核酸检测工作情况报告Word文档格式.docx
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在镇卫生院人力严重不足的情况下,镇政府及卫生院与嫩江市卫健局沟通,申请支援专业技术人员。
在卫健局的协调下,鹤山农场医院、xx镇中心卫生院和前进镇卫生院共计派出xx名精干技术人员支援我镇核酸检测工作。
全镇共设置采样点xx个,投入采样医务人员共xx人。
镇政府抽调xxx镇小学和中学教师xx名,作为信息录入人员。
派出所出动警员x人。
包村领导带领各村工作人员及志愿者xxx人负责采样现场维持秩序、引导村民和信息卡填写等工作。
此项工作参与人员共计xxx人。
出动车辆xx台。
x月xx日早七点整,xx镇村民全员核酸检测工作正式启动,xx个采集点同时开展采样工作,现场利用有限条件设置了进、出双通道,村民在现场工作人员带领下,按照采样工作程序配合采样工作,避免了人员聚集,各个采集点工作有序高效开展。
每个采集点工作完成后,又对行动不便人员进行入户采样。
到x月xx日xx时,xx镇居民全员核酸检测采样工作顺利结束。
卫生院收集整理所有采集点的医疗废物,按规定进行处理。
采集点所属单位对场所进行全面的消杀。
卫生院对全镇xxxx份采集样本、采集信息卡存根及采集登记表进行核对后,按规定流程送到xxx医院检验室,在当日xx时,完成全部样本送检工作。
本次xxx镇居民全员核酸检测采样工作,共计消耗防护服xxx套、防护面屏xxx个、手消毒液xx瓶、一次性乳胶手套xxx付,医用外科口罩xxx个、医用防护口罩(Nxx)xxx个,一次性靴套xxx个。
x月xx日下午,卫生院接到xxx医院检验室通知,xxx镇居民全员核酸检测样本xxxx份,结果全部为阴性。
至此,xxx镇居民全员核酸检测采样工作圆满完成。
新冠核酸检测技术方案
为落实《关于做好新冠疫情常态化防控工作的指导意见》和省应对新冠疫情应急指挥部要求,进一步提升全省新冠毒核酸检测能力,全面推进扩大核酸检测,使新冠核酸检测保“量”保“质”保“安全”,为做好常态化疫情防控工作提供有力技术支撑,制订此技术方案。
一、适用范围
适用于XX省区域内开展新冠毒核酸检测的实验室。
二、生物安全防护要求
(一)防护用品。
医用外科口罩、N95及以上防护口罩、全面型呼吸防护器或护目镜和面屏、医用防护服、防水隔离衣、工作服、工作鞋、乳胶手套、防水靴套、医用防护帽。
(二)相关操作过程人员生物安全防护要求。
样本采集、样本核酸提取人员须三级生物安全防护:
N95口罩(必要时可在外加戴医用外科口罩)、医用防护帽、工作服、外着防护服(必要时加戴穿防水隔离衣)、工作鞋、防水靴套、双层乳胶手套、护目镜(必要时可加戴面屏)或全面型呼吸防护器。
标本运输/接收人员须二级生物安全防护:
工作服、工作鞋、防水隔离衣、医用防护帽、医用外科口罩或N95口罩、乳胶手套;
特殊情况时,可升级为三级生物安全防护。
核酸扩增检测人员须一级生物安全防护:
医用外科口罩、乳胶手套、工作服、工作鞋、医用防护帽。
三、人员要求
(一)掌握实验室生物安全知识,熟悉生物安全三级实验室个人防护操作。
(二)实验室操作人员具备核酸提取和PCR扩增等分子生物学操作能力。
(三)标本采集人员接受过新冠标本采集操作培训,实验室检测人员接受过新冠核酸检测技术培训。
四、核酸检测实验室环境要求
新冠毒核酸检测实验室应至少设置三个区域:
试剂准备区、标本制备区、核酸扩增区。
各区域可以采用集中或分散设置形式,但物理空间上必须完全相互独立,各区域在使用中应当始终处于完全的分隔状态,不能有空气的直接相通。
