《免疫学检验》教学文档格式.docx
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1.掌握免疫学检验常用技术的原理、技术要点、应用及方法学评价。
2.掌握免疫学检验常用技术的测定方法。
3.掌握免疫学技术在免疫预防计划免疫、动植物检疫、健康相关产品免疫功能评价中的应用。
4.了解免疫学技术的最新进展及与其他学科的关系。
三、各章节内容及学时分配
第一章抗原抗体的纯化（2学时）
教学目的与要求
掌握抗原和抗体纯化方法的基本原理、方法评价和应用。
了解抗原抗体各种纯化方法的程序及分离物的选择。
教学内容
第一节盐析法
一、原理
二、常用中性盐
三、操作步骤
四、影响因素
五、方法评价与应用
第二节凝胶层析法
二、常用凝胶的种类和性质
四、方法评价与应用
第三节离子交换层析
二、常用离子交换剂的种类和性质
三、离子交换层析的程序
第四节亲和层析法
二、亲和层析载体与配基的选择
三、层析条件的选择
考核要求：
了解蛋白质提纯方法的程序及条件
掌握蛋白质提纯方法的原理
第二章免疫原与特异性抗体的制备（2学时）
教学目的及要求：
掌握人工免疫原的制备方法，免疫血清的制备方法，杂交瘤技术的原理及技术要点。
了解可溶性抗原的制备方法及单克隆抗体制备流程及应用。
教学内容：
第一节免疫原的制备
一、颗粒性抗原的制备
二、可溶性抗原的制备
三、人工免疫原的制备及佐剂
第二节免疫血清的制备
一、免疫动物的选择
二、确定免疫方案
三、动物采血法
四、免疫血清的分离与保存
第三节单克隆抗体的制备
一、杂交瘤技术的基本原理
二、单克隆抗体的制备要求
三、单克隆抗体的应用
了解：
1.颗粒性抗原、可溶性抗原的制备方法
2.单克隆抗体的制备流程
掌握：
1.人工免疫原的制备
2.免疫血清的制备方法
第三章沉淀反应与凝集反应（2学时）
掌握常用沉淀反应和凝集反应的原理及应用。
了解其他凝集技术类型、原理和应用。
第一节沉淀反应
一、免疫浓度测定
二、双向琼脂扩散试验
三、免疫电泳技术
第二节凝集反应
一、直接凝集反应
二、间接凝集反应
三、其他凝集技术
免疫浓度测定，其他凝集技术的原理及应用。
双向琼脂扩散试验、双免疫电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、间接血凝试验的原理及应用。
第四章溶血反应和补体结合试验
教学目的与要求：
掌握溶血反应体系及检测方法。
了解补体结合试验的原理、类型、方法和评价。
第一节溶血反应
一、溶血反应的检测试验
二、血清总补体溶血（CH50）测定。
第二节补体结合试验
一、类型与原理
二、试验方法及影响因素
三、方法的评价和应用
补体结合试验的类型、原理、方法评价及应用。
血清总补体溶血（CH50）测定。
第五章酶免疫技术（2学时）
掌握固相酶免疫测定的方法类型及原理，ELISA技术要点，了解其他酶免疫技术及应用。
第一节酶免疫技术的分类
第二节固相酶免疫测定
一、基本原理
二、方法类型和操作步骤
第三节ELISA技术要点
一、试剂准备
二、酶标记方法
三、酶标记物的纯化与鉴定
四、最适工作浓度的选择
第四节其他酶免疫技术
一、斑点-酶联免疫吸附试验
二、斑点酶免疫渗滤试验
三、免疫印记法
其他酶免疫技术的原理及应用
1.双抗体夹心法和间接法的原理
2.ELISA法的技术要点
第六章荧光免疫技术（1学时）
掌握荧光抗体技术的原理、技术方法及应用。
了解荧光抗体的制备方法及荧光免疫显微技术。
第一节荧光现象
第二节荧光抗体技术
二、荧光抗体技术方法
三、荧光抗体的制备
四、荧光免疫显微技术
五、应用
荧光抗体的制备及荧光免疫显微技术
荧光抗体技术的基本原理及技术方法。
第七章放射免疫技术（1学时）
掌握放射免疫测定的原理、方法、评价及应用。
了解免疫放射测定试验。
第一节放射免疫测定
二、测定方法
三、方法评价
四、应用
第二节免疫放射测定
二、技术类型
三、技术要点
考核要点：
免疫放射测定的原理、技术类型及技术要点。
放射免疫测定的原理、测定方法及应用。
第八章金免疫技术（2学时）
掌握金免疫测定技术的原理、技术类型及应用。
了解胶体金和免疫金的特性与制备。
了解金免疫组化技术的方法。
第一节胶体金与免疫金的制备
一、胶体金的特性及其制备
二、免疫金的特性及其制备
第二节金免疫测定技术
一、斑点金免疫渗滤试验
二、斑点金免疫层析试验
第三节金免疫组织化学技术
一、免疫金光镜染色技术
二、免疫金电镜染色技术
1.胶体金、免疫金的特性及制备方法。
2.免疫金（银）光镜染色技术的原理及方法。
斑点金免疫渗滤试验与斑点金免疫层析试验的原理、技术类型及方法。
第九章免疫细胞检测技术（3学时）
掌握免疫细胞分离纯化技术及评价免疫功能的相关试验原理、方法、结果判定。
第一节免疫细胞的分离与纯化
一、血液标本的采集
二、外周血液中白细胞的分离
三、外周血液中单个核细胞的分离
