兽医微生物课件.docx
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兽医微生物课件
兽医微生物学
绪言
1•微生物学与微生物：
微生物是个体最小的生物。
一般用肉眼看不见。
微生物学是研究微生物的形态结构、生理生化、作用及与人类、生态关系的科学。
2•微生物的发展：
形态学时期、生理学及免疫学的奠基时期、近代微生物学。
3•兽医微生物学：
4.日常生活中的微生物：
第一篇总论
细菌的形态及结构
第一节细菌的形态
一、细菌的大小
细菌是一种单细胞生物，要在显微镜下才能看见。
测定细菌大小的单位是微米或纳米。
二、细菌的外形和排列
细菌有三种基本的外形一一球状、杆状、螺旋状。
因此，细菌可分为球菌、杆菌和螺旋状菌。
球菌（coccus）:
1、双球菌、2、链球菌，3、四联球菌，4、八叠球菌，5、葡萄球菌。
杆菌（bacteriumorbacillus）:
1、单杆菌，2、双杆菌，3、链杆菌。
螺旋状菌（spiralformbacteria）:
1、弧菌,2、螺旋菌。
细菌的衰老型和多型性。
第二节细菌的构造
一、基本构造
（1）细胞壁（cellwall）:
细菌细胞壁在细胞的外层，贴近包浆膜之外，是一层无色透明、坚韧而具有一定
弹性的膜。
由于细菌细胞壁的差异，可用革兰氏染液将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两大类。
革兰氏阳性菌：
细胞壁无分化，其主要成分是肽聚糖。
较多
革兰氏阴性菌：
有多层结构，其中脂类含量分枝杆菌：
三分之一的细胞成分是脂类。
原生质体：
在形态学、化学、免疫学的范畴内全除去细胞壁，剩下胞浆膜包围原生质的球状或近球状个体。
球状体：
只除去细胞壁的肽聚糖。
细菌的L型：
细胞壁缺失或没有细胞壁的细菌变形。
能长久或短暂地进行有丝分裂。
革兰氏染色：
草酸铵结晶紫革兰氏碘液95%酒精石炭酸复红
青霉素类抗菌素的作用机理：
主要抑制肽聚糖的合成。
细胞壁功能:
保护作用和物质交换。
（二）胞浆膜（cytoplasmicmembrane）结构、功能
（三）核体（nuclearapparatus,necleoid）：
环状染色体
（四）质粒（plasmid）:
双股环状DNA
（五）细胞浆（cytoplasm）：
核糖体、异染颗粒、脂肪滴、糖原、淀粉粒、空泡和气泡
二、特殊构造
（一）荚膜（capsule）：
与粘液层的区分、性质、功能
（二）鞭毛（flagellum）：
分类、功能
（三）柔毛（pilusorfimbria）：
分类、功能
（四）芽胞（spore）：
分类、作用
细菌的生理
第一节细菌的化学组成
一、细菌的化学组成①水分②矿物质③有机物
二、细菌的物理性状
1比重：
一般大于1
2渗透压：
比其它动植物高胞浆分离（plasmolysis），胞浆逸出（plasmoptysis）概念、条件
3表面张力
4吸附现象（G+vG-）
5带电现象和等电点：
带阴性电荷
悬浮液的稳定性：
取决于细菌的状态
第二节细菌细胞的代谢过程
细菌与真核生物代谢的差异
物质的摄取（fueling）
单纯扩散、促进扩散、主动输送、基因移位之间的区别
生物合成（biosynthesis）
聚合作用（polymerization）
组装（assembly）
6、营养类型：
据碳素区分：
自养菌、异养菌
据能源区分：
光能营养菌、化能营养菌
共四型，光能自（异）养菌
化能自（异）养菌
7、细菌的营养需要
水分、无机盐类、含碳化合物、含氮化合物、生长因子
8、细菌的酶
9、吸呼与发酵
10、碳水化合物、含氮化合物、脂类的代谢及产物
11、其它代谢产物
