分子生物学Word文档格式.docx
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由于真核细胞染色体DNA的复制要有一段RNA为引物,因此线状的DNA复制后必须存在着5’端缩短的问题。
已发现有一种端粒蛋白称为 ,它由 构成,可以使单链DNA的5’延长。
5.
对DNA损伤有几种修复系统,其中只有 修复系统可以造成DNA变异,与这一系统有关的一套基因平时受到一称为 的抑制蛋白所抑制,它发挥抑制作用是结合在一段约20bp长的称为 的DNA序列上,当DNA损伤时,另一种蛋白质称为 把这种抑制蛋白水解后,修复系统的基因才会被激活。
6.
真核细胞中有三种依赖于DNA的RNA聚合酶分别合成不同的RNA,RNApolI负责合成 ,RNApolII负责合成 ,RNApolIII负责合成 。
7.
大分子互相作用是分子生物学的重要内容,包括蛋白质之间、蛋白质与DNA或RNA之间的互相作用,蛋白质有四种重要的结构花式与大分子互相作用有关,这些结构花式是
,
,
。
8.
NO是气体小分子信号,它可由
脱氨产生,它的作用方式是直接与
酶作用使产生cGMP(环式GMP)。
9.
真核mRNA的5’端通常有帽子结构,3’端有polyA。
在polyA上游有一保守序列称为polyA信号,其序列为
polyA能提高mRNA的翻译水平是由于:
(1)
(2)
。
10.
G-蛋白关联受体是一类重要的细胞表面受体,它的结构特色是
,它发挥信号传递作用的两条途径是
途径和
途径。
三、问答题(50分)
1.
说出双链DNA复制起始有关的五种重要的酶或蛋白并简述它们的功能。
(15分)
2.
简述增强子的特点和性质及作用机制。
(10分)
3.
简述真核RNA聚合酶II的转录起始复合物装配过程和转录起始(15分)
4.
DNA限制性内切酶EcoRI是人们熟悉的常用内切酶,它是在大肠杆菌(E.coli)R株中发现的,它被广泛用于分子克隆操作和DNA分析。
pUC质粒是常用克隆载体之一,它的多克隆位点上有EcoRI、BamHI、KpnI、HindIII等酶切点。
假如要你把一段由EcoRI切割产生的外源DNA片段克隆到pUC质粒中,并把重组质粒转化大肠杆菌R株来扩增,已知条件是所用的R菌株中只有EcoRI一种限制性内切酶,你设计如何做才能确保成功?
为什么?
2002年攻读硕士学位研究生入学考试试题
935
一、
填空:
(每空1分,共40分)
1.测定蛋白分子量的主要方法是 。
而要较准确测定DNA分子量的方法是根据DNA分子量的大小而采取不同的方法,分子量<5×
106时用 ,分子量=5-100×
106时用 ,分子量大于100×
106时用 。
2.长度为20um的DNA分子,其长与宽的比是 ,该DNA分子含有 碱基对。
3.细菌中,体内DNA重组需要RecA、RecB参加,RecA起 作用,RecB起 作用。
4.许多蛋白质能解开DNA双螺旋,32-prote重要性质 和 ,所以能使DNA变性。
5.Meselson-Stahl实验中用的E.coli长时间在15N中培养后转入14N中。
转入14N培养基中之后,1/2,1,世代时。
总DNA中15N15N,15N14N,14N14N的比例如下:
(本题共两分)
世代
15N15N
15N14N
14N14N
1/2
1
6.原核生物转录水平的调控方式主要有① ② ③ 和④
7.一个plasmid载体含有一个大肠杆菌Lac操纵子的promotor-operator和外源基因,则这个基因的表达可以这样来控制,向培养基加入 则转录开始,要使转录停止,可以加入 。
