农化分析技术实验指导书docxWord格式文档下载.docx
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将采集土样摊成薄厚均匀的圆形或方形，平均划分为四份，对角取样。
若仍过多，继续四分法弃去多余土量，直到lkg左右。
（-）土样的制备
1、湿样晾干：
在晾干室将湿样放置晾样盘屮，摊成2厘米厚的薄层，并间断
地用木極敲碎、翻拌、拣出碎石，砂砾及植物残体等杂质。
2、一个样品准备四个装样瓶（或样品袋），把装样瓶洗净晾干，填好样品标签并贴好（2（）冃二瓶，60冃一瓶，10（）冃一瓶），标签均一式二份，瓶外贴一份，瓶内装一份。
3、样品缩分：
将晾干敲碎的样品反复混合均匀，然后铺成一正方形，过圆心画十字线将其分为四等分，取对角线二份（另二份弃去），照此方法继续缩分，最终留500克左右制样。
4、样品粗磨：
将风干样于白色搪瓷盘中用木極、木棒再次压碎样品，全部过20冃尼龙筛。
过筛后的样品全部置于有机玻璃板上混匀。
5、样品细磨：
取粗磨样品10（）克，用磨样机或研钵磨至全部过6（）冃尼龙筛；
再样品铺开，化成许多小方格，用骨匙多点取出土壤样品约20g,用磨样机或研钵磨至全部过100冃尼龙筛。
6、样品分装：
将过20冃、60冃和100冃样品分别装入相应的样品瓶中，作为检测样品，剩余的约200克过2（）冃筛样品装入另一个样品瓶中，作为自备库存样备用。
7、样品制完后，检查所有样品编号、标签、粒径、标签填写等无误，将库存样和检测样一并交样品保管人，双方签字认可。
若样品需外送检测，则将检测样送检测单位，库存样自己保存。
（三）、样品保存
制备土样需专人保管，检测时领用；
制备土样按不同编号、不同粒径分类存放于样品库，保存半年至一年。
库存样至少保存一年才可弃去；
土壤样品库经常保持干燥、通风，无阳光直射、无污染；
耍定期检查样品，防止潮湿、霉变、鼠害及土壤标签脱落等。
五、注意事项：
1、晾样时不得将样品铺放在报纸等不洁净的纸张上；
2、样品不得在阳光下直接暴晒；
3、因时间关系需烘干样品时，需在45°
C以下温度烘烤；
4、不得在晾样前缩分样品；
5、制样中，采样时的土壤样品标签与土壤样品始终放在一起，严禁混错；
6、每个样品经风干、磨碎、分装后送到实验室的整个过程屮，使用的工具与盛样容器的编号必须始终一致，以免搞错；
7、制样所用工具每制备一份样品后擦洗一次，严防交叉污染。
8、过20冃筛（孔径0.9毫米）粗磨样可直接用于土壤pH、土壤代换量、土壤速测养分含量、元索有效性含量分析；
过60冃筛（孔径0.25毫米）样品用于农药或土壤有机质、土壤全氮等分析；
过100冃（孔径0.149毫米）土样，用于土壤重金属和元素全量分析。
六、实验作业
1、按要求撰写实验报告及检测报告
2、思考题：
（1）土样采集包括哪些环节？
多余的土样量如何处理?