第三节细菌的生长繁殖
、细菌生长的条件营养温度和PH渗透压气体：
需氧菌（aerobe）、厌氧菌（anaerobe）、兼性厌氧菌（facultativeanaerobe）、微嗜氧菌（microaerobephilicbacteria）二、细菌繁殖的速度和生长曲线
迟缓期、对数期、稳定期、衰退期各期的特点
第四节细菌的生化试验
第三章外界因素对细菌的影响
介绍常用名词
杀菌作用（bacteriocidicaction）:
指某些物质或因素所具有在一定条件下杀死微生物的作用。
抑菌作用（bacteriostaticaction）:
指某些物质或因素具有的抑制微生物的生长与繁殖的作用。
抗菌作用（antibioticaction）:
某些药物具有的抑制或杀灭微生物的作用。
灭菌（sterilization）:
指杀灭物体中所有病原微生物和非病原微生物及其芽孢、霉菌孢子的方法。
消毒（disinfection）:
指杀灭物体中病原微生物的方法。
防腐（antisepsis）:
指阻止或抑制微生物的生长繁殖的方法。
无菌（asepsis）:
没有活的微生物状态。
滤过除菌（sterilizationbyfiltration）:
第一节物理因素对微生物的影响
一、温度
1、高温对微生物影响的机理及应用
灭菌的方法及适用范围
干热灭菌法（dryheatsterilization）：
火焰灭菌法、热空气灭菌法湿热灭菌法（moistheatsterilization）：
煮
沸灭菌
巴氏消毒法（pasteurization）---低温维持巴氏消毒法（lowtemperatureholdingpasteurizationLTH），
63-65°C30min;高温瞬时巴氏消毒法（hightemperatureshottimepasteurizationHTST
）,71-72C
15sec;超高温巴氏消毒法（ultrahightemperaturepasteurizationUHT），132C1-2sec。
流通蒸汽灭菌
高压蒸汽灭菌
2、低温应用：
菌种保存，快速冷冻和快速解冻，加10%甘油等作保护剂。
二、干燥
三、辐谢：
光感作用（photosensitization）、光复活作用（photoreactivation）
可见光，阳光，紫外线（200-300nm），电离辐谢。
其它：
如微波、超声波等。
第二节化学因素对微生物的影响
消毒剂的种类及应用：
影响消毒剂作用的因素：
第三节生物因素对细菌的影响
抗生素（antibiotics）:
植物杀菌素（phytocide）:
细菌素（bacteriocin）:
噬菌体（bacteriophage,phage）
形态结构：
蝌蚪形、微球形、纤丝形
抗原性及抵抗力
增殖过程：
吸附侵入，增殖裂解
与寄主细菌的关系：
溶菌反应，溶原性
实际应用：
用于细菌的鉴定和分型
4.微生物的亚致死性损伤（sub-lethalinjury,SI）及其恢复
第四章细菌在自然界的分布土壤、水、空气中的细菌
细菌的来源和分布
病原菌的来源、存活期及影响因素
细菌检查的方法：
细菌总数、大肠菌群、大肠杆菌指数、大肠杆菌价。
正常动物体的细菌
正常动物体的细菌分布
正常动物体内细菌的生态关系
不同微生物种群间的相互关系：
共生、中立、共栖、互生、拮抗、竞争、偏生、寄生、吞噬。
正常菌群与其宿主的相互关系：
营养、免疫、益生菌、生物颉抗。
菌群失调：
悉生动物（gnotobioticanimals）
无菌动物（germfreeanimals,GF）、
无特定病原体动物（specificpathogen-freeanimals,SPF）、
清洁动物（cleananimals）、
