医院检验科临床基因扩增检测实验室程序管理文件.docx

医院检验科临床基因扩增检测实验室程序管理文件.docx

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医院检验科临床基因扩增检测实验室程序管理文件

医院检验科临床基因扩增检测实验室

程序管理文件

xxx自治区医

检验科

临床基因扩增实验室程序文件目录

编号：

CG-JY-ML

日期：

版本：

共3页

程序管理文件

标准操作程序

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

附图、附表

附图01.实验室平面图

附图02.室内质控图

附图03.冰箱温度记录图

附表01.实验室主要负责人简历表

附表02.实验室工作人员一览表

附表03.实验室仪器设备一览表

附表04.干式恒温器使用记录表

附表05.应急处理记录表

附表06.离心机使用记录表

附表07.可接受标本记录表

附表08.拒收标本记录表

附表09-1.检测后标本保存记录表

附表09-2.待检标本保存记录表

附表10.基因检测结果记录表

附表11.抱怨记录表

附表12.BIO-RADiCycler荧光定量PCR检测仪使用记录表

附表13.仪器维护记录表

附表14.仪器故障处理表

附表15.试剂进购记录表

附表16.试剂质检记录表

附表17-1.生物安全柜使用记录表

附表17-2.洁净工作台使用记录表

附表18.消耗品进购记录表

附表19.消耗品质检记录表

附表20.室间质控记录表

附表21.实验室温度、湿度、水浴箱温度记录表

附表22.垃圾处理记录表

人员培训计划及培训记录表

基因检验报告单格式

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

前言

我院是一所综合性三级医院。

近年来，随着临床医学的不断进步，检验医学也得到了迅猛的发展。

检验科为了更好的满足临床诊断的需求，根据卫生部临检中心制定的《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）、《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字2002第8号）文件，设立了临床基因扩增检验实验室，并于2009年6月着手编写实验室质量管理程序文件。

经过试运行，反复讨论和修改第一版已定稿。

从即日起开始实施。

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

xxx第四医院

检验科

质量方针、目标

编号：

CG-JY-FZ

日期：

版本：

共1页

1.质量方针

本实验室的质量方针是：

准确、及时、可靠。

2.质量目标

全面贯彻质量方针，建立科学、合理的实验室质量管理体系，严格按照程序规定做好检验工作，不段提高自身素质和技术水平，为临床和患者提供准确、可靠的诊断依据。

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

xxx第四医院

检验科

文件管理程序

编号：

CG-JY-Pro

日期：

版本：

共1页

1.目的：

文件管理有序和便于资料的查用

2.范围：

本质量管理手册及实验室相关资料

3.负责人：

xxx

4.规章

4.1本质量管理手册分正副本，正本由主任保管于主任办公室；副本由实验室负责人保管于实验室；

4.2本质量管理手册有电子文档，备有一份软盘，由主任保管；

4.3本质量管理手册不能外借，不能复印，不能抄写，只能在本室阅读；

4.4临床基因扩增实验室的每区有相应的质量管理文件副本，由实验室工作人员保管；

4.5本实验室的相关资料由实验室工作人员填写，保管于相关实验室，超过一年的资料由主任保管。

4.6实验原始数据电子文档每天保存于电脑中，一年的电子文档备于光盘中，保存五年；病人原始送检单及原始资料记录本保存两年；其它实验室的记录保存两年，超过保存期可按实际情况处理。

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

xxx第四医院

检验科

临床基因扩增实验室设置与管理

编号：

CG-JY-Pro-01

日期：

版本：

共1页

1.目的：

保证实验室工作规范而有序的进行

2.范围：

检验科临床基因扩增实验室

3.负责人:

xxx

4.内容：

4.1基因扩增检验实验室是检验科下设的，采用实时荧光定量PCR技术对临床标本进行基因扩增诊断的专业实验室。

本实验室按《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号）中临床基因扩增检验实验室基本设备标准结合本科实验室的条件进行配置、装修。

