酶工程试题Word格式.docx
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有机相酶催化反应的特点包括：
（1）有利于疏水性底物的反应。
（2）可提高酶的热稳定性。
（3）可改变反应平衡移动方向。
（4）可控制底物专一性。
（5）可防止由水引起的副反应。
（6）可扩大反应pH值的适应性。
（7）酶和产物易于回收。
（8）可避免微生物污染。
有机相酶催化反应的应用：
手性药物的合成；
功能高分子的合成等。
[填空题]4简述酶分子定向进化的概念及定向进化的主要策略。
所谓酶分子定向进化，即人为创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制，在体外对基因进行随机突变，从一个或多个已经存在的亲本酶出发，经过基因的突变和重组，构建一个人工突变酶库，通过一定的筛选或选择方法最终获得预先期望的具有某些特性的进化酶。
定向进化的主要策略：
易错PCR技术、DNA改组技术（DNAshuffling）、外显子改组、体外随机引发重组、交错延伸技术。
[填空题]5酶分子修饰的常用方法包括哪些并简述其方法原理？
（1）金属离子置换修饰（采用某些二价金属离子取代酶分子中的金属离子，改变其特性）；
（2）大分子结合修饰（利用聚乙二醇等大分子与酶分子共价或非共价结合，降低酶的抗原性和提高稳定性）；
（3）肽链有限水解修饰（将酶分子多肽链的一部分水解，达到改变酶特性的目的）；
（4）酶蛋白侧链基团修饰（采用小分子化学修饰剂修饰酶蛋白的侧链基团）；
（5）氨基酸置换修饰（利用化学方法或基因工程方法改变酶分子中某些氨基酸）；
（6）物理修饰（通过改变温度、压力等物理因素来改变酶特性）；
（7）酶交联晶体修饰（酶分子先结晶，然后通过多功能交联剂进行交联）；
酶的亲和修饰（利用某些能和酶分子进行专一性结合的修饰剂进行修饰反应）。
[填空题]6专一性不可逆抑制剂通常可分为（）和（）两种类型。
Kcat型不可逆抑制剂；
KS型不可逆抑制剂
[填空题]7根据酶催化反应类型，核酶可分为（）、（）两大类。
剪切型核酶；
剪接型核酶
[填空题]8酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即（）、（）、（）等方面。
酶活力；
稳定性；
抗原性
[填空题]9酶的催化机理包括（）、（）、（）、（）、（）等方面。
酸碱催化；
共价催化；
邻近及定向效应；
变形或张力；
微环境效应[判断题]
10、采用化学修饰法确定某种氨基酸残基在酶分子中所存在的状态（表面或分子内部），通常表面基团能反应，而分子内部不能反应。
（）
对
[判断题]
11、固定化酶的活力在多数情况下比天然酶高，其底物专一性可能发生改变。
错
12、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。
13、酶作用机制的“锁钥理论”无法解释酶催化反应中的可逆反应。
14、从最佳的抽提效果着眼，最好远离待抽提酶的等电点。
也就是说，酸性蛋白质宜用碱性溶液抽提，碱性蛋白质宜用酸性溶液。
15、虽然米氏方程对许多酶提供了很好的实验数据模式，但少数酶与米氏方程不相符合，如诱导酶。
16、有机相酶催化必需微量的水，这对于维持酶活性结构非常重要。
17、化学修饰剂聚乙二醇（PEG）既溶于水，也溶于有机溶剂，而且免疫原性和毒性很低。
18、如果某种酶有几种底物，则对每一种底物各有一个特定Km值，其中Km值最大的底物一般称为该酶的最适底物或天然底物。
[填空题]19有机相酶促反应有哪些优点？
（4）可控制底物专一性
[填空题]20何谓手性药物？
