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_。

18.因为核酸分子具有_ 

__、__ 

_,所以在___nm处有吸收峰,可用紫外分光光度计测定。

19.双链DNA热变性后,或在pH2以下,或在pH12以上时,其OD260______,同样条件下,单链DNA的OD260______。

20.DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈______。

21.DNA所在介质的离子强度越低,其熔解过程的温度范围愈___,熔解温度愈___,所以DNA应保存在较_____浓度的盐溶液中,通常为_____mol/L的NaCI溶液。

22.mRNA在细胞内的种类___,但只占RNA总量的____,它是以_____为模板合成的,又是_______合成的模板。

23.变性DNA的复性与许多因素有关,包括____,____,____,____,_____,等。

24.维持DNA双螺旋结构稳定的主要因素是_____,其次,大量存在于DNA分子中的弱作用力如_____,______和_____也起一定作用。

(三)选择题

1.在pH3.5的缓冲液中带正电荷最多的是:

A.AMP 

B.GMP 

C.CMP 

 

D.UMP

2.hnRNA是下列哪种RNA的前体?

A.tRNA 

B.rRNA 

C.mRNA 

D.SnRNA

3.决定tRNA携带氨基酸特异性的关键部位是:

A.–XCCA3`末端 

B.TψC环;

C.DHU环 

D.额外环 

E.反密码子环

4.根据Watson-Crick模型,求得每一微米DNA双螺旋含核苷酸对的平均数为:

:

A.25400  

B.2540 

C.29411 

D.2941 

E.3505

5.构成多核苷酸链骨架的关键是:

A.2′3′-磷酸二酯键 

B.2′4′-磷酸二酯键 

C.2′5′-磷酸二酯键 

D.3′4′-磷酸二酯键 

E.3′5′-磷酸二酯键

6.与片段TAGAp互补的片段为:

A.AGATp 

B.ATCTp 

C.TCTAp 

D.UAUAp

7.含有稀有碱基比例较多的核酸是:

A.胞核DNA 

B.线粒体DNA 

C.tRNA 

D.mRNA

8.真核细胞mRNA帽子结构最多见的是:

A.m7APPPNmPNmP 

B.m7GPPPNmPNmP 

C.m7UPPPNmPNmP 

D.m7CPPPNmPNmP 

E.m7TPPPNmPNmP

9. 

DNA变性后理化性质有下述改变:

A.对260nm紫外吸收减少 

B.溶液粘度下降

C.磷酸二酯键断裂 

D.核苷酸断裂

10.双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致:

A.A+G 

B.C+T 

C.A+T 

D.G+C 

E.A+C

11.下列对于环核苷酸的叙述,哪一项是错误的?

A.cAMP与cGMP的生物学作用相反 

B.重要的环核苷酸有cAMP与cGMP

C.cAMP是一种第二信使 

D.cAMP分子内有环化的磷酸二酯键

12.真核生物mRNA的帽子结构中,m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基连接,连接方式是:

A.2′-5′ 

B.3′-5′ 

C.3′-3′ 

D.5′-5′ 

E.3′-3′

(四)是非判断题

()1.DNA是生物遗传物质,RNA则不是。

()2.脱氧核糖核苷中的糖环3’位没有羟基。

()3.真核生物成熟mRNA的两端均带有游离的3’-OH。

()4.核酸的紫外吸收与溶液的pH值无关。

()5.生物体的不同组织中的DNA,其碱基组成也不同。

()6.核酸中的修饰成分(也叫稀有成分)大部分是在tRNA中发现的。

()7.DNA的Tm值和AT含量有关,AT含量高则Tm高。

()8.真核生物mRNA的5`端有一个多聚A的结构。

()9.DNA的Tm值随(A+T)/(G+C)比值的增加而减少。

()10.B-DNA代表细胞内DNA的基本构象,在某些情况下,还会呈现A型、Z型和三股螺旋的局部构象。

()11.DNA复性(退火)一般在低于其Tm值约20℃的温度下进行的。

()12.用碱水解核酸时,可以得到2’和3’-核苷酸的混合物。

()13.生物体内,天然存在的DNA分子多为负超螺旋。

()14.mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。

()15.tRNA的二级结构中的额外环是tRNA分类的重要指标。

()16.对于提纯的DNA样品,测得OD260/OD280<

1.8,则说明样品中含有RNA。

()17.基因表达的最终产物都是蛋白质。

()18.两个核酸样品A和B,如果A的OD260/OD280大于B的OD260/OD280,那么A的纯度大于B的纯度。

(五)简答题

1.将核酸完全水解后可得到哪些组分?

DNA和RNA的水解产物有何不同?

2.对一双链DNA而言,若一条链中(A+G)/(T+C)=0.7,则:

(1)互补链中(A+G)/(T+C)=?

(2)在整个DNA分子中(A+G)/(T+C)=?

(3)若一条链中(A+T)/(G+C)=0.7,则互补链中(A+T)/(G+C)=?

(4)在整个DNA分子中(A+T)/(G+C)=?