（2）采样点数量对分析结果的准确性有什么影响？
（3）土样研磨过筛、充分混匀的冃的是什么？
实验实训二土壤有机质测定（GB9834・88）
土壤有机质是土壤肥力的物质基础，它不仅直接为植物生长发育提供氧分，同时对土壤结构的形成、改善土壤物理性状有决定性作用，其含量高低是评定土壤肥力的重要指标Z—。
本法适用于测定土壤有机质含量在15%以下的土壤。
二、测定原理
用定量的重骼酸钾■硫酸溶液，在电砂浴加热条件下，使土壤中的有机碳氧化，剩余的重辂酸钾用硫酸亚铁标准溶液滴定，并以二氧化硅为添加物作试剂空白标定，根据氧化前后氧化剂质量差值，计算岀有机碳量，再剩以系数1.724,即为土壤有机质含量。
三、仪器与设备
1、仪器：
分析天平，感量O.OOOlg；
电砂浴；
磨口三角瓶:
150mL；
磨口简易空气冷凝管：
直径0.9cm,长19cm；
定时钟；
口动调零滴定管：
10.00、25.00mL；
小型日光滴定台；
温度计：
200-300；
铜丝筛：
孔径0.25mm；
瓷研钵。
2、试剂：
除特别注明者外，所用试剂皆为分析纯。
（1）邻菲口罗啦指示剂：
称取邻菲口罗啦1.490溶于含有0.700g硫酸亚铁的100mL水溶液中。
此指示剂易变质，应密闭保存于棕色瓶中备用。
（2）0.4mol/L重骼酸钾■硫酸溶液：
称取重珞酸钾39.23g,溶T600-800mL蒸帼水中，待完全溶解后加水稀霽至1L,将溶液移入3L大烧杯中；
另取1L比重为1.84的浓硫酸，慢慢地倒入重铝酸钾水溶液内，不断搅动，为避免溶急剧升温，每加约100mL硫酸后稍停片刻，并把大烧杯放在盛有冷水的盆内冷却，待溶液的温度试降到不烫手时再加另一份硫酸，直到全部加完为止。
（3）重珞酸钾标准溶液：
称取经13CTC烘1.5h的优级纯重洛酸钾9.807g,先用少量水溶解，然后移入1L容量瓶内，加水定容。
此溶液浓度c（l/6K2Cr2O7）=0.2000mol/Lo
（4）硫酸亚铁标准溶液：
称取硫酸亚铁56g,溶-T600-800mL水中，加浓硫酸20mL,搅拌均匀，加水定溶至1L（必耍时过滤），贮于棕色瓶屮保存。
此溶液易受空气氧化，使用时必须每天标定一次准确浓度。
硫酸亚铁标准溶液的标定方法如下：
吸取重铭酸钾标准溶液20mL,放入150mL三角瓶中，加浓硫酸3mL和邻菲口罗啦指示剂3・5滴，用硫酸亚铁溶液滴定，根据硫酸亚铁溶液的消耗量，计算硫酸亚铁标准容液浓度c2o
ci-V!
C2=
（1）
V2
式中：
c2硫酸亚铁标准溶液的浓度，mol/L；
C!
重珞酸钾标准溶液的浓度，mol/L；
VI吸取的重铮酸钾标准溶液的体积，mL；
V2滴定时消耗硫酸亚铁溶液的体积，mL。
四、测定步骤
1、按表1有机质含量的规定称取制备好的风干试样0.05-0.5g,精确到O.OOOlgo置入150mL三角瓶中，加粉末状的硫酸银O.lg,然后用自动调零滴定管，准确加入0.4mol/L重馅酸钾■硫酸溶液10mL摇匀。
表1不同土壤有机质含量的称样量
有机含量，%
试样质量，g
2以下
0.4-0.5
2-7
0.2-0.3
7-10
0」
10-15
0.05
2、将盛有试样的三角瓶装一简易空气冷凝管，移置己预热到200-230的电砂浴上加热。
当简易空气冷凝管下端落下第一滴冷凝液，开始记时，消煮5±
0.5mino
3、消煮完毕后，将三角瓶从电砂浴上取下，冷却片刻，用水冲洗冷凝管内壁及其底端外壁，使洗涤液流入原三角瓶，瓶内溶液的总体积应控制在60-80mL为宜，加3・5滴邻菲口罗財批示剂，用硫酸亚铁标准溶液滴定剩余的重钻酸钾。