8.紫外线诱导的胸腺嘧啶二聚体的修复可以通过四种途径进行,它们是 、 、 、和 。
其中 和 是对模板进行修复,而 修复引起突变。
9.在基因表达调控中,常常涉及顺式调控因子和反式调控因子,顺式调控因子是指 ,反式调控因子是指 。
10. 蛋白负责特定基因的开关。
在数百种来源于原核和真核的DNA-结合蛋白中发现以下几种结构花式(motif)。
它们是 , , 和 。
它们通常以 和 ,深入到DNA双螺旋的大沟中与DNA相互作用。
11.逆转病毒即使本身并没有病毒癌基因,也可以致癌,当病毒cDNA整合于 时病毒cDNA中 能激活细胞的原癌基因的表达。
12.P53一种重要的抑癌蛋白,它的两个主要功能是
(1)
(2) 。
P53的两个等位基因中只要其中一个变异就可能使癌发生,这是因为P53蛋白是 的形式存在和行使功能的。
13.细胞快速适应高浓度胞外信号的途径是 。
二、选择:
(每题2分,共20分)
关于遗传密码的论述,哪些是正确的
A、在通用密码中,AUG是唯一的兼职密码生
B、生物体可通过选择使用不同的同义密码来调节翻译的速度,从而进行翻译水平上的调控。
C、无论病毒、细菌、动物、植物、细胞器,都共用一套遗传密码。
D、在体外无细胞合成系统中合成多肽,起始密码子不存在时也能合成多肽。
DNApolymerasel的哪个活性是使DNA复制保持忠实性的关链因素
A、聚合活性
B、5’-3’外切活性
C、3’-5’外切活性
D、逆转录酶活性
一个λphage感染它的溶源菌时,下列情况将发生
A、
进入正常的噬菌体循环产生50个左右的噬菌体粒子
B、λ-DNA可以环化但不复制
C、细菌细胞将被杀死
D、原噬菌体将被割离
E、λ-DNA将不能注入
下面的部分二倍体中,哪些表型是组成型地合成β-半乳糖苷酶
A
I+o+z+y+
B
i+o+z+y-
C
i+ocz+y+
D
i+ocz-y+
E
i-ocz-y+
I-o+z+y+
I+ocz+y+
i-o+z+y+
关于真核基因表达调控特点的论述哪些是正确的
真核基因组基因数目多、大多数含内含子、且与组蛋白及非组蛋白结合形成核小体及其超螺旋等结构影响基因活性
B、转录在核内、翻译在细胞质中进行,绝大多数mRNA的形成要通过RNA是否被运输来控制基因表达
C、真核mRNA寿命长,为翻译水平的调控提供了较大的余地
D、真核基因表达调控可在DNA水平的调控(拷贝数、重排)、转录水平、转录后水平(RNA加工和运输)和翻译水平等多层次调控
E、原核基因表达调控活动范围比真核更大
人们为研究某一目的基因的结构,打算用基因工程的办法得此基因,请你在正面载体中选一最合适的载体
表达载体
B、分泌性载体
C、克隆载体
D、转移载体
E、穿梭载体
当培养基中不存在糖时,正面哪一种是galoperon上结合的蛋白质情况
结合有CAP-cAMP和RNA聚合酶两种蛋白质
B、不结合蛋白质
C、结合有阻遇蛋白和CAP-cAMP蛋白
正面关于真核生物启动子的叙述,哪些是正确的?
真核生物有三种RNA聚合酶,它们利用同一种启动子
B、DNApolymeraseII利用的启动子只有一种类型
C、RNApolymeraseI利用的启动子分两部分:
40~-+5和-165~-40
人们打算克隆并鉴定一个分子量为36-45kb的真核单拷贝基因,首先必须使用下边哪套系统,然后再进行鉴定。
用cosmid为载体建立基因文库
B、用pBR322为载体建立基因文库
C、用M13为载体建立基因文库
D、用λCharon4A为载体建立基因文库
11.
与细菌中发现的转录调控相比,真核细胞中的转录调控有以下区别,其中哪一项是错误的?