手性药物对映体所表现出的作用可能存在哪些差异？
手性药物是指药物分子属于手性分子，而手性分子存在两种对映异构体其药物作用可能存在差异。
手性药物立体异构体所表现出的作用可能存在以下差异：
1）一种异构体有显著的治疗作用，另一种异构体无或有很弱的作用。
2）一种异构体有治疗作用，另一种异构体有副作用。
3）两种异构体都有治疗作用，但其中一种异构体有副作用或另外一些辅助作用。
两种异构体的作用有互补性。
[填空题]21固定化酶的制备应遵循哪些基本原则？
（1）必须维持酶的催化活性及专一性。
（2）固定化应有利于生产自动化、连续化及机械化。
（3）酶和载体必须结合牢固。
（4）固定化酶应有最小的空间位阻。
（5）固定化酶应有最大的稳定性。
（6）固定化酶成本低，以利于工业使用。
（7）固定化酶应能回收储藏，利于反复使用。
更多内容请访问《睦霖题库》微信公众号[填空题]22酶分离纯化过程中，为了避免酶变性失效，应注意哪些事项？
（1）除了少数例外，所有操作都应在低温条件下进行。
（2）必须控制整个系统不要过酸过碱及调整酸碱值时避免产生局部酸碱过量的现象。
（3）操作中应尽量减少泡沫的形成。
（4）重金属离子对某些酶有破坏作用，可在提取液中加入少量金属螯合剂EDTA。
（5）为了防止内源性蛋白酶对酶的水解，在提取液加入少量蛋白酶抑制剂。
[填空题]23酶的分子修饰的常用方法包括哪些？
（1）金属离子置换修饰；
（2）大分子结合修饰；
（3）肽链有限水解修饰；
（4）酶蛋白侧链基团修饰；
（5）氨基酸置换修饰；
（6）物理修饰；
（7）酶交联晶体修饰；
（8）酶的亲和修饰。
[填空题]24酶催化反应机理主要包括（）、（）、（）、（）、（）等。
微环境效应
[填空题]251926年，萨姆纳（Sumner）首先制得结晶（），并指出酶的本质是蛋白质。
他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。
脲酶
[单项选择题]
26、下列关于化学修饰剂聚乙二醇（PEG）描述错误的是：
A.PEG既溶于水，也溶于有机溶剂
B.PEG免疫原性和毒性很低
C.PEG作为化学修饰剂一般需要先活化
D.PEG修饰剂与酶分子的作用属于非共价结合
D[单项选择题]
27、利用蛋白质颗粒带电荷性质进行的操作技术有（）。
A.电泳和薄层层析
B.电泳和离子交换
C.亲和层析和凝胶过滤
D.超速离心和超滤
B
28、世界上最早实现工业化生产的固定化酶是：
A.纤维素酶
B.果胶酶
C.氨基酰化酶
D.淀粉酶
C
29、抗体酶制备中（），方法是通过两次免疫动物获得的。
A.引入法
B.拷贝法
C.诱导法
D.化学修饰
30、对于竞争性抑制剂，当有I存在时，下述叙述正确的是：
A.Km增大，Vm不变，Km/Vm增大
B.Km增大，Vm减小，Km/Vm增大
C.Km减小，Vm不变，Km/Vm减小
D.Km减小，Vm减小，Km/Vm增大
A
31、在球蛋白分子中，非极性侧链总是埋藏在分子内部，形成疏水核，而极性侧链总是暴露在分子表面上，形成一些亲水区。
32、若酶促反应持续时间缩短，则此条件下测得的最适反应温度往往偏高。
33、从最佳的抽提效果着眼，最好接近待抽提酶的等电点。
也就是说，酸性蛋白质宜用酸性溶液抽提，碱性蛋白质宜用碱性溶液。
34、在酶与底物、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。
[填空题]35酶固定化的方法一般包括（）、（）、（）、（）等四大类。
非共价结合法、或吸附法；
共价偶联法；
交联法；
包埋法
[填空题]36根据酶催化反应类型，核酶可分为（）、（）两大类。