标本制备区应为生物安全二级实验室,宜为负压。
如为常压,应当可以通风换气,同时,必须设置缓冲区,以满足实验室个人防护装备穿脱的需求。
五、核酸检测实验设备要求
(一)试剂准备区。
超净工作台,冰箱,混匀器,移液器,离心机。
(二)标本制备区。
冰箱,混匀器,移液器,生物安全柜,核酸提取仪,离心机。
(三)核酸扩增区。
荧光PCR扩增仪。
六、试剂耗材要求
(一)核酸提取试剂和检测试剂需具备三证,并通实验室性能验证。
(二)移液器枪头应为带滤芯枪头。
七、标本采集
(一)采集对象。
需要进行新冠毒核酸检测的个体。
(二)采集准备。
咽/鼻拭子、采样管、采样杯、三级生物安全个人防护装备。
(三)采集标本类型。
新冠核酸检测的样本类型一般包括上呼吸道的咽拭子、鼻拭子、鼻咽拭子,下呼吸道的深咳痰液、呼吸道抽取物、支气管灌洗液、肺泡灌洗液和肺组织活检标本。
为提高呼吸道样本的新冠毒核酸呈阳检出率,兼顾采样的便捷性,首选深咳痰,其次鼻咽拭子,最后才是咽拭子,也可同时采集同一人的鼻拭子和咽拭子并放入同一病毒采样液中。
(四)标本采集方法。
1.咽拭子:
被采样人坐下,头后倾,张大嘴,并发“啊”音。
咽拭子越过舌根到咽后壁及扁桃体隐窝、侧壁等处。
先用拭子适度用力来回擦拭双侧咽扁桃体至少3次,然后再咽后壁至少3次。
取出拭子,避免触及舌头、悬垂体、口腔粘膜和唾液。
将拭子头浸入含3ml采样液的管中。
靠近顶端处折断无菌拭子杆,尾部弃去,旋紧管盖。
2.鼻咽拭子:
被采样人头部后仰(约70。
),保持不动。
用鼻拭子估测耳根到鼻孔距离。
自鼻孔垂直面部方向插入,深入距离最少应达耳垂部位到鼻尖长度的一半。
遇到阻力后即到达后鼻咽,应停留数秒吸取分泌物(一般要求15~30s),应旋转拭子3~5次。
宜轻轻旋转取出拭子,拭子头浸入装有3ml采样液中。
顶端处折断无菌拭子杆,尾部弃去,旋紧管盖。
3.深咳痰液:
用清水(勿用含消毒剂的漱口液)漱口 2~3次,有假牙者取出假牙后漱口,要求病人深咳后,将咳出的痰液收集于采样杯(含3ml采样液(细胞保存液)的50ml螺口痰杯)中。
4.支气管灌洗液:
将收集器头部从鼻孔或气管插口处插入气管(约30cm深处),注入5ml生理盐水,接通负压,旋转收集器头部并缓慢退出。
收集抽取的粘液,并用采样液冲洗收集器1次(亦可用小儿导尿管接在50ml注射器上来替代收集)。
5.肺泡灌洗液:
局部麻醉后将纤维支气管镜通过口或鼻经过咽部插入右肺中叶或左肺舌段的支管,将其顶端契入支气管分支开口,经气管活检孔缓缓加入灭菌生理盐水,每次30~50ml,总量100~250ml,不应超过300ml。
送检标本管/杯外必须贴含样本编号、种类、姓名及采样日期等信息的识别条码。
在采样记录单上同时记录并张贴识别条码。
(五)标本运输。
将密闭后的标本管/杯装入密封袋,每袋限一份标本,依次装入标本盒、新冠专用标本转运箱,并保持标本直立,70%酒精消毒后封闭,并由专人转运到实验室。
转运期间不能自行打开转运箱,并保持转运箱平稳,避免剧烈震荡、颠簸。
内部转运时,应采集之后30min内运抵实验室,不宜超过2h;
涉及外部标本运输的,应根据标本类型,按照A类或B类 感染性物质进行三层包装。
宜冷藏条件下定时定点转运交接,转运时间不超过8h。
标本采集后应置于4℃环境保存,保存时间不超过24h。
(六)标本保存。
用于病毒核酸检测的标本应尽快进行检测,能在24小时内检测的标本可置于4℃保存;