A、真核RNApolymerase单独不能起作用
B、真核基因在转录前,需多种转录因子(generaltranscriptionfactors)先在启动了上装配成复合物
C、起始复合物装配过程包括许多步骤,每个步骤都受到调控信号或调控因子的影响
D、在真核中大多数基因调控蛋白不能在离开它们所影响的基因相当远的地方起作用
三、问答:
1、简述(或绘图说明)真核细胞RNA聚合酶II转录的起始需要哪些基本转录因子及其装配过程(15分)
2、简述(或绘图说明)色氨酸操纵子弱化的机制(15分)
3、在讨论基因家庭时经常提到胚胎、胎儿和成体形成的蛋白质,这些述语是指什么现象?
可用什么术语来描述这一类基因家族(5分)
4、你正在进行Southernblot分析,并刚刚完成凝胶电泳部分,下一步是将胶浸泡在NaOH溶液中使DNA变性为单链,为了节约时间,你跳过这一步,直接把DNA从胶上转到硝酸纤维素膜上,你将标记好的探针与膜杂交,却发现放射自显影结果是一片空白,哪里错了呢?
(5分)
2003年攻读硕士学位研究生入学考试试题
717
注意:
所有的答题内容必须答在答题纸上,凡答在试题上的一律无效
一、下列名词翻译成中文,并简要解释(共10小题,每题4分,共40分)
1.Domainsandmotifs
2.Alternative
splicing
3.Reportergenes
4.ThePCRcycle
5.Restriction
mapping
6.Multiplecloningsites
7.DNAlibraries
8.Proteomics
9.Replicon
10.Semi-conservative
replication
二、简答题
(共5题,每题8分,共40分)
1,请列举三种以上蛋白质纯化技术,并说明不同纯化技术的简单原理。
2,简述DNA损伤与DNA突变之间的区别与相互关系。
3,简述密码的简并性(degeneracy)和同义密码子(synonymouscodon)及其在生物学上的重要性。
4,简述原核生物转录起始与转录终止过程中所涉及的主要蛋白质和核酸结构及其具体作用。
5,简述cDNA文库的构建过程。
三、论述题
(共5题,1-4题每题15分,第5题10分,共70分)
人类基因组计划完成的社会意义和科学意义是什么?
什么是操纵子(operon)?
试说明色氨酸操纵子(Trpoperon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。
请简要解释顺式作用元件与反式作用因子,并举二例加以说明它们的相互作用方式。
试说明真核细胞与原核细胞在基因转录、翻译及DNA的空间结构方面存在的主要差异,表现在哪些方面?
限制性核酸内切酶有哪几种类型?
哪一种类型的限制酶最适合于基因工程,为什么?
请简要说明其理由。
2004年武汉大学硕士研究生入学考试分子生物学试卷
一,名词翻译与解释
1,synonymouscodons2,RNAediting3,Spliceosome
4,Microarray5,Plaquehybridization6,Openreadingframe
7,Ribozyme
8,RFLP9,Sitespecificrecombination
10,RNAinterference
二,简答题(共5小题,每小题10分,共50分)
1,简述真核生物rRNA基因,tRNA基因和mRNA基因的转录机制。
2,原核生物和真核生物中存在哪些类型的转座子?
其转座机制有那些?
3,简述真核生物DNA复制中,端粒复制与染色体其他部分DNA复制的异同和生物学意义。
4,原核生物的蛋白质合成可分为哪些阶段?
简述各阶段的主要事件。
5,列举4种可用来检测,鉴定转基因动,植物的分子生物学技术和方法,简述选择这些技术的理由。
三,论述题
1,试述环境因素对DNA的损伤以及生物体中存在的DNA损伤修复系统。
如果DNA损伤没有被修复会造成什么后果?
2,试比较真核生物RNA聚合酶Ⅱ识别的启动子与原核生物RNA聚合酶所识别的启动子的结构特点,各结构单元的功能是什么?
为什么原核生物一种RNA聚合酶能识别不同的结构基因?
