相当”）时，有利于芽的分化。
【解析】
（1）植物芳香油的提取方法有蒸馏法、压榨法和萃取法等。
薄荷油具有挥发性强的特点，可用水蒸气蒸馏法提取。
（2）在提取薄荷油的过程中，向得到的油水混合物加入NaCl后薄荷油将分布在上层。
可用分液漏斗将两层分开。
用无水Na2SO4将薄荷油中的水除去。
（3）接种前工作台需用体积分数70%的酒精擦拭一遍，接种操作需要在酒精灯火焰旁进行。
培养基中生长素用量与细胞分裂素用量的比值低，有利于芽的分化。
【答案】
（1）萃取法 挥发性较强
（2）上层 分液漏斗 无水Na2SO4
（3）体积分数70%的酒精 酒精灯火焰 低
6．牛奶中富含蛋白质，长期饮用有助于增强体质，但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。
国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。
以下是牛奶消毒及细菌检测实验。
（1）图中步骤①称为________消毒法。
步骤②是________。
（2）培养基中的蛋白胨可以为微生物提供________。
进行步骤③操作时，应选用下列中的哪种工具？
________。
为了避免杂菌污染，此步骤应在______________附近进行。
（3）将接种后的培养基和作为对照的__________________同时放入37℃恒温培养箱中，培养36小时。
取出后统计各平板的菌落数，结果如下表所示。
应该选择其中稀释倍数为________的平板进行计数，经过消毒后的牛奶中，细菌数大约是________/mL。
牛奶稀释倍数
10－2
10－5
10－4
平板1菌落数
87
10
1
平板2菌落数
83
12
平板3菌落数
85
【答案】
（1）巴氏 系列稀释（或梯度稀释）
（2）碳源、氮源（和维生素） B 酒精灯火焰 （3）一个未接种的培养基 10－2 8500个
7．红方是腐乳的一种。
请回答与其制作有关的问题：
（1）补充制作红方的实验流程：
①______________→②加盐腌制→③____________→④密封腌制。
（2）在实验流程①中，首先将豆腐块平放在笼屉内，笼屉中的温度应控制在________℃，并保持在一定的________。
5天后豆腐块表面布满毛霉菌丝，这些毛霉来自空气中的________。
（3）在实验流程②操作中，向长满毛霉的豆腐块加盐，其作用是析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬。
同时，盐还能________________，避免豆腐块腐败变质。
（4）在实验流程③用到的辅料中，卤汤是由________及各种________配制而成的。
此外，红方因加入了________而呈深红色。
（3）加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。
同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。
（4）卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的，红方因加入红曲而呈深红色。
【答案】
（1）豆腐上长出毛霉 加卤汤装瓶
（2）15～18 湿度 毛霉孢子 （3）抑制微生物的生长 （4）酒 香辛料 红曲
8．蓝莓富含花青素等营养成分，具有保护视力、软化血管、增强人体免疫力等功能。
某同学尝试用蓝莓来制作蓝莓果酒和蓝莓果醋。
（1）制酒中利用的微生物是________，取样后可用________观察该微生物。
发酵时一般要先通气，通气的目的是____________________________。
制酒过程中可在酸性条件下用橙色的重铬酸钾检验酒精的存在，检验后颜色变成________。
（2）酿制成功的蓝莓果酒如果暴露在空气中酒味会逐渐消失而出现醋酸味，尤其是气温高的夏天更易如此，分析其原因是___________________________________________________________________________________________。
醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖原________（填“充
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