公开课动物细胞融合与单克隆抗体PPT资料.ppt

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,人鼠（想像图）,如何实现人、动物之间细胞的融合呢？

人工诱导,1.1动物细胞融合的概念,动物细胞融合（也称细胞杂交）：

是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。

物理法：

化学法：

生物法：

灭活的病毒（特有的方法）,原理：

（与植物细胞融合的基本原理相同）,离心、电激、振动,聚乙二醇（PEG）,细胞膜的流动性,灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面,细胞膜被病毒颗粒穿通,细胞膜连接,细胞融合，形成杂交细胞（细胞膜具有一定的流动性）,1.2动物细胞融合过程,保留融合活性,为什么灭活的病毒能作诱导剂？

灭活丧失感染性,1.3动物细胞融合技术的意义和应用,突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能,成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,意义：

应用：

制备单克隆抗体（最主要的应用）,从动物的血清中分离抗体,该法制备抗体的缺点：

如何解决这个问题呢？

抗体的传统生产方法,抗原,反复注射动物,产量低,纯度低,特异性差,灵敏度低,1975年的实验室,一个美丽的发现每个B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体,怎样大量获得单一抗体,进行无性繁殖（克隆）,体外培养的细胞不能无限增殖,？

癌细胞,但是,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞,一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞,动物细胞培养技术,动物细胞融合技术,单克隆抗体,你的设想,既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞,BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）,（一选）选择性培养基：

只有杂交瘤细胞才能存活,（二选）：

选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内培养,获得产生相应抗体的B细胞,2.2单克隆抗体的应用,诊断试剂最广泛应用准确、高效、简易、快速,单克隆抗体最主要的优点：

特异性强,灵敏度高,并能大量制备,“生物导弹”单克隆抗体药物单抗导向，药物为弹头,治疗疾病和运载药物,主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。

两个过程,动物细胞融合过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法灭活病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势,本节小结,重点,【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）A.离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（）A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息B.能无限增殖C.可形成新个体D.培养过程会贴壁,B,A,你掌握了吗？

【例3】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞,A,初试牛刀,【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）A将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体,B,初试牛刀,15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。

据图回答：

（1）该方案能达到预期效果吗？

。

原因是_。

（2）图中为过程，常用作为诱导剂。

该细胞继承了_，因此不仅能分泌_，还有本领。

不能,没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的B淋巴细胞,细胞融合,灭活病毒,双亲细胞的遗传物质,特异性抗体,大量增殖,制备单克隆抗体,（3）该方案的目的是_。

课后作业：

比较动、植物细胞杂交技术,谢谢,单克隆抗体:

单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体,