蛋白质化学.doc
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第四章蛋白质化学
一：
填空题
1.氨基酸的结构通式为________________。
2.组成蛋白质分子的碱性氨基酸有________________、________________和________________。
酸性氨基酸有________________和________________。
3.在下列空格中填入合适的氨基酸名称。
（1）________________是带芳香族侧链的极性氨基酸。
（2）________________和________________是带芳香族侧链的非极性氨基酸。
（3）________________是含硫的极性氨基酸。
（4）________________或________________是相对分子质量小且不含硫的氨基酸，在一个肽链折叠的蛋白质中它能形成内部氢键。
（5）在一些酶的活性中心中起作用并含羟基的极性较小的氨基酸是________________。
4.Henderson-Hasselbalch方程为________________。
5.氨基酸的等电点（pI）是指________________。
6.氨基酸在等电点时，主要以________________离子形式存在，在pH>pI的溶液中，大部分以________________离子形式存在，在pH的溶液中，大部分以________________离子形式存在。
7.在生理条件下（pH7.0左右），蛋白质分子中的________________侧链和________________侧链几乎完全带正电荷，但是________________侧链则带部分正电荷。
8.脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生________________色的物质，而其它氨基酸与茚三酮反应产生________________色的物质。
9.范斯莱克（VanSlyke）法测定氨基氮主要利用________________与________________作用生成________________。
10.实验室常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反应，然后用碱（NaOH）来滴定________________上放出的________________。
11.通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量，这是因为蛋白质分子中的________________、________________和________________三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力。
12.寡肽通常是指由________________个到________________个氨基酸组成的肽。
13.肽链的形式有________________、________________、和________________三种，其中以________________最常见。
14.在一些天然肽中含有________________、________________、和________________等特殊结构。
这些结构在蛋白质中是不存在的。
很可能这些结构上的变化可使这些肽免受蛋白水解酶的作用。
15.人工合肽时常用的活化羧基的方法有
（1）________________
（2）________________（3）________________。
保护羧基的方法有
（1）________________
（2）________________。
16.近年来的研究指出，肽也有构象。
如脑啡肽是一个五肽，它有________________构象。
但肽的构象易变，稳定性远不如蛋白质。
17.在糖蛋白中，糖可与蛋白质的________________、________________、________________或________________残基以O－糖苷键相连，或与________________残基以N-糖苷键相连。
18.用________________酶、________________酶、________________酶裂解蛋白质分子时，它们的专一性不如胰蛋白酶和溴化氰强。
19.一般来说，用嗜热菌蛋白酶水解蛋白质所得到的片段，要比用胰蛋白酶所得的片段________________。
20.常用的拆开蛋白质分子中二硫键的方法有
（1）________________法，常用的试剂为________________。
（2）________________法，常用的试剂为________________或________________。
21.蛋白质之所以出现各种内容丰富的构象是因为________________键和________________键能有不同程度的转动。
22.在蛋白质分子中相邻氨基酸残基的β-碳原子如具有侧链会使α-螺旋不稳定。
因此当________________、________________和________________三种氨基酸相邻时，会破坏α-螺旋。
23.在α-螺旋中C＝O和N-H基之间形成的氢键最稳定，因为这三个原子以________________排列。
24.Pauling等人提出的蛋白质α-螺旋模型，每圈螺旋包含________________个氨基酸残基，高度为________________。