溶液的变色过程是先由橙黄变为蓝绿，再变为棕红，即达终点。
如果试样滴定所用硫酸亚铁标准溶液的毫升数不到空口标定所耗硫酸亚铁标准溶液亳升数的1/3时，则应减少土壤称样量，重新测定。
4、每批试样测定必须同时做2・3个空白标定。
取0.500g粉末状二氧化硅代替试样，其他步骤与试样测定相同，取其平均值。
五、结果计算
（1）土壤有机质含量X按烘干土计算，由式
（2）计算：
（Vo-V）c2xO.OO3x1.724x100
X=
（2）
m
X土壤有机质含量，%;
Vo空白滴定时消耗硫酸亚铁标准溶液的体积，mL；
V测定试样时消耗硫酸亚铁标准溶液的体积，mL；
0.0031/4碳原子的摩尔质量数，g/mol；
1.724由有机碳换算为有机质的系数；
m烘干试样质量，go
（2）平行测定的结果用算术平均值表示，保留三位有效数字。
（3）允许差：
当土壤有机质含量小于1%时，平行测定结果的相差不得超过0.05%；
含量为1%・4%时，不得超过0.10%；
含量为4%-7%时，不得超过0.30%；
含量在10%以上时，不得超过（）.5（）%。
六、注意事项
1、消化煮沸时，必须严格控制时间和温度。
必须在试管内溶液表面开始沸腾才开始计算时间。
掌握沸腾的标准尽量一致，然后继续消煮5min,消煮时间对分析结果有较大的影响，故应尽量记时准确。
2、消煮好的溶液颜色，一般应是黄色或黄中稍带绿色，如果以绿色为主，则说明重倂酸钾用量不足。
在滴定时消耗硫酸亚铁量小于空门用量的1/3时，有氧化不完全的可能，应弃去重做。
3、对含有氯化物的样品，可加少量硫酸银除去其影响。
对于石灰性土样，须慢慢加入浓硫酸，以防由于碳酸钙的分解而引起剧烈发泡。
对水稻土和长期渍水的土壤，必须预先磨细，在通风干燥处摊成薄层，风干10天左右。
七、实验作业
1、按要求撰写实验报告及检测报告。
（1）测定土壤有机质时，加入K2CrO7和H2SO4的作用是什么？
（2）试述滴定时溶液的变色过程，为什么会出现这样的颜色变化？
实验实训三土壤水解氮测定一碱解扩散法
一、测定意义
土壤水解性氮，包括矿质态氮和有机氮中比较易分解的部分，它是鞍态氮、硝态氮、氨基酸、酰胺和易分解的蛋白质氮的总和。
水解氮的含量与作物氮素吸收有较好的相关性。
测定土壤中水解性氮的变化动态，能及时了解土壤肥力，指导施肥。
在密封的扩散皿中，用1.2mol/L氢氧化钠（NaOH）溶液水解土壤样品，在恒温条件下使有效氮碱解转化为氨气状态，并不断地扩散逸出，由硼酸（H3BO3）吸收，再用标准盐酸滴定，计算出土壤水解性氮的含量。
旱地土壤硝态氮含量较高,需加硫酸亚铁使之还原成鞍态氮。
由于硫酸亚铁本身会中和部分氢氧化钠，故需提高碱的浓®
（1.8mol/L,使碱保持1.2mol/L的浓度）。
水稻土壤中硝态氮含量极微，可以省去加硫酸亚铁，直接用1.2mol/L氢氧化钠水解。
三、仪器与试剂
扩散川L、微量滴定管、1/1000分析天平、恒温箱、玻璃棒毛玻璃、吸管（2ml和10ml）、角匙等。
2、试剂
（1）1.8mol/L氢氧化钠溶液：
称取化学纯氢氧化钠72g,用蒸馆水溶解后冷却定容到1000mlo
（2）1.2mol/L氢氧化钠溶液：
称取化学纯氢氧化钠48g,用蒸懾水溶解定容到1000mlo
（3）2%硼酸溶液:
称取20g硼酸，用热蒸馆水（约60°
C）溶解,冷却后稀释至1000ml,用稀盐酸或稀氢氧化钠调节pH至4.5（定氮混合指示剂显葡萄酒红色）。
（4）0.0lmol/L盐酸标准溶液：