普通动物（conventionalanimals）。
细菌在自然界物质转化中的作用
第五章病原菌的致病作用
1、非病原菌、病原菌、条件性病原菌、腐生性病原菌
2．病原性与毒力的区别
感染（infection）
发病（disease）
病原菌（pathogenicbacteria）
致病性（pathogenicity）毒力（virulent）
3•构成病原菌毒力的因素：
侵袭力（invasiveness）:
荚膜及其它构造，酶类
毒素：
外毒素、内毒素
细菌外毒素和内毒素基本特性比较
特性
外毒素
内毒素
化学性质
蛋白质
脂多糖
产生
由某些革兰氏阳性或阴性菌分泌
由革兰氏阴性菌菌体裂解
产生
耐热
不耐
极耐
毒性作用
特异性。
为细胞毒素、肠毒素或神经毒素，对特疋的细胞或组织发挥特疋的作用。
全身性。
致发热、腹泻、
呕吐
毒性程度
高，往往致死
弱，很少致死
致热性
对宿主不致热
常致宿主发热
能否产生类毒素
能，用甲醛处理
不能
免疫原性
强，刺激机体产生中和抗体
较弱，免疫应答不足于中和毒性
毒力岛（islands）
III型分泌系统（TypeIIIsecretionsystem）
细菌毒力的增强与减弱毒力增强的方法：
a.连续通过易感动物;
b.被温和噬菌体感染。
毒力减弱的方法：
a.通过非易感动物；
b.在较高温度下培养;
c.在含有特殊化学物质的培养基中培养；
d.在含有特异抗血清、特异噬菌体或抗生素的培养基中培养。
5•毒力的测定计算方法
半数致死量（medianlethaldose,LD50）
半数感染量（medianinfectiousdoseID50）
ID50的计算方法
细菌
稀释度
感染：
种
接
感染累计
未感染累
计
感染比率
感染百分率
10-3
4/4
9
0
9/9
100
10-4
3/4
5
1
5/6
83
10-5
2/4
2
3
2/5
40
10-6
0/4
0
7
0/7
0
高于50%的感染率-50%/高于50%的感染率-低于50%的感染率=（83-50）/（83-40）=0.7
因此，10-4.7的细菌悬液0.1毫升表示1个ID50,即这一稀释度可以使50%接种动物的发生感染。
6.病原菌引起传染的必要条件
1病原菌有足够的毒力
2达到一定数量
3有适宜的浸入门户
7.传染的表现形式：
传染病发生的三要素：
隐性传染：
不表现或仅表现出较微临床症状
显性传染：
具有明显临床症状带菌现象：
愈后，病原菌仍存在，并不断排出体外
8
C）
．局部传染与全身传染毒血症、菌血症、败血症、脓毒血症的区分（
第六章细菌的变异及人工诱变
1．变异类型：
遗传性的、非遗传性的
形态变异：
L型、衰老型。
结构变异：
荚膜变异、芽胞变异、鞭毛变异。
培养特性变异：
S-R变异后性状改变、D菌落变异
毒力变异:
生化特性变异：
耐药性变异：
2．非遗传变异的机制：
乳糖操纵子模型
3．遗传变异的类型及各过程：
突变（mutation）、转化（transformation）、转导（transduction）、接合（conjugation）
4.人工诱变的方法:
利用物理因素诱变：
紫外线、激光、X射线、丫射线、快中子等
利用化学因素诱变的方法及机制：
a.取代碱基；
b.使碱基变构；
c.移码突变；
d.诱发染色体畸变
现代分子生物学技术的应用：
遗传工程:
1基因分离
2基因与载体结合
3重组体引入受体细胞
4筛选
验证
聚合酶链反应（PCR）
核酸杂交
6．细菌遗传变异的重要意义。
理论上：
实践上：
疾病的诊断与防治；
b．制疫苗的菌株；
c农业生产上的苗种；
d消除环境污染。
第七章细菌的分类与命名
细菌的命名采用“双名法”：
每个细菌的拉丁文名称由属名和种名构成，属名的第一个字母大写，期于均小写。