并严格按《临床基因扩增检验实验室工作规范》（卫检字2002第8号）的要求开展临床基因扩增工作。

4.2实验室共分三个隔离区：

一、试剂贮存和准备区，二、标本制备区，三、扩增、分析区。

各区配备专用的设备、仪器、辅助设施、耗材、清洁用品、办公用品、专用工作服，并有明显的区分标识：

试剂贮存和准备区――黄色；标本制备区――红色；扩增、分析区――绿色。

各种物品要有相应颜色标记，不得混用。

各工作区配置、功能及管理见实验室平面图、各区工作制度及相关SOP文件。

并设立标本接收区负责接收标本及提供咨询服务等。

4.3进入实验室必须严格遵守试剂准备区→标本制备区→扩增及产物分析区的单一流向制度，严禁误入和逆行进入其他工作区。

4.4按要求配置各种检验器械，并定期质检由专人维护以保证运转正常，性能可靠。

4.5实验室所开展的检测项目均系卫生部批准的项目，使用经国家药品监督管理局批准的试剂。

4.6制订有关的各种规章制度及操作程序，并严格执行,以保证工作规范而有序的进行。

所引用图表：

附图1实验室平面图附表02实验室工作人员一览表

附表01实验室主要负责人简历附表03实验室仪器设备一览表

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

xxx第四医院

检验科

实验室人员配置、管理及培训

编号：

CG-JY-Pro-02

日期：

版本：

共2页

1.目的：

规范实验室人员的管理，保证实验室具备开展该类实验的能力。

2.负责人：

xxx

3.人员要求：

3.1基因扩增实验室工作人员应具备较广泛的分子生物学知识，掌握相关学科知识及应用能力（实验技能、分析能力、沟通能力）。

3.2实验操作人员应取得卫生部临检中心或内蒙古自治区临检中心颁发的上岗培训证书。

3.3工作人员上岗前必须掌握PCR实验室管理文件及要求，并由实验室主任核查。

4.人员配置：

4.1实验室根据工作开展情况配备足够数量的工作人员。

目前，实验室由实验室主任、两名青年技师组成。

4.2实验室主任负责实验室全面管理、解决与临床沟通及技术疑难问题，组织工作人员参加相关知识培训，实验室主任不在岗时，应指定代理人负责。

4.3两名青年技师负责实验室技术管理及临床标本的检验。

5.人员管理：

5.1按时上下班，不迟到、早退。

不得擅离工作岗位，特殊情况需请假。

5.2实验人员须保持仪表整洁，语言礼貌、举止文明，对待来访病人或电话应耐心细致，解释明确，不得推脱或生硬回绝。

5.3进入实验室的工作人员必须遵守实验室的单一流向的规定，禁止逆向走动。

5.4非本室工作人员未经允许不得进入实验室。

5.5实验室内不得吸烟、饮食及进行化妆。

5.6实验室技术人员必须严格执行PCR实验室制定的各项操作规程，不得随意更改操作步骤。

明确人员的责任分工，保证工作的顺利完成。

5.7所有仪器须有专人负责，有使用维护记录，保持仪器卫生整洁；实验人员必须熟悉仪器性能方允许操作，仪器使用前必须检查是否完好，一旦发现问题，需及时向科室负责人反映，不得擅自拆装；非仪器操作人严禁使用。

