版高考生物一轮浙江选考总复习讲义第九单元 生物技术实践 第32讲Word文档下载推荐.docx
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25~30℃/18~25℃
30~35℃
氧气
前期需氧,后期不需氧
一直需氧
发酵时间
2~3d/10~12d
7~8d
联系
酒精发酵为醋酸发酵提供营养物质(乙醇),制作流程如下:
→
1.(2017·
学军中学期末)下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。
下列相关叙述中,错误的是( )
A.根据图1可知,利用葡萄制作果醋时,必须先进行酒精发酵然后再进行果醋发酵
B.冲洗葡萄时不能次数过多,否则果酒的制作会失败
C.图2的装置中排气口弯曲可防止被空气中的杂菌污染
D.制作果酒要关闭充气口、打开排气口,制作果醋时充气口和排气口都要打开
答案 A
解析 图1中的流程是酵母菌发酵产生果酒及醋化醋杆菌利用果酒发酵产生果醋的过程,但醋化醋杆菌也可以在糖源和氧气充足的条件下直接利用糖类进行果醋发酵,A项错误;
个人用简易装置制作果酒时,所利用的酵母菌来自葡萄皮的表面,所以不能将葡萄冲洗次数过多,以免冲洗掉野生型酵母菌,B项正确;
图2中的排气口弯曲可避免被空气中的杂菌污染,C项正确;
由于酵母菌在需氧呼吸阶段利用的氧气来自装置中的空气,且厌氧呼吸阶段需要保持无氧状态,所以无需打开充气口,而发酵过程中会有二氧化碳产生,所以要打开排气口;
醋化醋杆菌属于需氧菌,所以要始终将充气口打开,D项正确。
2.如图为果酒和果醋的制作流程,请回答下列问题:
(1)清洗葡萄时应特别注意不能反复冲洗,以防止。
(2)从自然菌样中筛选较理想的醋化醋杆菌进行纯化培养,通常采用(方法)接种,接种之前要对接种工具进行,避免接种工具上可能存在的微生物污染培养基。
(3)果酒的制作离不开酵母菌,在酵母菌的酒精发酵过程中,通常将温度控制在。
由果酒转变成果醋的制作时,需要改变的环境条件是和温度控制在30~35℃。
写出由果酒酿制成果醋过程的总反应式:
。
(4)若果汁中含有醋化醋杆菌,在果酒发酵旺盛时,醋化醋杆菌(填“能”或“不能”)将果汁中的糖发酵为醋酸,理由:
(5)在用果汁制作果酒的过程中,发酵瓶溶液中pH的变化是。
A.增大B.不变
C.减小D.先减小后增大
答案
(1)菌种流失
(2)划线分离法(或涂布分离法) 灼烧(灭菌)处理 (3)25~30℃ 有氧(通入无菌空气或通入氧气) C2H5OH+O2―→CH3COOH+H2O (4)不能 在果酒发酵旺盛时,发酵环境中无氧 (5)C
解析
(1)果酒制作中利用的酵母菌来自葡萄皮上的野生型酵母菌,清洗葡萄时应特别注意不能反复冲洗,以防止菌种流失。
(2)从自然菌样中筛选较理想的醋化醋杆菌进行纯化培养,通常采用划线分离法或涂布分离法接种,接种之前要对接种工具进行灼烧灭菌处理,避免接种工具上可能存在的微生物污染培养基。
(3)果酒的制作离不开酵母菌,在酵母菌的酒精发酵过程中,通常将温度控制在25~30℃,醋化醋杆菌是需氧菌,因此由果酒转变成果醋的制作时,需要改变的环境条件是通入氧气。
由果酒酿制成果醋过程的总反应式为:
C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O。
(4)若果汁中含有醋化醋杆菌,在果酒发酵旺盛时,醋化醋杆菌不能将果汁中的糖发酵为醋酸,因为果酒发酵是在缺氧环境中进行的,而醋化醋杆菌是好氧细菌,果酒发酵的缺氧环境能抑制醋化醋杆菌生长。
