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(2)疫情来源的调查。

本地过去曾否发生过类似的疫病?

何时何地?

流行情况如何?

是否经过确诊?

有无历史资料可查?

何时采取过何种防治措施?

效果如何?

如本地未发生过,附近地区曾否发生?

这次发病前,曾否由其他地方引进畜禽、畜产品或饲料?

输出地有无类似的疫病存在?

(3)传播途径和方式的调查。

本地各类有关畜禽的饲养管理方法,使役和放牧情况,牲畜流动、收购以及防疫卫生情况如何?

交通检疫、市场检疫和屠宰检验的情况如何?

死病畜处理情况如何?

有哪些助长疫病传播蔓延的因素和控制疫病的经验?

疫区的地理、,地形、河流、交通、气候、植被和野生动物、节肢动物等分布和活动情况,它们与疫病的发生及蔓延传播有无关系?

(4)其他方面调查。

该地区的政治、经济基本情况,群众生产和生活活动的基本情况和特点,畜牧兽医机构和工作的基本情况,当地领导、干部、兽医、饲养员和群众对疫情的看法如何等。

3.病理学诊断。

患各种传染病而死亡的畜禽尸体,大多数具有一定的病理变化,可作为诊断的依据之一。

如猪瘟、猪气喘病、新城疫、禽霍乱、牛肺疫时,都有特征性的病理变化,常有很大的诊断价值。

有的病畜,特别是最急性死亡的病例和早期屠宰的病例,有时特征性的病变尚未出现,因此进行病理剖检诊断时尽可能多检查几头,并选择症状较典型的病例进行剖检。

有些疫病除肉眼检查外,还需进行病理组织学检查。

有些病,还需检查特定的组织器官,如疑为狂犬病时应取脑海马角组织进行包涵体检查。

 

实训报告

姓名:

班级:

同组人:

得分:

实验

名称

目的

材料

步骤

实训

反思

年月日

4.微生物学诊断。

运用兽医微生物学的方法进行病原学检查是诊断家畜传染病的重要方法。

一般常用下列方法和步骤:

(1)病料的采集。

正确采集病料是微生物学诊断的重要环节。

病料力求新鲜,最好能在病畜濒死时或死后数小时内采取,要求尽量减少杂菌污染,用具器皿应尽可能严格消毒。

通常可根据所怀疑病的类型和特性来决定采取哪些器官或组织的病料。

原则上要求采取病原微生物含量多、病变明显的部位,同时易于采取,易于保存和运送。

如果缺乏临诊资料,剖检时又难于分析诊断可能属于何种病时,应比较全面地取材,例如血液、肝、脾、肺、肾、脑和淋巴结等,同时要注意带有病变的部分。

如怀疑炭疽,则非必要时不准进行尸体剖检,只割取一块耳朵就可以了。

(2)病料涂片镜检。

通常在有显著病变的不同组织器官和不同部位涂抹数片,进行染色镜检。

此法对于一些具有特征性形态的病原微生物如炭疽杆菌、巴氏杆菌等可以迅即做出诊断,但对大多数传染病来说,只能提供进一步检查的依据或参考。

(3)分离培养和鉴定。

用人工培养方法将病原体从病料中分离出来。

细菌、真菌、螺旋体等可选择适当的人工培养基,病毒等可选用禽胚、各种动物、组织培养等方法分离培养,分离到病原体后,再通行形态学、培养特性、动物接种及免疫学试验等方法做出鉴定。

(4)动物接种试验。

通常选择对该种传染病病原体最敏感的动物进行人工感染试验。

将病料用适当的方法进行人工接种,然后根据对不同动物的致病力、临床症状和病理变化特点来帮助诊断。

当实验动物死亡或经一定时间杀死后,观察体内变化,并采取病料进行涂片检查和分离鉴定。

一般应用的实验小动物有家兔、小鼠、豚鼠、仓鼠、家禽、鸽子等,在实验小动物对该病原体无感受性时,可以采用有易感性的大动物进行试验,但费用大,而且需要严格的隔离条件和严格的消毒措施,因此,只有在非常必要和条件许可时才能进行。