先配制l.Omol/L盐酸溶液，然后稀释10（）倍，用标准碱标定。
（5）定氮混合指示剂。
与土壤全氮的测定配法相同。
⑹特制胶水。
阿拉伯胶（称取10g粉状阿拉伯胶，溶T-15ml蒸憾水中）10份、甘油10份，饱和碳酸钾5份混合即成（最好放置在盛有浓硫酸的干燥器屮以除去氨）。
（7）硫酸亚铁（粉状）。
将分析纯硫酸亚铁磨细保存于阴凉干慄处。
四、测定步骤
1、称取通过20H风干样品2g（精确到0.00lg）和lg硫酸亚铁粉剂，均匀铺在扩散皿外室内，水平地轻轻旋转扩散皿，使样品铺平。
（水稻土样品则不必加硫酸亚铁。
）
2、用吸管吸取2%硼酸溶液2ml,加入扩散皿内室，并滴加1滴定氮混合指示剂
3、在皿的外室边缘涂上特制胶水，盖上毛玻璃，并旋转数次，以便毛玻璃与皿边完全粘合
4、慢慢转开毛玻璃的一边，使扩散皿露出一条狭缝，迅速用移液管加入10mll.8mol/L氢氧化钠于曲的外室（水稻土样品则加入10mll.2mol/L氢氧化钠），立即用毛玻璃盖严。
5、水平轻轻旋转扩散1UI,使碱溶液与土壤充分混合均匀，用橡皮筋固定，贴上标签，随后放入4（）°
C恒温箱中。
6、24小时后取出，再以O.Olmol/LHCl标准溶液用微量滴定管滴定内室所吸收的氮量，溶液由蓝色滴至微红色为终点，记下盐酸用量毫升数V。
7、同时耍做空白试验，计下滴定空白所消耗盐酸量为V。
。
五、结果计算
水解性氮含量按下式计算：
N（mg/Kg）=Mx（V-Vo）xl4xlO3/W
M—标准盐酸的摩尔浓度；
V—滴定样品时所用去的盐酸的毫升数；
V。
一空白试验所消耗的标准盐酸的毫升数；
W一样品重量（g）
14一一个氮原子的摩尔质量g/mol；
IO?
—换算系数。
1、微量扩散肌使用前，必须彻底清洗，利用小刷除去残余后，冲洗，先后浸泡于软性清洁剂及稀盐酸屮，然后以自来水充分冲洗，最后再用蒸谓水淋Z。
2、滴定前首先耍检查滴定管的下端是否充有气泡。
若有，首先耍把气泡排出。
3、滴定时，应用玻璃棒小心搅动内室溶液（切不可摇动扩散皿），同时逐渐滴加入标准酸液，在接近终点时，用玻璃棒从滴定管尖端沾取少量标准酸后再搅拌内室，以防滴过终点。
4、特制胶水由于用强碱制成，决不能沾污到内室溶液，否则测定结果将会偏高。
5、扩散1111在抹有特制胶水后必须盖严，以防漏气。
（1）本实验为什么强调在密封条件下进行？
（2）测定水解性氮在生产上有何意义？
实验实训四土壤有效磷测定一碳酸氢钠法
了解土壤中的速效磷供应状况，对于施肥有着直接的指导意义。
二、实验原理
石灰性土壤由丁大量游离碳酸钙存在，不能用酸溶液来提取速效磷，可用碳酸盐的碱溶液。
由丁•碳酸根的同离子效应，碳酸盐的碱溶液降低碳酸钙的溶解度,也就降低了溶液中钙的浓度，这样就有利于磷酸钙盐的提取。
同时由于碳酸盐的碱溶液也降低了铝和铁离子的活性，有利于磷酸铝和磷酸铁的提取。
此外，碳酸氢钠碱溶液中存在着OH'
HCO\C（V3等阴离子有利于吸附态磷的交换，因此,碳酸氢钠不仅适用于石灰性土壤，也适用于中性和酸性土壤中速效磷的提取。
待测液用钳佛抗混合显色剂在常温下进行还原，使黄色的佛磷钳杂多酸还原成为磷钢蓝进行比色。
1、仪器:
往复振荡机、电子天平（1/100）、分光光度计、三角瓶（250ml和100ml）、烧杯（100ml）、移液管（10ml、50ml）、容量瓶（50ml）、吸耳球、漏斗（60ml）、滤纸、坐标纸、擦镜纸、小滴管。
2.试剂：
所有试剂，除注明者外，皆为分析纯，水均指蒸馆水或去离子水。
（1）10%（M/V）碳酸钠溶液:
l（）g无水碳酸钠溶于水后，稀释至l（）（）mL,摇匀；