3.DNA热变性有何特点?

Tm值表示什么?

4.在pH7.0,0.165mol/LNaCl条件下,测得某一DNA样品的Tm为89.3℃。

求出四种碱基百分组成。

5.核酸分子中是通过什么键连接起来的?

6.DNA分子二级结构有哪些特点?

7.在稳定的DNA双螺旋中,哪两种力在维系分子立体结构方面起主要作用?

8.简述tRNA二级结构的组成特点及其每一部分的功能。

9.用1mol/L的KOH溶液水解核酸,两类核酸(DNA及RNA)的水解有何不同?

10.如果人体有1014个细胞,每个体细胞的DNA量为6.4×

109个碱基对。

试计算人体DNA的总长度是多少?

是太阳-地球之间距离(2.2×

109公里)的多少倍?

答案

1. 

Watson-Crick;

1953

2. 

核苷酸

3. 

2’

4. 

细胞核;

细胞质

5. 

β;

糖苷;

磷酸二酯键

6. 

7. 

单链;

双链

8. 

m7G;

polyA;

m7G识别起始信号的一部分;

polyA对mRNA的稳定性具有一定影响

9. 

cAMP;

cGMP;

第二信使;

3’;

5’

10. 

反向平行、互补

11. 

胸腺嘧啶

12. 

3.4nm;

10;

36°

13. 

大;

14. 

退火

15. 

mRNA;

tRNA

16. 

三叶草;

倒L型;

CCA;

携带活化了的氨基酸

17. 

增加;

下降;

升高;

丧失

18. 

嘌呤;

嘧啶;

260

19. 

不变

20. 

21. 

宽;

低;

高;

1

22. 

多;

5%;

DNA;

蛋白质

23. 

样品的均一度;

DNA的浓度;

DNA片段大小;

温度的影响;

溶液离子强度

24. 

碱基堆积力;

氢键;

离子键;

范德华力

1.C:

在pH3.5的缓冲液中,C是四种碱基中获得正电荷最多的碱基。

2.C:

hnRNA是核不均一RNA,在真核生物细胞核中,为真核mRNA的前体。

3.E:

tRNA的功能是以它的反密码子区与mRNA的密码子碱基互补配对,来决定携带氨基酸的特异性。

4.D:

根据Watson-Crick模型,每对碱基间的距离为0.34nm,那么1μmDNA双螺旋平均含有1000nm/0.34nm个核苷酸对数,即2941对。

5.E:

核苷酸是通过3`5`-磷酸二酯键连结成多核苷酸链的。

6.C:

核酸是具有极性的分子,习惯上以5’→3’的方向表示核酸片段,TAGAp互补的片段也要按5’→3’的方向书写,即TCTAp。

7.C:

tRNA含有稀有碱基比例较多的核酸。

8.B:

真核细胞mRNA帽子结构最多见的是通过5’,5’-磷酸二酯键连接的甲基鸟嘌呤核苷酸,即m7GPPPNmP。

9.B:

核酸的变性指核酸双螺旋区的氢键断裂,变成单链的无规则的线团,并不涉及共价键的断裂。

一系列物化性质也随之发生改变:

粘度降低,浮力密度升高等,同时改变二级结构,有时可以失去部分或全部生物活性。

DNA变性后,由于双螺旋解体,碱基堆积已不存在,藏于螺旋内部的碱基暴露出来,这样就使得变性后的DNA对260nm紫外光的吸光率比变性前明显升高(增加),这种现象称为增色效应。

因此判断只有B对。

10.D:

因为G≡C对比A=T对更为稳定,故G≡C含量越高的DNA的变性是Tm值越高,它们成正比关系。

11. 

A:

在生物细胞中存在的环化核苷酸,研究得最多的是3’,5’-环腺苷酸(cAMP)和3’,5’-环鸟苷酸(cGMP)。

它们是由其分子内的磷酸与核糖的3’,5’碳原子形成双酯环化而成的。

都是一种具有代谢调节作用的环化核苷酸。

常被称为生物调节的第二信使。

12.D:

参照选择题8。

1.错:

RNA也是生命的遗传物质。

2.错:

脱氧核糖核苷中的糖环2’位没有羟基。

3.对:

真核生物成熟mRNA的5’为帽子结构,即m7G(5’)PPP(5’)Nm-,因此两5’端也是3’-OH。

4.错:

核酸的紫外吸收与溶液的pH值有关。

5.错:

生物体的不同组织中的DNA,其碱基组成也不同。

6.对:

核酸中的修饰成分(也叫稀有成分)大部分是在tRNA中发现的。

7.错:

DNA的Tm值和GC含量有关,GC含量高则Tm高。

8.错:

真核生物mRNA的3`端有一个多聚A的结构。

9.对:

(G+C)含量减少,DNA的Tm值减少,(A+T)/(G+C)比值的增加。

10.对:

在细胞内,B-DNA代表DNA的基本构象,但在不同某些情况下,也会呈现A型、Z型和三股螺旋的局部构象。

11.对:

DNA复性(退火)一般在低于其Tm值约20~25℃的温度下进行的。

12.对:

用碱水解核酸时,先生成2’,3’-环核苷酸,再水解为2’或3’-核苷酸。

13.对:

生物体内,负超螺旋DNA容易解链,便于进行复制、转录等反应。

14.错:

mRNA是细胞内种类最多、但含量很低的RNA。

细胞中含量最丰富的RNA是rRNA。

15.对:

不同tRNA中额外环大小差异很大,因此可以作为tRNA分类的重要指标。

16.错:

对于提纯的DNA样品,如果测得OD260/OD280<

1.8,则说明样品中有蛋白质。

17.错:

基因表达的最终产物可以是蛋白质或RNA。

18.错:

核酸样品的纯度可以根据样品的OD260/OD280的比值判断,纯的DNA样品OD260/OD280=1.8,纯的RNA样品OD260/OD280=2.0。

(五)问答题及计算题(解题要点)

1.答:

核酸完全水解后可得到碱基、戊糖、磷酸三种组分。

DNA和RNA的水解产物戊糖、嘧啶碱基不同。

2.答:

(1)设DNA的两条链分别为α和β,那么:

A=βT,Tα=Aβ,Gα=Cβ,:

Cα=Gβ,

因为,(Aα+Gα)/(Tβ+Cβ)=(Aα+Gα)/(Aβ+Gβ)=0.7

所以,互补链中(Aβ+Gβ)/(Tβ+Cβ)=1/0.7=1.43

(2)在整个DNA分子中,因为A=T,G=C,

所以,A+G=T+C,(A+G)/(T+C)=1

(3)假设同

(1),则

Aα+Tα=Tβ+ 

Aβ,Gα+Cα=Cβ+Gβ,

所以,(Aα+Tα)/(Gα+Cα)=(Aβ+Tβ)/(Gβ+Cβ)=0.7

(4)在整个DNA分子中

(Aα+Tα+Aβ+Tβ)/(Gα+Cα+Gβ+Cβ)=2(Aα+Tα)/2(Gα+Cα)=0.7

3.答:

将DNA的稀盐溶液加热到70~100℃几分钟后,双螺旋结构即发生破坏,氢键断裂,两条链彼此分开,形成无规则线团状,此过程为DNA的热变性,有以下特点:

变性温度范围很窄,260nm处的紫外吸收增加;

粘度下降;

生物活性丧失;

比旋度下降;

酸碱滴定曲线改变。

Tm值代表核酸的变性温度(熔解温度、熔点)。

在数值上等于DNA变性时摩尔磷消光值(紫外吸收)达到最大变化值半数时所对应的温度。

4.答:

为(G+C)%=(Tm–69.3)×

2.44×

%

=(89.3-69.3)×

%=48.8%

(A+T)%=1-48.8%=51.2%

G=C=24.4%,A=T=25.6%

5.答:

核酸分子中是通过3’,5’-磷酸二酯键连接起来的。

6.答:

按Watson-Crick模型,DNA的结构特点有:

两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕;

碱基位于结构的内侧,而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧,通过磷酸二酯键相连,形成核酸的骨架;

碱基平面与轴垂直,糖环平面则与轴平行。

两条链皆为右手螺旋;

双螺旋的直径为2nm,碱基堆积距离为0.34nm,两核酸之间的夹角是36°

,每对螺旋由10对碱基组成;

碱基按A=T,G≡C配对互补,彼此以氢键相连系。

维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力;

双螺旋结构表面有两条螺形凹沟,一大一小。

7.答:

在稳定的DNA双螺旋中,碱基堆积力和碱基配对氢键在维系分子立体结构方面起主要作用。

8.答:

tRNA的二级结构为三叶草结构。

其结构特征为:

(1)tRNA的二级结构由四臂、四环组成。

已配对的片断称为臂,未配对的片断称为环。

(2)叶柄是氨基酸臂。

其上含有CCA-OH3’,此结构是接受氨基酸的位置。

(3)氨基酸臂对面是反密码子环。

在它的中部含有三个相邻碱基组成的反密码子,可与mRNA上的密码子相互识别。

(4)左环是二氢尿嘧啶环(D环),它与氨基酰-tRNA合成酶的结合有关。

(5)右环是假尿嘧啶环(TψC环),它与核糖体的结合有关。

(6)在反密码子与假尿嘧啶环之间的是可变环,它的大小决定着tRNA分子大小。

9.答:

不同。

RNA可以被水解成单核苷酸,而DNA分子中的脱氧核糖2’碳原子上没有羟基,所以DNA不能被碱水解。

10.答:

(1)每个体细胞的DNA的总长度为:

6.4×

109×

0.34nm=2.176×

109nm=2.176m

(2)人体内所有体细胞的DNA的总长度为:

2.176m×

1014=2.176×

1011km

(3)这个长度与太阳-地球之间距离(2.2×

109公里)相比为:

2.176×

1011/2.2×

109=99倍

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