每个氨基酸残基沿轴上升________________，并沿轴旋转________________度。
25.胶原蛋白是由________________股肽链组成的超螺旋结构，并含有稀有的________________与________________残基。
26.蛋白质的最低自由能构象，常常通过________________残基之间形成的共价键而稳定。
27.当蛋白质的非极性侧链避开水相时，疏水作用导致自由能________________。
28.当疏水侧链折叠到蛋白质分子内部时，环境中水的熵________________。
29.一般来说，球状蛋白质的________________性氨基酸侧链位于分子内部，________________性氨基酸侧链位于分子表面。
30.两条相当伸展的肽链（或同一条肽链的两个伸展的片段）之间形成氢键的结构单元称为________________。
31.维持蛋白质构象的化学键有________________、________________、________________、________________、________________和________________。
32.血红蛋白（Hb）与氧结合的过程呈现________________效应，是通过Hb的________________现象实现的。
33.当溶液中盐离子强度低时，可增加蛋白质的溶解度，这种现象称________________。
当溶液中盐离子强度高时，可使蛋白质沉淀，这种现象称________________。
34.DEAE-纤维素是一种________________交换剂，CM-纤维素是一种________________交换剂。
35.一个带负电荷的蛋白质可牢固地结合到阴离子交换剂上，因此需要一种比原来缓冲液pH________________和离子强度________________的缓冲液，才能将此蛋白质洗脱下来。
36.胰岛素原转变为胰岛素的过程是在________________（细胞器）进行。
分泌颗粒中的胰岛素是通过________________离子与________________氨酸残基侧链上的氮原子配位，形成________________聚体。
37.测定蛋白质浓度的方法主要有________________、________________、________________和________________。
38.肌球蛋白本身具有________________酶的活性，所以当ATP释放能量时，就引起肌肉收缩。
39.酶蛋白的荧光主要来自________________氨酸与________________氨酸。
40.凝集素能专一地识别细胞表面的________________并与之结合，从而使细胞与细胞相互凝集。
41.抗体就是________________球蛋白。
42.用________________试剂可区分丙氨酸和色氨酸。
43.利用蛋白质不能通过半透膜的特性，使它和其他小分子物质分开的方法有________________和________________。
44.实验室中常用的测定相对分子质量的方法有________________、________________和________________等。
45.羧肽酶B专一地从蛋白质的C端切下________________氨基酸。
46.糖蛋白的糖基大多结合在蛋白质的________________残基、________________残基与________________残基上。
47.________________不是α-氨基酸，它经常改变肽链折叠的方式。
48.维持蛋白质构象的次级键主要有________________、________________、________________和________________。
49.羧肽酶A不能水解C端是________________残基、________________残基和________________残基的肽键。
50.常用的肽链N端分析的方法有________________法、________________法、________________法和________________法。
C端分析的方法有________________法和________________法等。
51.多聚L-谷氨酸的比旋光度随pH改变是因为________________，而L-谷氨酸的比旋光度随pH改变则是由于________________。
52.胰岛素是胰岛β-细胞分泌的，它是由前胰岛素原经专一性蛋白水解，失去N端的________________成为________________。
再经类胰蛋白酶和类羧肽酶的作用失去________________肽，形成具有生物活性的胰岛素。
53.影响血红蛋白与氧结合的因素有________________、________________、________________和________________等。
54.蛋白质的超二级结构是指________________，其基本组合形式为________________、________________、________________、________________、________________和________________等。
55.蛋白质的二级结构有________________、________________、________________、________________和________________等几种基本类型。
56.凝集素是一类能与________________相互作用的蛋白质。