(5)在用果汁制作果酒的过程中,由于产生C2H5OH的同时产生CO2,因此发酵瓶溶液中的pH减小。
发酵条件的控制
(1)酵母菌的繁殖需大量氧气,而发酵过程进行厌氧呼吸,故果酒制作的前期应通入氧气,而后期应保证严格的无氧环境。
(2)果醋制作过程中要求始终通氧,缺氧时醋化醋杆菌的生长、增殖都会受到影响,醋酸的生成也会受到影响。
考点二 泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定
1.泡菜的制作
(1)菌种:
主要是假丝酵母和乳酸菌。
(2)原理:
在无氧条件下,微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸和醇类物质等。
(3)制作流程
2.亚硝酸盐的测定
(1)测定原理
亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应,这一产物再与N1萘基乙二胺偶联,形成紫红色产物,可用光电比色法定量测定。
(2)亚硝酸盐的定量测定流程
①样品处理:
泡菜25g制匀浆过滤后调pH到8.0→加25mL硫酸锌溶液→加氢氧化钠溶液至产生白色沉淀→水浴加热至60°
C→过滤取滤液和洗涤液定容至500mL。
②测定:
10mL样品溶液+4.5mL氯化铵缓冲液+2.5mL60%乙酸溶液+5mL显色液→定容至25mL→暗处静置25min→在550nm处测定光密度值(以10mL水为空白对照)。
③标准曲线的绘制:
以亚硝酸钠质量为横坐标,以光密度值(OD值)为纵坐标,绘制标准曲线。
④计算:
公式:
X1=
X1:
样品中亚硝酸盐含量,单位mg/kg;
m1:
样品质量,单位g;
m2:
通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量,单位μg;
V1:
样品处理液总体积;
V2:
测定用样品液体积。
3.泡菜制作的关键点
(1)防止杂菌污染:
每次取样用具要洗净,要迅速封口。
(2)氧气需求
①泡菜坛要选择气密性好的容器,以创造无氧环境,有利于乳酸菌发酵,防止蔬菜腐烂。
②泡菜坛内要注满水,以保证乳酸菌发酵所需要的无氧环境,并注意在发酵过程中经常补水。
(3)温度:
发酵过程温度控制在室温即可,最好在26~36℃。
温度过高,则易滋生杂菌;
温度过低,则发酵时间延长。
1.如何营造泡菜制作中的“无氧环境”?
提示
(1)选择的泡菜坛要密封性好;
(2)加入蔬菜后要注入煮沸冷却的盐水,使盐水没过全部菜料;
(3)盖上坛盖后要在坛盖边沿的水槽中注满清水。
2.在泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量有怎样的变化规律?
为什么要测定亚硝酸盐的含量?
提示 在泡菜制作过程中,亚硝酸盐的含量先增加后减少。
测定亚硝酸盐含量的目的是掌握取食泡菜的时机。
3.热图解读:
下表中甲~丙为泡菜、果醋、果酒等发酵食品的制作装置图,请据图分析:
食品
①
②
③
主要
④
⑤
⑥
制作装
置或操
作步骤
(1)图中①~③分别是哪种发酵食品?
提示 ①-果酒、②-果醋、③-泡菜。
(2)图中④~⑥分别是哪种菌种?
分别是真核生物还是原核生物?
提示 ④—酵母菌、⑤—醋化醋杆菌、⑥—乳酸菌,其中酵母菌为真核生物,醋化醋杆菌、乳酸菌为原核生物。
(3)甲~丙装置或者步骤是否存在缺陷?