3,在进行基因工程时,载体是携带靶DNA片段进入宿主细胞进行扩增和表达的工具,请问一个载体应具有哪些基本特性和结构特点?
4,人类基因组计划基本完成表明:
人类基因组约有3乘10的9次方bp(而大肠杆菌的基因组约为4。
6乘10的6次方bp),其中仅有百分之一的基因组DNA直接编码蛋白质,约有百分之二十四的基因组DNA为内含子,而百分七十五的基因组DNA为其他非编码序列。
试从
(1)传代中遗传信息的保持;
(2)基因表达调空的角度来论述人类基因组如此排列的可能生物学意义。
2005分子试题
一、名解(4/10)
1Ubiquitin
2ribosomalbindingsite
3siRNAmiRNA
4proteome
5DNAfootprinting
6singlenucleotidepolymorphism
7chromosomewalking8haplotype
9zooblot
10transcriptionunit
二、简答(5/10)
1简述真核细胞rRNAtRNA和mRNA转录使用的聚合酶及各RNA前体(precursor)加工的基本过程?
2研究表明蛋白质组比基因组更复杂,蛋白质组中存在的蛋白质数目比基因组中存在的基因数目要多许多,这是如何造成的,你如何解释这种现象?
3简述原核与真核细胞染色体结构的差别
4在分子生物学研究中经常用各种载体进行研究工作,试问有哪些不同大小类型的载体,各自的主要特点是什么?
5简述DNA损伤修复的机制,在什么情况下DNA损伤会引起DNA突变?
三、论述4/15
1蛋白质与核酸的相互作用存在于基因表达的各个水平上,请分别举例说明在基因复制RNA转录和蛋白质翻译过程中二者的相互作用。
2一个真核细胞的蛋白质编码基因有哪些结构元件(或组建)组成(包括各种调控元件)?
请画图表示,并说名各元件的功能与作用?
3请设计一组试验来
(1)克隆一个你所感兴趣的人类基因
(2)并对基因产物大量表达与纯化(3)然后研究该基因的生物学功能
4生命科学的研究已进入后基因组时代,试从“分子生物学”的角度来谈谈你对后基因组时代的认识,并预测后基因组时代里“分子生物学”发展的未来
2006年分子生物学
一、名解4*10
1、DNA
Microarray
2、Spliceosome
3、Cosmidvector
4、Proteasome
5、Zinc
finger
domain
6、DNase
I
hypersensitivity
7、Insulator
8、Post-transcriptionalgenesilencing
9、Reversetranscription
PCR
10、Missense
mutation
二、简答题10*5
1、简述microRNA的基因调控功能与机制。
2、简述染色体端粒复制的问题,人正常细胞和癌细胞的端粒复制有何不同?
3、真核生物基因组中含有几种类型的DNA序列?
你如何设计实验来证明?
4、简述RNA编辑(RNAediting)的机制及其对基因表达的影响。
5、下面的DNA序列中含有一个假象基因,编码仅5个氨基酸。
请写出这些氨基酸的密码子以及终止密码子,并指出RNA转录的模版是哪条链?
启动子在该序列左侧还是右侧?
5-TCATGCTAGACACGTAATAGCATATGGGA-3
3-AGTACGATCTGTGCATTATCGTATACCCT-5
三、论述题15*4
1、论述一个真核基因产生有功能的蛋白质需要经过哪些分子生物学工程(event)?
列出每个过程发生的细胞位置和参与的主要酶和蛋白因子。
2、有哪几种类型的遗传重组?
其重组的特点如何?
3、DNA的甲基化在遗传信息的传递、DNA复制和DNA损伤修复等过程中有什么重要意义?
请举例说明。
4、假如你进入实验室开始研究一个小鼠DNA结合蛋白的生物学功能:
(1)、请设计实验确定其编码基因在小鼠细胞内的表达水平?
(2)、请设计实验确定该蛋白的那个结构域具有DNA结合功能?
(3)、如何确定该蛋白在小鼠体内(invivo)的生物学功能。