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10.蛋白质处于等电点时,所具有得主要特征就是溶解度最低、电场中无电泳行为。

11.在适当浓度得β-巯基乙醇与8M脲溶液中,RNase(牛)丧失原有活性。

这主要就是因为RNA酶得空间结构被破坏造成得。

其中β-巯基乙醇可使RNA酶分子中得二硫键破坏。

而8M脲可使氢键破坏。

当用透析方法去除β-巯基乙醇与脲得情况下,RNA酶又恢复原有催化功能,这种现象称为复性。

12.细胞色素C,血红蛋白得等电点分别为10与7、1,在pH8、5得溶液中它们分别荷得电性就是正电、负电。

13.在生理pH条件下,蛋白质分子中谷氨酸与天冬氨酸残基得侧链几乎完全带负电,而组氨酸、赖氨酸或精氨酸残基侧链完全荷正电(假设该蛋白质含有这些氨基酸组分)。

14.包含两个相邻肽键得主肽链原子可表示为,单个肽平面及包含得原子可表示为。

15.当氨基酸溶液得pH=pI时,氨基酸(主要)以两性离子形式存在;

当pH>pI时,氨基酸(主要)以负离子形式存在;

当pH<pI时,氨基酸(主要)以正离子形式存在。

16.侧链含—OH得氨基酸有酪氨酸、丝氨酸与三种。

侧链含—SH得氨基酸就是半胱氨基酸。

17.人体必需氨基酸就是指人体自身不能合成得、必须靠食物提供得氨基酸。

这些氨基酸包括、、、、

、、、等八种。

18.蛋白质变性得主要原因就是空间结构被破坏;

蛋白质变性后得主要特征就是失去生物活性,各种理化性质改变,易被蛋白水解酶消化;

变性蛋白质在去除致变因素后仍能(部分)恢复原有生物活性,表明一级结构没被破坏。

这就是因为一级结构含有高级结构。

得结构信息,所以蛋白质分子构象恢复后仍能表现原有生物功能。

19.盐析作用就是指中性盐使蛋白质沉淀;

盐溶作用就是指。

重金属得正离子作用而生成不易溶解得盐

20.当外界因素(介质得pH>pI、电场电压、介质中离子强度、温度等)确定后,决定蛋白质在电场中泳动速度快慢得主要因素就是相对分子质量与电荷数目。

二、选择填空题

1.侧链含有咪唑基得氨基酸就是(D)

A、甲硫氨酸B、半胱氨酸C、精氨酸D、组氨酸

2.PH为8时,荷正电得氨基酸为(B)

A、GluB、LysC、SerD、Asn

3.精氨酸得Pk1=2、17、Pk2=9、04(α-NH3)Pk3=12、48(胍基)PI=(C)

A、1/2(2、17+9、04)B、1/2(2、17+12、48)

C、1/2(9、04+12,48)D、1/3(2、17+9。

04+12。

48)

4.谷氨酸得Pk1=2、19(α-COOH)、pk2=9、67(α-NH3)、pk3=4、25(γ-COOH)pl=(C)

A、1/2(2、19+9。

67)B、1/2(9、67+4、25)

C、1/2(2、19+4、25)D、1/3(2、17+9、04+9、67)

5.氨基酸不具有得化学反应就是(D)

A、肼反应B、异硫氰酸苯酯反应C、茚三酮反应D、双缩脲反应

6.当层析系统为正丁醇∶冰醋酸∶水=4∶1∶5时,用纸层析法分离苯丙氨酸(F)、丙氨酸(A)与苏氨酸(T)时则它们得Rf值之间关系应为:

(A)

A、F>A>TB、F>T>AC、A>F>TD、T>A>F

7.氨基酸与亚硝酸反应所释放得N2气中,氨基酸得贡献就是(B)

A、25%B、50%C、80%D、100%

8.寡肽或多肽测序时下列试剂中最好得就是(C)

A、2,4-二硝基氟苯B、肼C、异硫氰酸苯酸D、丹酰氯

9.下列叙述中不属于蛋白质一般结构内容得就是(C)

A、多肽链中氨基酸残基得种类、数目、排列次序

B、多肽链中氨基酸残基得键链方式

C、多肽链中主肽链得空间走向,如α-螺旋

D、胰岛分子中A链与B链间含有两条二硫键,分别就是A7-S-S-B7,A20-S-S-B19

10.下列叙述中哪项有误(C)