试具体分析指出。
提示 甲装置中排气管不应插入到发酵液内。
(4)说明丙装置中“放水”的作用。
提示 装置中“放水”的作用在于为泡菜坛营造无氧环境。
(5)下图为丙装置乳酸菌的数量、乳酸和亚硝酸盐的含量随时间变化的曲线,请将三幅图分别填上“纵轴标识”。
①~③纵轴标识依次为乳酸菌数量、亚硝酸盐含量、乳酸含量。
嘉兴模拟)家庭中制作泡菜的方法:
新鲜的蔬菜经过整理、清洁后,放入彻底清洗并用白酒擦拭过的泡菜坛中,然后向坛中加入盐水、香辛料及一些“陈泡菜水”,密封后置于温度适宜的地方。
下列与此过程相关的叙述,不正确的是( )
A.用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒
B.加入“陈泡菜水”的作用是提供乳酸菌菌种
C.制作泡菜的过程中,有机物的干重和种类将减少
D.若制作的泡菜咸而不酸最可能的原因是大量的食盐抑制了乳酸菌的发酵过程
答案 C
解析 用白酒擦拭泡菜坛的目的是消毒,A正确;
“陈泡菜水”中含有大量的乳酸菌菌种,制作泡菜时加入“陈泡菜水”可以实现接种乳酸菌菌种的目的,B正确;
制作泡菜的过程中,由于呼吸作用的消耗,有机物的干重将减少,但坛内有机物的种类将增加,C错误;
若放入的食盐过多,抑制了乳酸菌的发酵,就会使制作的泡菜“咸而不酸”,D正确。
2.(2017·
宁波模拟)下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图,请据图回答下列问题:
(1)制作泡菜时加入已腌制过的泡菜汁的目的是
(2)泡菜在腌制时,抑制有害菌繁殖是关键。
下列与此无关的叙述是( )
A.白菜在开水中浸1min,热水洗坛内壁两次
B.加入适量糖和调味品
C.坛口用水封好,防止空气进入
D.加入适量的盐水、白酒
(3)亚硝酸盐与显色剂会生成色产物。
对亚硝酸盐的定量测定可以用法测出光密度值,利用预先建立的估算出样品中的亚硝酸盐含量。
在进行样品测定时,要取等量水进行同样的测定,目的是。
分析下图的曲线可知,食用泡菜的最佳时间是点。
(4)若要分离出变质泡菜中的细菌,下列叙述错误的是( )
A.取变质泡菜汁用无菌水配制成悬液
B.用划线分离法更易获得单菌落
C.需要配制合适的培养基
D.培养用具、培养基必须是无菌的
答案
(1)接种已经扩增的发酵菌,加速发酵过程
(2)B
(3)紫红 光电比色 标准曲线 作为空白对照 C (4)B
1.泡菜腌制的注意事项
(1)材料的选择及用量
①蔬菜应新鲜,若放置时间过长,亚硝酸盐含量增多。
②清水和盐的质量比为4∶1,盐水要煮沸后冷却。
煮沸有两大作用,一是除去水中的O2,二是杀灭盐水中的其他微生物。
(2)防止杂菌污染:
(3)O2需求:
泡菜坛要选择透气性差的容器,泡菜坛坛盖边缘的凹槽内注满水,在发酵过程中经常补水,以创造无氧环境,有利于乳酸菌发酵,防止蔬菜腐烂。
(4)温度:
发酵过程温度控制在室温即可,温度过高易滋生杂菌,温度过低会使发酵时间延长。
2.泡菜腌制过程中,乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化
发酵
时期
乳酸菌数量
乳酸含量
亚硝酸盐含量
初期
少(有O2,乳酸菌活动受抑制)
少
增加(硝酸盐还原菌的作用)
中期
最多(乳酸抑制其他菌的活动)
积累、增多、pH下降
下降(硝酸盐还原菌受抑制,部分亚硝酸盐被分解)
后期
减少(乳酸继续积累,pH继续下降,抑制乳酸菌的活动)
继续增多,pH继续下降
下降至相对稳定(硝酸盐还原菌被完全抑制)
考点三 植物的组织培养
1.组织培养的概念
取一部分植物组织,在无菌的条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上,给予一定的温度和光照,使之产生愈伤组织,或进而生根发芽。