从病料中分离出微生物,虽是确诊的重要依据,但也应注意动物的“健康带菌现象,其结果还需与临诊及流行病学、病理变化结合起来进行分析。

有时即使没有发现病原体,也不能完全否定该种传染病的诊断。

5.免疫学诊断。

免疫学诊断是传染病诊断和检疫中常用的重要方法,包括血清学试验和变态反应两类。

(1)血清学试验。

利用抗原和抗体特异性结合的免疫学反应进行诊断。

可以用已知抗原来测定被检动物血清中的特异性抗体,也可以用已知的抗体(免疫血清)来测定被检材料中的抗原。

(2)变态反应。

动物患某些传染病(主要是慢性传染病)时,可对该病病原体或其产物(某种抗原物质)的再次进入产生强烈反应。

能引起变态反应的物质(病原体、病原体产物或抽提物)称为变态原,如结核菌素、鼻疽菌素等,将其注入患病动物时,可引起局部或全身反应。

6.分子生物学诊断。

分子生物学诊断又称基因诊断。

主要是针对不同病原微生物所具有的特异性核酸序列和结构进行测定。

主要包括PCR技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等。

最后,通过各种诊断检查,将所获得的资料进行综合分析做出正确诊断。

三、实习作业筒述传染病的诊断方法。

项目二、制定常见畜禽传染病的防制措施

学会独立制定常见畜禽传染病的防制措施。

一、实验内容制定传染病的防制措施。

二、方法与步骤畜禽传染病防制措施的制定,必须贯彻“预防为主”的方针,严格执行国家颁布的动物防疫法。

根据本场的实际情况,制定出自己的疫病防制措施。

1.防疫措施。

家畜传染病的流行是由传染源、传播途径和易感动物三个因素相互联系而形成的复杂过程。

因此,采取适当的防疫措施来消除或切断造成流行的三个因素的相互联系作用,就可以使传染病不能继续传播。

综合性防疫措施可分为平时的预防措施和发生传染病时的扑灭措施两方面的内容。

现分别简述如下:

(1)平时的预防措施。

①加强饲养管理,搞好卫生消毒工作,增强家畜机体的抗病能力。

贯彻自繁自养的原则,减少传染病传播。

②拟订和执行定期预防接种和补种计划。

③定期杀虫、灭鼠,进行粪便无害化处理。

④认真贯彻执行国境检疫、交通检疫、市场检疫和屠宰检验等各项工作,以及时发现并消灭传染源。

⑤各地(省、市)兽医机构应调查研究当地疫情分布,组织相邻地区对家畜传染病的联防协作,有计划地进行消灭和控制,并防止外来传染病的侵入。

(2)发生传染病时的扑灭措施。

①及时发现、诊断和上报疫情并通知邻近单位做好预防工作。

②迅速隔离病畜,污染的地方进行紧急消毒。

若发生危害性大的传染病如口蹄疫、炭疽等应采取封锁等综合性措施。

③以疫苗进行紧急接种,对病畜进行及时和合理的治疗。

④死畜和淘汰病畜的合理处理。

以上预防措施和扑灭措施不是截然分开的,而是互相联系、互相配合和互相补充的。

2.免疫接种。

免疫接种是激发动物机体产生特异性抵抗力,使易感动物转化为不易感动物的一种手段。

有组织有计划地进行免疫接种,是预防和控制畜禽传染病的重要措施之一。

在某些传染病如牛瘟、猪瘟、新城疫等病的防制措施中,免疫接种更具有关键性的作用。

根据免疫接种进行的时机不同,可分为预防接种和紧急接种两类。

(1)预防接种。

在经常发生某些传染病的地区,或有某些传染病潜在的地区,或受到邻近地区某些传染病经常威胁的地区,为了防患于未然,在平时有计划地给健康畜群进行的免疫接种,称为预防接种。

预防接种通常使用疫苗、菌苗、类毒素等生物制剂作抗原激发免疫。

免疫接种时应注意以下几点:

①制定免疫程序时,应考虑母源抗体水平和持续时间、接种动物的年龄、畜群免疫率、本地区该病原体污染状况、传染病的发生和流行史、媒介动物出现的季节等。

②免疫接种前要观察畜群的健康状态,如是否有发热、下痢和其他异常行为等。

③妊娠母畜在产前和产后lOd不准免疫接种。

④接种弱毒疫苗后,致弱的病毒或细菌在体内增殖,使机体抵抗力下降,可能继发或混合感染细菌或支原体,应注意观察。

⑤接种灭活苗时,应考虑因注射大量异物引起的发热和疼痛等反应以及多次注射灭活苗所引起的过敏反应。

⑥冻干疫苗一经溶解应尽快使用,剩余的疫苗要无害化处理。

⑦接种弱毒疫苗后用过的空瓶要消毒或深埋处理,以免其他动物感染发病。

(2)紧急接种。

紧急接种是在发生传染病时,为了迅速控制和扑灭疫病的流行,而对疫区和受威胁区尚未发病的畜禽进行的应急性免疫接种。

从理论上说,紧急接种以使用免疫血清较为安全有效。

但因血清用量大,价格高,免疫期短,且在大批畜禽接种时往往供不应求,因此在实践中很少使用。

多年来的实践证明,在疫区内使用某些疫苗进行紧急接种是切实可行的。

例如在发生猪瘟、口蹄疫、新城疫和鸭瘟等一些急性传染病时,已广泛应用疫苗进行紧急接种,取得了较好的效果。

3.药物预防。

药物预防是为了预防某些传染病,在畜群的饲料饮水中加入某种安全的药物进行集体的化学预防,在一定时间内可以使受威胁的易感动物不受传染病的危害,这也是预防和控制畜禽传染病的有效措施之一。

近年来常用的保健添加剂有诺氟沙星、吡哌酸等,在饲料中添加上述药物对预防仔猪腹泻、雏鸡白痢、猪气喘病、鸡慢性呼吸道病等有较好效果。

但长期使用化学药物预防,容易产生耐药性菌株,影响防治效果,因此需要经常进行药物敏感试验,选择有高度敏感性的药物用于防治。

三、实习作业根据本场的实际情况,制定出自己的传染病防制措施,每人写一份实习报告。

项目三畜禽尸体剖检、病料采集和送检技术

通过实习,使学生掌握尸体剖检的顺序、内容和方法;

学会病料的采集、送检等技术,为临床应用打下坚实的基础。

一、材料与用具镊子、手术刀、手术剪、骨剪、塑料杯、酒精灯、酒精棉球、解剖车、载玻片、试管、棉签、平皿、显微镜、注射器、针头、木箱、油布,或油纸、纱布、胶桶、塑料袋、瓷盘、橡胶手套、2%来苏尔、30%甘油缓冲液或50%甘油缓冲液、10%饱和

盐水或10%甲醛溶液。

病死动物(猪或家禽)1只。

消毒间及其消毒设施l套,消毒后穿戴的工作服、帽、鞋每人2套。

二、实验内容尸体剖检方法;

病料的采集、送检技术。

三、方法与步骤

1.尸体剖检前的准备。

进行尸体剖检,尤其是剖检传染病尸体时,剖检者既要注意防止病原扩散,又要预防自身感染。

因此,必须做好如下工作:

(1)剖检场地的选择。

尸体剖检,特别是剖检传染病尸体,一般应在病理剖检室进行,以便消毒和防止病原扩散。

如果条件不许可而在室外剖检时,应选择地势较高、环境较干燥,远离水源、道路、房舍和畜舍的地点进行。

剖检前挖2m深坑,剖检后将内脏、尸体连同被污染的土层投入坑内,再撒上石灰或喷洒10%的石灰水、3%-5%来苏尔,然后用土掩埋。

(2)尸体剖检常用的器械和药品。

根据死前症状或尸体特点准备解剖器械,一般应有解剖刀、剥皮刀、脏器刀、外科刀、脑刀、外科剪、肠剪、骨剪、骨钳、镊子、骨锯、双刃锯、斧头、骨凿、阔唇虎头钳、探针、量尺、量杯、注射器、针头、天平、磨刀棒或磨刀石等。