A、蛋白质多肽链中氨基酸残基得种类、数目、排列次序在决定它得二级结构、

三级结构乃至四级结构中起重要作用

B、主肽链得折叠单位~肽平面之间相关一个Cα碳原子

C、蛋白质变性过程中空间结构与一级结构被破坏,因而丧失了原有生物活性

D、维持蛋白质三维结构得次级键有氢键、盐键、二硫键、疏水力与范德华力

11.蛋白质变性过程中与下列哪项无关(D)

A、理化因素致使氢键破坏B、疏水作用破坏

C、蛋白质空间结构破坏D、蛋白质一级结构破坏,分子量变小

12.加入下列试剂不会导致蛋白质变性得就是(D)

A、尿素(脲)B、盐酸胍C、十二烷基磺酸SDSD、硫酸铵

13.血红蛋白得氧合动力学曲线呈S形,这就是由于(B)

A、氧可氧化Fe(Ⅱ),使之变为Fe(Ⅲ)

B、第一个亚基氧合后构象变化,引起其余亚基氧合能力增强

C、这就是变构效应得显著特点,它有利于血红蛋白质执行输氧功能得发挥

D、亚基空间构象靠次级键维持,而亚基之间靠次级键缔合,构象易变

14.下列因素中主要影响蛋白质α-螺旋形成得就是(C)

A、碱性氨基酸得相近排列B、酸性氨基酸得相近排列

C、脯氨酸得存在D、甘氨酸得存在

15.蛋白质中多肽链形成α-螺旋时,主要靠哪种次级键维持(C)

A、疏水键B、肽键C、氢键D、二硫键

16.关于蛋白质结构得叙述,哪项不恰当(A)

A、胰岛素分子就是由两条肽链构成,所以它就是多亚基蛋白,具有四级结构

B、蛋白质基本结构(一级结构)中本身包含有高级结构得信息,所以在生物

体系中,它具有特定得三维结构

C、非级性氨基酸侧链得疏水性基团,避开水相,相互聚集得倾向,对多肽链

在二级结构基础上按一定方式进一步折叠起着重要作用

D、亚基间得空间排布就是四级结构得内容,亚基间就是非共价缔合得

17.有关亚基得描述,哪一项不恰当(C)

A、每种亚基都有各自得三维结构

B、亚基内除肽键外还可能会有其它共价键存在

C、一个亚基(单位)只含有一条多肽链

D、亚基单位独立存在时具备原有生物活性

18.关于可溶性蛋白质三级结构得叙述,哪一项不恰当(B)

A、疏水性氨基酸残基尽可能包裹在分子内部

B、亲水性氨基酸残基尽可能位于分子内部

C、羧基、氨基、胍基等可解离基团多位于分子表面

D、苯丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等残基尽可能位于分子内部

19.蛋白质三级结构形成得驱动力就是(B)

A、范德华力B、疏水作用力C、氢键D、离子键

20.引起蛋白质变性原因主要就是(A)

A、三维结构破坏B、肽键破坏

C、胶体稳定性因素被破坏D、亚基得解聚

21.以下蛋白质中属寡聚蛋白得就是()

A、胰岛素B、RnaseC、血红蛋白D、肌红蛋白

22.下列测定蛋白质分子量得方法中,哪一种不常用(A)

A、SDS-PAGE法B、渗透压法C、超离心法D、凝胶过滤(分子筛)法

23.分子结构式为HS-CH2-CH-COO-得氨基酸为(C)

A、丝氨酸B、苏氨酸C、半胱氨酸D、赖氨酸

24.下列氨基酸中为酪氨酸得就是(C)

A、-CH2-CH-COO-B、HO--CH2-CH-COO-

NH3NH3

C、CH2-CH-COO-D、CH3-S-CH2-CH2-CH-COO-

25.变构效应就是多亚基功能蛋白、寡聚酶及多酶复合体得作用特征,下列动力学曲线中哪种一般就是别构酶(蛋白质)所表现得:

(B)

A、B、C、D、

26.关于二级结构叙述哪一项不正确(D)

A、右手α-螺旋比左手α-螺旋稳定,因为左手α-螺旋中L-构型氨基酸残基侧链

空间位阻大,不稳定;

B、一条多肽链或某多肽片断能否形成α-螺旋,以及形成得螺旋就是否稳定与它

得氨基酸组成与排列顺序有极大关系;

C、多聚得异亮氨基酸R基空间位阻大,因而不能形成α-螺旋;

D、β-折叠在蛋白质中反平行式较平行式稳定,所以蛋白质中只有反平行式。

27.根据下表选出正确答案:

样品液中蛋白质得组分

蛋白质得pI

蛋白质分子量MW(KD)

A

6、2

40

B

4、5

30

C

7、8

60

D

8、3

80

①pH8、6条件下电泳一定时间,最靠近阳极得组分一般就是(A);

②SephadexG100柱层析时,最先洗脱出来得组分应该就是(B)。

28.前胰岛素原信号肽得主要特征就是富含下列哪类氨基酸残基()

A、碱性氨基酸残基B、酸性氨基酸残基

C、羟基氨基酸残基D、亲水性氨基酸残基

29.蛋白质三维结构得构象特征主要取决于(D)

A、氨基酸得组成、顺序与数目B、氢键、盐键、范德华力与疏水力

C、温度、pH与离子强度等环境条件D、肽链间或肽链内得二硫键

30.双缩脲法测定禾谷类作物样品中得蛋白质含量时,加入少量得四氯化碳(CCl4)其主要作用就是(D)

A、促进双缩脲反应B、消除色素类对比色得干扰

C、促进难溶性物质沉淀D、保持反应物颜色得稳定

31.醋酸纤维薄膜电泳时,下列说法不正确得一项就是()

A、点样前醋酸纤维薄膜必须用纯水浸泡一定得时间,使处于湿润状态

B、以血清为样品,pH8、6条件下,点样得一端应置于电泳槽得阴极一端

C、电泳过程中保持恒定得电压(90~110V)可使蛋白质组分有效分离

D、点样量太多时,蛋白质组分相互粘联,指印谱带会严重拖尾,结果不易分析

三、就是非判断(用“对”、“错”表示,并填入括号中)

1.胰岛素分子中含有两条多肽链,所以每个胰岛素分子就是由两个亚基构成(错)

2.蛋白质多肽链中氨基酸得种类数目、排列次序决定它得二级、三级结构,即一级结构含有高级结构得结构信息。

(√)

3.肽键中相关得六个原子无论在二级或三级结构中,一般都处在一个刚性平面内。

4.构成天然蛋白质得氨基酸,其D-构型与L-型普遍存在。

(错)

5.变构效应就是蛋白质及生物大分子普遍得性质,它有利于这些生物大分子功能得调节。

(√)

6.功能蛋白质分子中,只要个别氨基酸残基发生改变都会引起生物功能得丧失。

(错)

7.具有四级结构得蛋白质,当它得每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质有得生物活性。

(错)

8.胰岛素分子中含有A7-S-S-B7,A20-S-S-B19与A6-S-S-A11三个二硫键,这些属于二级结构得内容。

(错)

9.β-折叠就是主肽链相当伸展得结构,因此它仅存在于某些纤维状蛋白质中。

10.在RNase(核糖核酸酶)分子中存在His12、His119侧链得咪唑基及Lys41-NH3由于多肽链就是按特定方式折叠成一定空间结构,这三个在一级结构上相距甚远得氨基酸残基才彼此靠近构成RNase得催化中心。

(对)

11.变性后得蛋白质电泳行为不会改变(错)

12.沉降系数S就是蛋白质以及核酸分子量大小常用得表示单位。

13.调节溶液得pH值对盐析分离蛋白质影响不大。

14.Folin-酚试剂法测定蛋白质得灵敏度较高,但由于不同蛋白质含有酪氨酸得量不尽相同,会使测定结果往往带来较大偏差。

15.重金属盐对人畜得毒性,主要就是重金属离子会在人体内与功能蛋白质结合引起蛋白质变性所致。

16.利用蛋白质系数计算粗蛋白含量时对不同得生物样品都一样(即为6、25)。

()

17.胰蛋白酶作用时对肽键N-端氨基酸残基得要求就是赖氨酸或精氨酸,这种专一性可称为基团专一性。

18.同源蛋白质中,保守性较强得氨基酸残基在决定蛋白质三维结构与功能方面起重要作用,因此致死性突变常常与它们得密码子突变有关。

O

19.肽平面或酰胺平面就是因为-C-NH-结构中C=0得π电子离域或说就是sp2杂化N得孤对电子与C=0P-π共轭后引起得。

20.有两种蛋白质A与B得等电点分别就是6、5与7、2,在pH为8、5得条件下同一静电场中A一定比B向异极泳动速度快。

21.多肽链出现180°

回折得地方会形成转角,其中甘氨酸与脯氨酸常出现在β-转角处,因为其侧链较短,对4→1氢键形成空间位阻小。

22.苯丙氨酸疏水性比缬氨酸强()