2.组织培养的原理
植物细胞的全能性。
3.培养基中加入的激素
(1)激素种类:
生长素和细胞分裂素,两者的摩尔浓度比决定组织是生根,还是生芽。
(2)激素的使用比例
比例
结果
细胞分裂素和生长素的比例高
诱导芽的生成
细胞分裂素和生长素的比例大致相等
愈伤组织继续生长而不分化
细胞分裂素和生长素的比例低
会趋于长根
4.实验中使用的激素
人工合成的萘乙酸(NAA)代替生长素,人工合成的苄基腺嘌呤(BA)代替细胞分裂素。
5.菊花的组织培养的实验内容
(1)发芽培养基和生根培养基的比较
①发芽培养基:
细胞分裂素摩尔浓度大于生长素摩尔浓度的培养基。
②生根培养基:
生长素摩尔浓度大于细胞分裂素摩尔浓度的培养基。
(2)实验内容
以菊花为材料进行组织培养,首先,用细胞分裂素相对较多和生长素相对较少的培养基(发芽培养基)进行培养,使其长出较多的丛状苗;
然后将丛状苗分株培养。
分株后,再移入含有较多生长素的培养基(生根培养基)中,使其生根;
将生根的苗从三角瓶中移至草炭土或蛭石中继续生长,2~3天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼,直到将罩全部打开处于自然湿度下为止;
苗健壮后再移至土中。
6.菊花的组织培养的实验步骤
(1)配制MS培养基:
由大量元素、微量元素和有机成分组成。
(2)取外植体:
在超净台上将无菌培养的菊花幼苗切段,每段至少有1张叶片。
(3)生芽培养:
在生芽培养基中放入2~3段幼茎切段,日光灯下保持18~25℃的温度培养,每天的光照时间不少于14.5h。
(4)生根培养:
2~3周后,将生长健壮的丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中,在上述条件下继续培养。
(5)适应锻炼:
将苗移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑料布保持80%以上的湿度,2~3天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼,直至将罩全部打开处于自然湿度下为止。
(6)定植:
将苗转移到土中培养。
(7)自然生长的茎进行组织培养的步骤:
可取一段茎在70%乙醇中浸泡10min,再放入5%次氯酸钠溶液中浸泡5min,然后用另一5%次氯酸钠溶液浸泡5min,最后在超净台中用无菌水清洗,将茎的切段培养在生芽培养基中。
1.生长素和细胞分裂素在植物组织培养中的作用
使用顺序不同,结果不同:
使用顺序
实验结果
先加生长素,后加细胞分裂素
有利于细胞分裂,但细胞不分化
先加细胞分裂素,后加生长素
细胞既分裂又分化
同时使用
分化频率提高
2.热图解读:
图甲是植物组织培养过程示意图,图乙是植物激素对愈伤组织分化影响的示意图。
据图回答下列问题:
(1)植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性。
(2)在图甲A过程中,为了有利于嫩枝组织细胞启动细胞分裂形成愈伤组织,常常需要在配制好的培养基中添加植物激素。
嫩枝组织细胞接种后2~5d时,若发现其边缘局部污染,原因可能是嫩枝组织细胞消毒不彻底。
(3)在图甲过程B中,若愈伤组织没有形成根,但分化出了芽,其原因可能是培养基中生长素较少,细胞分裂素较多;
若要获得更多的愈伤组织,培养基中两种激素的含量应该是细胞分裂素的量中等,生长素较少。
(4)切取若干经光照一段时间后的幼苗芽尖处的组织块,消毒后,接种到诱导再分化的培养基中培养,该培养基中两种植物激素浓度相同。
从理论上分析,分化的结果是生根;
原因是培养基中细胞分裂素与生长素的浓度相等,而经光照后的幼苗芽尖处组织块中含较多生长素,因此组织块处的细胞分裂素相对较少,生长素相对较多,故诱导生根。