（2）5%（M/V）硫酸溶液：
吸取5mL浓硫酸（95.0・9&
0%,比重1.84）缓缓加入90mL水中，冷却后加水至lOOmL；
（3）3mol/L硫酸溶液：
量取168mL浓硫酸缓缓加入到盛有800mL左右水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，再加水至lOOOmL；
（4）二硝基酚指示剂：
称取0.2g2,6■二硝基酚溶TlOOmL水中；
（5）0.5%酒石酸怫钾溶液：
称取化学纯酒石酸锐钾0.5g溶T*100mL水中；
（6）硫酸铝锁贮备液：
量取126mL浓硫酸，缓缓加入到400mL水中，不断搅拌，冷却。
另称取经磨细的钳酸鞍10g溶于温度约60°
C300mL水中，冷却。
然后将硫酸溶液缓缓倒入钳酸钱溶液屮。
再加入0.5%酒石酸铢钾溶液1OOrnL,冷却后，加水稀释至OOOrnL,摇匀，贮于棕色试剂瓶屮，此贮备液含钳酸彼1%,硫酸2.25mol/L；
（7）钥锁抗显色剂：
称取L5g抗坏血酸（左旋，旋光度+21-220）溶于100mL钥锐贮备液中。
此溶液有效期不长，宜用时现配；
（8）磷标准贮备液：
准确称取经105°
C下烘干2h的磷酸二氢钾0.4390g,用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至lOOOmLo该溶液含磷100mg/L,放入冰箱可供长期使用；
（9）5mg/L磷标准溶液：
吸取5mL磷贮备液，放入lOOmL容量瓶中，加水定容。
该溶液用时现配；
四、操作步骤：
1、称取通过20冃的风干土样5g（精确到O.Olg）于200ml三角瓶中，准确加入O.5mol/L碳酸氢钠溶液10（）ml,再加一小角勺无磷活性碳，塞紧瓶塞，在20°
C〜30°
C下振荡30分钟（振荡机速率为每分钟150-180次），立即用无磷滤纸和干燥漏斗过滤，滤液承接丁10（）ml三角瓶中。
最初7〜8ml滤液弃去。
2、吸取滤液10ml（含磷量高时吸取2.5—5ml；
同时应补加（）.5mol/L碳酸氢钠溶液至10ml）于50ml量瓶中，加入二硝基酚指示剂2滴，用稀盐酸和西氢氧化钠调节PH至溶液刚呈微黄色（小心慢加，边加边摇，防止产生的二氧化碳使溶液喷岀瓶口），等充分排除二氧化碳后，加入加钳怫抗混合显色剂5ml充分摇匀，定容，再充分摇匀。
3、在室温高T15°
C下放置30分钟后，在分光光度计上比色（波长700nm）,以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查岀显色液的Pmg/L数。
4、磷标准曲线绘制：
分别吸取5mg/L磷标准溶液0、1、2、3、4、5ml、6ml于50ml容量瓶屮，即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6mg/L磷，每一容量瓶再逐个加入0.5mol/L碳酸氢钠10ml和硫酸一钥锐抗混合显色剂5ml,然后同待测液一样进行比色，在方格坐标纸上以吸光度为纵坐标，磷浓度为横坐标，绘制校准曲线。
土壤速效磷含量按下式计算：
显色液（P）mg/kgX显色液体积X分取倍数
土壤中速效磷（P）（mg/kg）=
烘干土重（g）
显色液（P）mg/kg是从丁•作曲线查得显色液的磷mg/kg数；
显色液体积为50ml；
分取倍数为浸提液总体积（50ml）为吸取浸出液体ml的倍数。
土壤速效磷含量与磷肥肥效
土壤速效磷（P）（mg/kg）
等级
作物对磷肥反应
<
5
低
肥效明显