[填空题]37固定化细胞技术与固定化酶技术相比较，有哪些优缺点？
优点：
（1）无须进行酶的分离纯化。
（2）可连续发酵，反复使用，成本低，抗污染能力强。
（3）可保持酶的原始状态，稳定性高。
（4）适用于进行多酶顺序连续反应。
（5）易于进行辅因子的再生。
缺点：
（1）必须保持菌体的完整，防止菌体的自溶，否则会影响产物的纯度。
（2）必须抑制细胞内蛋白酶的分解作用。
（3）往往有较多的副产物产生。
（4）细胞膜或细胞壁会造成底物渗透与扩散的障碍。
[填空题]38酶的催化机理包括哪些方面？
（1）酸碱催化；
（2）共价催化；
（3）邻近及定向效应；
（4）变形或张力；
（5）微环境效应。
[填空题]39何谓手性药物？
手性药物立体异构体所表现出的作用可能存在哪些差异？
4）两种异构体的作用有互补性。
[填空题]40酶促反应的特点为（）、（）、（）、（）。
条件温和；
高效率；
高专一性；
可调节
[填空题]41酶活性的快速调节方式包括（）和（）。
酶原激活；
共价修饰调节
[填空题]42全酶包括（）和（）。
酶蛋白；
辅助因子
[填空题]43酶的结合部位决定酶（），而催化部位决定酶的（）。
专一性；
催化反应性质
[填空题]44酶活性中心往往处于酶分子表面的（）中，形成（）区，从而使酶与底物之间的作用加强。
孔穴凹陷；
疏水[填空题]45在酶蛋白中既能作为质子供体又能作为质子受体的、最有效又最活泼的催化基团是（）。
组氨酸的咪唑基
[填空题]46在胰凝乳蛋白酶的催化过程中，有质子从酶到底物的转移，此质子的供体是（）。
水
[填空题]47胰凝乳蛋白酶活性中心的电荷转接系统是由（）、（）和（）三个氨基酸残基依赖（）键产生的。
Asp102；
His57；
Ser195；
氢
[填空题]48同一种酶有几种底物，就有（）个Km值，其中Km值最（）的底物，便为该酶的（）底物。
几；
小；
最适宜
[填空题]49加入竞争性抑制剂，酶的最大反应速度会（），Km值会（）。
不变；
减小
[填空题]50一般别构酶分子结构中都包括（）部位和（）部位，其反应速度对底物浓度的曲线是（）曲线。
活性部位；
别构部位；
S形
[填空题]51测定酶活力时，底物浓度应（），反应温度应选在（），反应PH选在（），反应时间应在反应的（）期进行。
过量；
适宜范围；
适宜的范围；
初
[填空题]52在标准条件下，1mg酶在1min内转化了2umol底物，那么（）mg酶代表1个酶活力单位。
0.5
[填空题]53酶原激活的本质是（）的形成和暴露的过程。
活性中心
[填空题]54丙二酸是（）酶的（）抑制剂。
琥珀酸脱氢酶；
竞争性
[填空题]55延胡索酸酶只对反丁烯二酸（延胡索酸）起催化作用，而对顺丁烯二酸则无作用，因而此酶具有（）专一性。
几何异构
[填空题]56米氏方程为（）
V=Vmax[S]/（Km+[S]）
[填空题]57酶能加速化学反应的主要原因是（）和（）结合形成了（），使（）呈活化状态，从而（）了反应的活化能。
酶；
底物；
ES中间复合物；
降低
[填空题]58酶实现高效率催化的主要因素是（）、（）、（）、（）。
邻近效应；
定位效应；
底物分子敏感键形变；
多功能催化
[填空题]59若使酶反应速度达到最大反应速度的90%，此时底物浓度应是此酶Km值的（）倍。
9
[填空题]60酶的活性中心包括（）和（）两个功能部位，其中（）直接与底物结合，决定酶的专一性，（）是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。
底物结合部位；
催化部位；
催化部位
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