5.8实验室内使用的一次性物品如离心管、吸头等要做好无菌灭活准备。

5.9每天了解仪器运转情况及试剂使用情况，检查电源，水龙头，负责安全工作。

5.10实验室地面必须平整、干净，通道要利于通行，没有阻碍。

5.11合理规划实验室内物品，抽屉、柜子、文件类物品要作好标记，以方便识别，做到摆放整齐、有序，容易寻找。

5.12每日实验结束后及时记录，清洁实验台面和地面，用紫外灯消毒实验台面及实验室。

报告单按时发送，原始记录存档清晰，以备查询。

5.13每天下班前要关好门窗、检查空调和仪器的电源是否关闭，处理好废弃物，内务整理完毕，关闭实验区。

6.人员培训计划：

6.1实验室主任（或其指定代理人）每年必须参加卫生部中心PCR室间质评总结会议。

6.2实验室主任督促指导本室工作人员通过继续教学或自学提高业务素质。

6.3实验人员参加卫生部临检中心或省（自治区）临检中心举办的临床核酸扩增培训班；

6.4安排未取得上岗培训合格证的工作人员在合适的时间内参加技术培训；

6.5实验室工作人员每1～2年至少参加1次临床基因扩增检验技术的省级或国家级继续教育项目，参加相关学术交流会议；

6.6定期对临床医护人员进行有关核酸扩增技术，标本采集、保存、运输知识的培训；

组织科室人员学习核酸扩增相关知识，质量管理手册；组织科室人员学习讨论工作过程中出现的相关问题，并提出可行的解决方案。

所引用图表：

附表02实验室工作人员一览表

人员培训计划及培训记录见“人员档案”

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

xxx第四医院

检验科

临床基因扩增实验室各区的工作制度

编号：

CG-JY-Pro-03

日期：

版本：

共3页

1.目的：

保证实验室的良好工作环境和实验结果的准确性。

2.负责人：

xxx

3.程序：

实验室分标本接收区和三个隔离区:

试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增分析区。

进入各区严格按照单一方向进行，即试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增、分析区。

各区及其设备、物品必须有明确的标记，严禁混用。

3.1试剂贮存和准备区

3.1.1实验人员进入该区穿专用白色工作服，及专用的工作鞋或使用一次性鞋套，操作中须戴手套。

3.1.2使用带有本区标识的记录本、纸和笔，每项记录书写工整详细。

3.1.3记录实验室温度和相对湿度，绘制冷柜温度图，打开排风扇，提前开启洁净工作台紫外灯和风机组工作15-30分钟。

3.1.4所使用的离心管、吸头等需事先经高温高压灭菌处理，使用时应在消毒有效期内。

3.1.5清点库存试剂，检查是否有过期或将近到期的试剂，作报废处理或排列优先使用，避免浪费；取出当天实验须使用或配制的试剂，其余试剂要立即收好放回冷柜内，然后记录试剂的详细保存情况。

3.1.6在洁净工作台内配制试剂，将准备好的试剂分装到PCR反应管中，放入专用的试剂管架中，填写工作流程表及相关仪器使用维护记录表，还原实验台面，将本区所有废弃物分类装入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋并记录。

