红霉素的发酵提炼工艺及过程Word格式.docx

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平不高，并易产生噬茵体污染。

随后，选育了抗噬菌体的菌株，并使用自然分离、紫外线、氮

芥子气、硫酸二乙酯、亚硝酸、激光及快速中子处理等方法选育高产菌种。

随着菌种选育的发展，从控制红霉素生物合成的代谢路线进行定向筛选，得到抗乙琉氨酸

的菌株，并采用原生质体融合的方法获得高产优质的菌种。

经生产实践，其红霉京A的含量

高，c的含量低，结合工艺控制条件的改进，发酵单位提高I叫左右点证了成品的质量。

二、发酵工艺及过程

（一）发酵工艺流程

沙土袍子羊至罕字十母瓶斜面袍子

（二）发酵工艺要点

I．种子红霉素斜面袍子培养基是由玉米浆、淀粉、氯化钠、硫酸铵等组成。

其中玉米

浆质量对袍子的外观及生产能力有直接影响，会出现“黑点”（即灰色焦状茵落）。

有的生产

厂以蛋白陈代替玉米浆会使黑点减少甚至不出现，但其袍子量少。

袍子培养基消毒后必须快速冷却为妥，过长对袍子生长不利。

温度37℃，湿度要求

50％左右，母瓶斜面培养9d，子瓶斜面培养7d。

要求成熟的把子呈深米黄色，色泽新鲜、均

匀、无黑点，把子瓶背面有红色色素，并要求每瓶的袍子数不低于1亿个。

将子瓶斜面把子

制成袍子悬浮液，用微孔接种的方式接人种子罐。

种子罐及繁殖罐的培养基由花生饼粉、蛋白陈、硫酸铵、淀粉、葡萄糖等组成。

种子罐的

培养温度为35℃，培养时间65h左右；

繁殖罐培养温度33℃，培养时间40h左右。

均按移种

标准检查，符合要求进行移种。

2．培养基发酵培养基成分由黄豆饼粉、玉米浆、淀粉、制钩糖、碳酸钙、硫酸铵、磷酸一

氢钾等组成。

（1）碳源：

以葡萄糖为主（占80％一85％），其次是淀粉（占15％一25％）。

为了降低成

本与节粮，生产上常用母液糖代替固体葡萄糖。

（2）氮源：

以黄豆饼粉为主，其次是玉米浆和硫酸铵。

中间补料有花生饼粉、蛋白陈、酵

母粉及氨水。

黄豆饼粉因消毒时泡沫较多，故一、二级种子罐及后期补料用部分花生饼粉代

替，玉米桨质量对红霉素生物合成也有影响。

有的工厂以玉米胚芽粉代替，因玉米胚芽粉

的合磷量低于玉米浆，因此配方中无机磷用量相应增加。

采用丰富培养基往往能提高发酵单位，但培养基丰富了，固形物增加使溶解氧随之下降，限

制了抗生家产量的近—步提高。

采用基础原料液体化，即用蛋白酶水解各种饼粉，取滤液（酶解

液）代替固体饼粉进行发酵，6加上酶解液进行中间补料就使摇瓶发酥单位大幅度提高。

（3）前体：

根据红霉家生物合成途径．红霉家c转为红雷素A需要甲基供体。

发酵过

程加入丙酸或丙醇作为前体以提高红霉家A的产量。

两酸作前体时其加入量、加入速度及

加入浓度控制不当易使菌丝自溶，甚至全罐损失。

最好加入水稀释降低丙胶浓度，减慢加入

速度或用丙酸钠代替。

丙醇作前体时，代谢较稳定，对pH影响小，发酵单位及成品的量都

比较高，但要注意防火安全。

国外介绍，菌种选育时用豆油作碳源可使产生菌利用脂肪酸的能力相应提高

培养基也用豆油作碳源，可不加前体，非但能提高单位，还可延长周期。

3．培养条件的控制

（1）通气和搅拌：

发酵罐的通气量一般为1，o，8一1．2v／（V·

min），增大空气流量和加

快搅拌转速会提高发酵单位，但必须加强补料的工艺控制，防止菌丝早衰自溶。

（2）温度：

采用全程31℃培养，红色链霉菌对温度较敏感，若前期33℃培养，则菌丝生长

繁殖速度加快，40h新度即达最高峰，但衰老自溶亦快，发酵液容易下降。

31℃培养菌丝生长

虽比33℃馒，48h新度方达最高峰，但衰老较馒，使新度下降速度减缓，转稀时间推迟。

（3）pH；

整个发酵过程维持在6．6—7．2，菌丝生长良好，不自治，发酵单位稳定。

如在

接种后24h内pH过低或偏高，则菌丝生长较馒，生物合成水平的差别也很显著，特别在发

酵前期，当pH为5．7—6．3时发酵终厂的单位仅为对照的一半。

曾用o．2m01儿磷酸盐缓冲液进行试验，将它加到72h的发酵液内，当PH为5．3时已

经生成的红霉家全部失效，菌丝自溶。

当PH为6．3时红霉素部分失效，pH在6．7—6．9有

利于红霉家的生物合成。

（4）中间补料；

发酵过程中还原糖控制在1．2％一1．6％范围内，每隔6h6D入葡萄糖，直

至故罐前12—18h停止加糖。

有机氮源一般每B4r3—4次。

根据发酵液新度的大小决定

补入量的多少，若新度低可增加补料量；

反之，则减少补料量，甚至适量补水，故罐前24h停

止补料。

前体一般在24h，当发酵液变浓，pH高于6．5时开始补入，每隔24hAR一次，全程

共加4至5次，总量为o．7％一o．8％。

（5）通氛：

红霉素适宜后期通氨对提高发酵单位和成品质量均有好处，氨水加入方式以

滴加为佳。

（6）发酵液新度的控制：

在一定的强度范围内，红霉素c含量与发酵液新度呈负相关的

关系。

因此，适当提高发酵液新度能减少红霉素c组分的比例，从而保证成品质量。

．216．

发酵液熟度与搅拌功效、氮源补人量及培养温度有关。

通过减慢搅拌转速、改变搅拌叶

型式、降低罐温、增加有机氮源补量，滴加氨水等能提高发酵液的教度。

但熟度过高会影响

溶解氧的浓度，单位明显下降，所以必须因地制宜进行发酵工艺控制。

（7）泡沫与消沫：

因发酵培养基有黄豆饼粉，故在培养基消毒及通争气时泡沫较多。

一

般以植物油（豆油或菜油）做消沫剂，不宜一次多量加入。

三、提炼工艺及过程

红霉素的提炼方法有溶媒萃取法、离子交换法及大孔树脂吸附法：

要采用溶媒萃取法和大孔树脂吸附法。

链霉素的理化性质