24小时内无法检测的标本则应置于-70℃或以下保存(如无-70℃保存条件,则于-20℃冰箱 暂存)。
应设立专库或专柜单独保存标本。
标本运送期间应避免反复冻融。
(七)标本接收
1.确认样本在装箱前有消毒环节,并在开箱瞬间用75%乙醇喷雾消毒。
2.核实样本信息。
八、实验室检验
(一)新冠核酸提取。
在标本制备室,须2名实验室操作人员着生物安全三级个人防护装备进行病毒RNA提取,确保生物安全。
进行核酸提取时,标本的开盖、取样或核酸的人工提取等操作都在生物安全柜内两人配合进行,检验操作过程中尽可能缩短打开样本管盖的持续时间,轻柔操作,尽可能避免产生气溶胶。
(二)新冠核酸检测。
推荐选用针对新冠毒的ORF1ab、N基因区域的引物和探针。
靶标一(ORF1ab):
正向引物(F):
CCCTGTGGGTTTTACACTTAA
反向引物(R):
ACGATTGTGCATCAGCTGA
荧光探针(P):
5'
-FAM-CCGTCTGCGGTATGTGGAAAGGTTATGG-BHQ1-3'
靶标二(N):
GGGGAACTTCTCCTGCTAGAAT
CAGACATTTTGCTCTCAAGCTG
荧光探(P):
-FAM-TTGCTGCTGCTTGACAGATT-TAMRA-3'
核酸提取和实时荧光RT-PCR反应体系及反应条件参考相关厂家试剂盒说明。
结果判断:
阴性:
无Ct值或Ct≥40。
呈阳:
Ct值<
37,可报告为呈阳。
灰度区:
Ct值在37-40之间,建议重复实验,若重做结果Ct值<
40,扩增曲线有明显起峰,该样本判断为呈阳,否则为阴性。
注:
如果用的是商品化试剂盒,则以厂家提供的说明书为准。
(三)呈阳结果的认定。
由卫生健康行政部门批准的确认实验室进行呈阳样本确认检测;
非确认实验室的结果呈阳,须立即联系当地的疾控中心进行核酸结果的确认检测。
实验室确认呈阳病例需满足以下两个条件中的一个:
1.同一份标本中新冠毒2个靶标(ORF1ab、N)实时荧光RT-PCR检测结果均为呈阳。
如果出现单个靶标呈阳的检测结果,则需要重新采样,重新检测。
如果仍然为单靶标呈阳,判定为呈阳。
2.两种标本实时荧光RT-PCR同时出现单靶标呈阳,或同种类型标本两次采样检测中均出现单个靶标呈阳的检测结果,可判定为呈阳。
核酸检测结果阴性不能排除新冠毒感染,需要间隔1天后再次采样检测以确认。
同时需排除可能产生假阴性的因素,包括:
样本质量差,比如口咽等部位的呼吸道样本;
样本收集的过早或过晚;
没有正确的保存、运输和处理样本;
技术本身存在的原因,如病毒变异、PCR抑制等。
(四)检验后标本及相关废弃物处理
1.需复查和上送的标本,应按规定保存和上送。
否则和其他固体废弃物一起装入红色废弃物袋内密封,转运至高压灭菌室,高压灭菌。
2.相关废液,采用化学消毒或物理消毒方式处理,并对消毒效果进行验证,确保彻底灭活。
3.消毒灭菌后的标本转运出实验室需符合生物安全原则、符合感染管理规范。
九、质量控制
卫生健康行政部门批准同意开展核酸检测的实验室要进一步制定和完善新冠毒实验室检测相关管理制度和工作程序。
严格按照国家卫生健康委《新冠毒感染的肺炎实验室检测技术指南(第五版)和本技术方案,科学、规范开展样本采集、样本运输(院内和外部)、实验室检测、信息报送等各环节工作,确保工作质量。
各检测机构实验室需做好新冠核酸检测的日常室内质控(包括不限于定期使用阴性、呈阳和弱呈阳质控品;
仪器比对;
人员比对;
试剂比对等);
并常态化接受国家或省级质量控制中心的检测技术和质量控制指导。