3.1.7准备结束后，清洁实验台及地面，打开紫外灯消毒30～60分钟并记录。

3.1.8将试剂管架、工作流程表及本区垃圾带出实验室，白色工作服留在本区。

3.2标本制备区

3.2.1实验人员进入该区换上专用蓝色工作服、及专用的工作鞋或使用一次性鞋套，戴手套，手套在实验过程中疑有污染应立即更换。

3.2.2使用带有本区标识的记录本、纸和笔，每项记录，书写工整详细。

3.2.3将带入本区的试剂放入冰箱冷藏室试剂存放专区暂存。

记录实验室温度、相对湿度和水浴箱温度，绘制冰箱温度图，打开排风扇，开启生物安全柜20分钟后使用。

3.2.4取出冰箱内待测标本，并将冰箱内一周前的已测标本取出，丢入废液垃圾桶，然后记录标本的保存情况。

3.2.5在生物安全柜中按照操作说明书处理标本，将处理后的标本加入分装有试剂的相应PCR反应管中。

处理后的标本放入冰箱冷藏室标本存放专区暂存，实验结束后装入塑料袋内密封后放入生物垃圾袋内。

3.2.6填写工作流程表及相关仪器使用维护记录表，还原实验台面，关闭所有仪器。

3.2.7使用过的离心管、吸头须置于盛有10％84消毒液的废液桶中，实验结束后方丢入生物垃圾袋内，患者样品应按有生物传染性危险品对待。

3.2.8将本区所有废弃物分类装入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋并记录。

3.2.9本区应避免不必要的走动，实验结束后，清洁实验台及地面，打开紫外灯消毒30～60分钟并记录。

3.2.10将专用的试剂管架，工作流程表，检验申请单及垃圾带出本区，将蓝色工作服留在本区。

3.3扩增、分析区

3.3.1实验人员进入该区须更换专用粉红色工作服、及专用的工作鞋或使用一次性鞋套，戴手套。

3.3.2使用带有本区标识的记录本、纸和笔，每项记录，书写工整详细。

3.3.3记录实验室温度和相对湿度，打开排风扇，打开扩增仪预热30分钟。

3.3.4将标本制备区带入的反应管（已加样）上机扩增。

3.3.5扩增完成，保存检测结果后关机，立刻取出反应管装入塑料袋内密封后放入生物垃圾袋内。

分析并记录检测结果，填写工作流程表，绘制质控图，记录仪器使用时间和运行状态。

3.3.6专用的试剂管架放入75%的酒精中浸泡12小时以上。

3.3.7将本区所有废弃物分类装入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋并记录。

3.3.8严禁本区物品带至其他区，实验结束后清洁该区打开紫外灯照射30～60分钟，记录紫外灯使用情况。

3.3.9将检验申请单和垃圾带出实验室，粉红色工作服留在本室再离开实验室。

3.3.10检验报告单在科室联机系统上统一发放，原始报告单保存在科室统一存放处。

3.4标本接收区

本临床基因扩增检测实验室配备两名实验员，在以下描述中分别称为第一实验员和第二实验员。

3.4.1第一实验员已经进入实验区后，不能返回的情况下，第二实验员在此接收、传递标本，接待来访。

3.4.2第二实验员在收到标本，验收登记后，将标本通过缓冲区送入标本制备区。

3.4.3每天的标本登记记录，应书写工整详细。

3.4.4将本区所有废弃物装入垃圾袋，封口，交医院统一处理，在垃圾筒上套好新的垃圾袋。

3.4.5每天要打开紫外灯消毒45分钟，记录紫外灯使用情况。

所引用图表：

附表04.干式恒温器使用记录表

附表05.应急处理记录表

附表06.离心机使用记录表

附表09-1.检测后标本保存记录表

附表09-2.待检标本保存记录表

附表10.基因检测结果记录表

附表12.BIO-RADiCycler荧光定量扩增仪使用记录表

附表17-1.生物安全柜使用记录表

附表17-2.洁净工作台使用记录表

附表21实验室温度、湿度、水浴箱温度记录表

附表22垃圾处理记录表

附图3.冰箱温度记录图

附图2.室内质控图

基因检验报告单格式

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

xxx第四医院

检验科

内务管理制度

编号：

CG-JY-Pro-04

日期：

版本：

共4页

1.目的：

使实验室日常内务管理工作顺利进行，工作专人负责。

2.范围：

实验室相关人员

3.负责人：

xxx

4.制度：

本核酸扩增荧光检测实验室配备两名实验员，在以下描述中分别称为第一实验员和第二实验员。

实验室每周二安排做HBV-DNA、TB项目检测（定性），周五进行实验室的卫生清洁、离心管、吸头的高压灭菌及仪器的维护保养等工作。

4.1标本接收区内务管理制度

4.1.1设立标本接收区的主要目的：

接收待检测的标本，认真填写记录，并提供咨询服务。

4.1.2每天工作开始前，第二实验员进入该区，清洁台面及地面，将台面物品摆放整齐。

4.1.3检测标本核对无误后，填写可接收标本记录表，统计当天待检标本数，告知第一实验员后，将标本带入标本制备区进行检测（如当天不做，则放入专用冰箱中保存）。

4.1.4每天的登记记录，应书写工整详细，使用本室专用的记录本、纸和笔。

4.1.5每天下班前将本区所有废弃物装入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋并记录，将垃圾送至实验室外特定的实验垃圾区。

4.1.6每天要打开紫外灯消毒30～60分钟。

4.2试剂贮存和准备区内务管理制度

4.2.1第一实验员进入该区在缓冲间穿本区专用白色工作服、一次性鞋套,戴一次性手套，手套要经常更换。

4.2.2每天实验开始前，打开排风扇，提前开启洁净工作台紫外灯和风机组工作15-30分钟，记录实验室温度、湿度，清洁实验室（见实验室清洁制度）。

4.2.3配制10%84消毒液2000ml,分别倒入废液桶（不少于桶的1/5）和清洁盆里待用。

将清洁用品带入实验区后关闭隔离门，更换手套准备配制试剂。

4.2.4取出当天实验需配制和使用的试剂，绘制冷柜温度图，待试剂恢复室温后，按照试剂配制的标准操作规程准备当天实验所需的试剂，分装后放入专用的试剂管架，其余试剂要立即收好，做好标记放回冷柜内。