四、淋巴细胞及其亚群的分离纯化
五、吞噬细胞的分离
六、淋巴细胞的保存及活力测定。
第二节T淋巴细胞的检测
一、T淋巴细胞表面标志的检测
二、T淋巴细胞受体的检测
三、T淋巴细胞功能的检测
第三节B淋巴细胞的检测
一、B淋巴细胞表面抗原的检测
二、B淋巴细胞表面受体的检测
三、B淋巴细胞功能的体外检测
第四节自然杀伤细胞的检测
一、概述
二、NK细胞活性检测
三、测定NK细胞活性的卫生学意义
第五节吞噬细胞功能的检测
一、巨噬细胞吞噬功能的检测
二、巨噬细胞吞噬功能检测的卫生学意义
1.了解T淋巴细胞表面标志的检测方法及卫生学意义的评价。
2.了解T淋巴细胞E受体和IL-2受体的检测方法。
3.了解B淋巴细胞Sm2g受体及Fc受体的检测方法。
1.外周血液中单个核细胞、淋巴细胞及亚群分离纯化方法，淋巴细胞保存及活力测定方法。
2.T淋巴细胞功能检测方法。
3.B淋巴细胞功能检测的体外实验。
4.NK细胞活性检测方法及卫生学意义。
5.噬细胞功能的检测方法及卫生学意义。
第一十章免疫球蛋白测定（1学时）
掌握免疫球蛋白定量测定的方法参考值及应用评价。
了解免疫球蛋白定量的医学意义。
第一节免疫球蛋白定量的检测方法
一、常用检测方法。
二、参考值
第二节免疫球蛋白定量检测方法学评价及应用
第三节免疫球蛋白定量临床意义
一、血清Ig定量临床意义。
二、尿微量Ig定量临床意义。
三、脑脊液Ig定量临床意义。
血清Ig、尿微量Ig、脑脊液Ig定量检测的临床意义。
免疫球蛋白定量检测方法及参考值，方法评价及应用。
第十一章动植物病原体的免疫学检验（2学时）
掌握常见动植物疫病的免疫学检测方法。
了解进出口商品检疫的新进展。
第一节动物病原体的免疫学检验
一、炭疽的免疫学检验
二、鼻疽的免疫学检验
三、口蹄疫的免疫学检验
四、布鲁氏病的免疫学检验
五、狂犬病的免疫学检验
六、疯牛病的免疫学检验
七、禽流感的免疫学检验
第三节植物病原体的免疫学检验
一、植物细菌的免疫学检验
二、植物真菌的免疫学检验
三、植物病毒的免疫学检验
植物病原体的免疫学检验方法。
动物病原体的免疫学检验方法。
第十二章健康相关产品的免疫学检验（2学时）
掌握保健食品免疫学检验方法和评价标准及化妆品的免疫学检验方法。
了解健康相关产品中有毒有害物质免疫学检验方法及新进展。
第一节有毒有害物质的免疫学检验
一、有毒有害物质免疫学检验的技术要点。
二、有毒有害物质免疫学检测方法。
三、有毒有害物质免疫学检测方法的应用。
第二节化妆品的免疫学检验
第三节保健食品免疫学检验和评价
一、免疫学检验项目
二、免疫学检验方法
三、增强免疫功能结果判定与评价。
有毒有害物质的免疫学检验的技术要点、方法和应用。
保健食品免疫学检验项目、检验方法、结果判定及标价标准。
免疫学检验实验课教学大纲
一、实验目的与任务
免疫学检验实验课的教学目的是使学生掌握诸项试验的原理、基本要求、操作步骤，正确分析实验结果、了解各种影响因素以及在卫生检验工作中的应用。
通过实验课教学，培养学生认真、严谨的工作态度和实际动手操作能力，以适应检验工作的需要。
二、实验教学基本要求
1.掌握免疫学检验诸项试验的原理
2.掌握诸试验各种液体的配制方法
3.掌握必做实验的操作步骤、结果判定及影响因素。
4.了解诸项试验所需的仪器设备。
三、实验教材或指导书
《免疫学检验实习指导》人民卫生出版社2006年8月第一版
五、实验项目一览表
序号
实验项目
内容提要
实验
类型
学时
分配
主要仪器
设备
地点
备注
1
免疫球蛋白的分离纯化
盐析法
血清中的免疫球蛋白粗提
综合性
10
一组
（每学期选取3个实验项目）
2
凝胶过滤层析法（分离不同分子量大小的抗原）
层析柱
3
双向琼脂扩散
鉴定抗原和抗体纯度的定性分析
4
聚丙烯酰胺凝胶电泳
分离、鉴定血清中各类蛋白质
电泳仪、圆盘电泳槽
5
酶联免疫吸附实验
双抗体夹心法检验未知抗原
酶标仪、微量加样器、酶标测定板
6
免疫金（银）染色实验
免疫金标记抗体及检测抗原
超速离心机、显微镜、温箱、分光光度计
7
保健食品免疫功能评价，包括：
血清补体总活性测定（CH50法）
ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验（MTT法）
抗体生成细胞的检测（溶血空斑法）
小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验（滴片法）
测定血清总补体活性
测定淋巴细胞增殖数量
测定B细胞功能
测定巨噬细胞功能
96孔培养板（平底）、手术器械、CO2培养箱、酶标仪、721分光光度计、超净工作台、高压灭菌器、无菌滤器、恒温小浴箱、离心机、200目筛网、显微镜、计数器
二组
（每学期学生自主选取1个实验项目）
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