如没有专用解剖器材,也可用其他合适的刀、剪代替。

准备装检验样品的灭菌平皿、棉拭子和固定组织用的内盛10%甲醛溶液或95%酒精的广口瓶,常用消毒液,如3%一5%来苏尔、苯酚、0.2%高锰酸钾、70%酒精、3%-5%碘酒等。

此外,还应准备凡士林、滑石粉、肥皂、棉花和纱布等。

(3)剖检人员的防护。

剖检人员,特别是在剖检传染病尸体时,应穿工作服、胶皮外罩或塑料围裙,戴橡胶手套、线手套、工作帽,穿胶鞋,必要时还要戴上口罩和眼镜。

如缺乏上述用品时,可在手上涂抹凡士林或其他油类,保护皮肤,以防感染。

在剖检中不慎切破皮肤时应立即消毒和包扎。

在剖检过程中,应保持清洁,注意消毒。

常用清水或消毒液洗去剖检人员手上和刀剪等器械上的血液、脓液和各种排出物。

剖检后,双手先用肥皂洗涤,再用消毒液冲洗。

为了消除粪便和尸腐臭味,可先用0.2%高锰酸钾溶液浸泡,再用2%一3%草酸溶液洗涤,褪去棕褐色后,再用清水冲洗。

2.尸体剖检的注意事项。

(1)尸体剖检的时间。

剖检最好在白天进行,因为在灯光下,一些病变的颜色(如黄疸、变性等)不易辨认。

供分离病毒的脑组织要在动物死后5h内采取。

一般死后超过24h的尸体,就失去了剖检意义。

此外,细菌和病毒分离培养的病料要先无菌采取,最后再取病料做组织病理学检查。

如尸体已腐烂,可锯一块带骨髓的股骨送检。

(2)了解病史。

尸体剖检前,应先了解病畜所在地区的疾病的流行情况、病畜生前病史,包括临床化验、检查和临床诊断等。

此外,还应注意治疗、饲养管理和临死前的表现等方面的情况。

(3)自我防护意识。

剖检前应在尸体体表喷洒消毒液;

搬运尸体时,特别是搬运炭疽、开放性鼻疽等传染病尸体时,用浸透消毒液的棉花团塞住天然孔,并用消毒液喷洒尸体后方可运送。

(4)病变的切取。

未经检查的脏器切面,不可用水冲洗,以免改变其原来的颜色和性状。

切脏器的刀、剪应锋利。

切开脏器时,要由前向后,一刀切开,不要由上向下挤压或拉锯式的切开。

切开未经固定的脑和脊髓时,应先使刀口浸湿,然后下刀,否则切面粗糙不平。

(5)尸体剖检后处理。

①衣物和器材。

剖检中所用衣物和器材最好直接放入煮锅或手提高压锅内,经灭菌后,方可清洗和处理;

解剖器械也可直接放入消毒液内浸泡消毒后,再清洗处理。

橡胶手套消毒后,用清水洗净,擦干,撒上滑石粉。

金属器械消毒清洁后擦干,涂抹凡士林,以免生锈。

②尸体。

为了不使尸体和解剖时的污染物成为传染源,剖检后的尸体最好焚化或深埋。

特殊情况,如人畜共患传染病或烈性病尸体要先用消毒药处理然后再焚烧。

野外剖检时,尸体要就地深埋。

深埋之前在尸体上洒消毒液,尤其要选择具有强烈刺激异味的消毒药如甲醛等,以免尸体被意外挖出。

③场地。

剖检场地要进行彻底消毒,以防污染周围环境。

如遇特殊情况(如禽流感),检验工作在现场进行,当撤离检验工作点时,要做终末消毒,以保证继用者的安全。

3.尸体剖检的顺序。

为了全面系统地检查尸体所呈现的病理变化,尸体剖检必须按照一定的方法和顺序进行。

通常采用的剖检顺序是:

新鲜尸体_外表检查→剥皮和皮下检查→剖开腹腔先进行一般检查→剖开胸腔进行一般检查→摘出腹腔脏器→摘出胸腔脏器→摘出口腔和颈部器官→颈部、胸腔和腹腔脏器的检查→骨盆腔脏器的摘出和检查→剖开颅腔摘出大脑检查→剖开鼻腔检查→剖开脊椎管,摘出脊髓检查→肌肉、关节和淋巴结的检查→骨和骨髓的检查。