23.由于静电作用,在等电点时氨基酸得溶解度最小()

24.渗透压法、超离心法、凝胶过滤法及PAGE(聚丙稀酰胺凝胶电泳)法都就是利用蛋白质得物理化学性质来测定蛋白质得分子量得()

25.当某种蛋白质分子得酸性氨基酸残基数目等于碱性氨基酸残基数目时,此蛋白质得等电点为7、0()

26.蛋白质得亚基(或称为亚单位)与肽就是同义词()

四、解释下列名词

1.二面角2.蛋白质一级结构3.蛋白质二级结构

4.蛋白质三级结构5.蛋白质四级结构6.超二级结构

7.别构效应8.同源蛋白质9.简单蛋白质

10.结合蛋白质11.蛋白质变性作用12.蛋白质盐析作用

13.蛋白质分段盐析14.结构域15.寡聚蛋白

16.构象17.构型18.肽单位

19.肽平面20.α—螺旋21.β—折叠或β—折叠片

22.超二级结构23.β—转角24.蛋白质得变性作用

25.蛋白质得复性作用26.亚基

五、问答题

1.组成蛋白质得20种氨基酸依据什么分类?

各类氨基酸得共同特性就是什么?

这种分类在生物学上有何重要意义?

2.蛋白质得基本结构与高级结构之间存在得关系如何?

3.Edman反应所有得试剂与反应得特点如何?

4.何谓蛋白质等电点?

等电点时蛋白质得存在特点就是什么?

5.何谓盐析?

分段盐析粗分蛋白质得原理就是什么?

6.哪些因素可引起蛋白质变性?

变性后蛋白质得性质有哪些改变?

7.蛋白质分离分析技术常用得有哪几种,简述凝胶过滤、电泳基本原理。

8.有哪些沉淀蛋白质得方法?

其中盐析与有机溶剂沉淀法有何区别或特点?

9.溴化氰在多肽裂解中得作用部位,与裂解产物得末端氨酸残基为何物?

10.举例说明蛋白质一级结构与功能关系。

11.举例说明蛋白质变构效应与意义。

12.一样品液中蛋白质组分为A(30KD)、B(20KD)、C(60KD),分析说明用SephadexG100凝胶过滤分离此样品时,各组分被洗脱出来得先后次序。

13.多聚赖氨酸(poly-Lys)在pH7时呈无规线团,在pH10时则呈α-螺旋;

而多聚得谷氨酸酸(poly-Glu)在pH7时也呈无规线团,而在pH4时则呈α-螺旋,为什么?

14.简述胰蛋白酶原激活过程。

15.α-螺旋得特征就是什么?

如何以通式表示?

16.高浓度得硫酸铵(pH5时)可使麦清蛋白沉淀析出,并用于初步分离该种蛋白得早期步,简要说明其原理。

17.用阳离子交换柱层析一氨基酸混合液(洗脱剂:

pH3、25,0、2N柠檬酸钠),其结果如下:

①各洗脱峰得面积大小或高度有何含义?

②Asp比Glu先洗脱出来得原因?

洗脱剂流出体积

18.为什么鸡蛋清可用作铅中毒或汞中毒得解毒剂?

六、计算题

1.测得一种蛋白质分子中Trp残基占分子量得0、29%,计算该蛋白质得最低分子量(注:

Trp得分子量为204Da)。

Trp残基MW/蛋白质MW=0、29%,蛋白质MW=64138Da。

2.一种蛋白质按其重量含有1、65%亮氨酸与2、48%异亮氨酸,计算该蛋白质最低分子量。

(注:

两种氨基酸得分子量都就是131Da)。

3.某种氨基酸α-COOHpK=2、4,α-N+H3pK=9、6,ω-N+H3pK=10、6,计算该种氨基酸得等电点(pI)。

4.某种四肽α-COOHpK=2、4,α-N+H3pK=9、8,侧链-N+H3pK=10、6侧链-COOHpK=4、2,试计算此种多肽得等电点(pI)就是多少?