4.2.5本室的所有仪器参见“标准操作规程”并及时记录仪器状态，填写工作流程表。

每次实验记录，应使用本室专用的记录本和笔。

4.2.6实验中使用的离心管、吸头等应经过灭活无菌处理（应在消毒的有效期内），用后放入废液桶中。

4.2.7试剂准备完成后，关闭仪器电源，用10%84消毒液擦拭实验台和离心机，再用75%酒精擦拭，并用75%酒精擦拭加样枪、镊子、剪刀等物品，之后还原实验台面,开启洁净工作台紫外灯，将垃圾封口后更换新的垃圾袋并记录。

4.2.8打开隔离门，将配好的试剂、工作流程表、清洁用品、垃圾（封口后）带入缓冲区，开启实验区紫外灯，关闭隔离门。

整理好清洁用品，摘掉鞋套和手套放入生物垃圾袋内，洗手后脱去专用工作服，更换新手套，将实验区带出的垃圾和缓冲区的垃圾一同封口，更换新的垃圾袋。

将配好的试剂、工作流程表、垃圾带出该区，开启缓冲区紫外灯（约45分钟），关闭排风扇。

（注：

PCR其它室的用品不得带入本室）

4.2.9将配好的试剂、工作流程表经缓冲区交给标本制备区内的第二实验员，垃圾放入实验室外特定的实验垃圾区，由专人交医院统一处理。

然后进入扩增区开始工作。

4.3标本制备区内务管理制度

4.3.1第二实验员进入该区在缓冲区穿本区专用蓝色工作服、一次性鞋套，戴一次性手套，手套需常更换。

4.3.2每天实验开始前，打开排风扇，提前开启生物安全柜约20分钟后再使用，记录实验室温度、湿度、水浴箱温度，清洁实验室（见实验室清洁制度）。

4.3.3配制10%84消毒液2000ml,分别倒入废液桶（不少于桶的1/5）和清洁盆里待用。

将清洁用品带入实验区后关闭隔离门，更换手套后准备标本提取。

4.3.4取出当天要检测的标本，并将一周前已测的标本取出丢入废液桶中，填写标本保存记录表；核对待测标本后，按标准操作规程在生物安全柜中进行标本提取。

4.3.5本室的所有仪器参见“标准操作规程”并及时记录仪器状态，填写工作流程表。

每次实验记录，应使用本室专用的记录本和笔。

4.3.6实验中使用的离心管、吸头等应经过灭活无菌处理（应在消毒的有效期内），用后放入废液桶中。

4.3.7将带入本区的试剂放入冰箱冷藏室试剂存放专区暂存，待标本提取完成后将处理后的标本加入分装有试剂的相应PCR反应管中。

将当日已测的标本放入冰箱中标本保存专区冷冻保存，处理后的标本放入冰箱冷藏室提取后标本存放专区暂存，实验结束后装入塑料袋内密封后放入生物垃圾袋内。

4.3.8加样完成后，关闭仪器电源，用10%84消毒液擦拭实验台和离心机，再用75%酒精擦拭，并用75%酒精擦拭加样枪、镊子等物品，之后还原实验台面，开启生物安全柜紫外灯，关闭排风扇，将垃圾封口后更换新的垃圾袋并记录。