57.确定蛋白质中二硫键的位置，一般先采用________________，然后用________________技术分离水解后的混合肽段。
二：
是非题
1.[]天然氨基酸都具有一个不对称α-碳原子。
2.[]亮氨酸的疏水性比丙氨酸强。
3.[]蛋白质分子中所有的氨基酸（除甘氨酸外）都是左旋的。
4.[]自然界的蛋白质和多肽类物质均由L-型氨基酸组成。
5.[]只有在很高或很低pH时，氨基酸才主要以非离子化形式存在。
6.[]当溶液的pH大于某一可解离基团的pKa值时，该基团有一半以上被解离。
7.[]一个化合物如能和茚三酮反应生成紫色，说明这化合物是氨基酸、肽或蛋白质。
8.[]一个蛋白质样品经酸水解后，能用氨基酸自动分析仪准确测定它的所有氨基酸。
9.[]用纸电泳法分离氨基酸主要是根据氨基酸的极性不同。
10.[]组氨酸是人体的一种半必需氨基酸。
11.[]CNBr能裂解Gly-Met-Pro三肽。
12.[]用化学修饰法能使一个肽只在精氨酸和半胱氨酸残基处被胰蛋白酶水解。
13.[]Lys－Lys-Lys三肽的pI必定大于个别Lys的pKa值。
14.[]从理论上说，可用Edman降解法测定任何非封闭多肽的全部氨基酸顺序。
15.[]从某些微生物中分离得到的多肽抗菌素往往为环状肽链，并含有D-型氨基酸。
16.[]双缩脲反应是肽和蛋白质特有的反应，所以二肽也有双缩脲反应。
17.[]热力学上最稳定的蛋白质构象自由能最低。
18.[]测定焦谷-组-脯酰胺三肽的游离氨基与羧基时呈阴性。
19.[]可用8mol/L尿素拆开蛋白质分子中的二硫键。
20.[]如果多肽链C-末端的第二个氨基酸不是脯氨酸，则羧肽酶A或B中至少有一种
能切下C-末端氨基酸。
21.[]在一次实验中，蛋白质顺序仪可测定肽链长度为200个氨基酸残基的氨基酸顺序。
22.[]脯氨酸不能参与α-螺旋，它使α-螺旋弯曲（bend），在肌红蛋白和血红蛋白的多
肽链中，每一个弯曲处并不一定有脯氨酸，但是每个脯氨酸却产生一个弯曲。
23.[]水溶液中蛋白质分子表面的氢原子相互形成氢键。
24.[]胰岛素的生物合成途径是先分别合成A、B两条链，然后通过S-S键相连。
25.[]维持蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键。
26.[]疏水蛋白质的折叠伴随着多肽链熵的增加。
27.[]大多数蛋白质的主要带电基团是由它N-末端的氨基和C-末端的羧基组成。
28.[]蛋白质的氨基酸顺序（一级结构）在很大程度上决定它的构象（三维结构）。
29.[]羧肽酶A的分子外部主要是α-螺旋构象，分子内部主要是β-折叠的构象。
30.[]蛋白质的亚基（或称亚单位）和肽链是同义的。
31.[]在水溶液中，蛋白质溶解度最小时的pH值通常就是它的等电点。
32.[]变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子的电荷被中和以及除去了蛋白质外面
的水化层所引起的。
33.[]血红蛋白的α-链、β-链和肌红蛋白的肽链在三级结构上很相似，所以它们都有
结合氧的能力。
血红蛋白与氧的亲和力较肌红蛋白更强。
34.[]血红蛋白与肌红蛋白均为氧载体，前者是一个典型的别构（或变构）蛋白，因而与氧结合过程中呈现协同效应，而后者却不是。
35.[]生活在空气稀薄的高山地区的人和生活在平地上的人比较，高山地区的人血液中
2,3-二磷酸甘油酸（2，3-DPG）的浓度较低。
36.[]测定别构酶的相对分子质量可以用十二烷基硫酸钠（SDS）-聚丙烯酰胺凝胶电泳。
37.[]胰岛素原（Proinsulin）是信使核糖核酸（mRNA）翻译后的原始产物。
38.[]蛋白质所含的天冬酰胺及谷氨酰胺两种残基是生物合成时直接从模板中译读而来。
39.[]球蛋白与球状蛋白质是不同的。
40.[]等电点不是蛋白质的特征参数。
41.[]免疫球蛋白是一种糖蛋白，它由两条重链和两条轻链组成。
42.[]蛋白质的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和圆盘电泳是两种完全不同的技术。
43.[]在多肽分子中只存在一种共价键即肽键。
44.[]人绒毛膜促性腺激素（HCG）是一种糖蛋白。
45.[]血红蛋白和肌红蛋白的功能都是运输氧。
46.[]逆流分溶和纸层析这两个分离氨基酸的方法是基于同一原理。
47.[]溶液的pH可以影响氨基酸的等电点。
48.[]在生理条件下，氧和二氧化碳均与血红蛋白血红素中的二价铁结合。
49.[]如用阳离子交换树脂分离D、K和M三种氨基酸，用pH7.0的缓冲溶液洗脱时，
先下来的氨基酸为D。
50.[]到目前为止，自然界发现的氨基酸为20种左右。
51.[]蛋白质分子的亚基与结构域是同义词。
52.[]转铁蛋白是一种糖蛋白。
53.[]一种非常稳定的相对分子质量小的蛋白质的化学结构中，经常含有较多的二硫键。
54.[]某蛋白质在pH6时向阳极移动，则其等电点小于6。
55.[]多数寡聚蛋白质分子其亚基的排列是对称的，对称性是四级结构蛋白质分子的最
重要的性质之一。
56.[]疏水作用是使蛋白质空间结构稳定的一种非常重要的次级键。
57.[]在蛋白质和多肽分子中，连接氨基酸残基的共价键除肽键外，还有二硫键。
三：
单选题
1.[]下列氨基酸中，哪个含有吲哚环?
A.甲硫氨酸
B.苏氨酸
C.色氨酸
D.缬氨酸
E.组氨酸
2.[]下列有关氨基酸的叙述，哪个是错误的?
A.酪氨酸和苯丙氨酸都含有苯环
B.酪氨酸和丝氨酸都含羟基
C.亮氨酸和缬氨酸都是分支氨基酸
D.脯氨酸和酪氨酸都是非极性氨基酸
E.组氨酸、色氨酸和脯氨酸都是杂环氨基酸
3.[]下列氨基酸溶液除哪个外都能使偏振光发生旋转?