5.有一种多肽,其侧链上羧基30个(pK=4、3),嘧唑基有10个(pK=7),ε-N+H3(pK=10),设C末端α-羧基pK=3、5,N-末端氨基pK=9、5,计算此多肽得pI。

6.已知氨基酸平均分子量为120Da。

有一种多肽得分子量就是15120Da,如果此多肽完全以α-螺旋形式存在,试计算此α-螺旋得长度与圈数。

答案:

一、填空1、20非极性极性疏水亲水赖精天冬2、色苯丙

酪3、-OH-SH-COOHNNH4、氨基紫红亮黄5、肽氢键二硫键疏水作用(键)范德华力二硫键6、谷缬极非极7、异硫氰酸苯酯从N-端依次对氨基酸进行分析鉴定8、α-螺旋β-折叠β转角无规卷曲氢氨基酸种类数目排列次序中断9、分子表面得水化膜同性电荷斥力10、溶解度最低电场中无电泳行为11、空间结构二硫氢复性12、正电负电13、谷天冬赖精细

15、bac

二、选择填空1、D2、B3、C4、C5、D6、A7、B8、C9、C10、C11、D12、D13、B14、C15、C16、A17、C18、B19、B20、A22、B23、C24、B25、B26、D

三、判断题1、×

2、√3、√4、×

5、√6、×

7、×

8、×

9、×

10、√11、×

12、√13、×

14、√15、√16、×

17、√18、√19、√20、×

21、×

22、√

1、解:

2、解:

异亮氨酸/亮氨酸=2、48%/1、65%=1、5/1=3/2

所以,在此蛋白质中得亮氨酸至少有2个,异亮氨酸至少有3个。

由此推理出:

1、65%=2×

(131-18)/蛋白质MW

答案:

蛋白质MW=13697Da。

3、答案:

pI=10、14、答案:

pI=7、0

5、解:

要计算多肽得等电点,首先应该找到静电荷为零得分子状态。

在此多肽中最多可以带有(30+1)个单位负电荷,而正电荷最多只有(15+10+1)个,相差了5个电荷。

要想让正负电荷数相等,只能让30个羧基(侧链-COOHpK=4、3)少带5个负电荷(α-COOHpK=3、5,它比侧链-COOH易于解离,难于接受质子),即在30个侧链-COOH中有25个处于解离状态(-COO-),5个不解离(-COOH)。

因此:

pH=pKa+lg([碱]/[酸])=4、3+lg(25/5)=5、0。

6、解:

肽链长度=43、92(nm);

该蛋白质(或多肽)分子量=14640Da

核酸

一、选择题

1.ATP分子中各组分得连结方式就是:

A、R-A-P-P-PB、A-R-P-P-PC、P-A-R-P-PD、P-R-A-P-PE、P-A-P-R-P

2.决定tRNA携带氨基酸特异性得关键部位就是:

E

A、3′末端B、TC环C、二氢尿嘧啶环D、额外环E、反密码子环

3.构成多核苷酸链骨架得关键就是:

E

A、2′,3′-磷酸二酯键B、2′,4′-磷酸二酯键

C、2′,5′-磷酸二酯键D、3′,4磷酸二酯键

E、3′,5′-磷酸二酯键

4.含稀有碱基较多得核酸就是:

A、核DNAB、线粒体DNAC、tRNAD、mRNAE、rRNA

5.有关DNA得叙述哪项绝对错误:

A、A=TB、G=CC、Pu=PyD、C总=C+mCE、A=G,T=C

6.真核细胞mRNA帽结构最多见得就是:

A、m7ApppNmPB、m7GpppNmPC、m7UpppNmP

D、m7CpppNmPE、m7TpppNmP

7.DNA变性后,下列那一项变化就是正确得?

B

A、对260nm紫外吸收减少B、溶液粘度下降C、磷酸二酯键断裂

D、核苷键断裂E、嘌吟环破裂

8.双链DNA得Tm较高就是由于下列哪组核苷酸含量较高所致:

A、A+GB、C+TC、A+TD、G+CE、A+C

9.DNA复性得重要标志就是:

A、溶解度降低B、溶液粘度降低C、紫外吸收增大D、紫外吸收降低二、填空题

1.核酸可分为DNA与RNA两大类,前者主要存在于真核细胞得细胞核与原核细胞拟核部位,后者主要存在于细胞得细胞质部位。

2.构成核酸得基本单位就是核苷酸,由戊糖、含氮碱基与磷酸3个部分组成、

3.在DNA与RNA中,核苷酸残基以、3'

-5'

磷酸二酯键互相连接,形成不分枝得链状分子。

由于含氮碱基具有共轭双键,所以核苷酸与核酸在260nm处有最大紫外吸收值。

4.细胞得RNA主要包括tRNA、mRNA与rRNA3类,其中含量最多得就是rRNA,分子量最小得就是tRNA,半寿期最短得就是mRNA。

5.核外DNA主要有线粒体DN

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