4.尸体剖检。

某些器官组织检查的方法与要点如下:

(1)皮下检查。

要注意检查皮下有无出血、水肿、脱水、炎症和脓肿,并观察皮下脂肪组织的多少、颜色、性状及病理变化等。

(2)淋巴结。

要特别注意下颌淋巴结、颈浅淋巴结等体表淋巴结,肠系膜淋巴结、肺门淋巴结等内脏器官附属淋巴结,注意其大小、颜色、硬度、与其周围组织的关系及横切面的变化。

(3)胸膜腔。

观察有无液体,液体的数量、透明度、色泽、性质、浓度和气味,注意浆膜是否光滑、有无粘连等病变。

(4)肺脏。

首先注意其大小、色泽、重量、质地、弹性,有无病灶及表面附着物等。

然后用剪刀将支气管剪开,注意观察支气管黏膜的色泽,表面附着物的数量、黏稠度。

最后将整个肺脏纵横切割数刀,观察切面有无病变,切面流出物的数量、色泽变化等。

(5)心脏。

检查心脏时,注意检查心腔内血液的含量及性状。

检查心内膜的色泽、光滑度、有无出血,各个瓣膜、腱索是否肥厚,有无血栓形成和组织增生或缺损等病变。

对心肌的检查,应注意心肌各部的厚度、色泽、质地,有无出血、瘢痕、变性和坏死等。

(6)脾脏。

观察其形态和色彩,包膜的紧张度,有无肥厚、梗死、脓肿及瘢痕形成,用手触摸脾的质地(坚硬、柔软、脆弱),然后作一两个纵切,检查脾髓、滤泡和脾小梁的状态,有无结节、坏死、梗死和脓肿等。

(7)肝脏。

先检查肝门部的动脉、静脉、胆管和淋巴结,然后检查肝脏的形态、大小、色泽、包膜性状,有无出血、结节、坏死等。

最后切开肝组织,观察切面的色泽、质地和含血量等情况。

注意切面是否隆突,肝小叶结构是否清晰,有无脓肿、寄生虫性结节和坏死等。

(8)肾脏。

先检查肾脏的形态、大小、色泽和质地。

注意包膜的状态,是否光滑透明和容易剥离。

包膜剥离后,检查肾表面的色泽,有无出血、瘢痕、梗死等病变。

然后由肾的外侧向肾门部将肾纵切为相等的两半,检查皮质和髓质的厚度、色泽,交界部血管状态和组织结构纹理。

最后检查肾盂,注意其容积,有无积尿、积脓、结石等,以及黏膜的性状。

(9)胃。

先观察其大小,浆膜面的色泽,有无粘连,胃壁有无破裂和穿孔等,然后由贲门沿大弯剪至幽门。

胃剪开后,检查胃内容物的数量、性状、含水量、气味、色泽、成分,有无寄生虫等。

最后检查胃黏膜的色泽,注意有无水肿、充血、溃疡、肥厚等病变。

(lO)肠管。

对十二指肠、空肠、回肠、大肠、直肠分段进行检查。

在检查时,先检查肠管浆膜面的色泽,有无粘连、肿瘤、寄生虫结节等。

然后剪开肠管,随时检查肠内容物的数量、性状、气味,有无血液、异物、寄生虫等。

除去肠内容物后,检查肠黏膜的性状,注意有无肿胀、发炎、充血、出血、寄生虫和其他病变。

(11)生殖器官。

公猪检查睾丸和附睾,检查其外形、大小、质地和色泽,观察切面有无充血、出血、瘢痕、结节、化脓和坏死等。

母猪检查子宫、卵巢和输卵管,先注意卵巢的外形、大小、卵黄的数量、色泽,有无充血、出血、坏死等病变。

5.病料的采取。

(1)液体材料。

一般用灭菌棉拭子采取破溃的脓汁、鼻液、阴道分泌物与排泄物。

未破的脓肿、胸水、腹水在皮肤表面消毒后,用无菌注射器抽取。

(2)血液。

无菌采取血液,供病原培养、抗体检测和血液检查使用。

体型较大的单蹄和偶蹄类动物少量血样可以从耳背静脉采血;