A.丙氨酸
B.甘氨酸
C.亮氨酸
D.丝氨酸
E.缬氨酸
4.[]下列哪一类氨基酸完全是非必需氨基酸?
A.碱性氨基酸
B.含硫氨基酸
C.分支氨基酸
D.芳香族氨基酸
E.以上四种答案都不对
5.[]一个谷氨酸溶液，用5m11mo1/LNa0H来滴定，溶液的pH从1.0上升到7.0，下列数值中哪一个接近于该溶液中所含谷氨酸的毫摩尔数?
A.1.5
B.3.0
C.6.0
D.12.0
E.18.0
6.[]在pH10.0时，下列所示谷氨酸结构中哪一种占优势?
A.
B.
C.
D.
E.
7.[]图3-1为一个常见生化物质的滴定曲线，下列关于这图的叙述中除哪个外都是正确的?
A.这化合物有两个可解离基团
B.这化合物是一个简单的氨基酸
C.这化合物在pH5到7之间显示最大缓冲能力
D.A代表羧基的解离范围
E.A点和B点分别代表一个酸性基团和一个碱性基团的pKs
8.[]下列蛋白质组分中，哪一种在280nm具有最大的光吸收?
A.色氨酸的吲哚环
B.酪氨酸的酚环
&,nbsp;C.苯丙氨酸的苯环
D.半胱氨酸的硫原子
E.肽键
9.[]下列哪种氨基酸有米伦氏（Millon）反应?
A.色氨酸
B.酪氨酸
C.苯丙氨酸
D.组氨酸
E.精氨酸
10.[]下列氨基酸中除哪种外都是哺乳动物的必需氨基酸？
A.苯丙氨酸
B.赖氨酸
C.酪氨酸
D.亮氨酸
E.甲硫氨酸
11.[]下列哪一种氨基酸侧链基团的Pka值最接近于生理pH?
A.半胱氨酸
B.谷氨酸
C.谷氨酰胺
D.组氨酸
E.赖氨酸
12.[]肽键在下列哪个波长具有最大光吸收?
A.215nm
B.260nm
C.280nm
D.340nm
E.以上都不是
13.[]有一多肽经酸水解后产生等摩尔的Lys，Gly和A1a.如用胰蛋白酶水解该肽，仅发现有游离的Gly和一种二肽。
下列多肽的一级结构中，哪一个符合该肽的结构?
A.Gly-Lys-Ala-Lys-Gly-Ala
B.Ala-Lys-Gly
C.Lys-Gly-Ala
D.Gly-Lys-Ala
E.Ala-Gly-Lys
14.[]下列关于多肽Glu-His-Arg-Val-Lys-Asp的叙述，哪个是错的?
A.在pH12时，在电场中向阳极移动
B.在pH3时，在电场中向阴极移动
C.在pH5时，在电场中向阴极移动
D.在pH11时，在电场中向阴极移动
E.该多肽的等电点大约在pH8
15.[]测定小肽氨基酸顺序的最好方法是
A.2，4-二硝基氟苯法（FDNB法）
B.二甲氨基萘磺酰氯法（DNS-Cl法）
C.氨肽酶法
D.苯异硫氰酸法（PITC法）
E.羧肽酶法
16.[]用下列方法测定蛋白质含量，哪一种方法需要完整的肽键?
A.双缩脲反应
B.克氏定氮
C.紫外吸收
D.茚三酮反应
E.奈氏试剂
17.[]下列哪组反应是错误的?
A.葡萄糖－莫利希（Molisch反应）
B.胆固醇－李-伯（Libermann-Burchard）反应
C.色氨酸－坂口（Sakaguchi）反应
D.氨基酸－茚三酮反应
E.多肽－双缩脲反应
18.[]Sanger试剂是
A.苯异硫氰酸（异硫氰酸苯酯）
B.2，4-二硝基氟苯
C.丹磺酰氯
D.对氯汞苯甲酸
E.β-巯基乙醇
19.[]典型的α-螺旋是
A.
B.
C.
D.
E.
20.[]下列有关α-螺旋的叙述哪个是错误的?
A.分子内的氢键使α-螺旋稳定减弱R基团间不利的相互作用使α-螺旋稳定
B.减弱R基团间不利的相互作用使α-螺旋稳定
C.疏水作用使α-螺旋稳定
D.在某些蛋白质中，α-螺旋是二级结构中的一种类型
E.脯氨酸和甘氨酸残基使α-螺旋中断
21.[]每分子血红蛋白所含铁离子数为
A.1
B.2
C.3
D.4
E.6
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