4.3.9打开隔离门，将加样后的试剂、工作流程表、检验申请单、清洁用品、垃圾（封口后）带入缓冲区，开启实验区紫外灯，关闭隔离门。

整理好清洁用品，摘掉鞋套和手套放入生物垃圾袋内，洗手后脱去专用工作服，更换新手套，将实验区带出的垃圾和缓冲区的垃圾一同封口，更换新的垃圾袋。

将加样后的试剂、工作流程表、检验申请单、垃圾带出该区，开启缓冲区紫外灯（约45分钟）。

4.3.10将加样后的试剂、工作流程表、检验申请单、经缓冲区交给基因扩增区内的第一实验员，垃圾放入实验室外特定的实验垃圾区，由专人交医院统一处理。

然后进入标本接收区处理当天实验开始后所收到的标本。

4.3.11本区应避免不必要的走动，PCR扩增后的物品不得带入本区。

4.4扩增区及产物分析区内务管理制度

4.4.1第一实验员进入该区在缓冲间穿本区专用粉红色工作服、一次性鞋套，实验中须戴一次性手套，手套常更换。

4.4.2每天实验开始前，打开排风扇，提前打开扩增仪预热30分钟，记录实验室温度、湿度，清洁实验室（见实验室清洁制度）。

4.4.3配制10%84消毒液1000ml,倒入清洁盆里，将清洁用品放入实验区待用。

4.4.4本室的所有仪器参见“标准操作规程”并及时记录仪器状态，每次实验记录，应使用本室专用的记录本和笔。

4.4.5将标本制备区带入的反应管（已加样）按照扩增区的标准操作规程上机扩增。

4.4.6专用的试剂管架放入75%的酒精中浸泡12小时以上。

将检验申请单上的内容填写到基因检测结果记录表中。

4.4.7扩增完成，保存检测结果后关闭扩增仪，立刻取出反应管装入塑料袋内密封后放入垃圾袋内。

分析并记录检测结果，关闭计算机，填写工作流程表，绘制质控图，记录仪器使用时间和运行状态。

（如发现室内质控品结果有问题时，则这次临床结果作废，并向科主任报告，认真分析原因，作好详细记录）。

4.4.8实验结束后，用10%84消毒液擦拭实验台，再用还75%酒精擦拭，还原实验台面，关闭排风扇，将垃圾封口后更换新的垃圾袋并记录。

4.4.9将检验申请单、清洁用品、垃圾带入缓冲区，开启实验区紫外灯，关闭隔离门。

整理好清洁用品，摘掉鞋套和手套放入生物垃圾袋内，洗手后脱去专用工作服，更换新手套，将实验区带出的垃圾和缓冲区的垃圾一同封口，更换新的垃圾袋。

将检验申请单、垃圾带出该区，开启缓冲区紫外灯（下午上班后关闭）。

4.4.10检验报告单在科室联机系统上统一发放，要认真核对检验结果，仔细填好化验单，作好签名。

原始报告单保存在科室统一存放处。

4.4.11PCR扩增室的物品不得带入扩增前区。

注：

当天实验结束后，由第二实验员依次进入各区关闭紫外灯，检查水电、门窗后关闭实验室。

编写人

批准人

生效日期

xxx

xxx

xxx第四医院

检验科

实验室清洁制度

编号：

CG-JY-Pro-05

日期：

版本：

共2页

1.目的：

保证实验室清洁工作顺利进行

2.范围：

实验室地面、台面及仪器等

3.负责人：

xxx

4.程序:

4.1实验台面和地面清洁

4.1.1每次实验开始、结束后做好清洁工作并记录，各区的清洁工具不得混用。

4.1.2实验开始时用清水擦拭；实验结束后，实验台面选用10％84消毒液擦拭，然后用75％的酒精清洁，实验室地面用10％84消毒液清洁。

清洁完成后，用紫外灯照射消毒30～60分钟，同时可移动紫外灯照射实验台面45分钟。

4.1.3实验操作过程中出现血液不慎泄漏至实验台面，应立即停止实验，用10%的84消毒液浸住污染区域，再用滤纸片覆盖30分钟左右，然后用75％酒精反复清洗，再用清水擦拭；必要时紫外灯照射30～60分钟后方能开始实验。

4.2高速离心机清洁

4.2.1每次实验完毕后，先用10％84消毒液擦拭，然后用75％的酒精清洁，擦洗离心机内壁，待干后盖上机盖。

每周二用75％的酒精清洁离心机转头。

4.2.2如果离心时发现离心管破裂，必须先停止实验，将破裂管密封放入生物垃圾桶，用10%84消毒液擦拭消毒、再用75％酒精进行擦拭消毒，如必要需用移动紫外灯照射30～60分钟后才能开始实验。