细菌分类鉴别标准：
DNA（G+C）mol%值；
解链（Tm）法；
核酸分子杂交；
16srRNA寡核苷酸编目；
第八章革兰氏阳性球菌
第一节葡萄球菌属（Staphylococcus）
一、葡萄球菌的一般特征
7-
圆形、无芽胞、无鞭毛，温度范围：
6.5—46C,最适温度：
35-40C,pH范围：
4.2—9.3，最适pH:
7.5。
葡萄球菌的分类：
金色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌
二、金色葡萄球菌：
（Staphylococcusaureus）
1、形态及染色特性：
圆形、葡萄串形：
G+
2、培养特性：
①普通琼脂平板：
光滑、湿润、隆起的圆形菌落；
2血液琼脂平板：
菌落大、呈明显B溶血；
3普通肉汤：
浑蚀、沉淀。
3、抗原及变异：
SPA（A型多糖抗原），耐药性、StR
4、致病性：
引起二类疾病—化脓性疾病和毒素性疾病。
毒力因子：
a毒素：
牛羊坏疽性乳腺炎有关。
肠毒素（Enterotoxin）：
引致食物中毒,呕吐、腹泻
毒素休克综合症毒素：
耐热核酸酶、凝固酶（Coagulase）
诊断：
涂片、染色：
培养：
①凝固酶试验；
2菌落颜色；
3溶血试验；溶血
生化反应：
甘露醇阳性
动物接种：
家兔,引起局部皮肤溃疡及坏死。
6、免疫防治
第二节链球菌属（streptococcus）
1、链球菌的分类。
（C）
按溶血能力：
a型：
在菌落周围形成不透明的草绿色溶血环，红细胞未溶解，血红蛋白变成绿色。
这种细菌致病力不强，多为条件性致病菌。
B型：
菌落周围形成完全透明的溶血环，红细胞完全溶解。
这类菌致病力强，常引起人及动物各种疾病。
r型：
菌落周围无溶血现象。
一般为非致病菌。
按抗原结构分：
①群特异性抗原
2型特异性抗原，
3核蛋白抗原
2、链球菌的一般特征（B）链状、圆形、G+、有些有荚膜。
3、培养特性：
大多数为兼性厌氧，最适温度37，pH7.4-7.6,在普通培养基上生长不良，血琼脂平板上长
成灰白色，表面光滑，边缘整齐的小菌落。
4、致病性
链球菌溶血素（Streptolysin）、致热外毒素（Pyrogenicexotoxin）
免疫原性：
微生物学诊断：
无乳链球菌（Sagalactiae）
停乳链球菌（Sdysgalactiae）
乳房链球菌（Suberis）
形态：
中长链
染色特征：
G+
培养要求：
AA、VitB、U
培养特性：
血平板（溶血）：
淡灰色，隆起、闪光的小菌落。
肉汤（浑浊）
致病性：
牛乳房炎
诊断：
①显微镜检查；②分离鉴定；③CAMP试验
免疫防治
猪链球菌（Ssuis）
1、根据荚膜抗原的差异，猪链球菌有35个血清型（1-34、1/2），2型的毒力最强是人兽共患病的细菌，
它通过猪的口鼻传染，在扁桃体中增殖，其中1、7、9可以使猪发病死亡。
2、它可以致猪的脑膜炎、关节炎、肺炎、多发性浆膜炎、流产。
化脓链球菌（B）
形态：
链状
染色特征：
G+
培养及生化特性：
平板（溶血）
肉汤（浑浊）
致病性：
牛乳房炎
诊断：
分离培养、生化反应
第九章革兰氏阴性兼性厌氧杆菌
埃希氏菌属（Escherichia）
本属共有五个种，最重要的是大肠埃希氏菌（Ecoli）。
1、形态及染色特征：
有周鞭毛、柔毛
染色：
G-
形态及排列：
直杆菌，单在或成双。
其它：
无芽胞，大部分有周鞭毛，有菌毛。
2、培养特性：
本菌为兼性厌氧菌，在普通培养基中生长良好。
肉汤：
浑浊，粘性沉淀，管壁有菌环。
营养琼脂：
隆起、光滑，整齐，灰白色。
麦康盖培养基：
红色菌落。
伊红美兰鉴别培养基：
黑色带金属光泽的菌落。
血平板：