毛皮动物少量采血可通过耳壳外侧静脉采取;

鼠类可以通过尾尖、耳背静脉,眼窝内血管采血;

兔可从耳背静脉、颈静脉、心脏等处采血;

鸟类可以从肘关节内侧的翅静脉、跖部内静脉或心脏采血。

(3)乳汁。

乳房先用消毒药水洗净(取乳者的手也应事先消毒),并把乳房附近的毛刷湿,最初所挤的3-4股乳汁弃去,然后再采集lOml左右乳汁于灭菌试管中。

若仅供显微镜直接染色检查,则可于其中加入0.5%的甲醛溶液。

(4)淋巴结及内脏组织。

应在尸体解剖后立即采取。

将淋巴结、肺脏、肝脏、脾脏及肾脏等有病变的部位各采取l~2em3的小方块,分别置于灭菌容器中,并尽可能采取有病变及病变交界处的部位。

(5)胃肠及内容物。

可将胃肠两端扎好剪下,然后送往实验室。

或用烧红的器具烧烙表面后穿一小孔,用灭菌棉拭子取其内容物,放入无菌的器皿内或放入装有生理盐水或PBS的试管内。

(6)脑、脊髓。

按病理解剖方法取出脑、脊髓。

取一部分放入10%甲醛溶液的瓶中,供组织学检查;

一部分放入50%甘油生理盐水瓶中,供微生物学检查。

或者将头部取下,用塑料口袋包好直接送检。

(7)胆汁。

先用烧红刀片或铁片烧烙胆囊表面,再用灭菌细管或注射器刺入胆囊内吸取胆汁,置于灭菌试管中。

(8)皮肤。

取大小约10em×

lOem的皮肤一块,保存于30%甘油缓冲溶液中,或10%饱和盐水溶液中,或10%甲醛溶液中。

(9)骨头。

需要完整的骨头时,应将附着的肌肉和韧带等全部除去,表面撒上食盐,然后包于浸过5%石炭酸水或0.1%升汞液的纱布或麻布中,装于木箱内送到实验室。

(10)流产胎儿及小动物尸体。

将流产胎儿及小动物尸体包入不透水塑料薄膜、油纸或油布中,装于木箱内送到实验室。

6.病料的送检。

供细菌检验用的病料,要防止腐败,必须及时送检。

一般可用有冰块的保温瓶或其他低温条件,以使病料不腐败。

最好由专人送检,并带好送检的有关病情、病例、剖检等记录,以供检验人员参考。

为避免散播病原,盛有病料的容器、瓶口要盖紧,用胶布封好或石蜡封固,并用消毒液充分擦拭容器的表面。

瓶上加贴标签,注明样品来源、种类、保存方法、采集时间等。

为避免病料外漏,应立放于金属筒内,填塞防震填充料(木屑、纸渣、稻草、塑料泡沫等)。

三、实训作业掌握病死动物尸体剖检方法,病料的采集、送检等技术,写实验报告一份。

项目四消毒与免疫接种技术

掌握消毒器械与敷料、畜舍、地面土壤、粪便与污水的消毒方法;

熟悉生物制剂的保存、运送和用前检查方法,掌握免疫接种的方法和步骤。

一、材料与用具甲醛溶液、高锰酸钾、水、脸盆、各种疫苗、注射器、刺种针、消毒器械等。

二、实验内容各种消毒技术及器械认识,各种免疫接种的方法技术,常用生物制剂的保存、运送和用前检查方法。

(一)消毒技术:

消毒是以消毒药物借某些消毒器械或直接消灭被传染源散播在目的物(器械、用具等)及环境(舍内、运动场、粪便及污水等)的病原体或由传染媒介带来的病原体,以切断传染途径,防止疫病发生蔓延。

消毒是保证畜禽生产安全、健康和正常的必不可少的重要措施,对防制任何疾病都有利。

1.消毒的器械。

(1)高压消毒锅。

又叫高压

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