3.在植物组织培养再分化阶段中,逐渐改变培养基中植物激素X和植物激素Y的浓度比,细胞群的变化情况如下图所示。
若培养基中植物激素X的浓度为a、植物激素Y的浓度为a+0.2,则细胞群分化的结果最可能是C试管,分析图可知,植物激素X的浓度小于植物激素Y的浓度时,有利于根的分化。
1.为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响,某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA,配制成四种培养基(见下表),灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体,在适宜条件下培养一段时间后,统计再生丛芽外植体的比率(m),以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n),结果如下表。
培养基编号
浓度/mg·
L-1
m/%
n/个
6-BA
IAA
1
0.5
76.7
3.1
2
0.1
77.4
6.1
3
0.2
66.7
5.3
4
60.0
5.0
请回答下列问题:
(1)按照植物的需求量,培养基中无机盐的元素可分为和两类。
上述培养基中,6-BA属于类生长调节剂。
(2)在该实验中,自变量是,因变量是,自变量的取值范围是。
(3)从实验结果可知,诱导丛芽总数最少的培养基是号培养基。
(4)为了诱导该菊花试管苗生根,培养基中一般不加入(填“6-BA”或“IAA”)。
答案
(1)大量元素 微量元素 细胞分裂素
(2)IAA浓度 再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n) 0~0.5mg·
L-1 (3)1 (4)6-BA
解析 植物组织培养所用培养基的主要成分有无机盐(大量元素和微量元素)、有机物,常常还需要添加植物激素。
根据实验结果可知,本实验所用培养基中加入的6-BA属于细胞分裂素类生长调节剂。
根据表中所列数据及实验结果可知,本实验自变量是IAA浓度,其取值范围是0~0.5mg·
L-1,因变量是再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)。
当生长素用量与细胞分裂素用量的比值高时,有利于根的分化,所以为了诱导菊花试管苗生根,培养基中一般不加入6-BA。
温州选考模拟)铁皮石斛是一种名贵的中药材,有生津养胃、降血糖和增强免疫力等作用,有效成分为石斛多糖、石斛碱等,温州雁荡山素有“中国铁皮石斛之乡”的美誉。
(1)用优良品种自然生长的茎快速繁殖铁皮石斛时,给茎消毒时无需使用的是(A.乙醇 B.无菌水 C.甘露醇 D.次氯酸钠)。
在细胞分裂素相对较多和生长素相对较少的培养基中培养茎的切段,待长出较多的,将其进行(处理)后再转入培养基中继续培养,直至长成幼苗。
这种通过组织培养技术快速繁殖植物的方法,也称为。
(2)研究发现,铁皮石斛的生长发育与其体内的内生菌密切相关。
为进一步研究内生菌的作用,需要大量内生菌进行相关实验。
分离内生菌时最好采用(A.G6玻璃砂漏斗过滤法 B.血细胞计数法 C.划线分离法 D.涂布分离法),再将纯化的内生菌转移到液体培养基中进行。
(3)研究发现,200mg/L浓度的卡那霉素能有效抑制铁皮石斛细胞的增殖与分化。
科学家欲利用卡那霉素,采用农杆菌转化法对现有铁皮石斛品种进行基因改良。
在基因工程操作中,导入受体细胞的分子应同时带有目的基因和基因,这样才能利用含有卡那霉素的培养基将成功导入目的基因的受体细胞筛选出来。
(4)鉴定铁皮石斛的品质,可通过苯酚-浓硫酸法测定石斛多糖的含量。
其原理是:
石斛多糖水解成单糖并脱水生成糖醛衍生物后,与苯酚缩合生成橙黄色化合物,在490nm处测定光密度值,以不同浓度的葡萄糖溶液为标准溶液建立标准曲线,便可知道样品的石斛多糖含量。
这种方法类似于泡菜汁中含量的测定,称之为法。
(5)为高效提取石斛多糖,可在提取液中加入,以提高铁皮石斛的出汁率。
答案
(1)C 丛状苗 分株/分株培养 生根 植物克隆
(2)D 扩大培养 (3)重组DNA/重组质粒 卡那霉素抗性/抗卡那霉素 (4)亚硝酸盐 光电比色 (5)果胶酶/果胶酶和果胶甲酯酶/果胶酶和纤维素酶/果胶酶、果胶甲酯酶和纤维素酶
解析
(1)植物组织培养需要使用乙醇、次氯酸钠和无菌水。
细胞分裂素比例偏高,有利于生芽,将其分株后转入生根培养基。
这种快速繁殖植物的方法,称为植物克隆。
(3)重组DNA分子应具有目的基因和标记基因,标记基因据题意是卡那霉素抗性基因。
(5)为高效提取石斛多糖,可在提取液中加入纤维素酶和果胶酶,分解细胞壁,以提高出汁率。
模拟演练
1.某同学设计了如图所示的发酵装置来制作果酒、果醋,下列有关叙述错误的是( )
A.甲用来制作果酒,乙用来制作果醋
B.乙装置需要的温度条件高于甲
C.该装置便于发酵中产生气体的排出
D.甲、乙装置中排液管排出液体的pH都下降
解析 甲装置密闭,可用来进行酵母菌的发酵制作果酒,酒精进入乙装置中,在有氧条件下,可用来制作果醋,A项正确;
酵母菌的发酵温度一般为25~30℃,而醋化醋杆菌的最适生长温度为30~35℃,B项正确;
甲到乙、乙到丙流入的都是发酵液,甲装置中没有气体的排出口,该装置不便于发酵中产生气体的排出,C项错误;
甲装置中产生酒精和CO2,导致排出液体的pH下降;
乙装置将乙醇转变为醋酸,导致排出液体的pH也下降,D项正确。
2.下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法,不正确的是( )
A.植物组织培养中的关键性激素是生长素和细胞分裂素
B.先使用生长素,后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂和分化
C.先使用细胞分裂素,后使用生长素,细胞既分裂又分化
D.同时使用生长素和细胞分裂素时,两者摩尔浓度的比例影响植物细胞的发育方向
答案 B
解析 用于植物组织培养的培养基中除营养成分外,还需添加植物激素,一般包括生长素和细胞分裂素;
外植体脱分化、再分化的诱导方向取决于二者的比例。
先使用生长素,后使用细胞分裂素,有利于细胞分裂,但细胞不分化;
先使用细胞分裂素,后使用生长素,对细胞的分裂和分化均有利。
3.(2017·
绍兴模拟)某研究小组用梨酿制醋酸,具体流程如图所示,请回答下列问题:
(1)图中乙过程可加入酶,为证明该酶的效果,可分别取等量浑浊的梨汁和澄清的梨汁,各加入等量的,预计后者出现的沉淀物比较少。
(2)适宜条件下进行酒精发酵,发酵完毕的标志是,待沉淀后,可用(方法)将上清液(即果酒)取出。
若培养液酒精浓度超过时,酵母菌会死亡。
(3)用适宜方法获得优质醋化醋杆菌的菌种,若要扩大培养,适宜的培养基是( )
A.MS培养基
B.添加蔗糖的豆芽汁
C.含蛋白胨、酵母提取物、NaCl及其他适宜添加物的培养液
D.尿素、葡萄糖、K2HPO4、NaCl、酚红、琼脂糖配制的培养基
(4)下图表示不同醋化醋杆菌接种量(5%、10%、15%)与醋酸发酵的关系,据图判断,下列叙述中错误的是( )
A.发酵液中的醋化醋杆菌进行需氧呼吸
B.培养时间越长,培养液的pH越低
C.接种后20h,接种量为5%的醋酸产量最少,主要是因为发酵速度较慢
D.接种后70h,接种量为15%的醋酸产量最少,与菌体生长繁殖消耗较多营养物质有关
答案
(1)果胶 95%乙醇
(2)停止产生气泡 虹吸法 16% (3)C (4)B
解析 (