B溶血。
3、生化特性：
能发酵多种碳水化合物产酸产气，大多数菌株可迅速发酵乳糖。
4、抗原及血清型：
0抗原：
菌体抗原，有173种。
121°不破坏其抗原性，可用单因子抗0血清做凝集以鉴定。
K抗原：
菌体表面的一种热不稳定抗原，位于被膜或荚膜中。
有K的不被抗O血清凝集。
分为L、A、B三
型，共80种。
H抗原：
热不稳。
5、致病性：
产肠毒素大肠杆菌（ETEC）：
毒力因子主要是粘附素和肠毒素。
引起动物腹泻。
肠产毒性大肠杆菌
（EnterotoxigenicE.coli,ETEC）：
引起婴幼儿和旅游者腹泻，出现轻度水泻，也可呈严重的霍乱样症状。
腹泻常为自限性，一般2〜3天即愈。
营养不良者可达数周，也可反复发作。
致病因素是LT或ST,或两者
同时致病。
有些菌株具有定居因子，常见者为06:
K15:
H16、025:
K7:
H42。
鉴定ETEC主要测定大肠
杆菌肠毒素,血清型有一定参考意义。
产类志贺毒素大肠杆菌（SLTEC）:
主要毒力因子是粘附性菌毛和类志贺毒素，引起猪水肿和人的出血性肠
炎。
0157；H7
肠致病性大肠杆菌:
是婴儿腹泻的主要病原菌,有高度传染性,严重者可致死；成人少见。
细菌侵入肠道后，主要在十二指肠、空肠和回肠上段大量繁殖。
切片标本中可见细菌粘附于绒毛，导致刷状缘破坏、绒毛
萎缩、上皮细胞排列紊乱和功能受损，造成严重腹泻。
EPEC不产生LT或ST。
有人报道，EPEC可产生一种
由噬菌体编码的肠毒素，因对Vero细胞（绿猴肾传代细胞）有毒性，故称VT毒素。
VT毒素的结构、作用与志贺氏毒素相似，具有神经毒素、细胞毒素和肠毒素性。
鉴定EPEC可根据临床表现与血清型。
败血性大肠杆菌：
尿道致病性大肠杆菌：
6、微生物学诊断：
涂片、染色、镜检：
分离培养、纯化：
生化试验：
血清学鉴定：
动物试验：
（O157：
H7）
大肠杆菌的分离鉴定程序
防治：
菌苗
沙门氏菌属（Salmonella）
1、染色特征：
革兰氏阴性，无芽胞，周鞭毛，兼性厌氧。
2、培养特性：
与E.coli相似。
只有鸡白痢、鸡伤寒、羊流产和甲型副伤寒在普通培养基上生长较差。
大部
分不利用乳糖。
培养基中加入硫代硫酸钠、胱氨酸、血清等可提高其生长效率。
3、生化特性：
4、抗原及变异：
O抗原：
细胞表面的耐热多糖抗原，每个菌株均有。
A、B、C、---51个O群。
H抗原：
I相为特异相，为一部分血清型所有。
II相为非特异相。
常发生双相变异。
K抗原：
Vi抗原。
5、致病性：
败血症、胃肠炎
毒力因子：
6、微生物学诊断：
防治：
净化鸡群，灭活疫苗，抗菌药物。
鼠疫耶尔森菌属（Y.pestis）
1、形态与染色特性：
革兰氏阴性、短小杆菌、无鞭毛；肉汤培养基可见短链状，两极浓染。
2、培养及生化特性：
兼性厌氧菌；
普通培养基：
生长贫瘠；
其菌落半透明、奶油状、光滑湿润、黏而不易刮取。
3、抗原与血清型：
无H抗原，有18活0种0抗原；
4、致病性：
人类鼠疫表现为，腺鼠疫、败血型鼠疫、肺鼠疫；
由于死者皮下严重出血、充血，大量血红蛋白转为含铁血红素，致使皮肤呈黑紫色，因此又称“黑死病”第十章弧菌科
副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）形态及培养特性：
细菌多形态，呈弧状，丝状或杆状。
一端有鞭毛，革兰氏染色阴性。
菌落中等大小。
绵羊血平板：
不溶血；
弧菌选择培养TCBS琼脂：
菌落发绿；
高度嗜盐，可在含7.5%NaCl的培养基上生长致病性：
实用本菌污染的海鱼或者贝类引起食物中毒，表现为水样腹泻，呕吐发热，一般很快能恢复。
第十一章巴氏杆菌科（vibrio）