5——10
中
肥效不稳
>
10
高
施肥无效
六、注意事项
1、活性碳一定耍洗至无磷无氯反应，否则不能使用。
2、显色时7.5mol/L硫酸钢锐抗混合显色剂5ml,除中和10ml0.5mol/L碳酸氢钠
溶液外，最后酸度为O.65mol/Lo
3>
m抗混合剂的加入量耍十分准确，特别是钳酸量的大小，直接影响着显色的深浅和稳定性。
标准溶液和待测液的比色酸度应保持基本一致，它的加入量应随比色时定容体积的大小按比例增减。
4、温度的大小影响着测定结果。
提取时耍求温度在25°
C左右。
室温太低时，可将容量瓶放入40—50°
C的烘箱或热水屮保温20分钟，稍冷后方可比色。
七、实验作业
（1）测定土壤速效磷应注意哪些问题？
（2）
用0.5mol/L碳酸氢钠浸提土壤，测定土壤速效磷的指标如何划分？
钾是作物生长发育过程中所必需的营养元素Z—，速效性钾可被作物直接吸收利用，最能直接反映土壤供钾能力（尤具是对当季作物而言）和钾肥肥效高低的标志Z-O测定土壤中速效钾的含量，对指导合理施用钾肥，满足作物丰产的营养耍求，有其重要的意义。
以中性1mol/LNH4OAc溶液为浸提剂,NHf与土壤胶体表面的K*进行交换,连同水溶性的K+—起进入溶液，浸岀液中的钾可用火焰光度计法直接测定。
1、主要仪器：
1/1000天平、振荡机、火焰光度计、三角瓶（250ml,100ml）.漏斗（60ml）、滤纸、坐标纸、角匙、吸耳球、移液管（50ml）
2、试剂:
⑴中性1.0mol/LNH4OAc溶液，称77.08gNH4OAc溶于近1升水中，用稀HOAc或NH4OH调节至pH7.0,用水定容至1刃。
⑵K标准溶液称取0.1907克KC1溶于1mol/LNH4OAc溶液中，完全溶解后用lmol/LNH4OAc溶液定容至1升，即为含100mg/LK的NHqOAc溶液。
用时分别吸取此100mg/LK标准液0,2,5,10,20,40ml放入100ml容量瓶中，用lmol/LNH4OAc定容，即得0,2,5,10,20,40mg/LK标准系列溶液。
四、操作步骤:
称取20冃风干土样5.0gT150ml三角瓶中，力口1mol/LNH4OAc溶液50.0ml（±
液比为1：
10）,用橡皮塞塞紧，在20—25°
C下振荡30分钟，用干滤纸过滤，滤液与钾标准系列溶液一起在火焰光度计上进行测定，在方格纸上绘制成曲线，根据待测液的读数值查岀相对应的mg/L数，并计算岀土壤中速效钾的含量。
1、数据记录：
标准溶液K
浓度mg/kg
2
20
40
待测液
检流计读数
2、土壤速效钾含量按下式计算:
土壤速效钾（K）（mg/kg）二待测液（mg/kg）XV（ml）/烘干土重（g）
待测液（mg/kg）——标准曲线上查出试液含钾（K）浓度（mg/kg）；
V——浸提液体积（50ml）。
两次平行测定结果允许差为2ppmKo
土壤速效钾的供应指标
土壤速效钾K
（mg/kg）
30
30-一60
60——100
100——160
160
极低
极高
六、注意出项
1、用醋酸镀溶液配制的钾标准溶液，容易定霉菌变质，影响测定结果，故标准液不能放置过久。
2、醋酸鞍提取剂必须是中性。
加入醋酸钱溶液于土样后，不宜放置过久，否则可能有一部分矿物钾转入溶液中，使速效钾量偏高。
（1）测定土壤速效钾应注意哪些问题？
（2）用醋酸钱浸提土壤，测定土壤速效钾的指标如何划分？
实验实训六石灰性土壤交换性盐基组成测定
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