巴氏杆菌属（Pasteurella）
多杀性巴氏杆菌，主要使动物发生出血性败血症或传染性肺炎。
该菌存在于健康动物的口腔和咽部粘膜。
1、形态及染色特征：
G-球杆菌，来自组织的细菌为两级浓染。
2、培养特性：
需氧或兼性厌氧。
普通培养基：
生长贫瘠。
血清或鲜血培养基：
生长旺盛，可长成灰白色、闪亮露珠状小菌落
在麦康盖培养基：
不生长。
血清肉汤培养基：
开始轻度浑浊，后液体变清朗，底部出现粘稠沉淀。
3、生化特性：
可分解葡萄糖和蔗糖。
血清型：
依荚膜抗原（6）和菌体抗原分型（16）。
我国家禽为5:
A（菌体：
荚膜），8:
A;猪为5:
A,
6:
B;兔为7:
A，5:
A。
4、抵抗力：
不强。
5、致病性:
败血症，实质器官出血，肝脏有针尖样坏死。
6、微生物学诊断:
取材:
心、肝、脾、肺、肾、血液等实质器官。
涂片、染色、镜检。
分离（普通平板、鲜血、肉汤培养基）、培养（需氧和厌氧培养）、纯化。
生化鉴定。
血清学鉴定。
动物试验。
7、免疫:
灭活苗和弱毒苗、血清、抗菌药。
里氏杆菌属（Riemerella）主要注意与巴氏杆菌相区别。
1、形态及染色特征：
G-杆菌，个别呈长丝状。
瑞氏染色两级浓染。
形成荚膜，无芽孢，无鞭毛
2、培养特性：
需氧或兼性厌氧。
初次培养需5-10%CO2。
普通培养基：
生长贫瘠。
巧克力或胰蛋白胨大豆琼脂（TSA）：
生长旺盛。
光滑型奶油状小菌落。
在麦康盖培养基：
不生长。
3、生化特性：
不分解葡萄糖和蔗糖（与巴氏不同）。
4、血清型：
有21个型，我国以1型为主，个别报道有2型。
5、抵抗力：
不强（与巴氏相同）。
6、致病性：
主要感染2-3周的雏鸭。
引起急性或慢性败血症和浆膜炎。
微生物学诊断：
涂片、染色、镜检。
分离、培养、纯化。
生化鉴定。
血清学鉴定。
动物试验。
免疫：
灭活菌苗和弱毒苗。
放线杆菌属（Actinobacillus）
一、猪胸膜肺炎放线杆菌（A.pleuropneumoniae）
1、染色特征：
G-球杆菌，组织涂片两级浓染。
2、养特性：
兼性厌氧。
初次培养需5-10%CO2。
普通培养基：
生长贫瘠。
巧克力：
生长旺盛。
绵羊鲜血琼脂：
B溶血，金色葡萄球菌可增强其溶血。
麦康盖琼脂：
不生长（与巴氏同）。
3、生化特性：
产生脲酶、分解蔗糖。
4、血清型：
14个型，1型的毒力最强。
我国为2、3、5、7、8型。
5、抵抗力：
不强（与巴氏相同）。
6、致病性：
主要引起猪的胸膜肺炎。
7、微生物学诊断：
取材：
猪坏死组织，胸水，鼻及气管渗出物。
涂片、染色、镜检。
分离、培养、纯化。
生化鉴定。
血清学鉴定。
动物试验。
免疫：
灭活菌苗免疫母猪。
嗜血杆菌属（Haemophilus）
它是一群酶系统不完全革兰氏阴性细菌，生长需要血液中的生长因子，尤其是X因子和V因子。
1、形态及染色：
多为短杆状，椰油呈球、杆状和丝状等多形性。
无鞭毛，无芽孢，新分离的菌株有荚膜，美蓝染色两极浓染，为革兰氏阴性。
2、培养特性：
在巧克力琼脂：
菌落呈圆形，隆起，表面光滑边缘整齐，灰白色，半透明小菌落。
卫星现象，靠近金黄色葡萄球菌的生长旺盛。
3、抵抗力：
对外界环境的抵抗力比较弱，干燥环境中易死亡。
4、抗原及分型：
荚膜多糖抗原和菌体抗原。
5、致病性：
其毒力因子包括荚膜、菌毛、内毒素。
6、其他嗜血杆菌：
流感嗜血杆菌、副猪嗜血杆菌、副禽嗜血杆菌。
7、微生物诊断：
显微镜检查：
涂片，美蓝染色，镜检；
分离培养
V因子需要测试；
卟啉试验
生化试验；
血清学试验
第十二章革兰氏阴性需氧杆
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